四種枳殼三種成分的含量測定

1、四種枳殼三種成分的含量測定摘要：本文通過對江枳殼、綠衣枳殼、香圓枳殼、蘇枳殼四種藥材的醇溶性浸出物、揮發(fā)油、橙皮苷含量的測定及分析，得出四種中藥材質(zhì)量優(yōu)劣順序：江枳殼香圓枳殼綠衣枳殼蘇枳殼。關(guān)鍵詞：枳殼醇溶性浸出物揮發(fā)油橙皮苷含量測定枳殼為常用中藥，中醫(yī)理論認(rèn)為枳殼性浮而立上，長于入脾肺經(jīng)，以破氣消積，行氣除痞為主1。自古以來，中藥材枳殼品種繁雜，古人皆以翻肚如盆口唇狀2。中國藥典（2000版）收載了酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種的干燥未成熟果實為藥用枳殼來源標(biāo)準(zhǔn)3,但今人對各種來源不同的枳殼質(zhì)量優(yōu)劣還是爭論不休，同時，由于各地用藥習(xí)慣和歷史原因，給臨床用藥也帶來了極大的不

2、便,因而要建立統(tǒng)一的藥源非常困難。為此,本實驗選用江枳殼、綠衣枳殼、香圓枳殼、蘇枳殼四種全國有代表性的原藥材,擬用醇溶性浸出物、揮發(fā)油、橙皮苷等有生理活性的化學(xué)成分為指標(biāo),對四種枳殼進(jìn)行研究比較。四種枳殼的鑒定藥材名科別來源性狀鑒定主產(chǎn)地江枳殼蕓香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種的干燥未成熟果實。藥材直徑4.56.0cm,外表綠褐色或青綠色，頂端有明顯的花柱基痕，基部有果柄良，呈典型“翻肚如盆口唇狀”江西新干、清江綠衣枳殼蕓香科植物枸橘Poncinustrifaliata（L.）Rafin干燥未成熟果實。藥材直徑較小，2.53.0cm,外表灰綠色，有細(xì)柔毛，“口面不反卷

3、，皮略薄”福建閩侯、閩清、古田三縣香圓枳殼蕓香科植物香圓CitruswilsoniiTanaKa干燥未成熟果實。藥材直徑4.07.0cm,外表灰綠色，常帶有棕黃色斑塊，表面粗糙，具有金線環(huán)，“口面反卷，皮厚，質(zhì)較松泡”陜西漢中、安康地區(qū)蘇枳殼蕓香科植物代代花CitrusaurantiumL.amaraEngL.干燥未成熟果實。藥材直徑3.05.5cm,外皮綠褐色，基部常帶有殘存的宿萼和果柄殘基。江蘇、浙江儀器與試劑TN-100型托盤式扭力天秤（上海第二化儀器廠）800-2型水浴鍋（寧夏自動化儀表廠）METTLERAnalybalanceAE240DualRageBalance（瑞士）揮發(fā)油提取

4、器索氏提取器橙皮苷（721-9202中國藥品生物制品檢定所）石油醚101-2型電熱恒溫箱（上海市實驗儀器總廠）酒精計蒸餾水95%乙醇（分析純上海振興化工廠）甲醇（分析純上海振興化工廠）二、四種枳殼實驗設(shè)計與含量測定（一）、樣品醇溶性浸出物的測定取供試品約4g,精密稱定重量（精確到O.Olg）,置250300ml錐形瓶中，精密加入70%乙醇100ml,塞緊，冷浸，前6小時內(nèi)每半小時振搖十分鐘，再靜置18小時，用干燥濾器迅速濾過，精密量取濾液20ml，置于干燥恒重蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后，于105C干燥3小時，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，以干燥品計算供試品中醇溶浸出物百分?jǐn)?shù)。（測定用的供試品須粉碎

5、通過二號篩，并混合均勻。）其結(jié)果見表1.表1.四種枳殼醇溶性浸出物的含量測定結(jié)果（）n=3）樣品第一次第二次第三次平均江枳殼36.47436.86536.77836.706綠葉枳殼30.72329.96530.36530.351香圓枳殼34.42534.78134.75734.654蘇枳殼28.96228.47828.26528.568（二）、樣品揮發(fā)油的含量測定4取樣品粉末適量，精密稱定重量（精確至0.01g），置燒瓶中，加水300500ml至適量，加玻璃珠數(shù)粒，振搖，藥材充分膨脹后，連接揮發(fā)油提取儀與回流冷凝裝置。自冷凝管上端加水至充滿揮發(fā)油的刻度線部分，使水溢入燒瓶為止，置電爐緩緩加熱至

