全自動生化分析儀試劑存在的問題及解決方法

1、全自動生化分析儀試劑存在的問題及解決方法1 優(yōu)質(zhì)的儀器用水優(yōu)質(zhì)的儀器用水是使用好檢驗試劑的一個十分重要環(huán)節(jié)之一。因為測定離子類的項目：比如銅、鐵、鋅、鈣、Mg、磷。這些項目在使用過程中，儀器用水的質(zhì)量相當重要，雖然現(xiàn)在一般醫(yī)院的生化儀都帶有制水系統(tǒng)，但制水系統(tǒng)基本都是制備去離子水，離子交換樹脂在使用一段時間后交換能力明顯下降，需要定期進行更換，否則制備的水離子含量多，電導率偏高。使用含離子超標的水沖洗儀器，直接影響檢驗結(jié)果。再如血氨、二氧化碳項目，如果水質(zhì)不好，儀器用水中本身含氨和二氧化碳就很高，則檢測該項目的結(jié)果也會受到嚴重的影響。還有如果血清中含有 GLDH,而儀器用水存在氨時，可消耗 N

2、ADH，使利用 NADH 的酶聯(lián)連續(xù)監(jiān)測法結(jié)果偏高。解決辦法：定期監(jiān)測水質(zhì)，當儀器用水的電阻小于 1.0M?時要更換離子交換樹脂或活性炭。2 標本的及時分離及測定標本的及時分離及測定是用好檢驗試劑的首要環(huán)節(jié)因為凡是利用 NADH 轉(zhuǎn)化為 NAD 變化率來檢測其物質(zhì)含量的試驗都或多或少受到血液存放時間的影響。原因是全血存放時間越長，紅細胞利用血清中的糖進行無氧酵解產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸使 NADH 轉(zhuǎn)化為 NAD,這樣使測定結(jié)果假性升高。解決辦法：作好與臨床的溝通，對抽血人員和標本運送人員(傳遞人員)進行培訓；及時分離血清并及時檢測；也可將全自動生化分析儀上的延遲時間設(shè)置大于 60 秒，這樣試劑在延

3、遲期內(nèi)消除丙酮酸的干擾，可完全避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。3 交叉污染3.1 生化分析儀本身的清洗問題造成的交叉污染在使用全自動生化分析儀時，儀器的交叉污染現(xiàn)象是引起實驗結(jié)果偏離的一個原因。由于全自動生化分析儀試劑針需要接觸各種試劑，一般難以徹底清洗干凈，所以容易造成分析項目的攜帶污染.而生化項目的測定往往僅需要幾微開樣本，試劑往往需要幾百微升，尤其在沒有自動沖洗程序的流動池式生化分析儀上， 由于前帶現(xiàn)象的存在， 如果前一個樣本為高值樣本， 則接后的第一個低值標本結(jié)果應慎重報告。不僅沒有沖洗程序的生化分析儀器上有這種現(xiàn)象，就是具有自動沖洗程序的全自動生化分析儀也有交叉污染，例如 Beckman 全自

4、動生化分析儀 CX4,它的試劑吸針(Probe)、樣品吸針及反應攪拌棒是利用高壓沖洗液沖洗，然后用高壓壓縮空氣吹于，有時由于洗液壓力和壓縮空氣的壓力偏低，使試劑吸針、樣品吸針及反應混勻棒沖不干凈、吹不干，從而導致反應池之問相互污染、試劑問交又污染，使檢驗結(jié)果偏離。另一個值得注意的問題是許多生化儀器由于長期頻繁的利用，使加樣針和試劑針的注射器磨損加重或注射器的“特氟龍”吸頭不及時更換，使吸樣針或試劑針密封層增大，產(chǎn)生泄漏現(xiàn)象也是造成樣本間及試劑間相互污染的一個重要原因。試劑吸樣或樣品吸樣不準確，通常導致利用速率法測試的標本系統(tǒng)偏低或偏高。眾所周知，速率法計算因子是由加樣體積和試劑體積參與確定的，

5、如果加樣體積或加試劑體積不準，導致真正速率計算因子和理論計算因子偏離，從而使檢測結(jié)果不準確。解決辦法：定期進行儀器維護保養(yǎng)；按要求及時更換零部件；定期對儀器進行校準；全自動生化分析標本和試劑用量少，殘存少量即會影響測試結(jié)果，每天應用無水乙醇擦洗并定期更換干燥棒，保證比色杯清洗后不留殘液，避免比色杯的交叉污染。3.2 檢驗項目間的交叉污染在全自動生化分析儀的使用中，我們發(fā)現(xiàn)一個項目會影響緊隨其后項目的測試結(jié)果，造成這種影響的原因之一是一種試劑中含有另一試驗的測定物質(zhì)而直接干擾其測試結(jié)果。原因之二是一種試劑中含有改變另一試驗反應條件或影響其反應進程的物質(zhì)而間接干擾其測試結(jié)果。比如：在 TP 試劑中

