電針對(duì)MCAO大鼠海馬微循環(huán)血流量的影響

1、電針對(duì)MCAO大鼠海馬微循環(huán)血流量的影響【摘要】目的研究電針對(duì)局灶性腦缺血(A)大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量的影響。方法應(yīng)用激光多普勒微循環(huán)血流分析儀，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)栓線法栓塞大腦中動(dòng)脈所致局灶性腦缺血大鼠電針人中、內(nèi)關(guān)、曲池、足三里前后大鼠腦海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量的變化。結(jié)果電針人中、內(nèi)關(guān)對(duì)A大鼠右側(cè)海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量無明顯影響;電針曲池、足三里可使A大鼠右側(cè)海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量降低，與電針前相比具有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論電針曲池、足三里可使A大鼠右側(cè)海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量明顯下降?！娟P(guān)鍵詞】電針;局灶性腦缺血;海馬;微循環(huán)Abstrat：bjetiveTinvestigatethee

2、ffetsfeletraupunturentheirirulatininthehippapalA1reginffalerebralisheiarats.ethdsFalerebralisheiainratsereprduedithiddleerebralarterylusin(A).TherealtieirirulatrybldflasbservedithalaserdpplerbldflnitrinthehippapalA1reginfAratsaftereletraupunturenRenzhng(DU26),NEiguan(P6)andQuhi(LI11),Zusanli(ST36).R

3、esultsTheirirulatrybldflftherightlateralhippapusshednrearkablehangeinRenzhng,NEIguangrupaftereletraupunture.TheirirulatrybldflftherightlateralhippapusasdereasedgreatlyinQuhi,Zusanligrupaftereletraupunture(P0.05).nlusinEletraupunturenQuhi,ZusanliandereasetheirirulatrybldflinthehippapalA1reginfArats.K

4、eyrds：Eletraupunture;A;Hippapus;irirulatrybldfl針刺治療缺血性中風(fēng)(缺血性腦血管疾病)療效顯著，然而機(jī)制尚不明了。我們以往的研究證實(shí)1電針人中、內(nèi)關(guān)可促進(jìn)大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量;電針曲池、足三里可降低大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究電針對(duì)局灶性腦缺血大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量的影響，從微循環(huán)角度深化討論針刺治療腦缺血性疾病的機(jī)理。1材料與儀器1.1動(dòng)物雄性istar大鼠，12周齡，32只，體質(zhì)量(25020)g，由山東大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，普通級(jí)，動(dòng)物消費(fèi)答應(yīng)證號(hào)：SXK(魯)20220004。1.2儀器江灣型立體定位儀，上海

5、川沙花木農(nóng)機(jī)廠產(chǎn)品;激光多普勒微循環(huán)分析儀，英國R公司產(chǎn)品;G6805-2A電針治療儀，上海華誼醫(yī)用儀器廠產(chǎn)品;自制大鼠固定器、恒溫箱。2方法2.1尼龍線的制備根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室操作經(jīng)歷，選用直徑為0.2的尼龍線，經(jīng)砂紙?zhí)幚硎诡^端變鈍、細(xì)，每段截取長(zhǎng)度25,浸泡于0.1%的新潔爾滅溶液中消毒待用。2.2模型制作采用大腦中動(dòng)脈栓塞法制成局灶性腦缺血模型。大鼠麻醉后，仰臥位固定，頸部正中切口，逐層別離出右側(cè)頸總動(dòng)脈，沿頸總動(dòng)脈向上別離出頸內(nèi)動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈，穿線結(jié)扎頸總動(dòng)脈近心端后，提起頸總動(dòng)脈，在間隔 頸內(nèi)和頸外動(dòng)脈的分叉處遠(yuǎn)端約3處剪一小口，用途理過的尼龍線沿剪口插入頸內(nèi)動(dòng)脈1921，即將大腦中動(dòng)脈起

6、始部阻塞，結(jié)扎入端。假手術(shù)對(duì)照組穿入尼龍線長(zhǎng)為10，其余操作與模型組完全一樣。2.3動(dòng)物分組除假手術(shù)對(duì)照組外，其余大鼠術(shù)后清醒即刻參考ZeaLnga5分制評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分(0分，無神經(jīng)損傷病癥;1分，不能伸展對(duì)側(cè)前爪;2分，向外側(cè)轉(zhuǎn)圈;3分，向?qū)?cè)傾倒;4分，不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失)，并按照評(píng)分情況，將大鼠進(jìn)展隨機(jī)配伍分為3組：模型組;人中內(nèi)關(guān)針刺組;曲池足三里針刺組。各組樣本含量均為8。2.4針刺方法曲池、足三里組取左側(cè)曲池、足三里，人中內(nèi)關(guān)組取人中及左側(cè)內(nèi)關(guān)，電針頻率為416Hz，波型為連續(xù)疏密波,刺激強(qiáng)度為1V,時(shí)間為30in，于15in時(shí)交換電極，1次/d。以上兩組均在模型復(fù)制成功后第2天

