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1、、選擇題1.土壤中有些微生物能利用尿素是因為()A.其體內(nèi)含有月尿酶B.其體內(nèi)含有氨(NH3)酶C.它能將 CO2合成為有機物D.它們不需要氮源解析:選 A。能利用尿素的微生物就是因為體內(nèi)含有月尿酶,可降解尿素為其生長繁殖提供氮源。2.從土壤中分離以尿素為氮源的微生物時,所用的 LB 培養(yǎng)基由以下哪一組成分構(gòu)成()A.蛋白月東、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂B.蛋白月東、NaCl、水、瓊脂糖C.蛋白月東、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂糖D.葡萄糖、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂解析:選 C。LB 培養(yǎng)基必須含五大營養(yǎng)元素:碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子。由于是固體培養(yǎng)基還必須有凝固劑,為與尿
2、素培養(yǎng)基作對比,所用凝固劑不能帶來氮源干擾,因此只能選擇相對更為純凈的瓊脂糖了。3.用 104稀釋度的細菌懸?分別涂布于 LB、尿素培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后的結(jié)果,以下敘述正確的是()A.LB 培養(yǎng)基上未出現(xiàn)任何菌落B.尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類都多于 LB 培養(yǎng)基上的C.尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類都少于 LB 培養(yǎng)基上的D.尿素培養(yǎng)基上是不可能出現(xiàn)菌落的解析:選 C。LB 培養(yǎng)基為完全培養(yǎng)基,會出現(xiàn)大量菌落。尿素培養(yǎng)基上只有能以尿素做氮源的微生物能存活,因此其上的菌落數(shù)量和種類都將會減少。尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落就是能利用尿素的那些微生物菌落。4 .在做分離分解尿素白細菌實驗時,A 同學(xué)從
3、對應(yīng)稀釋倍數(shù)為 106的培養(yǎng)基上篩選出大約 150 個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約 50 個菌落。A 同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有()由于土樣不同由于培養(yǎng)基污染由于操作失誤沒有設(shè)置對照A.B.C.D.解析:選 A。該同學(xué)可能取的土樣不同,可取其他同學(xué)的土樣進行培養(yǎng),同時將未接種的培養(yǎng)基同時培養(yǎng),如果結(jié)果不是大約 50 個菌落,可能是培養(yǎng)基污染或操作有誤;如果結(jié)知能演練果和其他同學(xué)數(shù)據(jù)相同,且未接種的培養(yǎng)基沒有菌落生成,說明是土樣不同。5 .能合成月尿酶的微生物所需的碳源和氮源分別是()A.二氧化碳和氮氣 B.葡萄糖和氨C.二氧化碳和尿素 D.葡萄糖和尿素解析:選 D。能合成月尿酶的微生物主要是分解
4、尿素的細菌,其碳源為葡萄糖,氮源為尿素。6 .某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為 106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為 234,那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為 0.1mL)()A.2.34X108B.2.34X109C.234D.23.4解析:選 B。每克樣品中的菌落數(shù)=(CW)XM=(234 田.1)X106=2.34X109。7 .可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是()A.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑8 .以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹出試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮月尿試劑解析:選 Ao 酚紅指示劑是靈敏
5、性高的堿性指示劑,分解尿素的細菌合成的月尿酶將尿素分解成氨,使 pH 升高,使酚紅指示劑變紅。9 .進行系列稀釋時,按怎樣的順序進行()A.稀釋倍數(shù)遞增 B.稀釋倍數(shù)遞減C.不論稀釋度大小 D.A、B 兩者都可解析:選 A。將菌液進行系列梯度稀釋,在稀釋倍數(shù)足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。10 有關(guān)倒平板的操作錯誤的是()A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C.將培養(yǎng)皿打開,培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上D.等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置解析:選 Co 在倒平板時,左手將皿蓋打開一條縫隙,不能將培養(yǎng)皿完全打開,以
6、免雜菌污染。11 .將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入 37c 恒溫箱的目的是()A.對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B.對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培養(yǎng)基D.為了下次接種時再使用解析:選 B。將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入測培養(yǎng)基是否被雜菌污染,即制備是否合格。12 .如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是()A.3 號試管的稀釋倍數(shù)為 103倍B.4 號試管中稀釋液進行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰好為 5 號試管的 10 倍C.5 號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為 1.7X109個D.該實驗方法統(tǒng)計得到的
7、結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高答案:C12 .統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法是()涂布平板法重量法直接計數(shù)法比濁法生理指標法膜過濾法A.B.C.D.解析:選 D。微生物計數(shù)法主要有顯微鏡直接計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法、光電比濁法、最大可能數(shù)(MPN)法、膜過濾法等。13 .分離以尿素為氮源的細菌和分離大腸桿菌都使用了 LB 培養(yǎng)基,其成分()A.前者含瓊脂,后者不含瓊脂和瓊脂糖B.兩者都含有瓊脂C.前者含有瓊脂糖,后者不含瓊脂糖但含瓊脂D.兩者都不含瓊脂和瓊脂糖解析:選 C。瓊脂和瓊脂糖都起凝固劑的作用,用于制備固體培養(yǎng)基。但瓊脂為混合物,含少量含氮化合物,瓊脂加以純化,去除含氮化合物就成為瓊脂糖。分離大腸桿菌