6、含有大量的 CuSO4,如果將 Cu 放在 TP 項目的后面檢測，會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。再如 P 放在含有磷酸鹽的項目后面，TBA 放在含有膽酸鹽的項目后面都會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。GLU 放在 CK 和 CKMB 的項目后面可能會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。LDH 放在 AIJT 和 AST 的項目后面可能會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。Mg 放在 ALP 等含有鎂離子項目后面可能會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。ca 放在 aAmy 項目后面可能會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。Mg 試劑(CALMAGITE 法)中含有 EGTA,會干擾 Ca 的測定結(jié)果。另外我們發(fā)現(xiàn)相鄰兩個項目的 PH 值相差

7、太大或反應對 PH 要求嚴格的項目，也會對測定的結(jié)果產(chǎn)生影響，比如 TP 和 Alb 之iPH 相差較大，會互相干擾，TBA 放在 Alb 后面測定，會使測定結(jié)果偏低等等。解決辦法：調(diào)整實驗的前后順序來消除這種影響；在造成污染的項目和受污染的項目之間設(shè)置清洗劑并設(shè)定進行清洗的次數(shù)。4 正確的參數(shù)設(shè)置也是用好檢驗試劑的一個關(guān)鍵因素現(xiàn)代化分析儀上通常有分析程序供用戶設(shè)定，包括樣品量、試劑量、波長、分析方式和延遲時間、測試時間的設(shè)定等。下面我們就延遲時間和加樣程序的設(shè)定來說明正確使用分析參數(shù)對于正確運用試劑的作用。比如肌酊苦味酸測定法，我們在設(shè)定延遲時間時應注意到苦味酸在堿性條件下 50 秒前首先快

8、速與如乙酰乙酸等快反應物質(zhì)產(chǎn)生紅色化合物，而在120 秒后堿性苦味酸又能與慢反應物質(zhì)產(chǎn)生陽性干擾，解決辦法：最好設(shè)定延遲時間為 506O 秒之間，測定時間小于6O 秒，這樣就充分消除了快反應和慢反應干擾，從而檢測到真正肌酊含量。5 校準液的正確使用由于目前生產(chǎn)廠家提供的校準液并非通用的，只適用于某一特定的分析系統(tǒng)。同一項目不同方法學之間有很大差異，同一項目不同方法學的校準液更不能混用，但是在臨床檢驗中經(jīng)常會發(fā)生膽紅素帆酸鹽法用重氮法的校準液校準，乳酸脫氫酶 LP 法用 PL 法校準液校準。TBA 循環(huán)酶法用比色法校準液校準等都會造成測定結(jié)果不準確。另外同一方法學，不同廠家的校準品和試劑都會有所

9、差異。解決辦法：建議結(jié)合各實驗室條件選擇適合自已實驗室的校準品，如有條件可進行系統(tǒng)溯源；建立滿足在同一方法學、同一測定條件、與理論計算的 factor 值差異不大，沒有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素，方可進行校正測定；建立一個可靠的參考系統(tǒng)作為準確性基礎(chǔ)，然后將準確性轉(zhuǎn)移到“使用方法”測定中去，使“使用方法”測定結(jié)果可溯源到參考系統(tǒng)所提供的準確性基礎(chǔ)上來。在實現(xiàn)溯源性目標過程中，永遠以患者新鮮標本為實驗對象，以方法學對比試驗方法為驗證手段。采用回歸方程進行統(tǒng)計分析，斜率接近 1,截距較小，說明“使用方法”對標本測定結(jié)果和溯源目標參考系統(tǒng)對標本檢測結(jié)果非常接近，檢測結(jié)果可靠。6 抗凝劑的使用目前臨床上常用的

10、抗凝劑有 EDTA-2K、 肝素、草氨酸鈉等，TBA 和 AFU 不能用肝素抗凝劑， 因為肝素會使 TBA 和 AFU 試劑發(fā)生混濁，導致吸光度假性偏高，從而使檢測結(jié)果偏高。解決辦法：認真參閱試劑說明書；作好與抽血人員之間的溝通和培訓，使抽血人員知道什么項目用何種標本。7 混成單一試劑的問題比如酶法肌酊試劑，第一步 R.中的酶要消除樣品中內(nèi)源性肌酸的干擾，如果混成單一試劑，則會使檢測結(jié)果偏高，消除法 HDL、LDL 也不能混成單一試劑，因為它們都要分別清除 HDL 和 LDL 以外的脂蛋白，從而達到檢測的目的，如果混成單一試劑，則會使測定的 HDL 和 LDL 不準確。另外，有的試劑混成單一試

11、劑后，穩(wěn)定性和抗干擾能力也會明顯下降。解決辦法：在儀器通道或試劑位允許的情況下盡量使用雙試劑； 如一定要使用單一試劑， 最好選擇試劑廠家針對部份項目專門生產(chǎn)好的單一試劑。8 試劑開瓶的問題隨著全自動生化分析儀的普及，“開瓶穩(wěn)定性”也隨之受到了大家的重視，但是就目前有的試劑方法學來講，還達不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內(nèi)放很長時間不需要定標，比如 ALP、TP、GSP 等 PH 為堿性的試劑，開瓶后試劑會吸收空氣中的二氧化碳，使試劑本身的 PH 值下降，如果長時間開瓶不定標或校準，會使檢測結(jié)果發(fā)生偏離，在國外有的項目有明文規(guī)定，必須 72 小時之內(nèi)定標，比如 BUNo 但是在國內(nèi)的某些實驗室為

