免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教培訓(xùn)課件

1、免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教 1890年Behring 和北里用白喉外毒素免疫動物時發(fā)現(xiàn)了抗白喉外毒素的抗毒素即發(fā)現(xiàn)了抗體，于1901年獲諾貝爾獎。 1938年，用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、1、 2、及球蛋白等組分，抗體活性主要存在于區(qū)，也可延伸到區(qū)和2 球蛋白區(qū) 。 概述：抗體與免疫球蛋白免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教2 1890年Behring 和北里用白喉外毒Porter（英）和Edelman（美）用酶解法和化學(xué)斷鏈法，闡明Ab是四肽鏈結(jié)構(gòu)。年獲獎 1957年F Macfarlane Burnet(澳,18991986)Peter B Medawar(英,1915 )二人合作,提出抗體形

2、成的選擇學(xué)說,獲得性免疫耐受于1960年獲諾貝爾獎。1972年NK Jerne(丹,1912 )免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說,提出一個 B細胞系產(chǎn)生一種抗體于1984年獲諾貝爾獎。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教3Porter（英）和Edelman（美）用酶解法和化學(xué)斷鏈法1975年G Koehler(德,194619 )C Milstein(英,阿根廷,1927 ) 此二人制備了單克隆抗體于1984年獲諾貝爾獎。1978年S Tonegawa(日,利根川進,1939 )發(fā)現(xiàn)免疫球蛋白基因結(jié)構(gòu),抗體多樣性遺傳原理闡明了B細胞Ag識別受體（BCR）多樣性的產(chǎn)生機制，于1987年獲諾貝爾獎。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教41975年G K

3、oehler(德,194619 )C M 抗體（antibody, Ab）：B細胞在抗原刺激 下增殖分化為漿細胞，產(chǎn)生的能與相應(yīng)抗原 發(fā)生特異性結(jié)合、具有免疫功能的球蛋白。 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig):具有抗 體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。一、抗體與免疫球蛋白的概念免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教5 抗體（antibody, Ab）：B細胞在抗原刺激一、抗體概念不同 Ab都是Ig,Ig不一定是Ab（Ig包含Ab）Ab是生物學(xué)功能上概念,Ig是化學(xué)結(jié)構(gòu)上概念分泌型（ secreted Ig,sIg) ：分泌進入體液, 發(fā)揮各種免疫功能。膜型（ membrane Ig, mIg ）:

4、 即B細胞表面抗原受體（BCR），包括mIgM和mIgD。二、Ab與Ig的區(qū)別與聯(lián)系三、Ig的存在形式免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教6概念不同 分泌型（ secreted I第一節(jié) 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教7第一節(jié) 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教7一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)四肽鏈結(jié)構(gòu):兩條相同的重鏈（Heavy chain, H鏈）和兩條相同的輕鏈（Light chain, L鏈）以二硫鍵連接而成“Y”字型。其基本結(jié)構(gòu)稱單體。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教8一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)四肽鏈結(jié)構(gòu):兩條相同的重鏈（Heav免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教9免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教9（一）重鏈和輕鏈 IgG - IgA - IgM

5、- IgE - IgD -分 類(class)：同一種屬的 Ig，根據(jù)重鏈恒定區(qū)氨基酸組成和排列順序不同，將Ig分為五類或五個同種型： 1、重鏈（H鏈，450-550aa，50-75kDa）免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教10（一）重鏈和輕鏈 IgG -免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教11免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教11亞類(subclass) : 每類Ig根據(jù)其鉸鏈區(qū)氨基酸殘基的組成和H鏈二硫鍵數(shù)目、位置的不同，又可分為不同的亞類。如： IgG：IgG1IgG4 IgA：IgA1、IgA2 IgM：IgM1、IgM2免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教12亞類(subclass) : 每類Ig根據(jù)其鉸鏈區(qū)氨基酸殘分型（type) ：同一種屬所有個

