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文檔簡介
1、 一一 、傳染性病原體、傳染性病原體 二、免疫學(xué)基礎(chǔ)二、免疫學(xué)基礎(chǔ) 三、三、 HIV 四、四、 HIV篩選試驗(yàn)原理篩選試驗(yàn)原理 五、五、 HIV抗體的篩檢方法的選擇抗體的篩檢方法的選擇 六、抗六、抗HIV抗體篩檢試驗(yàn)的應(yīng)用抗體篩檢試驗(yàn)的應(yīng)用 七、質(zhì)量保證七、質(zhì)量保證 八、其它傳染性病原體八、其它傳染性病原體 病毒、細(xì)菌、原蟲、真菌,只有病毒、細(xì)菌、原蟲、真菌,只有前三種可經(jīng)血傳播,但最常見的經(jīng)前三種可經(jīng)血傳播,但最常見的經(jīng)血傳播的病原體是病毒。血傳播的病原體是病毒。 病毒:由核酸、核衣殼、包膜組成;病毒:由核酸、核衣殼、包膜組成;但朊病毒不含核酸、僅由蛋白質(zhì)組但朊病毒不含核酸、僅由蛋白質(zhì)組成、
2、此病毒侵襲神經(jīng)系統(tǒng)和腦組織。成、此病毒侵襲神經(jīng)系統(tǒng)和腦組織。病毒蛋白質(zhì)存在于病毒包膜和核衣病毒蛋白質(zhì)存在于病毒包膜和核衣殼上,可被機(jī)體免疫應(yīng)答來識別。殼上,可被機(jī)體免疫應(yīng)答來識別。 細(xì)菌細(xì)菌:原核生物原核生物-具有清晰的細(xì)胞具有清晰的細(xì)胞 結(jié)構(gòu)、但缺乏真正的細(xì)胞核。許多結(jié)構(gòu)、但缺乏真正的細(xì)胞核。許多細(xì)菌包被有莢膜,能直接引起免疫細(xì)菌包被有莢膜,能直接引起免疫應(yīng)答。應(yīng)答。 原蟲:屬真核生物、是單細(xì)胞有機(jī)原蟲:屬真核生物、是單細(xì)胞有機(jī)體、大多數(shù)原蟲生活在水里、僅少體、大多數(shù)原蟲生活在水里、僅少數(shù)寄生在其它動(dòng)物的身上。數(shù)寄生在其它動(dòng)物的身上。 真核生物真核生物-有真正的細(xì)胞核(核膜、有真正的細(xì)胞核(
3、核膜、核仁)。核仁)。 真菌:不同與細(xì)菌、大多數(shù)真菌能真菌:不同與細(xì)菌、大多數(shù)真菌能分解有分解有 機(jī)物和廢物、只有少數(shù)種機(jī)物和廢物、只有少數(shù)種類的真菌可引起人類疾病。真菌分類的真菌可引起人類疾病。真菌分霉菌型和酵母型(酵母菌和類酵母霉菌型和酵母型(酵母菌和類酵母菌)酵母型以單細(xì)胞形式通過出芽菌)酵母型以單細(xì)胞形式通過出芽的方式生長。霉菌可形成菌絲體,的方式生長。霉菌可形成菌絲體,酵母菌不形成菌絲體。酵母菌不形成菌絲體。 近年,一種新的傳染性病原體朊病近年,一種新的傳染性病原體朊病毒被證實(shí)存在。朊病毒是唯一不含毒被證實(shí)存在。朊病毒是唯一不含任何核苷酸,僅由蛋白質(zhì)組成的病任何核苷酸,僅由蛋白質(zhì)組成
4、的病原體。原體。 傳染性病原體是否可經(jīng)血傳播取決傳染性病原體是否可經(jīng)血傳播取決于以下三個(gè)條件;于以下三個(gè)條件; 1. 病原體必須能夠隨血進(jìn)入宿主病原體必須能夠隨血進(jìn)入宿主或患者體內(nèi)?;蚧颊唧w內(nèi)。 2. 被感染的獻(xiàn)血者沒有任何癥狀。被感染的獻(xiàn)血者沒有任何癥狀。 3. 病原體在血液中能存活一段時(shí)病原體在血液中能存活一段時(shí)間。間。 具備三個(gè)條件是否真的發(fā)生還取決具備三個(gè)條件是否真的發(fā)生還取決于多種因素,如患者的免疫狀態(tài)和于多種因素,如患者的免疫狀態(tài)和輸入的傳染性病原體的數(shù)量。輸入的傳染性病原體的數(shù)量。 輸血是傳播傳染性病原體的主要途輸血是傳播傳染性病原體的主要途徑但不是首要途徑。徑但不是首要途徑。