12、了方便，很長時間都不作校準，導致測定結(jié)果的不準確。解決辦法：了解試劑的特性，及時對部份項目進行校準，2.對于每天標本量不多的醫(yī)院，可按 12 天的用量取用試劑放入儀器。9 不同批號試劑相混的問題目前將不同批號的試劑混合在一起使用的現(xiàn)象在檢驗中經(jīng)常發(fā)生，當然這一方面是為了節(jié)省成本，另一方面為了方便。但是不管是什么品牌、什么試劑，由于不同批號的試劑生產(chǎn)時間不同，試劑中工具酶的活性會有差異，會發(fā)生水解的底物濃度隨時間長短也會不同。因此混在一起使用而又不定標，可能會導致檢測結(jié)果的不準確。還有如果有的試劑開瓶時間太長，空氣中的灰塵或細菌會進入瓶中，由于有的試劑含有大量的蛋白質(zhì)和鹽，是細菌生長的最好條件，

13、雖然有的試劑添加了防腐劑，但防腐劑的防腐也是有一定限度的，而且絕大多數(shù)廠家的試劑中是沒有加防霉劑的。解決辦法：不同批號試劑建議不要混用，如果混用最好重新定標；試劑瓶在儀器內(nèi)使用時間不要過長，及時更換。一般每個試劑瓶內(nèi)由于試劑針不能吸完，或多或少都會留有幾毫升的試劑，如果是同一批號可以將未開瓶的同一批號試劑往里倒。但如果不是同一批號的試劑時倒人后最好定標，最好的做法是將每個批號的剩余試劑留起來待一定數(shù)量后混在一起，然后重新定標后檢測。通過我們這幾年使用伊得利康試劑，參加衛(wèi)生部的室間質(zhì)評都取得很好的成績，確實認為該公司試劑質(zhì)量好。本篇文章來源于檢驗在線 http:/ 通過對該系統(tǒng)工作流程的分析以及

14、遇到的實際情況， 發(fā)現(xiàn)并總結(jié)了導致水純度不夠的幾種因素及其對全自動生化分析儀檢測的影響。1 純水系統(tǒng)工作流程及影響因素1.1原水預處理原水是指進入實驗室的自來水，預處理就是除去自來水中絕大部分的雜質(zhì)。1.1.1方法：預處理一般使用機械過濾法，分三步進行：精密濾芯（又稱過濾濾芯、分線繞濾芯和熔噴濾芯）過濾原水中的泥沙等大的顆粒物；活性炭濾芯通過吸附作用去除水中的絕大部分有機物和重金屬離子等（特別是自來水中的余氯，其對反滲透膜有很大的氧化作用，所以必須經(jīng)由活性炭去除）；反滲透膜（RO）進一步去除水中的微觀粒子和鹽分。1.1.2影響因素：自來水水質(zhì)：自來水中雜質(zhì)含量高時會導致預處理部件使用壽命縮短和

15、處理后水質(zhì)不達標，甚至會堵塞管道，導致需要更高的進水壓才能工作，一般要求自來水中固體溶解物含量（TDS）小于 200mg/L。預處理部件使用壽命：精密濾芯、活性炭濾芯、反滲透膜等都是具有相對壽命的材料，其中精密濾芯和活性炭濾芯又對反滲透膜具有保護作用，如果它們失效，RO 膜負荷就會加重，壽命就會縮短。由于各廠家產(chǎn)品質(zhì)量各異，RO 膜又價格昂貴，因此在實際使用中應根據(jù)各地自來水水質(zhì)合理搭配使用。進水壓：一般純水系統(tǒng)預處理都需要用高壓泵維持一定的進水壓力（0.IMpa）才能維持正常工作，當高壓泵壓力不足時會導致產(chǎn)水量下降。純水系統(tǒng)的維護：純水系統(tǒng)一般都具有自動反沖洗功能，當其設(shè)置不合理或故障以及人

16、工維護不當時也會影響純水機的正常工作，導致純化效率及水質(zhì)下降。1.2去離子水的制備一般的純水系統(tǒng)由于受到成本限制，RO 膜質(zhì)量一般，經(jīng)其處理過的水只能達到三級純水（電阻率0.2MO.cm）的標準。三級純水雖然經(jīng)過預處理已經(jīng)去除了大部分離子，但其中的離子濃度還較高，還會影響生化分析儀的微量檢測，因此必須將三級純水進一步去離子以達到一級純水（電阻率lOMQ.cm）的標準才能用于生化檢測。1.2.1方法：離子交換樹脂法是去離子水制備的常用方法，所用的部件就是離子交換柱即純化柱（罐），包括陰離子交換柱、陽離子交換柱和混合柱等，試劑為陰陽離子交換樹脂。陰陽離子交換樹脂一般是由苯乙烯聚合成后再通過二乙烯苯