8、和含月尿酶的細菌用的都是固體培養(yǎng)基,因此都必須含有凝固劑:瓊脂或瓊脂糖。但是,由于瓊脂為混合物,其中含一定量的含氮化合物,因此不能用于分離以尿素為氮源的細菌。瓊脂糖為瓊脂的純化物,不含含氮化合物,可用于分離以尿素為氮源的細菌。14 .下列說法不正確的是()A.科學(xué)家從 7080C 熱泉中分離得到耐高溫的 TaqDNA 聚合酶B.統(tǒng)計某一稀釋度的 5 個平板的菌落數(shù)依次為 M1、M2、M3、M4、M5,以 M3作為該樣品菌落數(shù)的估計值37C 恒溫箱的目的是檢C.設(shè)置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響,提高實驗結(jié)果的可信度D.同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物數(shù)量最大,種類
9、最多解析:選 B。統(tǒng)計菌落數(shù)應(yīng)注意選擇菌落數(shù)在 30300 的平板進行計數(shù),且至少涂布 3個平板作為重復(fù)組,重復(fù)組的結(jié)果不能相差太多,然后取平均值進行計算。15 .通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長;在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌;在培養(yǎng)基中加入 10%的酚類可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出()A.大腸桿菌 B.霉菌C.放線菌 D.固氮細菌解析:選 A。缺乏氮源的培養(yǎng)基可以選擇出固氮細菌;在培養(yǎng)基中加入青霉素,可以選擇出霉菌;在培養(yǎng)基中加入 10%的酚類可以選擇出放線菌。16 .在農(nóng)田土壤的
10、表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng),可將自生固氮菌與其他細菌分開,對培養(yǎng)基的要求是()加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37c 恒溫箱中培養(yǎng)2830C 溫度下培養(yǎng)A.B.C.D.解析:選 Co 自生固氮菌生長繁殖的適宜溫度是 2830C,能夠?qū)o機氮源合成有機氮,不需要加氮源。細菌對抗生素敏感。固氮菌是異養(yǎng)生物,需要加葡萄糖。17 .能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A.稀釋涂布平板法 B.直接計數(shù)法C.重量法 D.比濁法解析:選 Ao 利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下將細菌個體從固體培養(yǎng)基上分離出來,并可以繁殖形成菌落,可根據(jù)菌落數(shù)測定出
11、樣品活菌數(shù)。18 .在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時,甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基,乙組實驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基,其他成分都相同,在相同條件下操作,培養(yǎng)與觀察,則乙組實驗屬于()A.空白對照 B.標準對照C.相互對照 D.條件對照解析:選 D。乙組和甲組實驗僅是培養(yǎng)條件不同,所以為條件對照。19 .下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,其中錯誤的是()A.用蒸儲水配制牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B,取 104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各 0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置,37C 恒溫培養(yǎng) 2448 小時
12、D.確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在 300 以上的實驗組平板進行計數(shù)解析:選 D。選擇菌落數(shù)在 30300 的一組平板為代表進行計數(shù),所以 D 不對。20 .用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為 106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果,正確的是()A.涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是 230B.涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是 215 和 260,取平均值 238C.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是 21、240 和 250,取平均值 163D.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是 210、240 和 250,取平均值 233解析:選 D。在設(shè)計實驗時,一定要涂布至少 3
13、個平板,作為重復(fù)組,才能增強實驗的說服力與準確性,所以 A、B 不正確。C 項雖涂布了 3 個平板,但是,其中 1 個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠,說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤,因此,不能簡單地將 3 個平板的計數(shù)值用來求平均值。二、非選擇題21 .某些土壤細菌可將尿素分解成 CO2和 NH3,供植物吸收和利用。回答下列問題:(1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物 CO2作為碳源,原因是但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是(答出兩點即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇(填“尿素”“NHNO
14、3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有 KH2PO4和 Na2HPO4,其作用有(答出兩點即可)。解析:(1)土壤中的某些細菌之所以能夠分解尿素,是因為它們能產(chǎn)生月尿酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物,不能利用 CO2來合成有機物,必須利用現(xiàn)成的有機物(如葡萄糖)作為碳源;葡萄糖通過呼吸作用被分解時,能為細胞生命活動提供能量,同時,葡萄糖還可以轉(zhuǎn)化成脂肪、某些氨基酸等物質(zhì),所以進入細菌體內(nèi)的葡萄糖能為其他有機物的合成提供原料。(2)選擇培養(yǎng)基是只允許特定種類的微生物(目的微生物)生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。本實驗的目的菌是可分解
15、尿素的細菌,因此,配制的培養(yǎng)基應(yīng)只允許尿素分解菌生長,NH4NO3可以作為所有細菌的氮源,培養(yǎng)基中如含有 NH4NO3,將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和 Na2HPO4能為細菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽,而 H2PO4/HPO4可以使培養(yǎng)基中 pH 保持相對穩(wěn)定。答案:(1)月尿酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用 CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量,為其他有機物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有 NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中 pH 穩(wěn)定22 .某化工廠的污水