5、1、 免疫系統(tǒng)的組成免疫系統(tǒng)的組成; 免疫器官,免疫器官,免疫組織,免疫細(xì)胞,免疫分子組免疫組織,免疫細(xì)胞,免疫分子組成。成。 免疫器官:中樞免疫器官免疫器官:中樞免疫器官骨髓、骨髓、胸腺、是免疫活性細(xì)胞的產(chǎn)生、增胸腺、是免疫活性細(xì)胞的產(chǎn)生、增殖和分化的場所殖和分化的場所 周圍免疫器官周圍免疫器官脾、脾、淋巴結(jié)、何粘膜相關(guān)淋巴組織、是淋巴結(jié)、何粘膜相關(guān)淋巴組織、是免疫細(xì)胞和應(yīng)答的場所。免疫細(xì)胞和應(yīng)答的場所。 免疫細(xì)胞:免疫細(xì)胞: 1 .T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 2. B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 3. 第三類淋巴細(xì)胞第三類淋巴細(xì)胞 4. 輔助細(xì)胞輔助細(xì)胞 T淋巴細(xì)胞:輔助淋巴細(xì)胞:輔助T淋巴細(xì)胞(淋巴細(xì)胞(T
6、h):):CD4 分分Th1和和Th2 細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞(細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞(Tc):):CD8 2. B淋巴細(xì)胞:是產(chǎn)生抗體的細(xì)胞淋巴細(xì)胞:是產(chǎn)生抗體的細(xì)胞 3. 第三類淋巴細(xì)胞(大顆粒淋巴細(xì)胞):第三類淋巴細(xì)胞(大顆粒淋巴細(xì)胞):NKc Kc LAK細(xì)胞(細(xì)胞(5%-10%) NKc殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞 Kc 識別識別IgG包被的細(xì)胞包被的細(xì)胞 LAK非特異性的殺滅靶細(xì)胞非特異性的殺滅靶細(xì)胞 4. 輔助細(xì)胞:單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)、樹突狀輔助細(xì)胞:單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)、樹突狀細(xì)胞和棘細(xì)胞細(xì)胞和棘細(xì)胞 免疫分子;主要是免疫球蛋白、既免疫分子;主要是免疫球蛋白、既抗體、它屬于抗
7、體、它屬于r球蛋白。球蛋白。 1.抗體是由蛋白質(zhì)和碳水化合物組成、是抗體是由蛋白質(zhì)和碳水化合物組成、是r-球蛋白、也稱作免疫球蛋白球蛋白、也稱作免疫球蛋白 2.抗體分子的基本結(jié)構(gòu)是由一條重鏈(分子抗體分子的基本結(jié)構(gòu)是由一條重鏈(分子量約量約50000)和一條輕鏈(分子量約)和一條輕鏈(分子量約25000)組成,共有五種免疫球蛋白:組成,共有五種免疫球蛋白:IgG IgM IgA IgE IgD, 其區(qū)別在于重鏈成分和結(jié)構(gòu)的不其區(qū)別在于重鏈成分和結(jié)構(gòu)的不同。同。 3. IgG 占人體免疫球蛋白總量占人體免疫球蛋白總量73%、 4. IgM占人體免疫球蛋白總量占人體免疫球蛋白總量8%、由五個(gè)、由五
8、個(gè)基本單位組成、是初次免疫應(yīng)答的主要抗基本單位組成、是初次免疫應(yīng)答的主要抗體。體。 5. IgA占人體免疫球蛋白總量占人體免疫球蛋白總量18%、由二個(gè)、由二個(gè)基本單位組成、是分泌物和粘膜中的主要基本單位組成、是分泌物和粘膜中的主要抗體抗體 6. IgE 和和 IgD共占共占1%、IgD位于淋位于淋巴細(xì)胞表面為表面受體;巴細(xì)胞表面為表面受體;IgE與過與過敏反應(yīng)有關(guān)、位于肥大細(xì)胞和嗜堿敏反應(yīng)有關(guān)、位于肥大細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞表面性細(xì)胞表面 免疫系統(tǒng)的組成:免疫器官、免疫免疫系統(tǒng)的組成:免疫器官、免疫組織、免疫細(xì)胞組織、免疫細(xì)胞 免疫分子組成。免疫分子組成。但根據(jù)其作用,免疫系統(tǒng)是由兩部但根據(jù)其作用,
