中性粒細胞吞噬功能測定

1、2014級麻醉學1班張先剛學號：1410550160熟悉中性粒細胞的生物學特性及其意義、觀察機體的非特異性免疫現(xiàn)象掌握血液中的中性粒細胞體外吞噬異物能力的測定方法及用途即是中性粒細胞；來源于骨髓造血干細胞；占白細胞總數(shù)的60%70%；生命周期短，不能分裂；細胞核呈多葉狀，胞質(zhì)內(nèi)含多種顆粒： 顆粒內(nèi)含髓過氧化物酶髓過氧化物酶、防御素、溶菌酶、組蛋白酶、乳鐵蛋白、堿性磷酸酶等。中性粒細胞所特有，巨噬細胞沒有這種酶，為中性粒細胞在細胞化學法上的標志。中性粒細胞生物學特性：中性粒細胞生物學特性：A、在抗化膿性細菌感染中起主要防御作用B、引起感染部位急性炎癥反應C、參與超敏反應（如型超敏反 應），引起機

2、體免疫病理損傷。吞噬細胞可以通過趨化、調(diào)理、吞入和殺菌等步驟，能吞噬和消化衰老、損傷及病原微生物等異物，是機體固有免疫的重要組成部分。在一定條件下，將白細胞懸液與細菌混合，保持一段時間后，取樣涂片染色鏡檢，可以測定中性粒細胞吞噬細菌的百分率和吞噬指數(shù)。該實驗可助診斷吞噬細胞功能障礙的疾病。1、菌液：表皮葡萄球菌菌液（9億/ml）2、抗凝劑：3.8%枸緣酸鈉或肝素（25U/ml）3、毛細吸管、凹玻片、載玻片、牙簽、甲醇、瑞特-吉姆薩染料、pH=6.4 PB、酒精棉球、采血針、顯微鏡、香柏油、洗鏡油等。取凹玻片一張，在凹孔中加1滴（0.4ml）3.8%枸緣酸鈉或者肝素（25U/ml）酒精棉球消毒左

3、手無名指后，用采血針在消毒部位取血23滴（約0.2ml），加入凹孔中混勻。加表皮葡萄糖液1滴（0.020.04ml），后用牙簽輕輕攪拌混勻。將凹玻片放在濕盒內(nèi)，置于37孵箱3045min。取一滴于載玻片上，制成薄涂片，自然干燥。置于瑞氏液中，1min后取出。置于pH=6.4 PB中， 3min后取出。置于吉姆薩染液中，510min后取出蒸餾水洗（平持玻片，在一端加水，使染液“漂走”），待干，鏡檢。 在油鏡下可細胞核及被吞噬的細菌被染成紫色，而中性粒細胞的胞漿被染成淡紅色。被吞入細菌1、吞噬百分率= 100個中性粒細胞中吞噬了細菌的細胞數(shù)1002、吞噬指數(shù)= 100個中性粒細胞吞噬的細菌總數(shù) 100100%人吞噬百分率正常參考值：62%76%100%人吞噬指數(shù)正常參考值：1.321.721、中性粒細胞吞噬活性在37時最好，溫度過 高或者過低均會使其吞噬能力減低；2、個體差異、年齡、健康狀況的不同，其吞噬能力不同；3、掌握好中性粒細胞與細菌的作用時間（中性粒細胞對細菌吞噬非常迅速，5min左右吞噬率