17、交聯(lián)得到多孔網(wǎng)狀骨架結(jié)構(gòu)， 然后在骨架上連接活性基團而形成的高分子聚合物。 離子交換樹脂所連接的活性基團可分為酸性基團和堿性基團兩大類型。連接酸性基團的離子交換樹脂稱為陽離子交換樹脂，連接堿性基團的樹脂稱為陰離子交換樹脂。1.2.2原理：陽離子交換柱原理即硬水軟化原理：陽離子交換樹脂中的酸性基團有磺酸基（-S03H）、竣基（一 COOH）和苯酚基（-C6H40H）等酸性基團，其中的氫離子能與溶液中的金屬離子或其他陽離子進行交換。例如苯乙烯和二乙烯苯的高聚物經(jīng)磺化處理得到強酸性陽離子交換樹脂，其結(jié)構(gòu)式可表示為 R-SO3H,式中 R 代表樹脂母體，以 Ca2+為例其表達式為2R-S03H+Ca2

18、+-（R-SO3）2Ca+2H+。陰離子交換柱的原理：陰離子交換樹脂中的堿性基團有季胺基-N（CH3）30H、胺基（-NHz）和亞胺基（-NHz）等。它們在水中能生成 OH-離子，可與各種陰離子起交換作用，以 Cl-為例其表達式為 R-N(CH3)30H+Cl-RN(CH3)3Cl+OH-。混合柱：當兩者串聯(lián)使用或混合使用時，產(chǎn)物就只有水，總表達式為：2R-S03H+Ca2+2(CH3)30H+2Cl-(R-S03)2Ca+2RN(CH3)3C1+2H影響因素：離子交換樹脂的質(zhì)與量：離子交換樹脂是有壽命限制的，當離子交換達到一定量時就達到飽和，需要進行再生處理，因此質(zhì)量越好總量

19、越大其使用期限越長。陰陽離子交換樹脂的連接方式：復床式：若干個陽離子交換柱和若干個陰離子交換柱串聯(lián)而成，陽在前陰在后，其優(yōu)點是再生方便，缺點是出水質(zhì)量不高(單級復床式出水電阻率只有 0.5Mcm,雙級復床式出水電阻率為 2MOcm)。混床式：將陽離子樹脂和陰離子樹脂以 1:2 容積比均勻混合裝入同一個交換柱內(nèi)而成， 優(yōu)點是出水純度高(電阻率)1OMQ.cm),缺點是再生困難。 聯(lián)合式： 將復床式和混床式串聯(lián)起來即成， 多采用三柱式， 出水質(zhì)量高(電阻率最高可達 18.3MQ.cm,即超純水)，使用壽命長。三級純水的純度： 當三級純水質(zhì)量不合格， 其中一些非離子雜質(zhì)通過離子交換柱時就會影響離子交

20、換柱的使用壽命并造成出水水質(zhì)的降低。 該情況主要受預處理過程的影響， 同時有些開放性的純水系統(tǒng)將生成的三級純水儲存于水箱中以備其它用途使用時儲存時間過長或其它原因?qū)е碌亩挝廴疽矔顾兌认陆怠? 純水質(zhì)量對生化分析儀及檢測結(jié)果的影響不合格純水中的雜質(zhì)成分純水質(zhì)量不合格也就意味著純水系統(tǒng)水純化的失敗，可能出現(xiàn)在原水預處理過程、三級純水的儲存和離子交換過程中的任何一步。無論哪一步失敗，其雜質(zhì)來源無外乎自來水和純水機水通道的污染物，主要有：電解質(zhì)，常見的有H+,Na+,K+,NH4+,Mg2+,Ca2+,Fe3+,Cu2+,Mn2+,Zn2+,Al3+等陽離子和 F-,CI-,N03-,HC03-

21、,S042-,P043-,H2P04-,HSi03-等陰離子；有機物質(zhì)，如有機酸、農(nóng)藥、燒類、醇類和酯類等；顆粒物；微生物；溶解氣體(Nz,02,C1z,HzS,CO,COz,CH4 等)；其它。不同雜質(zhì)成分對生化分析儀及檢測結(jié)果的影響1電解質(zhì)含量高的影響：最直接的影響就是對血清(漿)中同種離子測定結(jié)果的升高，如對 Mg2+,Ca2+,Fe3+,Cu2+,Zn2+等的測定，同時也對這些項目的定標產(chǎn)生影響。由于很多金屬離子都是酶的輔因子，因此當金屬離子含量高時往往影響酶活性的檢測(如 Mg2+是多種磷酸化激酶的激活劑，水中含量超標時會導致這些酶活性測定值的升高；而許多重金屬離子則對酶有抑制作用，

22、導致酶活性下降)。很多陰離子也作為酶的輔因子存在，對酶活性測定產(chǎn)生影響(如 CI-對 a-淀粉酶就有激活作用)。電解質(zhì)含量高的水更容易形成結(jié)晶和導致蛋白等有機物變性附著于管道系統(tǒng)， 從而使得生化分析儀管道系統(tǒng)更易堵塞， 最終造成測定失真或失??；同時，在使用其對反應杯進行清洗時也很難清洗干凈，會加速反應杯的老化和損壞，使杯空白升高。1有機物質(zhì)的影響：有機物質(zhì)的影響主要在于對類似物質(zhì)測定時導致類似物質(zhì)測定結(jié)果的升高。同時，有機物含量升高也會加速管道系統(tǒng)和反應杯的清洗困難及老化。1顆粒物的影響：顆粒物一般很難通過純水系統(tǒng)進入生化分析儀管道和反應系統(tǒng)，其來源一般都是三級純水或一級純水的儲水箱發(fā)生二次污