6、沸，并保持微沸23小時，至提取器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測量下端活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0線上面5ml處為止，靜置1小時以上，再開啟活塞使油層下降至上端恰好與0線齊平，讀取揮發(fā)油量，并以干燥品計算供試品含揮發(fā)油數(shù)。其結(jié)果見表2.表2.四種枳殼揮發(fā)油量測定結(jié)果缸/g）（n=3）樣品第一次第二次第三次平均江枳殼4.2164.1054.1734.165綠葉枳殼3.0242.9962.9722.997香圓枳殼3.4563.4023.5143.457蘇枳殼3.1223.0883.1343.115（三）、四種枳殼橙皮苷的含量測定1色譜條件5儀器：Waters高效液相色譜儀VK

7、進(jìn)樣器Millenum2010色譜管理系統(tǒng)996檢測器6柱：HynersilODSC200X4.6mm5Am218流動相：甲醇：水=40：60（醋酸調(diào)PH=3.0）檢測波長：284nm2工作曲線67繪制取對照品橙皮苷約10mg精密稱定（精確至O.Olmg）,置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并釋稀至刻度，搖勻，以作標(biāo)準(zhǔn)曲線。在高效液相色譜儀上依次進(jìn)入2、4、6、8、10、12匹標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分析，以峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，用C-R3A微處理機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1、圖2。Ifi-liv*i:令4igkA!l4il3AJJIbU.lMiJtik1914RI4I.M1W.圖1.：對照品的H

8、PLC圖譜#13樣品橙皮苷的含量測定EruuppI仙祜MI崔晦ElM41M“JkKuntCiIlon_ploR-jiLJbiLoZ3U1H*ncaMT自活時3辭馳相關(guān)系數(shù)r=0：（2%。取樣品粗粉約lg,精密稱定（精確至O.Olg）,置索氏提取器中，加石油醚80ml,置水浴加熱（6090C）,回流23小時，棄去石油醚，藥渣揮盡石油醚后，加甲醇80ml，置于水浴加熱回流3小時，提取至無色，放冷，過濾，濾液置100ml容量瓶中，用少量甲醇分次洗滌容器，洗液濾入容量瓶中，加甲醇至刻度線，搖勻，精密量取5ml，置于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度線，搖勻即得。測定結(jié)果見表3.、圖譜見圖36。表3.四種枳

9、殼橙皮昔的含量測定結(jié)果飯）（n=3）樣品第一次第二次第三次平均江枳殼4.4354.3764.3664.392綠葉枳殼3.6613.7213.5993.660香圓枳殼3.9263.7723.8993.866蘇枳殼3.2453.3042.9983.182Hlnutea0.0013app1cHTunrUanwR*tTime(lain)Are*(uvarcjIleiyht(UV)AjnountVolunLhylaheapT.648lf143?s680170.91510PackRouths圖3江枳殼橙皮苷HLPC圖譜圖4綠葉枳殼橙皮苷HPLC圖譜圖5香圓枳殼橙皮苷HPLC圖譜圖6蘇枳殼橙皮苷HLPC圖譜三、討論與小結(jié)枳殼的原植物來源廣泛，歷代本草記載的枳殼品種都經(jīng)歷了一番演變。本文優(yōu)先選用江枳殼、綠葉枳殼、香圓枳殼、蘇枳殼作醇溶性浸出物測定，從表1可知，四種枳殼醇溶性浸出物順序：江枳殼香圓枳殼綠衣枳殼蘇枳殼。實驗表明，枳殼中的相關(guān)成分醇溶性較高，特別是江枳殼，超過了三分之一。揮發(fā)油是枳殼中藥材的特定成分之一，存在于油室組織中，直接決定枳殼香氣的濃郁。來源不同的枳殼揮發(fā)油的含量有很大的差異，從表2中可知，江枳殼含揮發(fā)油的量是非常大，為綠葉枳殼的近2倍，是香圓枳殼的120.5%，蘇枳殼的133.7%。為江枳殼香氣比其它枳殼濃烈提供了可靠的依據(jù)。黃酮類成分也是枳殼