6、體內(nèi)，根據(jù)各類Ig L鏈恒定區(qū)（C區(qū)）氨基酸組成和排列不同分為兩型：型、型（2：1）亞型（subtype) ：根據(jù)鏈C區(qū)個別氨基酸的差異,將型分為1、2、3、4 四個亞型。2、輕鏈（L鏈，214aa，25kDa）免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教132、輕鏈（L鏈，214aa，25kDa）免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教1可變區(qū) （ variable region, V區(qū)）：H鏈(1/4)和L鏈(1/2)靠近N端的約110個氨基酸的序列變化很大，稱為可變區(qū)。（二）可變區(qū)和恒定區(qū)V區(qū)(VL、VH)HVR（CDR）HVR1(CDR1)HVR2(CDR2)HVR3(CDR3)FRFR1FR2FR3FR4免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教14可變

7、區(qū) （ variable region, V區(qū)）：H鏈(Ig的結(jié)構(gòu)域Complementarity determining region,CDRFramework region,FR免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教15Ig的結(jié)構(gòu)域Complementarity determin免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教16免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教16 VH和VL的3個CDR共同組成Ig的Ag結(jié)合部位，決定著Ab的特異性，負(fù)責(zé)識別及結(jié)合Ag。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教17 VH和VL的3個CDR共同組成Ig的Ag結(jié)合免疫球蛋恒定區(qū)（constant region, C區(qū)）:H鏈和L鏈靠近C端的其余氨基酸數(shù)量、種類、排列順序相對穩(wěn)定，稱為恒定區(qū)。免

8、疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教18恒定區(qū)（constant region, C區(qū)）:H鏈和L鏈免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)示意圖免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教19免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)示意圖免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教19* 不同類Ig的CH 長度不一： IgG、IgA、IgD：CH1、CH2、CH3 IgM、IgE：CH1、CH2、CH3、CH4* 同一種屬的個體，所產(chǎn)生針對不同Ag的同一類別Ig，其C區(qū)氨基酸組成和排列順序比較恒定，即免疫原性相同，但V區(qū)各異。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教20* 不同類Ig的CH 長度不一：免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教20 易伸展彎曲，有利于Fab段同時結(jié)合兩個不 同的抗原表位； 易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解； 有利于I

9、g分子變構(gòu)，暴露Ig的補體結(jié)合位點； 五類Ig或亞類的鉸鏈區(qū)不盡相同* IgG、IgA、 IgD有鉸鏈區(qū) * IgM和IgE無鉸鏈區(qū) （三）鉸鏈區(qū)：位于CH1與CH2間，富含脯氨酸 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教21 易伸展彎曲，有利于Fab段同時結(jié)合兩個不（三）鉸鏈區(qū)：位于免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教22免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教221、Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊 為數(shù)個球形結(jié)構(gòu)域(由鏈內(nèi)S-S鍵)，每個結(jié)構(gòu)域一般具有其相應(yīng)的功能。 L鏈:VL，CL H鏈: IgG、IgA 、IgD: VH，CH1，CH2，CH3 IgM和IgE: VH，CH1，CH2，CH3， CH42、這些結(jié)構(gòu)域的功能雖不同，但其結(jié)構(gòu)相似

10、:桶狀或三明治（四）結(jié)構(gòu)域（功能區(qū)）免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教231、Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊（四）結(jié)構(gòu)域（功能區(qū)功能區(qū)的作用有：VH和VL是結(jié)合抗原的部位；CH和CL上具有部分同種異型的遺傳標(biāo)志；IgG的CH2和IgM的CH3具有補體C1q結(jié)合位點，可啟動補體活化經(jīng)典途徑；IgG可通過胎盤；IgG的CH3可結(jié)合細胞表面的FcR，介導(dǎo)調(diào)理作用及ADCC作用。IgE的CH2和CH3可與肥大細胞和嗜堿性粒細胞的IgE Fc受體結(jié)合,介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教24免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教24免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教25免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教25二、免疫球蛋白的其他成分（一）J鏈 （joining ch

11、ain） 富含半胱氨酸的多肽鏈 由漿細胞合成 主要功能：將單體Ig分子連接成多聚體。 如：IgA二聚體、IgM五聚體 IgG、 IgD、 IgE常為單體，無J鏈。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教26二、免疫球蛋白的其他成分（一）J鏈 （joining cha（二）分泌片 （secretory piece,SP） 含糖肽鏈合成、分泌細胞：黏膜上皮細胞以非共價鍵形式結(jié)合于IgA二聚體上，使其 成為sIgA 功能*保護sIgA的鉸鏈區(qū)免受蛋白水解酶降解；*介導(dǎo)IgA二聚體從黏膜下到黏膜表面的轉(zhuǎn)運。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教27（二）分泌片 （secretory piece,SP）免疫球免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教28免疫球蛋白醫(yī)學(xué)

