生化試劑的基本知識(shí)

1、全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together生化試劑的基本知識(shí)全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together主要內(nèi)容介紹生化試劑的分類反應(yīng)速度特性顯色原理性能評(píng)價(jià)方法全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together生化試劑的分類按照化學(xué)性質(zhì)分酶類：包括ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，-HBDH，LDH，CK，CK-MB,-AMY，MSO，ADA，ChE等。 底物/代謝產(chǎn)物類：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，TBA，NH4+，CO2等。無(wú)機(jī)離子類：包括Ca，P，M

2、g，Cl等。 特種蛋白類：包括apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM等。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together生化試劑的分類按照臨床應(yīng)用分無(wú)機(jī)離子：包括Ca，P，Mg，Cl等。肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil， D-Bil，TBA，TP，Alb等。腎功能：UA，UREA，Cr等。心肌酶譜：CK，CK-MB，LDH，-HBDH，AST，MSO。糖尿?。篏LU等。前列腺疾?。篈CP，p-ACP等。胰腺炎：-AMY。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together生化試劑的分類按照臨

3、床應(yīng)用分胰腺炎：-AMY。血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。痛風(fēng)：UA。有機(jī)磷中毒：ChE。免疫性疾?。篊3，C4，PFB(B因子)， IgG，IgA，IgM， Kappa鏈，Lambda鏈。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性按照反應(yīng)速度，可以將生化試劑分為二大類：終點(diǎn)法試劑；動(dòng)力學(xué)法試劑：又可再分為零級(jí)動(dòng)力學(xué)法和一 級(jí)動(dòng)力學(xué)法全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性之終點(diǎn)法 終點(diǎn)法指經(jīng)過(guò)一段時(shí)間(一般為幾分鐘)的反應(yīng)，反應(yīng)進(jìn)行到完全，使全部底物(被測(cè)物)轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物，稱終點(diǎn)法，更

4、確切地說(shuō)應(yīng)稱平衡法，這是最理想的分析類型。整個(gè)反應(yīng)達(dá)到平衡，由于正向反應(yīng)的平衡常數(shù)很大，可認(rèn)為所有的被測(cè)定物已轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物，反應(yīng)液的吸光度不再增加(或降低)，吸光度的增加(或降低)程度與被測(cè)定物的濃度成正比。終點(diǎn)法對(duì)反應(yīng)條件(如酶量、pH、溫度)小的改變不敏感，只要這種改變不影響在一定時(shí)間內(nèi)反應(yīng)達(dá)到平衡即可，是最理想的反應(yīng)模型。 Att1t2t3全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性之終點(diǎn)法屬于終點(diǎn)法的試劑主要有：TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，Cr（氧化酶法），NH4+，CO2 ， Ca，P，Mg，Cl

5、 ， apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM等。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性之動(dòng)力學(xué)法零級(jí)動(dòng)力學(xué)法 指反應(yīng)過(guò)程中反應(yīng)速度維持不變，達(dá)到最大，與底物濃度無(wú)關(guān)，因此，在整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中，反應(yīng)物可以勻速地生成某個(gè)產(chǎn)物，導(dǎo)致被測(cè)定溶液在某一波長(zhǎng)下吸光度均勻地減小或增加，減小或增加的速度(A/min)與被測(cè)物的活性或濃度成正比，主要用于酶活性的測(cè)定。 實(shí)際上，由于底物濃度不可能足夠大，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，底物消耗到一定程度后，反應(yīng)速度不再維持不變，同樣從啟動(dòng)反應(yīng)到達(dá)到最大速度需要一定時(shí)間。因此，零級(jí)動(dòng)力學(xué)法是針對(duì)于特

6、定時(shí)間段而言的，各試劑商對(duì)這段時(shí)間有嚴(yán)格規(guī)定。 Att1t2 t3tn全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性之動(dòng)力學(xué)法屬于零級(jí)動(dòng)力學(xué)法的試劑主要有：ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，-HBDH，LDH，CK，CK-MB,-AMY，MSO，ADA，ChE ，TBA等全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性之動(dòng)力學(xué)法一級(jí)動(dòng)力學(xué)法(固定時(shí)間法） 在一定的反應(yīng)時(shí)間內(nèi)，反應(yīng)速度與底物濃度的一次方成正比,由于底物在不斷的消耗，因此整個(gè)反應(yīng)速度在不斷的減小，表現(xiàn)為吸光度的增加(或降低)速度越來(lái)越小，這類反應(yīng)達(dá)到平衡的時(shí)間很長(zhǎng)，理論

7、上可以在任意時(shí)間段進(jìn)行監(jiān)測(cè)，但由于血清成份復(fù)雜，反應(yīng)剛啟動(dòng)時(shí)反應(yīng)較復(fù)雜，雜反應(yīng)較多，經(jīng)過(guò)一段延遲時(shí)間才能進(jìn)入穩(wěn)定反應(yīng)期，必需在特定時(shí)間段內(nèi)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，各試劑商對(duì)這段時(shí)間有嚴(yán)格規(guī)定。 在一固定時(shí)間間隔中，底物濃度的變化量正比于底物的初濃度。這是一級(jí)反應(yīng)的通性。該段時(shí)間內(nèi)吸光度的增加(或)降低與被測(cè)定物的濃度成正比。Att1 t2t3t4全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together反應(yīng)速度特性之動(dòng)力學(xué)法屬于一級(jí)動(dòng)力學(xué)法的試劑主要有：Cr（苦味酸法），UREA（紫外監(jiān)測(cè)法）全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together顯色原理NAD-NADH和NADP-NADPH系統(tǒng)