23、染，但是一旦進入除了會導致吸光度升高外，還很容易堵塞管道和損壞反應杯。1微生物的影響：微生物的去除主要依賴原水的預處理，有些純水系統(tǒng)還在一級純水或超純水處加裝紫外殺菌或者微濾、超濾等裝置，進一步除去水中殘余的細菌、微粒、熱源等。但一旦預處理失敗或純水儲存箱被二次污染，微生物及其產(chǎn)物就能進入生化分析儀管道系統(tǒng)和反應系統(tǒng)，可能出現(xiàn)的情況有兩種：微生物在管道及反應系統(tǒng)孳生，導致管道堵塞，同時令吸光度和杯空白升高；微生物產(chǎn)生特定的酶對生化分析儀酶測定產(chǎn)生影響，具體產(chǎn)生什么影響取決于污染菌的類型。1溶解氣體：溶解氣體增多產(chǎn)生的影響有：對同種氣體的測定的影響；對水的 pH 值也產(chǎn)生影響，如 C02,Cl2

24、,H2S 等溶解增多導致水 pH 值的下降，也對 pH 值依賴性較強的生化項目測定產(chǎn)生影響；某些氣體如 C12 增多，因其自身氧化性較強，會對與氧化還原反應相關(guān)的生化測定項目產(chǎn)生影響，如對基于 340nm處 NADH 和 NADPH 有吸收峰而建立的 ALT,AST,BUN 等的測定方法，會導致測定值的升高。1其它雜質(zhì)的影響：有些純水系統(tǒng)也將最終生成的超純水或一級純水儲存于水箱中，當水箱有生銹情況時導致鐵測定不正常；還有當機械裝置密封不嚴造成的漏油時導致 TG 測定結(jié)果升高。這些情況雖然少見，但也最容易被忽視。3 討論驗室常用的自動化純水系統(tǒng)有兩種：大型蒸儲器系統(tǒng)，日出水量在 100L 左右，

25、原水利用率 10%15%,能耗大，自動化程度低，制備的蒸儲水純度一般較低，適用范圍較窄，現(xiàn)在基本已經(jīng)被淘汰；反滲透的中央純水系統(tǒng)，由機械過濾、活性炭吸附、反滲透膜和離子交換樹脂等組成，日產(chǎn)水量 900L 左右，原水利用率 30%40%,自動化程度高，能耗低，主部件可反復使用，出水純度高，目前使用廣泛。另外，有些實驗室因條件所限，直接購買商品化純凈水使用，但商品化純凈水多為飲用水，其標準與實驗室用水標準有所不同，因此購買前一定要清楚該產(chǎn)品的各項指標，避免對檢測造成影響。價水質(zhì)的常用指標電阻率，是衡量實驗室用水導電性能的指標，其隨著水內(nèi)無機離子的減少而增大，但由于水自身的解離作用，電阻率最大只能達

26、到 18.3MQ.cm 左右，是檢測水中離子濃度的主要指標；pH 值，一級純水及超純水的 pH 值測定較為困難，測定值浮動范圍較大（67）,主要是因為其中溶質(zhì)極低，導電性差,測定時極易受到外界干擾，但正因如此，水質(zhì)的細小變化對 pH 值的影響就很明顯，是評價水質(zhì)的一個非常靈敏的指標；www.clin-總有機碳，是指水中碳的濃度，反映水中有機化合物的含量；內(nèi)毒素，即革蘭氏陰性細菌的脂多糖細胞壁碎片，又稱之為“熱原”。議對實驗室超純水進行嚴格規(guī)范的質(zhì)量控制，定時測定純水電阻率和 pH 值等指標，繪制質(zhì)控圖。增強實驗室用水質(zhì)量意識，積極防范因用水而造成的影響和損失。對于開放式水儲存箱的取用水要嚴格把

27、關(guān)，嚴防因此而造成的二次污染。要掌握純水機各部件的使用壽命和維護方法，積極防范因純水機部件失效而造成的各種影響水質(zhì)的情況，同時延長或保證 RO 膜和離子交換樹脂的壽命。要對本地區(qū)自來水水質(zhì)狀況有所了解并評估其對純水機的影響，如水質(zhì)較硬，應考慮加裝前處理設(shè)備。本篇文章來源于檢驗在線 http:/ 3 才徹底了解的事實，雖然當初我所在的院校（211）給本專業(yè)的定位是檢驗醫(yī)師。但是事實是全國各醫(yī)學檢驗專業(yè)本科文憑都不能報考執(zhí)業(yè)醫(yī)師，雖然我們學制 5 年，雖然我們大綱要求所有的內(nèi)外婦兒傳染等臨床學習。但是國家的政策如此，胳膊擰不過大腿。要想考執(zhí)照，你需要考臨床專業(yè)檢驗地帶網(wǎng)搜集整理的研究生，即使這樣，

