片劑微生物限度檢測方法驗證試驗報告

1、微生物限度檢測方法驗證試驗報告目的：確認供試品的抑菌活性及測定方法的可靠性。二、內(nèi)容：細菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定（即：對五株陽性對照實菌株的回收逐一進行驗證）。三、菌種：枯草芽孢桿菌【CMC（ B）63501】、金黃色葡萄球菌【CMC（ B）26003】、大腸埃希菌【CMCQ F） 44102】、白色念珠菌【CMC（ F） 98001】、黑曲霉菌【CMCQF）98003】。四、方法： 常規(guī)法（）；培養(yǎng)基稀釋法（）；薄膜法（）；綜合法（）。依據(jù)中國藥典 2005年版二部微生物限度檢查方法驗證實驗。五、方法驗證：細菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定，進行三次獨立實驗，每次平行實驗回收率為 70%A上。六、實 驗

2、:(1)菌液 組 測定所加的試驗菌數(shù)。（2）供試品對照組取1m供試液注入平皿中，立即傾入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，做兩個平板，按平板菌落計數(shù)方法測定其菌落數(shù)。（3 ）試 驗 組平皿法計數(shù)，取供試品10g（ ml）,加入PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml（ 1： 10），作為供試液。取1ml供試液、1ml試驗菌液（50100cfu/ml ）分別注入平皿中，立即傾入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株菌做兩個平板，按平板菌落計數(shù)方法 測定其菌落數(shù)。（4）稀釋劑對照組試驗時，可用相應(yīng)的稀釋劑替代供試品，加入1ml試驗菌（50100cfu/ml ）,立即傾入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株菌做兩個平板，按平板菌落計數(shù)方法測定其

3、菌落數(shù)。七、結(jié) 論：通過方法學(xué)驗證實驗證明， 采用常規(guī)法（）；培養(yǎng)基稀釋法（）；薄膜法（）；綜合法（），對5株陽性代表菌株回收率均為70%以上。該方法適用于微生物限度檢查復(fù)核人：試驗人:試驗記錄（1）批號：驗證日期：試驗組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對照組(3)試 驗組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗證菌金黃色枯草芽白色念金黃色枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培養(yǎng)時 間及溫CCCCCCCCCCCC

4、度小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時菌落數(shù)A、試驗組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋劑對照組回收率：(3)寧(1)x 100%BBBBB批號:驗證日期:試 驗記 錄（1）年 月 日試驗組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對照組(3)試 驗組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗證菌金黃色枯草芽白色念金黃色枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培養(yǎng)時 間及溫CCCCCCC

5、CCCCC度小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時菌落數(shù)（供）（供）（?。ㄏ。〢、試驗組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋劑對照組回收率：(3)寧(1)x 100%BBBBB試驗記錄（2驗證日期:實批號:年 月曰試驗組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對照組(3)試 驗組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗證菌金黃色枯草芽白色念金黃色枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-

6、培養(yǎng)時 間及溫CCCCCCCCCCCC度小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時菌落數(shù)（供）（供）（?。ㄏ。〢、試驗組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋劑對照組回收率：(3)寧(1)x 100%BBBBB實驗記錄 （3）試驗組及（1）菌液組（2）供試品（稀釋 劑）對照組(3)試 驗組接種量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供試液（稀釋劑）1ml +菌液1ml /皿】驗證菌金黃色枯草芽白色念金黃色:枯草芽白色念及稀釋大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉細菌霉菌大腸埃葡萄球孢桿菌珠菌黑曲霉倍數(shù)布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培養(yǎng)時 間及溫CCCCCCCCCCCC度小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時小時菌落數(shù)（供）（供）（?。ㄏ。〢、試驗組回收率:【(3)-（2）】寧（1）X 100%AAAAAB、稀釋