9、免疫系統(tǒng)是由兩部分組成、即外來蛋白的體內(nèi)識別和分組成、即外來蛋白的體內(nèi)識別和阻止體內(nèi)傳染性病原體繁殖生長這阻止體內(nèi)傳染性病原體繁殖生長這兩部分組成,這種免疫應(yīng)答是特異兩部分組成,這種免疫應(yīng)答是特異性的。性的。 免疫反應(yīng)分體液免疫和細(xì)胞免疫免疫反應(yīng)分體液免疫和細(xì)胞免疫 細(xì)胞免疫由細(xì)胞免疫由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)、包括輔助性淋巴細(xì)胞介導(dǎo)、包括輔助性T細(xì)胞和殺傷性細(xì)胞和殺傷性T細(xì)胞,輔助性細(xì)胞,輔助性T細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞表達(dá)CD4、殺傷性、殺傷性T細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞表達(dá)CD8, 體液免疫(體液免疫(Bc):是是B細(xì)胞介導(dǎo)的抗原抗體細(xì)胞介導(dǎo)的抗原抗體反應(yīng),和免疫學(xué)檢測方法有關(guān)反應(yīng),和免疫學(xué)檢測方法有關(guān) 細(xì)胞免疫(細(xì)胞免疫
10、(Th)Th1 Th2 NK破壞被微生物感染的細(xì)胞和組織破壞被微生物感染的細(xì)胞和組織 Tc: LAK非特異性的殺滅靶細(xì)胞非特異性的殺滅靶細(xì)胞 K:識別:識別IgG包被的感染細(xì)胞包被的感染細(xì)胞 減少輸血傳染傳染性病原體的方法減少輸血傳染傳染性病原體的方法 仔細(xì)選擇獻(xiàn)血員仔細(xì)選擇獻(xiàn)血員 篩檢捐獻(xiàn)的血液篩檢捐獻(xiàn)的血液 去除血液中被感染的特殊成分去除血液中被感染的特殊成分 用物理方法滅活感染性病原體用物理方法滅活感染性病原體 血液篩查就是檢查傳染性標(biāo)志物血液篩查就是檢查傳染性標(biāo)志物 傳染性標(biāo)志物:可以是病原體本身、傳染性標(biāo)志物:可以是病原體本身、也可以是特異性抗體也可以是特異性抗體 .HIV和和HBV
11、 感染后,抗體的產(chǎn)生感染后,抗體的產(chǎn)生對機(jī)體免受再次感染有保護(hù)作用,對機(jī)體免受再次感染有保護(hù)作用, 對獻(xiàn)血員篩查而言,檢測病原體自對獻(xiàn)血員篩查而言,檢測病原體自身比檢測抗體要好??贵w的出現(xiàn)僅身比檢測抗體要好??贵w的出現(xiàn)僅提示了一種免疫力,而非感染狀態(tài)。提示了一種免疫力,而非感染狀態(tài)。 對乙型肝炎,檢測對乙型肝炎,檢測HBsAg是用于是用于HBV 感染的篩查;而對于感染的篩查;而對于HIV,檢,檢測測HIV抗體用于獻(xiàn)血者抗體用于獻(xiàn)血者HIV感染的感染的篩查篩查 1. 1983年發(fā)現(xiàn)的年發(fā)現(xiàn)的HIV1;1986年西非發(fā)現(xiàn)年西非發(fā)現(xiàn)HIV2,兩者的包膜蛋白不同。,兩者的包膜蛋白不同。 2. 與與HI
12、VRNA相關(guān)的兩種蛋白質(zhì)分別是相關(guān)的兩種蛋白質(zhì)分別是7KDa和和9KDa(7P和和9P),逆轉(zhuǎn)錄酶是),逆轉(zhuǎn)錄酶是P66。糖蛋白的縮寫是。糖蛋白的縮寫是gp. 3. HIV1的包膜蛋白:的包膜蛋白:P17/gp41/gp120 HIV2的包膜蛋白的包膜蛋白:P17/ gp36/gp110130. 4. 當(dāng)病毒開始復(fù)制時(shí)、感染進(jìn)入最后階段、當(dāng)病毒開始復(fù)制時(shí)、感染進(jìn)入最后階段、產(chǎn)生大量病毒粒子,以出芽的方式脫離細(xì)產(chǎn)生大量病毒粒子,以出芽的方式脫離細(xì)胞時(shí),外面包裹一層細(xì)胞膜、形成病毒顆胞時(shí),外面包裹一層細(xì)胞膜、形成病毒顆粒。粒。 5. HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒,其核心蛋白為逆轉(zhuǎn)錄病毒,其核心蛋白P24和包
13、和包膜蛋白膜蛋白gp41最具免疫性,主要破壞免疫系最具免疫性,主要破壞免疫系統(tǒng)、感染統(tǒng)、感染CD4+細(xì)胞。(細(xì)胞。(CD4+細(xì)胞:幫助細(xì)胞:幫助刺激免疫應(yīng)答的刺激免疫應(yīng)答的Tc、 Thc、吞噬細(xì)胞)、吞噬細(xì)胞) 6. AIDS相關(guān)綜合征的縮寫是相關(guān)綜合征的縮寫是ARC 7. ARC惡性發(fā)展的預(yù)兆是:既可惡性發(fā)展的預(yù)兆是:既可檢測到檢測到gp41抗體又能檢測到抗體又能檢測到P24抗原??乖?。 8. 輸血是輸血是HIV傳播的重要途徑、但傳播的重要途徑、但不是主要途徑。不是主要途徑。 1. HIV抗體檢測的基本方法:抗體檢測的基本方法: EIA(抗人球法(抗人球法I型、競爭法型、競爭法 II型、型、