12、宣教28 三、免疫球蛋白的水解片段 木瓜蛋白酶（papain）水解 IgG 2個Fab段(fragment antigen binding,抗原結(jié)合片段) 1個Fc段（fragment crystallizable,可結(jié)晶片段） 胃蛋白酶（pepsin）水解IgG F( ab)2 可結(jié)合兩個抗原表位形成凝集反應(yīng)。 pFc 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教29 三、免疫球蛋白的水解片段免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教29免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教30免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教30IgG 二硫鍵近N端 木瓜蛋白酶二硫鍵近C端胃蛋白酶單價,與抗原結(jié)合但無凝集或沉淀反應(yīng)2Fab1Fc固定補體、結(jié)合FcR；同種型的抗原性F(ab)2雙價,與抗原結(jié)

13、合，有凝集或沉淀反應(yīng)pFc無生物學(xué)活性免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教31IgG 二硫鍵近N端 木瓜蛋白酶二硫鍵近C端胃蛋白酶單價,與水解片段意義：* 闡明Ig分子生物學(xué)作用；* 用作生物制品：去掉Fc段，減少超敏反 應(yīng)發(fā)生；* 構(gòu)建基因工程抗體。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教32水解片段意義：免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教32第二節(jié) 免疫球蛋白的異質(zhì)性含義：盡管所有的免疫球蛋白分子在結(jié)構(gòu)上均由V區(qū)和C區(qū)組成，但不同抗原甚至同一抗原刺激B細胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，在其特異性以及類型等諸多方面均不盡相同，呈現(xiàn)出明顯的異質(zhì)性。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教33第二節(jié) 免疫球蛋白的異質(zhì)性含義：盡管所有的免疫球蛋白分子在Ig異質(zhì)性表現(xiàn)在1、不同抗原表位誘

14、導(dǎo)的同一類型的Ig，其結(jié)合抗原的特異性不同（可變區(qū)差異）。2、同一抗原表位刺激所產(chǎn)生的抗體分子，其結(jié)合抗原的特異性相同，但恒定區(qū)可不同（其H鏈類別和L鏈型別也有差異）。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教34Ig異質(zhì)性表現(xiàn)在免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教341、類：在同一種屬的所有個體內(nèi)，Ig重鏈C區(qū)所含抗原表位不同，據(jù)此可將Ig分為五類，即同種型。2、亞類：同一類Ig其重鏈的抗原性及二硫鍵的數(shù)目和位置不同，據(jù)此可以將Ig又可以分為亞類。一、免疫球蛋白的類型免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教351、類：在同一種屬的所有個體內(nèi)，Ig重鏈C區(qū)所含抗原表位不同3、型：同一種屬所有個體內(nèi)，根據(jù)Ig輕鏈C區(qū)抗原性的不同，將Ig輕鏈分為2種：和，與此

15、對應(yīng)的Ig分為和兩型（2：1）。4、亞型：同一型Ig中，根據(jù)其輕鏈C區(qū)N端氨基酸排列的差異 ，又可分為亞型。 型有1 4四個亞型。 OZ(+) (或1) ：第190位(亮氨酸) OZ(-) (或2) ：第190位(精氨酸) Kern(+)(或3) ：第154位(甘氨酸) Kern(-)(或4) ：第154位(絲氨酸)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教363、型：同一種屬所有個體內(nèi)，根據(jù)Ig輕鏈C區(qū)抗原性的不同，將多樣性抗原：自然界存在的抗原數(shù)目繁多，每一種抗原分子 的結(jié)構(gòu)又十分復(fù)雜，含有多種不同的抗原表位。理論上，每一種抗原表位可誘導(dǎo)產(chǎn)生一種特異性抗體，以及針對同一抗原表位可產(chǎn)生不同類型的抗體。二、外源因素所