28、部分地區(qū)仍有困難，如在上海地區(qū)，這種情況還是不能報考。2、醫(yī)學檢驗專業(yè)學制多樣中山、華西、湘雅醫(yī)學檢驗 5 年制，交大、南方醫(yī)醫(yī)學檢驗 4 年制，前者拿醫(yī)學學位，后者拿理學學位。出來除個別單位喜歡 5 年制以外，找工作無本質(zhì)區(qū)別，誰不知道現(xiàn)在找工關(guān)系第一。貌似醫(yī)學檢驗全國重點也就是專業(yè)排名第一的重慶醫(yī)科大學，還有醫(yī)檢 7 年制，出來是 MM,具執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試資格。如此復雜參差的學制和培養(yǎng)方法，也難怪國家不給考執(zhí)業(yè)醫(yī)師的資格。3、沒有真正意義上的檢驗醫(yī)師如果你想報考檢驗醫(yī)師，你必須先具有臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師執(zhí)照，按照第 1 條所說，所以你本科必須是學臨床然后轉(zhuǎn)入檢驗專業(yè)。這在醫(yī)學檢驗專業(yè)的人看來確實非常不

29、公平和可笑，要承認這樣一個事實，很多情況下，臨床專業(yè)的人改行進入檢驗專業(yè)， 大多是在臨床混的不好，這樣的檢驗隊伍你覺得是壯大了還是魚龍混雜了？而正規(guī)接受醫(yī)學檢驗培訓的人卻沒有資格？另外，即使你成為了一名檢驗醫(yī)師，在絕大多數(shù)時候你從事的是技師的工作。罕見或不見有讓檢驗科人員協(xié)助臨床診斷、治療會診的醫(yī)院單位，檢驗醫(yī)師，名存實無。4、檢驗科在醫(yī)院地位普遍不高輔助科室，地位不高也難怪，看看到處都是的關(guān)于檢驗科室被臨床科室肢解的討論就知道了，不用多說。5、醫(yī)學檢驗工作相對好找開始說些這個專業(yè)的好處吧，找工作對于醫(yī)檢專業(yè)的同學來說，不用像臨床那般發(fā)愁，本科進入三甲的機會很多，碩士基本夠用。公務員、公司、科

30、研機構(gòu)，都有不錯的選擇。如果你有好的 idea,試劑開放也許可以讓你一夜暴富。6、醫(yī)學檢驗專業(yè)發(fā)展迅猛所有生物技術(shù)方法上的革新，以及基礎(chǔ)研究上突破，都給醫(yī)學檢驗專業(yè)帶來了無窮無盡的動力。在這個專業(yè)，可以學習最先進的醫(yī)學診斷方法進展，而且這些方法的更替日新月異。如果你是個科研愛好者，醫(yī)學檢驗專業(yè)有得天獨厚的優(yōu)勢，診斷試劑、儀器、病人標本，都是你豐富的資源，即使其他科室搞個項目，也免不了需要你的幫忙。7、醫(yī)學檢驗不用直面冰冷的醫(yī)患關(guān)系不用多說，現(xiàn)實有時候我們無法改變。檢驗專業(yè)只需要在后面認真負責地處理病人標本，用自己的良心報給臨床醫(yī)生準確的結(jié)果。8、沒有差的專業(yè)，只有差的人看看專業(yè)的大佬們，叢玉隆

31、、王鴻利、倪語星、陳宏礎(chǔ)、仲人前，很多臨床科研的巨擘都烙著醫(yī)學檢驗的印子，看看他們的工作和經(jīng)歷。最后套用我老板的一句話：做的好做什么都好，做不好做什么都不好本篇文章來源于檢驗在線 http:/ 吸附在比色杯上的上一個項目的殘留試劑可能會對在這個比色杯中進行的下一個項目的檢測結(jié)果造成影響。根據(jù)經(jīng)驗，比色杯的污染對結(jié)果影響最大，因為比色杯最難以清洗干凈，且在實際工作中難以判斷該比色杯上一測試的項目。（4）燈泡老化：這也是常見影響結(jié)果的原因，應按照要求及時更換燈泡，使儀器處于良好的工作狀態(tài)。臨床實驗室：除了儀器本身設(shè)計方面造成結(jié)果不穩(wěn)定性這個我們不能自己解決的原因，很多讀者反映日常使用時，質(zhì)控往往在

32、控，單獨測試一個項目時，比如肌酊非常準確，但是同時測定很多項目，結(jié)果就非常不好，這主要是什么原因（試劑間化學污染的可能性，引起測定結(jié)果不準確）？于主任：試劑化學成分的交叉污染很難發(fā)現(xiàn)，往往質(zhì)控結(jié)果很好，或驗證試驗結(jié)果也良好，但實際測定的個別結(jié)果會誤差很大。引起試劑間化學污染的原因很多，主要有兩個，一是試劑中含有下一個檢測所要測定的底物，或是含有的某種試劑成分與下一反應的底物有作用，因而直接干擾下一反應的測定結(jié)果；另一種原因是該試劑所引導的反應對下一個項目的反應進程帶來間接的干擾，在有試劑污染的情況下，下一個測試所測定的是前后兩個項目反應的綜合作用結(jié)果。臨床實驗室：造成以上試劑間化學污染導致測試