14、夾心法夾心法 III型)、型)、 顆粒凝集試驗(yàn)、顆粒凝集試驗(yàn)、 特異性快速試驗(yàn)(顆粒凝集試驗(yàn)、特異性快速試驗(yàn)(顆粒凝集試驗(yàn)、特異性快速試驗(yàn)只能檢測抗體)。特異性快速試驗(yàn)只能檢測抗體)。 抗人球蛋白抗人球蛋白EIA法中的標(biāo)記酶通常法中的標(biāo)記酶通常是辣根過氧化物酶(使底物氧化)是辣根過氧化物酶(使底物氧化)和堿性磷酸酶(使底物去磷酸化)。和堿性磷酸酶(使底物去磷酸化)。 競爭型競爭型EIA法的酶結(jié)合物是酶標(biāo)法的酶結(jié)合物是酶標(biāo)HIV抗體抗體 ,其濃度應(yīng)低于標(biāo)本中的,其濃度應(yīng)低于標(biāo)本中的HIV抗體最小濃度??贵w最小濃度。 HIV抗原檢測抗原檢測 : HIV抗原檢測采用夾心法抗原檢測采用夾心法(抗體(抗
15、體-抗原抗原-抗體抗體 ) 結(jié)果判讀結(jié)果判讀 : I型與夾心法型與夾心法 III型中、高型中、高OD值、產(chǎn)生顏色、值、產(chǎn)生顏色、表明有反應(yīng);表明有反應(yīng); 競爭法競爭法 II型中、高型中、高OD值、產(chǎn)生顏色、表明值、產(chǎn)生顏色、表明無反應(yīng);無反應(yīng); Cut-off值的計(jì)算:值的計(jì)算:Cut-off值值=Ncm+0.2 (陰性對照的平均值陰性對照的平均值) 標(biāo)準(zhǔn)比率標(biāo)準(zhǔn)比率=OD值值/Cut-off值,數(shù)值值,數(shù)值小于小于1為無反應(yīng)結(jié)果;為無反應(yīng)結(jié)果; 數(shù)值大于數(shù)值大于1為有反應(yīng)結(jié)果;但在競爭型為有反應(yīng)結(jié)果;但在競爭型EIA法中、比率法中、比率= Cut-off值值/ OD值。值。 特異性快速法:蛋
16、白特異性快速法:蛋白A由金黃色葡由金黃色葡萄球菌產(chǎn)生,能與萄球菌產(chǎn)生,能與IgG的的Fc段結(jié)合段結(jié)合(補(bǔ)體結(jié)合部位)。(補(bǔ)體結(jié)合部位)。 靈敏度:檢測出最弱陽性標(biāo)本的能力(真靈敏度:檢測出最弱陽性標(biāo)本的能力(真陽性陽性/真陽性真陽性+假陰性假陰性100%) 特異性:避免假陽性或非特異性陽性結(jié)果特異性:避免假陽性或非特異性陽性結(jié)果的能力(真陰性的能力(真陰性/真陰性真陰性+假陽性假陽性100%)。)。 質(zhì)控品:質(zhì)控品中不能含有那些可能干擾質(zhì)控品:質(zhì)控品中不能含有那些可能干擾實(shí)驗(yàn)的防腐劑,疊氮鈉可能實(shí)驗(yàn)的防腐劑,疊氮鈉可能EIA法中的辣根法中的辣根過氧化物酶時(shí)候失活。過氧化物酶時(shí)候失活。 篩檢結(jié)果
17、處理:初試陽性標(biāo)本用篩檢結(jié)果處理:初試陽性標(biāo)本用特異性快速法一般只重做一份,而特異性快速法一般只重做一份,而顆粒法和顆粒法和EIA均做雙份。均做雙份。 1. 對質(zhì)量體系而言,最本質(zhì)的是各種對質(zhì)量體系而言,最本質(zhì)的是各種程序文件化。程序文件化。 2. SOP初稿由各崗位工作人員起草,初稿由各崗位工作人員起草,負(fù)責(zé)人審核。負(fù)責(zé)人審核。 3.質(zhì)量審核的目的在于質(zhì)量控制工作質(zhì)量審核的目的在于質(zhì)量控制工作的完整性和質(zhì)量體系得有效性。的完整性和質(zhì)量體系得有效性。 (一)(一) HBV (二)(二) HCV (三)(三) 梅毒梅毒 (四)瘧疾(四)瘧疾 (五)恰加斯?。ㄓ址Q為南美洲錐蟲(五)恰加斯?。ㄓ址Q為
18、南美洲錐蟲?。┎。?(一)、(一)、HBV 27nm的的HBV殼體核心含有殼體核心含有病毒核酸和病毒核酸和DNA聚合酶、其具有聚合酶、其具有傳染性;而傳染性;而22nm的球形顆?;蚬艿那蛐晤w?;蚬軤钚☆w粒只含有病毒蛋白、其沒有狀小顆粒只含有病毒蛋白、其沒有傳染性。傳染性。HBsAg HBV感染確認(rèn)感染確認(rèn) Anti-HBs 自然痊愈、疫苗注射自然痊愈、疫苗注射 HBeAg 傳染標(biāo)志傳染標(biāo)志 anti-HBe 復(fù)制水平低復(fù)制水平低 anti-HBc IgM:HBV 復(fù)制,多見于乙型肝炎急復(fù)制,多見于乙型肝炎急性期性期 IgG:感染:感染 HCV-1 病毒結(jié)構(gòu):至今尚未培養(yǎng)病毒結(jié)構(gòu):至今尚未培養(yǎng)成