7、開場(chǎng)針刺，連續(xù)針刺2d。假手術(shù)對(duì)照組及模型組除不針刺外，亦經(jīng)過抓娶固定等過程。2.5微循環(huán)監(jiān)測(cè)方法各組大鼠均于第2天針刺時(shí)監(jiān)測(cè)右側(cè)海馬A1區(qū)微循環(huán)。大鼠戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，俯臥位固定于腦立體定位儀上，頭皮正中切口，以前囟和矢狀縫的交點(diǎn)作為中點(diǎn)，在向后4，右側(cè)旁開2處用10號(hào)針頭鉆一孔，將探頭通過立體定位儀經(jīng)此孔垂直入腦2，置于海馬A1區(qū)，即可應(yīng)用激光多普勒微循環(huán)血流儀實(shí)時(shí)檢測(cè)微循環(huán)的血流量。大鼠穩(wěn)定10in后開場(chǎng)電針，記錄電針前5in，電針1，10，20，30in，停針后20，40，60in的微循環(huán)血流量，以觀察時(shí)間1in內(nèi)的平均微循環(huán)血流量作為該觀察時(shí)間的微循環(huán)血流量。2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

8、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以s表示，同時(shí)間不同組采用單因素方差分析，同組不同時(shí)間采用配伍組方差分析，以P0.05為差異具顯著性。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3結(jié)果結(jié)果顯示，與同時(shí)間點(diǎn)假手術(shù)組相比擬，模型組、人中內(nèi)關(guān)組及曲池足三里組大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量在各時(shí)間點(diǎn)均降低，大局部時(shí)間點(diǎn)有顯著性差異(P模型組大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量在電針30in后與電針前相比明顯下降(P4討論研究腦血流的方法較多。目前激光多普勒血流計(jì)(laserdpplerbldflnitr，LDF)逐漸開展成為神經(jīng)科學(xué)研究的重要工具。LDF原理是采用單色的內(nèi)聚激光，以一可傳遞的光學(xué)纖維傳遞到生理組織。從挪動(dòng)的物體上反射的激光會(huì)出現(xiàn)多普勒效應(yīng)，即頻

9、移。而周圍靜止構(gòu)造反射的激光頻率不變。反射光信號(hào)通過光學(xué)纖維傳入探測(cè)器，由探測(cè)器通過探測(cè)頻移，測(cè)定紅細(xì)胞的速度。LDF以多普勒效應(yīng)為檢測(cè)根底，無需吸入或注射任何藥物，不用等候檢測(cè)時(shí)機(jī)，可隨時(shí)進(jìn)展檢測(cè)。瞬時(shí)測(cè)量時(shí)間為0.1s，可以迅速反應(yīng)血流變化，具有簡(jiǎn)單、連續(xù)、實(shí)時(shí)、微創(chuàng)等特點(diǎn)。但是影響LDF測(cè)量值的因素較多，如組織牽拉、探頭移位、光導(dǎo)纖維的擺動(dòng)、呼吸幅度的改變等均可產(chǎn)生贗像波，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)予以重視。傳統(tǒng)治療中風(fēng)病也多采用“治痿獨(dú)取陽明的療法，故實(shí)驗(yàn)另外選取曲池、足三里進(jìn)展針刺。據(jù)報(bào)道在正常和高血壓狀態(tài)下，針刺曲池、足三里能顯著降低大鼠血壓2。針刺大鼠足三里可以誘發(fā)支配穴位的特異性外周神經(jīng)放電，推

10、測(cè)該神經(jīng)信號(hào)可能通過軀體心血管反射參與調(diào)節(jié)體內(nèi)的血壓變化3。電針足三里可以減少延髓頭端腹外側(cè)區(qū)內(nèi)谷氨酸釋放量，降低應(yīng)激性高血壓大鼠的血壓4。而電針曲池穴可抑制兩腎一夾高血壓大鼠血壓的升高，其降壓機(jī)制可能與其綜合抑制腎素一血管緊張素系統(tǒng)有關(guān)5。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示電針曲池、足三里可使A大鼠右側(cè)海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量降低，推測(cè)可能與上述神經(jīng)體液調(diào)節(jié)機(jī)制相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)所選用的“人中和“內(nèi)關(guān)兩穴是“醒腦開竅針法中的兩個(gè)主要穴位，人中穴也稱水溝穴,為督脈腧穴,具有醒神開竅、回陽救逆等功能。內(nèi)關(guān)是心包經(jīng)穴，具有寧心安神的作用。據(jù)報(bào)道電針人中、內(nèi)關(guān)能抑制急性腦缺血模型大鼠血清N、NS、ET-1的過度升高從而調(diào)節(jié)微血

11、管舒縮6，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示電針人中、內(nèi)關(guān)對(duì)A大鼠右側(cè)海馬A1區(qū)微循環(huán)血流量無明顯影響，推測(cè)不同穴位對(duì)微循環(huán)的調(diào)節(jié)效應(yīng)有一定差異，方案在以后的實(shí)驗(yàn)中，嘗試改變腦缺血造模方法，改良針刺時(shí)機(jī)，延長(zhǎng)微循環(huán)監(jiān)測(cè)時(shí)間來進(jìn)一步證實(shí)電針人中、內(nèi)關(guān)對(duì)腦缺血大鼠海馬微循環(huán)血流量的影響?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1王世軍，吳富東，韓冰冰，等.電針對(duì)大鼠海馬A1區(qū)微循環(huán)的影響J.中國微循環(huán)，2022，9(5)：308.2胡和平，朱兵，孫國杰，等.針刺不同腧穴對(duì)大鼠血壓的影響J.湖北中醫(yī)雜志，2022，30(4)：5.3LIEi-in，HENYing-b，ANGZhi-jun.PeripheralNerveDishargeEliitedbyanualAupuntureatZusanli(ST36)RegulatesBldPressureinAnesthetizedRatsJ.JAupuntureTuina，2022，6：281.4ANGYan-rng，ANGJin，LILi，etal.RelatinshipBeteentheentralHyptensiveEffetfAupunturerelatninandthehangesfedullaryAinAidNeurtransit