8、p-NP和p-NA系統(tǒng)H2O2偶聯(lián)的指示系統(tǒng)抗原抗體反應(yīng)指示系統(tǒng)其它顯色反應(yīng)全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together顯色原理NAD-NADH和NADP-NADPH系統(tǒng) NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而NAD和NADP在340nm無(wú)特征性吸收峰，利用其偶聯(lián)的脫氫酶(工具酶)反應(yīng)，根據(jù)340nm吸光度的變化，可以測(cè)定物質(zhì)的濃度或活性。 作為該指示系統(tǒng)常用的工具酶有LDH、MDH、GLDH和G6PDH 目前利用此指示系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定的臨床項(xiàng)目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、-HBDH 、 Glu、UREA、NH4+ 、CO2等。全球信賴的邁瑞全球信賴

9、的邁瑞 A world together顯色原理p-NP和p-NA指示系統(tǒng) p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根據(jù)405nm吸光度的變化，可以測(cè)定物質(zhì)的濃度或活性。 目前利用此指示系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定的臨床項(xiàng)目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together顯色原理H2O2偶聯(lián)的指示系統(tǒng) H2O2在過(guò)氧化物酶的作用下，可使單一個(gè)或成對(duì)的無(wú)色的色素原氧化成有色的色素，導(dǎo)致某一波長(zhǎng)吸光度的增加，因此可用來(lái)測(cè)定物質(zhì)的濃度或活性 用于此指示系統(tǒng)的單一色素原有TMB、ABTS等；成對(duì)色素原有酚和4AA、MBTH和DMA等。 目前利用此指示系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)

10、定的臨床項(xiàng)目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu、Cr、UA等。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together顯色原理抗原抗體反應(yīng)指示系統(tǒng) 特異性抗體與抗原(待測(cè)物質(zhì))在相應(yīng)的緩沖環(huán)境下反應(yīng)生成抗原抗體復(fù)合物，形成一定的濁度，導(dǎo)致特定波長(zhǎng)透光率的改變。在抗體過(guò)剩的前提下，改變程度與抗原濃度成正比。 目前利用此指示系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定的臨床項(xiàng)目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together顯色原理其它顯色反應(yīng) 蛋白質(zhì)中的肽鍵在堿性溶液中能與銅離子作用產(chǎn)生紫紅色絡(luò)合物，在一定濃度范圍內(nèi)

11、顏色反應(yīng)強(qiáng)度與蛋白質(zhì)的濃度成正比。用于TP的測(cè)定。 溴甲酚綠(BCG)在非離子去污劑Brij35的存在下，可與白蛋白形成緊密結(jié)合的綠色復(fù)合物。用于Alb的測(cè)定。 重氮苯磺酸鹽與膽紅素生成紅紫色偶氮膽紅素。用于總膽紅素和直接膽紅素的測(cè)定。 甲基麝香草酚蘭(MTB)在堿性條件下可與Ca、Mg形成有色絡(luò)合物。用于Ca、Mg的測(cè)定。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together性能評(píng)價(jià)方法主要性能指標(biāo)：穩(wěn)定性：指在規(guī)定條件下經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的保存， 仍能達(dá)到相應(yīng)的性能指標(biāo)，如試劑空白吸光 度、線性范圍、靈敏度等。 反應(yīng)靈敏度：指單位濃度(或活性)的測(cè)定物反應(yīng)所產(chǎn)生的 反應(yīng)度，反應(yīng)度越高，靈

12、敏度越大。 精密度：結(jié)果間相互符合的一致程度準(zhǔn)確度：與參考測(cè)定程序結(jié)果的一致性線性范圍：在規(guī)定的重復(fù)性和線性偏差下，測(cè)得的濃度或活性值 與設(shè)定的濃度或活性值之間的比例關(guān)系的范圍。 基質(zhì)效應(yīng)：抗干擾性：其它：試劑/樣本比例、反應(yīng)時(shí)間、價(jià)格等。全球信賴的邁瑞全球信賴的邁瑞 A world together性能評(píng)價(jià)方法穩(wěn)定性：連續(xù)觀測(cè)，每日試驗(yàn)；熱加速試驗(yàn)。反應(yīng)靈敏度：直接計(jì)算單位濃度反應(yīng)物的吸光 度變化或變化率。精密度：按照NCCLS EP5-A進(jìn)行。準(zhǔn)確度：按照NCCLS EP9-A2 進(jìn)行。線性范圍：按照NCCLS EP6-A 進(jìn)行?；|(zhì)效應(yīng)：通過(guò)回收試驗(yàn)確定抗干擾性：按照NCCLS EP7-A進(jìn)行。謝謝大家！謝謝大家！已推出的試劑種類共35個(gè)項(xiàng)目38種試劑（按照化學(xué)性質(zhì)分）：酶類：包括ALT，AST，ALP，r-GT，-HBDH，LDH，CK，CK-MB,-AMY等。 底物/代謝產(chǎn)物類：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，UREA，Cr