19、功,三維結(jié)構(gòu)不清,使用反義病成功,三維結(jié)構(gòu)不清,使用反義病毒學(xué)推出。毒學(xué)推出。 抗抗- HCV HCV RNA/HCV Ag 解釋解釋 (-)(-)排除排除HCV感染感染 (+) (+)活動(dòng)性活動(dòng)性HCV感染(急性或慢性感染)感染(急性或慢性感染) (-)(+)早期早期HCV感染免疫障礙患者慢性感染免疫障礙患者慢性HCV感染感染 (+) (-)康復(fù)低或間歇病毒血癥、慢性感染、康復(fù)低或間歇病毒血癥、慢性感染、抗抗-HCV假陽性結(jié)果、假陽性結(jié)果、“被動(dòng)被動(dòng)”輸輸入抗體入抗體 梅毒梅毒 密螺旋體屬密螺旋體屬T-蒼白球細(xì)菌傳染蒼白球細(xì)菌傳染?。ú。℅-),梅毒螺旋體對溫度非),梅毒螺旋體對溫度非常敏感
20、、常敏感、4保存保存24-48小時(shí)后、小時(shí)后、傳染危險(xiǎn)基本上消除。傳染危險(xiǎn)基本上消除。 人類密螺旋體屬病原體主要有四種統(tǒng)稱:人類密螺旋體屬病原體主要有四種統(tǒng)稱: 1. 蒼白球(梅毒)蒼白球(梅毒) 2. 細(xì)弱密螺旋(雅司?。┚窒拊跓釒Ъ?xì)弱密螺旋(雅司?。┚窒拊跓釒-蒼白球亞類蒼白球亞類 3.品他螺旋體(品他?。┢匪菪w(品他?。?:主要在:主要在 中美和南美洲流行中美和南美洲流行 4.(Bejel?。悍侵藜爸袞|的非性傳?。悍侵藜爸袞|的非性傳 染病染病 一期損傷粘膜淋巴系統(tǒng)一期損傷粘膜淋巴系統(tǒng) 一般分三期:一般分三期: 二期損傷皮膚和細(xì)胞膜、傳染性最二期損傷皮膚和細(xì)胞膜、傳染性最 強(qiáng)。強(qiáng)
21、。 三期損傷神經(jīng)系統(tǒng)合心血管系統(tǒng)三期損傷神經(jīng)系統(tǒng)合心血管系統(tǒng) 梅毒檢測:梅毒檢測: 非特異性:非特異性:RPR(用正常牛用正常牛 心類脂質(zhì)作抗原心類脂質(zhì)作抗原)、USR 特異性:特異性:TPHA、FTA-ABS (用梅毒螺旋體作為抗原)(用梅毒螺旋體作為抗原) 螺旋體是革蘭氏染色陰性,細(xì)胞壁中的外螺旋體是革蘭氏染色陰性,細(xì)胞壁中的外層細(xì)胞膜含有抗原性蛋白層細(xì)胞膜含有抗原性蛋白 1. 瘧原蟲有二個(gè)宿主:人和按蚊瘧原蟲有二個(gè)宿主:人和按蚊 2. 瘧原蟲在二個(gè)宿主的生命循環(huán)瘧原蟲在二個(gè)宿主的生命循環(huán) 人類宿主內(nèi)的生命循環(huán):人類宿主內(nèi)的生命循環(huán): 孢子蟲孢子蟲肝細(xì)胞(滋養(yǎng)體肝細(xì)胞(滋養(yǎng)體裂細(xì)胞裂細(xì)胞裂
22、殖裂殖子)子)釋放入血釋放入血紅細(xì)胞(滋養(yǎng)體紅細(xì)胞(滋養(yǎng)體裂細(xì)裂細(xì)胞胞裂殖子)裂殖子)部分形成雌雄配子體(雌部分形成雌雄配子體(雌雄配子體在血液中存活雄配子體在血液中存活6-12小時(shí))小時(shí)) 能引起瘧疾的瘧原蟲有四種:能引起瘧疾的瘧原蟲有四種: 間日瘧原蟲間日瘧原蟲 卵型瘧原蟲卵型瘧原蟲 三日瘧原蟲三日瘧原蟲 惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲 通常只有由惡性瘧原蟲引起的瘧疾是致命通常只有由惡性瘧原蟲引起的瘧疾是致命的的 1.克魯斯錐蟲引起的、屬于有鞭毛克魯斯錐蟲引起的、屬于有鞭毛的原生動(dòng)物的原生動(dòng)物 2.克魯斯錐蟲在人類宿主的血液中克魯斯錐蟲在人類宿主的血液中不能增殖不能增殖 3.錐鞭體在昆蟲中的腸內(nèi)以短
23、膜型錐鞭體在昆蟲中的腸內(nèi)以短膜型鞭毛蟲形式增殖鞭毛蟲形式增殖 (一)、病原體(一)、病原體 1、能引起輸血傳播的病原體有:、能引起輸血傳播的病原體有:病毒、細(xì)菌、原蟲。病毒、細(xì)菌、原蟲。 2、最常見的經(jīng)輸血傳播的病原體、最常見的經(jīng)輸血傳播的病原體是病毒。是病毒。 1、朊、朊病毒病毒是唯一的不含任何核苷酸僅由蛋白質(zhì)組成的病是唯一的不含任何核苷酸僅由蛋白質(zhì)組成的病原體。原體。 2、DNA是由堿基(腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧是由堿基(腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶)、磷酸和核糖組成的脫氧核糖核酸。啶)、磷酸和核糖組成的脫氧核糖核酸。RNA是由堿基是由堿基(腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、磷