16、池中,含有一種有害的、難于降解的有機化合物合物 A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物 A 的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題:而厘的次,力受祗也口的掂培養(yǎng)基中加入化合物 A 的目的是篩選,這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的,實驗需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是。(3)培養(yǎng)若干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物 A 含量的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數(shù)量。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)若研究“目的菌”的生長規(guī)律,將單個菌落進行液體培養(yǎng),可采
17、用的方法進行計數(shù),以時間為橫坐標,以為縱坐標,繪制生長曲線。(6)實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行處理后,才能倒掉。解析:加入化合物 A 的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,選擇培養(yǎng)目的菌。由于化合物 A 為有機物,且要振蕩,說明目的菌為異養(yǎng)需氧型。“目的菌”生長繁殖過程中要不斷消耗營養(yǎng)物質(zhì),培養(yǎng)若干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物 A 含量減少的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數(shù)量增加。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用劃線的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。若研究“目的菌”的生長規(guī)律,將單個菌落進行液體培養(yǎng),可采用定期取樣的方法進行計數(shù),繪制生長曲線應(yīng)以時間為橫坐標,以細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標。實驗結(jié)束后
18、要對培養(yǎng)基進行滅菌,以免污染環(huán)境。答案:(1)目的菌選擇(2)化合物 A 異養(yǎng)需氧型Ao 研究人員用化漪黑懶擷第島*I國軍昌昌接種固體刀養(yǎng)刀(3)減少增加劃線(5)定期取樣細菌數(shù)目的對數(shù)(6)滅菌23 .土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計了以下實驗,并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示,實驗步驟如圖所示。請分析回答:士通,稿料倍數(shù)為1?二1仃的試 ft看限/靖養(yǎng)MKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO47H2O0.2g葡萄糖10gwr1g瓊脂糖15g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸儲水定容到 1000mL(1)培養(yǎng)基中
19、加入尿素的目的是篩選,這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2) “目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的和,實驗需要振蕩培養(yǎng),原因是。(3)圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時,常采用的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(4)下列材料或用具:培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿,玻棒、試管、錐形瓶和吸管,實驗操作者的雙手。其中需要滅菌的是:;需要消毒的是:。(填序號)解析:培養(yǎng)基中添加尿素為氮源,目的是篩選分解尿素的微生物,這種培養(yǎng)基從功能上來說,屬于選擇培養(yǎng)基;該培養(yǎng)基的氮源為尿素,碳源為葡萄糖。培養(yǎng)過程中震蕩的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣,說明尿素分解菌為需氧型微生物;將菌液接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),一般要采用稀釋涂布
20、平板法或平板劃線法;培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿要進行高壓蒸汽滅菌,玻棒、試管、錐形瓶和吸管要用干熱滅菌,實驗操作者的雙手用酒精消毒。答案:(1)目的菌選擇(2)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(3)涂布平板(劃線)(4)24 .幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下:配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板|X|培養(yǎng)觀察請回答下列問題:(1)在配制培養(yǎng)基時,要加入尿素和酚紅指示劑,這是因為 Hp 含有,它能以尿素作為氮源;若有 Hp,則菌落周圍會出現(xiàn)色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是滅菌。A.高壓蒸汽B.紫外燈照射C.
21、70%酒精浸泡D.過濾(3)步驟 X 表示。在無菌條件下操作時,先將菌液稀釋,然后將菌液到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得菌落。(4)在培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿倒置并放在中。若不倒置培養(yǎng),將導(dǎo)致(5)臨床上用14C 呼氣實驗檢測人體是否感染 Hp,其基本原理是 Hp 能將14C 標記的分解為 NH3和14CO2。解析:(1)幽門螺桿菌(Hp)含有月尿酶,能以尿素為氮源,在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng) Hp,由于尿素經(jīng)月尿酶的降解可產(chǎn)生堿性的 NH3,NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅指示劑變成紅色,故菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解,對尿素溶液進行滅菌最好用 G6 玻璃砂漏斗過濾。(
22、3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是:配制培養(yǎng)基一滅菌、倒平板一接種一培養(yǎng)。為獲得單菌落,接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋,然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中,若不倒置培養(yǎng),則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C 標記的尿素分解為 NH3和14CO2,故臨床上常用14C 呼氣實驗檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。答案:(1)月尿酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落25.臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗,實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲
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