16、致的異質(zhì)性-免疫球蛋白的多樣性免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教37多樣性抗原：自然界存在的抗原數(shù)目繁多，每一種抗原分子 的結(jié)構(gòu)三、內(nèi)源性因素所致的異質(zhì)性-免疫球蛋白的血清型 Ig具有兩重性，即可以是抗體，也可以成為抗原，表現(xiàn)為三類不同的抗原表位：(一）同種型：存在于同種抗體分子中的抗原表位，是同一種屬所有個體Ig分子共有的抗原特異性標(biāo)志，為種屬型標(biāo)志，存在于Ig C區(qū)。 鼠-人，兔-人，Ig在種之間的抗原性(強)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教38三、內(nèi)源性因素所致的異質(zhì)性-免疫球蛋白的血清型 Ig具（二）同種異型：同一種屬不同個體間Ig 分子所具有的不同抗原特異性標(biāo)志，為個體型標(biāo)志。存在于Ig C區(qū)，由同一基因座的不同

17、等位基因所編碼，均為共顯性。 目前已鑒定的人類Ig分子上的同種異型抗原決定基有：Gm、Am、Km Ig在同種不同個體間的抗原性（弱）,人人免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教39（二）同種異型：同一種屬不同個體間Ig 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教3（三）獨特型（idiotype,Id)：每一B細胞克隆產(chǎn)生的Ig所具有的特有的抗原特異性標(biāo)志。即使是同一種屬、同一個體來源的抗體分子，主要由于其CDR區(qū)的氨基酸序列的不同，可顯示不同的免疫原性，是每個Ig分子所特有的抗原特異性標(biāo)志，其表位又稱為獨特位（idiotope)。存在于V區(qū)。（Ig分子間的抗原性） 獨特型可刺激異種、同種異體以及自體產(chǎn)生相應(yīng)Ab,即抗獨特型抗體（AId或

18、Ab2)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教40（三）獨特型（idiotype,Id)：每一B細胞克隆產(chǎn)生的Id (idiotype)和AId （anti-idiotype antibody）Id： 個體獨特型，特異性抗體分子所特有的Id； 公有獨特型，功能上有關(guān)聯(lián)的Ig所共有的Id。AId: 稱為Ab2 分為Ab2、Ab2、Ab2、Ab2Ab2：識別并結(jié)合Ig（Ab1）骨架區(qū)附近的獨特型，不影響Ab1與抗原的結(jié)合，屬于半抗原非抑制性Ab2。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教41Id (idiotype)和AId （anti-idiotyAb2：識別Ab1上與抗原互補的表位，完全抑制抗原與Ab結(jié)合。具有類似抗原的結(jié)構(gòu)，可模擬A

19、g產(chǎn)生IR，稱“內(nèi)影像”作用。Ab2：結(jié)合Ab1上與互補位相關(guān)及鄰近的獨特位，抑制或部分抑制Ab1與抗原結(jié)合，屬于半抗原抑制性Ab2。Ab2：既識別Ab1骨架區(qū)附近的獨特位，又識別抗原上的抗原表位，為雙特異性抗體，與自身免疫病的發(fā)生有關(guān)。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教42Ab2：識別Ab1上與抗原互補的表位，完全抑制抗原與Ab結(jié)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教43免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教43 第三節(jié) Ig的基因結(jié)構(gòu)及其重排和表達一、胚系基因結(jié)構(gòu)（一）V區(qū)基因和C區(qū)基因每種肽鏈的編碼基因可分為編碼V區(qū)的V區(qū)基因和編碼C區(qū)的C區(qū)基因兩大部分。重鏈V區(qū)基因:是由三種胚系基因片段：V、D、J片段拼接而成輕鏈V區(qū)基因:是由V、J兩個基

20、因片段拼接成免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教44第三節(jié) Ig的基因結(jié)構(gòu)及其重排和表達免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教44BCR/Ig的各個V基因片斷之前還有前導(dǎo)序列（ L序列），編碼前導(dǎo)肽;V區(qū)基因的下游是編碼C區(qū)的C區(qū)基因BCR/Ig各條肽鏈的基因定位于不同的染色體上 H鏈:14號染色體 鏈:2號染色體 鏈:22號染色體免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教45BCR/Ig的各個V基因片斷之前還有前導(dǎo)序列（ L序列），編免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教46免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教46免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教47免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教47（二）Ig胚系基因結(jié)構(gòu)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教48（二）Ig胚系基因結(jié)構(gòu)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教48VDJ或VJ基因重排連接V區(qū)基因轉(zhuǎn) 錄初次RN