24、酸和核糖組(腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、磷酸和核糖組成的核糖核酸。成的核糖核酸。 3、病毒感染相應(yīng)的宿主細(xì)胞后,可被機(jī)體免疫應(yīng)答的物、病毒感染相應(yīng)的宿主細(xì)胞后,可被機(jī)體免疫應(yīng)答的物質(zhì)是病毒核酸。質(zhì)是病毒核酸。 4、病毒的結(jié)構(gòu):病毒核酸、病毒衣殼(病毒核心)、包、病毒的結(jié)構(gòu):病毒核酸、病毒衣殼(病毒核心)、包膜(病毒外衣)。膜(病毒外衣)。 5、窗口期:潛伏性感染后,機(jī)體內(nèi)不能檢測到相應(yīng)的抗、窗口期:潛伏性感染后,機(jī)體內(nèi)不能檢測到相應(yīng)的抗體體 1、細(xì)菌是由細(xì)胞核、細(xì)胞器、細(xì)胞壁極其、細(xì)菌是由細(xì)胞核、細(xì)胞器、細(xì)胞壁極其附屬結(jié)構(gòu)(莢膜、鞭毛、菌毛和芽孢)組附屬結(jié)構(gòu)(莢膜、鞭毛、菌毛和芽孢)組
25、成。成。 2、細(xì)菌感染人體后產(chǎn)生的病變通常是由細(xì)細(xì)菌感染人體后產(chǎn)生的病變通常是由細(xì)菌產(chǎn)生并釋放病毒而導(dǎo)致的。菌產(chǎn)生并釋放病毒而導(dǎo)致的。3真核細(xì)胞微生物:有核膜、核仁、多個(gè)染真核細(xì)胞微生物:有核膜、核仁、多個(gè)染色體,由色體,由DNA和組蛋白組成。(真菌、原和組蛋白組成。(真菌、原蟲)蟲)4原核細(xì)胞微生物:僅有原始核,無核膜和原核細(xì)胞微生物:僅有原始核,無核膜和核仁,僅為單個(gè)裸露的核仁,僅為單個(gè)裸露的DNA分子。(細(xì)菌)分子。(細(xì)菌)5非細(xì)胞性生物:由單一的非細(xì)胞性生物:由單一的DNA或或RNA和蛋和蛋白質(zhì)組成,必須寄生在活的易感細(xì)胞內(nèi)生白質(zhì)組成,必須寄生在活的易感細(xì)胞內(nèi)生長繁殖。(病毒)長繁殖。
26、(病毒) 1、原蟲是單細(xì)胞有機(jī)體。、原蟲是單細(xì)胞有機(jī)體。 2、真菌是一種具有典型細(xì)胞核的真核細(xì)胞、真菌是一種具有典型細(xì)胞核的真核細(xì)胞微生物。微生物。 a.酵母菌:酵母菌: 單細(xì)胞真菌,不形成菌絲,單細(xì)胞真菌,不形成菌絲, 真菌分為真菌分為 b.類酵母菌:但類酵母菌可有假菌絲類酵母菌:但類酵母菌可有假菌絲 c.霉菌:多細(xì)胞真菌,有菌絲和孢子霉菌:多細(xì)胞真菌,有菌絲和孢子 一、血液中主要成分的功能及其在數(shù)學(xué)中一、血液中主要成分的功能及其在數(shù)學(xué)中的意義的意義 二、二、ABO的抗原抗體反應(yīng)及其影響因素的抗原抗體反應(yīng)及其影響因素 三、三、 ABO血型系統(tǒng)的正反定型,對獻(xiàn)血者血型系統(tǒng)的正反定型,對獻(xiàn)血者和
27、患者鑒定和患者鑒定 四、四、RH血型系統(tǒng)血型系統(tǒng) 五、配血試驗(yàn)重要性五、配血試驗(yàn)重要性 六、血型鑒定和配血試驗(yàn)的原理六、血型鑒定和配血試驗(yàn)的原理 一、血液成分與功能一、血液成分與功能 全血是由細(xì)胞和血漿組成,全血是由細(xì)胞和血漿組成, 1、紅細(xì)胞:、紅細(xì)胞: 其入血后壽命約其入血后壽命約120天、隨后天、隨后被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)降解清除,紅細(xì)胞內(nèi)的血被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)降解清除,紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白在輸血工作中用已知濃度的硫酸銅紅蛋白在輸血工作中用已知濃度的硫酸銅溶液測定、男性用密度為溶液測定、男性用密度為1.052、女性用、女性用1.050的硫酸銅溶液。血紅蛋白男的硫酸銅溶液。血紅蛋白男135-170g/L
