TPPA試劑盒說明書

1、梅毒TPPA試書劑盒說明書1、試驗原理：梅毒抗體檢測是采用抗原抗體凝集反應中的抗原抗體凝集反應。其原理如下：將梅毒（Nichols 株） 的精制菌體成分包被在人載體明膠粒子上。 這種致敏粒子和樣品中的梅毒螺旋體（TP）抗體進行反應發(fā)生凝集，產(chǎn)生粒子凝集反應（TP）抗體，并且可用來測定抗體效價。2、樣本收集和貯存：血清或血漿 1ml,標本應無溶血，無脂血，無微生物污染。不滿足上述要求的標本拒收，標本的采集應使用清潔，無菌的一次性的干燥管。標本用量最少 50ul,七天內檢測的標本應在 2-8C 保存，貯存在-20C 可保存 4W,同時避免反復凍融血清。3、安全防范：3.1 此試劑盒內含人血成分。盡

2、管所有的對照及定點對照都已經(jīng)過試驗驗證并且發(fā)現(xiàn)對于乙型肝炎表面抗原，丙型肝炎抗體，HIV 抗體均為陰性；但仍認為它們具有潛在的感染性。3.2 移液過程禁止用口。3.3 在處理試劑和標本的地方禁止吸煙，飲食。3.4 使用試劑盒和標本時，必須戴一次性手套，穿試驗服。使用后請徹底洗手清潔 03.5 患者樣本及其他潛在感染材料試驗后應放入醫(yī)用垃圾桶內。3. 6 試劑的溶解液，血清稀釋液和陽性對照血清含有疊氮鈉作為防腐劑，疊氮鈉可以和鉛銅反應形成爆炸的金屬疊氮化合物.為防止金屬疊氮化合物的形成，應用大量的水沖洗以免其堆積.4、試劑：4. 1 儲存與穩(wěn)定性：試劑應在 2-10C 保存。凍干試劑必須在復溶后

3、的當天使用，如果保存在 2-10C 最多可使用 7 天。4.2 試劑盒組成：（由富士瑞士歐公司出產(chǎn)）（1）溶解液（液體）8mLX1 瓶用于調制致敏粒子和未致敏粒子。（2）血清稀釋液 29mLX1 瓶用于樣品的稀釋。（3）致敏粒子（冷凍干燥）調制濃度為 1%的 TreponemaPallidum（Nichols 株）致敏明膠粒子。（4）未致敏粒子（冷凍干燥）經(jīng)單寧酸處理調制濃度為 1%的明膠粒子。（5）陽性對照（液體）0.5mLX1 瓶用抗 TreponemaPallidum（Nichols 株）家兔免疫血清調制成抗體效價為 1:320（最終稀釋倍數(shù)）。5、操作步驟：5.1 試劑稀釋液的配制：致

4、敏粒子： 每瓶+加 0.6ML 血清稀釋液溶解， 平衡 30 分鐘后使用。 未致敏作粒子： 每瓶+加 0.6ML血清稀釋液溶解，平衡 30 分鐘后使用。填寫免疫記錄表NJKM-SOP0301?18?015.2 血清處理干燥管離心，充分將血清與紅細胞分離5.3 實驗過程：孔號123456789101112血清稀釋液 (ul)1002525252525252525252525標本（ul）252525252525252525252525 棄去 25血清稀釋度1/51/201/801/3201/12801/51201/101/401/1601/6401/25601/10240未感作粒子25感作粒子25

5、2525252525252525最終稀釋度1/801/3201/12801/51201/204801/401/1601/6401/25601/10240震蕩混勻，加蓋, 室溫孵育 2 小時。每批試驗，同時做陽性對照操作同上表。6、正常參考范圍:陰性（與年齡，性別，種族無關）7、結果解釋：判定a.反應物集中于孔底，成紐扣狀聚集，邊緣光滑的圓形。一b.顆粒在管底形成一個小環(huán)狀，呈現(xiàn)出外周均勻且光滑的圓形。c.粒子環(huán)明顯變大，其外周邊緣不均勻且雜亂地凝集在周圍。+d.產(chǎn)生均一的凝集，顆粒鋪滿整個孔底，邊緣成齒狀不齊，整體上呈膜狀延展。+7.1 陽性：標本與非致敏顆粒（最終稀釋為 1:40）反應，顯示

6、為（-）;但與致敏顆粒（最終稀釋為 1:80）反應，顯示為（+）或以上，最終抗體稀釋度為（+）的模式。7. 2 陰性：無論未致敏粒子呈現(xiàn)何種反應，只要標本與致敏顆粒（最終稀釋度為 1:80）反應圖象顯示為（-）,最終判定為陰性。8. 3 可疑：標本與未致敏顆粒（最終稀釋度為 1:40）反應，顯示為（-）;標本與致敏顆粒（最終稀釋度為 1:80）反應，顯示為（土）。7. 4 把結果記錄于表格 NJKM-SOP0301?18?1 中。8、質量控制：8. 1 只有全部使用本試劑盒內的試劑才能保證檢測效果，因為所有試劑都是有關聯(lián)的，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。試劑各組成，必須使用試劑盒配備的，不要使用生

7、產(chǎn)批號不同的試劑混合使用。8. 2 未開封的情況下，如果保存于 2-8C,試劑盒內所有試劑均在標定的有效期內有效。8. 3 每一種試劑都是經(jīng)過校準以保證最佳的檢測結果。 這些試劑如果經(jīng)過稀釋或改動都會導致檢測的敏感度的降低。8. 4 開始試驗前，將所有試劑置于室溫。8. 5 試驗結果的可重復性依賴于充分混合試劑。 使用前振蕩裝有對照血清的小管和所有稀釋過的溶液。9. 6 為避免干擾結果，高血脂的，溶血的，或污染的血清不要用于檢測，樣品不應加熱滅活。9、方法學特性：10.1 敏感性：11.2 特異性：12.3 精密度：10、臨床意義：TPPA 是梅毒血清學檢查的梅毒特異性抗體反應，在判定陽性的情況下，需結合其它的檢查結果以及臨床癥狀來進行綜合判斷。在梅毒 TP 感染初期，有可能不產(chǎn)生抗體，或雖然產(chǎn)生抗