21、A轉(zhuǎn)錄體剪切加工成 mRNAL序列和V、C基因連接入胞質(zhì)翻譯肽鏈內(nèi)質(zhì)網(wǎng)重鏈、輕鏈組裝完整的BCR/Ig高爾基體運送細胞膜分泌型Ig或膜型Ig二、Ig的基因重排和表達免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教49VDJ或VJ基因重排連接V區(qū)基因轉(zhuǎn) 錄初次RNA轉(zhuǎn)錄體剪切加免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教50免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教50 三、Ig的類別轉(zhuǎn)換（class switching） 一個B細胞克隆在分化過程中V-D-J功能性基因片段保持不變，而發(fā)生C基因重排，使其表達的抗體分子發(fā)生H鏈類的改變，稱為類別轉(zhuǎn)換。 B細胞克隆 IgM IgGIFN- IL-4IgE免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教51 三、Ig的類別轉(zhuǎn)換（class switching

22、）IgS序列：CH基因5一段內(nèi)部重復(fù)序列，使任一C區(qū)均可與VDJ單位連接免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教52S序列：CH基因5一段內(nèi)部重復(fù)序列，使任一C區(qū)均可與VDJ四、膜型Ig和分泌型Ig1、Ig (IgM、IgD)既有膜型又有分泌型；2、膜型Ig均為單體；3、膜型和分泌型Ig是在轉(zhuǎn)錄加工過程中造 成的。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教53四、膜型Ig和分泌型Ig1、Ig (IgM、IgD)既有膜型A、編碼Ig羧基端有兩種外顯子 SC： 編碼分泌型Ig羧基端 MC：編碼膜型Ig羧基端B、基因結(jié)構(gòu)：V-D-J-C-SC -MC -MCa.轉(zhuǎn)錄到SC止 編碼分泌型Igb.轉(zhuǎn)錄到MC止 編碼膜型Ig免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教54A、

23、編碼Ig羧基端有兩種外顯子免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教54免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教55免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教55一、識別并特異性結(jié)合抗原二、激活補體三、結(jié)合細胞表面的Fc受體（一）調(diào)理作用（二）ADCC（三）介導(dǎo)型超敏反應(yīng) 四、穿過胎盤和黏膜 第四節(jié) 免疫球蛋白的功能免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教56一、識別并特異性結(jié)合抗原第四節(jié) 免疫球蛋白的功能免疫球蛋白 一、 Ig V區(qū)的功能: 1、特異性識別、結(jié)合抗原 V區(qū)的CDR在識別和結(jié)合特異性抗原中起 決定性作用 抗原結(jié)合價：Ig結(jié)合抗原表位的個數(shù) 實際意義:*中和效應(yīng)： 中和毒素、病毒，阻止細菌吸附*啟動體液免疫應(yīng)答:BCR（mIgM、 mIgD）特 異性識別Ag分子*病理損

24、傷 :參與、型超敏反應(yīng)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教57 一、 Ig V區(qū)的功能:免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教572、免疫調(diào)節(jié)：獨特型網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)3、超抗體活性：Ig除與特異性抗原結(jié)合外，還可與核苷酸及超抗原結(jié)合，從而發(fā)揮多種功能?？赡芘c自身免疫病和抗感染免疫有關(guān)。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教582、免疫調(diào)節(jié)：獨特型網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教58二、Ig C區(qū)的功能(一）激活補體Ab(IgM、IgG1-3) 與 Ag結(jié)合 構(gòu)型改變 位于CH2/ CH3功能區(qū)的補體結(jié)合位點暴露 激活補體經(jīng)典途徑IgG4、IgA和IgE的凝聚物 激活補體旁路 途徑免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教59二、Ig C區(qū)的功能(一）激活補體Ab(IgM、IgG1-31、