28、 女女120-160g/L 粒細(xì)胞粒細(xì)胞 2.白細(xì)胞:白細(xì)胞: 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 單核細(xì)胞單核細(xì)胞 白細(xì)胞是有核細(xì)胞且平均壽命很短,粒細(xì)白細(xì)胞是有核細(xì)胞且平均壽命很短,粒細(xì)胞平均胞平均3-5天,單核細(xì)胞離開循環(huán)系統(tǒng)后壽天,單核細(xì)胞離開循環(huán)系統(tǒng)后壽命只有幾天命只有幾天 中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞 50%-70% 粒細(xì)胞粒細(xì)胞 嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞1%-5% (其功能是抵御炎癥感染)(其功能是抵御炎癥感染) 嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞 0%-1% 淋巴細(xì)胞:大部分由淋巴組織和胸腺產(chǎn)淋巴細(xì)胞:大部分由淋巴組織和胸腺產(chǎn) 生生 20%-40% 主要是針對外源性抗原及病毒性主要是針對外源性抗原及病毒性 感染感
29、染 單核細(xì)胞:單核細(xì)胞: 8% (清除外源性物質(zhì)如細(xì)菌、這一(清除外源性物質(zhì)如細(xì)菌、這一 過程稱為吞噬)過程稱為吞噬) 3. 血小板:正常成人含量約血小板:正常成人含量約10-30萬、血小萬、血小板離體后如保存適當(dāng)、可保存板離體后如保存適當(dāng)、可保存5天天 血清和血漿:血清和血漿: 血清是凝固紅細(xì)胞的上清液;血清是凝固紅細(xì)胞的上清液; 血漿是抗凝血的上清液。血漿是抗凝血的上清液。 凝血激活途徑:內(nèi)源性(表面接觸)、外凝血激活途徑:內(nèi)源性(表面接觸)、外源性(組織損傷源性(組織損傷 ) 1. IgG和和IgM的區(qū)別(都能激活補(bǔ)體、最適的區(qū)別(都能激活補(bǔ)體、最適PH值值6.5-7.5) IgG(73
30、%)不完全抗體、能通過胎盤、不完全抗體、能通過胎盤、與紅細(xì)胞在鹽水中不凝集、但可致敏紅細(xì)與紅細(xì)胞在鹽水中不凝集、但可致敏紅細(xì)胞、最適反應(yīng)溫度胞、最適反應(yīng)溫度37、。如、。如HR血型抗體血型抗體 IgM(8%)完全抗體、不能通過胎盤、與完全抗體、不能通過胎盤、與紅細(xì)胞在鹽水中凝集、最適反應(yīng)溫度紅細(xì)胞在鹽水中凝集、最適反應(yīng)溫度4、。、。如如ABO血型抗體,平均壽命血型抗體,平均壽命10天天 2. 抗原與抗體比例抗原與抗體比例 最適細(xì)胞濃度是最適細(xì)胞濃度是2-5% 3. 抗人球蛋白試驗(yàn)抗人球蛋白試驗(yàn) 抗人球蛋白試驗(yàn)分三階段;第一致敏與包抗人球蛋白試驗(yàn)分三階段;第一致敏與包被、第二階段洗滌、第三階段加
31、入抗人球被、第二階段洗滌、第三階段加入抗人球蛋白。蛋白。 4. 補(bǔ)體補(bǔ)體 5630分鐘可將其滅活分鐘可將其滅活 1. 1900年年Landsteiner發(fā)現(xiàn)了發(fā)現(xiàn)了ABO血型血型 2. ABO血型鑒定、必須進(jìn)行細(xì)胞與血清兩血型鑒定、必須進(jìn)行細(xì)胞與血清兩組試驗(yàn)、即正定與反定、反定時(shí)用組試驗(yàn)、即正定與反定、反定時(shí)用O細(xì)胞的細(xì)胞的目的是證實(shí)是否有不規(guī)則抗體目的是證實(shí)是否有不規(guī)則抗體 3. 新生兒新生兒ABO血型只作正定血型只作正定 4. A抗原亞型抗原亞型 1911年發(fā)現(xiàn)年發(fā)現(xiàn)A1 A2兩種亞型、兩種亞型、A2 和和A2B的的血清中有可能有抗血清中有可能有抗A1抗體??贵w。 5. 抗抗AB和抗和抗A