33、結(jié)果不穩(wěn)定的種類都有哪些？于主任：根據(jù)試劑化學成分污染的途徑可分為：（1）試劑成分的直接污染：上一個測定試劑中含有下一個測試所要測定的物質(zhì)，直接干擾下一檢測的測定結(jié)果。如：淀粉酶（AMY）試劑中含有較高濃度的鈣（Ca2+）;堿性磷酸酶（ALP）（IFCC 法）、肌酸激酶（CK）（NAC 法）、肌酸激酶-MB（CK-MB）（NAC 法）、二氧化碳（CO2）（PEPC 法）、AMY（EPS 法）、三酰甘油（TG）等試劑中含有鎂（Mg2+）;葡萄糖（GLU）（氧化酶法）、總蛋白（TP）與酸性磷酸酶（ACP）試劑中含有較高濃度的鉀（K+）;膽堿酯酶（ChE）、總膽固醇（CHOL）、GLU（GOD 法）

34、、尿酸（UA）（尿酸酶法）、乳酸脫氫酶 （LD） （IFCC 法） 、 羥丁酸脫氫酶（HBDH） （DGKC 法） 等試劑中含有磷酸緩沖液； CHOL、 TG 試劑及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑中含有膽酸鈉；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）（IFCC 法）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）（IFCC 法）試劑中含有高活性的 LD;以上試劑的交叉污染就分別會對 Ca2+、Mg2+、K+（紫外酶法）、磷（P）、總膽汁酸（TBA）及 LD 的測定結(jié)果造成干擾。（2）試劑成分參與反應：上一個試劑中含有的某種試劑成分與下一反應所要測定的底物有作用，因而干擾下一反應的測定結(jié)果。如：Mg2+測定試劑的絡合劑亦

35、能與鐵（Fe）結(jié)合，影響鐵與鐵絡合劑的結(jié)合；直接膽紅素（DBil）（重氮法）試劑含有 EDTA,Mg2+試劑中含有 EGTA,均能與 Ca 結(jié)合，從而影響 Ca 的測定；以甘油作為酶保護劑的試劑，會對 TG 的測定帶來干擾；鈣（MTB 法）試劑對 K+有負干擾；CHOL 試劑中含有膽固醇酯酶，可水解膽固醇酯形成游離膽固醇，而引起對游離膽固醇測定的干擾。（3）反應進程相同：上一個試劑所引導的反應對下一個項目的反應進程帶來間接的干擾，下一項目所測定的是前后兩個項目反應的綜合作用結(jié)果。如：當上一反應產(chǎn)物為 H2O2時，則對以 Trinder 反應產(chǎn)生顏色的測定結(jié)果引起干擾，如 UA 對 CHOL 結(jié)

36、果的影響，CHOL 對肌酊（CREA）（酶法）測定結(jié)果的影響，GLU（氧化酶法）對 CREA 測定結(jié)果的影響；CK（NAC 法）、CK-MB（NAC 法）試劑中含有 GLU 成分，其分析方法的原理中包含 GLU 的己糖激酶（HK）反應過程，因此可能對 GLU 的測定帶來干擾，尤其對 GLU 的 HK 法測定可能帶來嚴重干擾。（4）影響反應條件：如上一試劑緩沖液成分改變了下一反應的 pH 環(huán)境，從而改變反應速率，如 TP（雙縮月尿法）測定需在 pH89 時，蛋白肽鍵才都能與堿性銅溶液作用生成紫色反應，若 pH8 時，則會導致 TP 結(jié)果偏低，還直接影響球蛋白、白蛋白/球蛋白的結(jié)果；酶活性測定有最

37、適 pH,大多數(shù)酶反應 pH 在 6.07.5 之間，ALP、GT、LDH 則在堿性條件下最適宜；CREA（苦味酸速率法）反應條件為堿性，果糖胺（動力學法）反應條件為酸性，受到污染后反應速率會減慢。CREA（酶法）試劑中含有抗壞血酸氧化酶，影響了氧化還原反應的進程，會對 TBA（酶循環(huán)法）測定結(jié)果有影響。DBil（帆酸鹽氧化法）試劑中含有表面活性劑的酒石酸鹽緩沖液會影響 ALT 活性，對測定結(jié)果有負干擾。臨床實驗室：如何判別試劑間存在化學污染？于主任：由于試劑中化學成分非常復雜，各種穩(wěn)定劑、反應物質(zhì)、緩沖體系共存，且各品種、各廠商的試劑內(nèi)含物均不同，因此試劑間的化學污染往往較難判別。日常工作中

38、往往是儀器評估沒問題，而用戶使用時存有污染；質(zhì)控品和 Westgard法則不起作用，質(zhì)控往往在控；污染具有偶然性，并不是每次都出現(xiàn)。當按照日常的分析順序出現(xiàn)異常結(jié)果時，將出現(xiàn)異常結(jié)果的分析項目及其前一個項目單獨復檢又恢復正常，多是由于發(fā)生試劑間交叉污染所致。但由于試劑成分的復雜多樣性，儀器狀況的獨特性，可能發(fā)生的試劑間交叉污染的情況不盡相同。各個公司所提供的產(chǎn)品說明書常不能夠全面反映試劑組成的情況，因此需要通過試驗才能發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來的干擾。一般可以以下試驗及步驟來加以判別：（1）追溯可疑檢測項目的反應杯序號，在這之前該反應杯做的是什么項目的檢測，以此來初步估計是什么反應或什么物質(zhì)對后