25、調(diào)理作用：IgG 與細菌等顆粒性抗原結(jié)合后，可通過其Fc段與巨噬細胞和中性粒細胞表面相應(yīng) FcR結(jié)合，從而促進吞噬細胞的吞噬作用。（二）結(jié)合Fc受體免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教601、調(diào)理作用：IgG 與細菌等顆粒性抗原結(jié)合后，可通過其Fc2、抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC) :IgG 與腫瘤或病毒感染的靶細胞結(jié)合后，可通過其Fc段與NK細胞、巨噬細胞和中性粒細胞表面相應(yīng)FcR結(jié)合，直接殺傷靶細胞。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教612、抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教61 IgE的Fc段可與肥大細胞

26、和嗜堿性粒細胞表面的高親和力IgE Fc受體（FcR )結(jié)合，并使其致敏。若相同變應(yīng)原再次進入機體與致敏靶細胞表面的特異性IgE結(jié)合，即可使之脫顆粒，釋放組胺等生物活性介質(zhì)，引起型超敏反應(yīng) 。3、介導(dǎo)型超敏反應(yīng)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教62 IgE的Fc段可與肥大細胞和嗜堿性粒細胞(三）穿過胎盤和黏膜 穿過胎盤 ： IgG 意義：新生兒抗感染 穿過黏膜：sIgA 意義： 黏膜局部抗感染免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教63(三）穿過胎盤和黏膜 穿過胎盤 ： IgG免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教64免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教64一、IgG單體分子，少量IgG以多聚體存在；四個亞類；血清中含量最高,約占血清總Ig的75%;

27、半衰期最長(2023天），是再次應(yīng)答的主要抗體；抗感染的主要抗體；是唯一能通過胎盤的抗體；第五節(jié) 五類免疫球蛋白的特性與功能免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教65一、IgG第五節(jié) 五類免疫球蛋白的特性與功能免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣激活補體；中和毒素。與細胞表面FcR結(jié)合調(diào)理作用、ADCC作用能結(jié)合SPA 純化抗體、免疫診斷參與II、III型超敏反應(yīng)某些自身抗體、封閉抗體也屬于IgG免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教66激活補體；中和毒素。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教66二、IgM 1.占血清Ig含量的510%； 2.單體：以膜結(jié)合型（mIgM）表達于B細胞表 面，構(gòu)成BCR 分泌型：五聚體，分子量最大；(凝集作用強) 3.個體發(fā)育中最早合成和

28、分泌的Ab； 4.IgM 不能通過胎盤 臍帶血IgM升高示胎兒 有宮內(nèi)感染；免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教67二、IgM 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教675.初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的Ab -早期抗感染; 6.半衰期: 5天 - 血清中特異性IgM 增高提示有 近期感染； 7.激活補體能力強，中和毒素與病毒，促吞噬8.自身抗體（如：類風(fēng)濕因子）、天然血型Ab 為IgM；9.參與II、III型超敏反應(yīng)。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教685.初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的Ab 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教68免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教69免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教691.兩種類型： 血清型 - 單體，血清中；與組織Ag有特殊 親和力,可防止其誘導(dǎo)自身免疫應(yīng)

29、答。 分泌型 - 二聚體，由J鏈連接，含上皮細胞 合成的SP,經(jīng)分泌性上皮細胞分泌 至外分泌液中； 有阻抑病原粘附、溶解 細菌、介導(dǎo)ADCC作用、中和毒素與病 毒及免疫排除等作用。2.占血清Ig含量的1015%；三、IgA免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教701.兩種類型： 三、IgA免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教703.黏膜局部抗感染免疫的主要Ab：抗感染：阻止病原體黏附到細胞表面 中和毒素4.嬰幼兒從母體初乳中獲得sIgA,屬重要的 自然被動免疫。 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教713.黏膜局部抗感染免疫的主要Ab：免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教71 四、IgD 1.單體分子; 2.存在形式： 分泌型: 血清中，不穩(wěn)定，功能不清; 膜結(jié)合型