32、 常用抗常用抗AB來確定弱來確定弱A和和B抗原這種抗抗原這種抗A和抗和抗B的混合物與弱的混合物與弱A和和B抗原親和力強(qiáng),抗抗原親和力強(qiáng),抗AB在患者的紅細(xì)胞鑒定中部需要,但建議用在患者的紅細(xì)胞鑒定中部需要,但建議用于獻(xiàn)血者簡單。于獻(xiàn)血者簡單。 6. 直接抗人球蛋白試驗(yàn):測定細(xì)胞表面致直接抗人球蛋白試驗(yàn):測定細(xì)胞表面致敏的抗體敏的抗體 7. 間接抗人球蛋白試驗(yàn):測定游離在血清間接抗人球蛋白試驗(yàn):測定游離在血清中的抗體中的抗體 A2和和A2B的人血清中有可能有抗的人血清中有可能有抗A1,但,但通常很弱。通常很弱。 A2人血清有抗人血清有抗A1占占2%, A2B的人血清的人血清中有抗中有抗A1占占2
33、5 % 1939年發(fā)現(xiàn)了年發(fā)現(xiàn)了Rh血型、抗原的發(fā)育血型、抗原的發(fā)育與與ABO抗原的發(fā)育不一樣、抗原的發(fā)育不一樣、RhD抗抗原在胎兒早期就得到了充分的發(fā)育,原在胎兒早期就得到了充分的發(fā)育,臍帶或新生兒紅細(xì)胞的臍帶或新生兒紅細(xì)胞的Rh血型與成血型與成人一樣強(qiáng)。人一樣強(qiáng)。 RH系統(tǒng)不象系統(tǒng)不象ABO系統(tǒng),它有六個(gè)基因,系統(tǒng),它有六個(gè)基因,稱為:稱為:Cc,Dd,Ee;五種抗原稱為五種抗原稱為Cc,D,Ee。d基因不產(chǎn)生抗原?;虿划a(chǎn)生抗原。 1. RhDu型的獻(xiàn)血員作為型的獻(xiàn)血員作為Rh陽性看陽性看待、待、RhDu型的病人作為型的病人作為Rh陰性性陰性性看待。看待。 2. 不完全不完全D和和RhD
34、u型不同、不完型不同、不完全全D是部分抗原丟失、可產(chǎn)生針對是部分抗原丟失、可產(chǎn)生針對丟失部分抗原的抗丟失部分抗原的抗-D抗體;而抗體;而RhDu型是細(xì)胞上型是細(xì)胞上D抗原數(shù)量低于抗原數(shù)量低于正常。正常。 患者用血選擇患者用血選擇 1.為大量輸血的患者選血、大量輸血為大量輸血的患者選血、大量輸血是指患者在是指患者在24小時(shí)內(nèi)輸了超過自身血小時(shí)內(nèi)輸了超過自身血容量的血液、在輸了容量的血液、在輸了12單位血后,可單位血后,可以輸注未經(jīng)交叉配合的血液,但三天以輸注未經(jīng)交叉配合的血液,但三天后仍需輸血必須進(jìn)行交叉配合。后仍需輸血必須進(jìn)行交叉配合。 2. 給嬰兒或新生兒選擇全血或紅細(xì)胞懸液、一般給嬰兒或新
35、生兒選擇全血或紅細(xì)胞懸液、一般用不超過用不超過7天的、最新鮮的血液。血液選用與母天的、最新鮮的血液。血液選用與母嬰配合嬰配合Rh血型合適的血液(由于嬰兒血清中存在血型合適的血液(由于嬰兒血清中存在母親的血型抗體如母親為母親的血型抗體如母親為O型,嬰兒為型,嬰兒為A型,則選型,則選用用O型的紅細(xì)胞加型的紅細(xì)胞加AB型血漿);在換血的情況下型血漿);在換血的情況下選血的原則有賴于換血的原因。選血的原則有賴于換血的原因。RhD新生兒溶血新生兒溶血病患兒換血、則用病患兒換血、則用RhD陰性血;陰性血;ABO新生兒溶血新生兒溶血病患兒換血、則用低效價(jià)病患兒換血、則用低效價(jià)O型血;其他任何新生型血;其他任何新生兒黃疸患兒換血、可選用兒黃疸患兒換血、可選用ABO、Rh與嬰兒同型的與嬰兒同型的血液或血液或Rh同型的。同型的。 3. 不規(guī)則抗體篩選:不規(guī)則抗體篩選不規(guī)則抗體篩選:不規(guī)則抗體篩選多用抗人球蛋白試驗(yàn)、篩選細(xì)胞有雙多用抗人球蛋白試驗(yàn)、篩選細(xì)胞有雙細(xì)胞篩選細(xì)胞篩選R1R1O型型CDe/CDe, R2R2cDE/ cDE, 三細(xì)胞篩選三細(xì)胞篩選R1R1 、R2R2 、 RRO型型cde/cde. 4. 輸血反應(yīng):發(fā)熱反應(yīng)輸血反應(yīng):發(fā)熱反應(yīng) 過敏反應(yīng)過敏反應(yīng) 溶血反應(yīng)溶血反應(yīng) 溶血反應(yīng):溶血反應(yīng): 血管內(nèi)溶血:在循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)紅細(xì)胞血管內(nèi)溶血:在循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)紅細(xì)胞溶解,伴
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