39、項目檢測產(chǎn)生干擾；初步確定后可選擇同類反應，有針對性地實施交叉污染試驗加以驗證，并尋找方法避開此污染。如加做清洗，更換試劑順序，甚至更換檢測試劑或方法。（2）將某一試劑作為樣本進行全套項目測定，觀察各項生化結(jié)果的情況，進而確定發(fā)生試劑交叉污染時造成直接干擾的項目。（3）1 份樣品分成 2 份，1 份加生理鹽水或其他適當?shù)南♂屢?，另一份加等量的某試劑，同時測定，觀察結(jié)果的變化，進而確定可能發(fā)生試劑交叉污染時造成干擾的項目。（4）試劑交叉污染實驗方法：交叉污染初試：假設(shè)有 3 個項目 A、B、C,以一混合血清作為標本，按以下順序測試：順序AAAAABACAB串果Ai網(wǎng)AsA4國JABi順序eBBB

40、CcCcC結(jié)果當&國ClJQGA2A5、B2B5、C2C5:以此 4 次測定值平均值分別作為 A、B、C 項目無污染時的均值；AB-A:表示 B 項目對 A 項目污染時 A 項目的測定值，其余表示類同。若（AB-A/AX100%）105%則強烈支持 B 試劑對 A 有交叉污染。疑似污染確認：若上述初試結(jié)果 B 對 A 有污染，則可進行以下試驗進行確認。順序BAAA結(jié)果A?At臨床實驗室：如何消除試劑間的化學污染？于主任：首先要求檢驗人員對儀器工作流程、試劑組成、測定原理要了如指掌，對試劑交叉污染的各種可能性加以考慮:合理設(shè)計程序。更換試劑時，應仔細研究說明書，發(fā)現(xiàn)和避免可能存在的試劑交

41、叉污染。實際工作中，用全自動生化分析儀進行連續(xù)的多個項目的測定，每個反應的詳細過程難以探知，特別是比色杯的交叉污染無明顯的特征，因此應理論分析結(jié)合實際應用摸索出一套符合本單位工作的方法：（1）為減少試劑間的化學污染，應定期對儀器進行適當?shù)谋ｐB(yǎng)，如更換管道，用去污劑、酸性洗液清洗比色杯，用去污劑擦清試劑針，用無水乙醇擦洗攪拌棒等。（2）合理安排檢測項目的順序：一般在安排項目順序時要求兩個項目間至少要有一個非干擾項目，由于各廠商試劑盒原理不同，內(nèi)含成分不同，故無固定的測定順序格式，需要自己摸索。較好的做法是將被干擾項目置于干擾項目之前，以消除干擾發(fā)生的可能。一般檢測順序有以下原則：不受上一試劑的干

42、擾；不影響下一試劑測定；不影響測試速度；充分運用剩余試劑位開展新項目；利用好儀器的功能。（3）當合理設(shè)置測試順序無法消除交叉污染時，可使用生化分析儀的試劑針、比色杯清洗程序，對試劑針、比色杯進行 2 次或多次清洗。用堿性清洗液及酸性清洗液交叉沖洗試劑針可以有效地避免攜帶污染。（4）選用具有抗交叉污染的試劑盒：如在游離膽固醇試劑中添加膽固醇酯酶抑制劑，以減少膽固醇酯酶水解膽固醇酯而引起對游離膽固醇測定的污染。（5）部分大型全自動生化分析儀有多個模塊或通道，可以將有化學污染干擾的項目排在不同的模塊或通道中檢測。本篇文章來源于檢驗在線 http:/ 2002 年 9 月-2003 年 4 月分院收治

43、住院的呼吸道感染患兒進行微量顆粒凝集法和酶聯(lián)免疫吸附法進行肺炎支原體抗體 IgM 的測試，并且同時檢測冷凝集試驗，現(xiàn)告如下。1 材料與方法對象標本來源 2002 年 10 月2003 年 4 月就診的呼吸道感染癥狀的分院兒科病房呼吸道感染患者 216 例。每例均于入院 2 天內(nèi)抽血，。同時用間接血凝法和酶聯(lián)免疫法檢測 MP-IgM 抗體及冷凝集試驗。方法微量顆粒凝集法測 MP-IgM 抗體，試劑盒 SERODIASMYCO-口由日本富士瑞比歐株式會社提供。嚴格按說明書進行操作，每次均設(shè)陰、陽性對照，滴度1:80 為陽性。ELISA 法試劑由美國診斷自動化公司生產(chǎn)，上海領(lǐng)檢科技公司提供，操作嚴格按說明書進行。冷凝集試驗按臨床醫(yī)學檢驗“冷凝集試驗”進行操作，滴度）1:64 為陽性。2 結(jié)果治療結(jié)果 216 例受檢樣品中，MP 感染和非 MP 感染患兒 MP 三種結(jié)果比較見表 1o172例疑為MP感染的病例中， PA法陽性占93.0%,ELISA法占95.3%,CAT法占67.4%。在44例非MP感染中， PA法陽性占9.0%,ELISA法占 11.3%,CAT 法占 13.6%。表 1MP 感染和非 MP 感染患兒 MP 三種結(jié)果比較略PA 法、ELISA 法、CAT 三種檢測方法比較 PA 法敏感