30、: 構(gòu)成BCR,是B細胞發(fā)育成熟的 重要標(biāo)志。 未成熟B細胞:mIgM 成熟B細胞:mIgM + mIgD 3.占血清Ig含量的0.2%； 4.半衰期: 3天。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教72 四、IgD免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教72五、IgE 1.單體分子； 2.血清中含量最低(占Ig的0.002%)； 3.半衰期: 2天； 4.黏膜下淋巴組織中的漿細胞分泌； 5.親細胞抗體，介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)； 6.過敏性疾病和某些寄生蟲感染患者血清中 特異性IgE水平增高。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教73五、IgE免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教73第六節(jié) 免疫球蛋白超家族概念與組成 與Ig結(jié)構(gòu)相似、遺傳基基同源的一類蛋白分子，它們主要以膜蛋

31、白形式存在于細胞表面，有識別及傳遞信號的功能，將此類蛋白稱為免疫球蛋白超家族。Ig、抗原受體（TCR與BCR）、提呈抗原的分子（MHC與CD1）、粘附分子、IgFcR、CKR及其他成員結(jié)構(gòu)特點跨膜蛋白；胞外區(qū)、跨膜區(qū)、胞內(nèi)區(qū)生物學(xué)功能激發(fā)IR、調(diào)節(jié)免疫、介導(dǎo)細胞間相互粘附、參與Ig轉(zhuǎn)運與分泌。免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教74第六節(jié) 免疫球蛋白超家族概念與組成免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教74第七節(jié)人工制備抗體1、制備抗血清-多克隆抗體2、單克隆抗體技術(shù)3、基因工程抗體免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教75第七節(jié)人工制備抗體1、制備抗血清-多克隆抗體免疫球蛋1、含義：指由多個B細胞克隆產(chǎn)生的針對抗 原物質(zhì)中多種抗原表位的多種抗體混合

32、物。 如:免疫血清（含多種特異性抗體）優(yōu)點：作用全面,來源廣泛，制備容易。缺點：特異性不高，易發(fā)生交叉反應(yīng)。一、多克隆抗體（polyclonal antibody)免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教761、含義：指由多個B細胞克隆產(chǎn)生的針對抗 一、多克隆抗體（ 多克隆抗體 天然 Ag免疫動物多克隆抗體免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教77 多克隆抗體 天然免疫動物多克隆抗體免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣二、單克隆抗體（monoclonal antibody, McAb） 由單一克隆B細胞雜交瘤產(chǎn)生的，只識別抗原分子某一特定抗原表位的特異性抗體。 雜交瘤細胞： 骨髓瘤細胞 - 無限增殖； 免疫B細胞 - 合成、分泌特異性抗體。 雜交瘤技術(shù)

33、- HAT培養(yǎng)基：次黃嘌呤(H), 氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)。 免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教78二、單克隆抗體免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教78雜交瘤細胞具有無限增殖和分泌特異性抗體的能力未融合脾細胞（HGPRT+）:不能在體外長 期存活而死亡(次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶）未融合的骨髓瘤細胞（HGPRT-）:合成DNA 被氨基蝶呤(A)阻斷，又缺乏HGPRT，不能 利用次黃嘌呤(H)合成DNA而死亡融合的雜交瘤細胞（HGPRT+）:從脾細胞 獲得HGPRT而能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖雜交瘤技術(shù)的原理免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教79雜交瘤細胞具有無限增殖和分泌特異性抗體的雜交瘤技術(shù)的原理免疫單克隆抗體的制備過程 抗原(多表位)免疫小鼠 骨髓瘤細胞培養(yǎng) 免疫脾細胞 骨髓瘤細胞 細胞融合 HAT培養(yǎng)基 雜交瘤細胞的篩選與克隆化 mAb的大量制備PEG免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教80單克隆抗體的制備過程PEG免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教80免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教81免疫球蛋白醫(yī)學(xué)宣教81 優(yōu)點：結(jié)構(gòu)均一、純度高、特異性強、效價高、血清交叉反應(yīng)少或無 缺點：鼠源性對人具有較強的免疫原性，反復(fù)人體使用后可誘導(dǎo)產(chǎn)生人抗鼠的免疫應(yīng)答（HAMA），導(dǎo)致機體免疫損傷。 試圖使用相同的技術(shù)生產(chǎn)人源mAb未能成功，其主要原因是缺乏合適的人骨髓瘤細胞系， 另外， 雜交瘤產(chǎn)生人源mAb在技術(shù)上還存在著融合難、不穩(wěn)定、人體不能隨意免疫等問題。免疫球