高效液相色譜法檢測(cè)西瓜中四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留.總結(jié)

1、目錄摘要2Abstract2引言31 有機(jī)磷農(nóng)藥及其檢測(cè)方法31.1有機(jī)磷農(nóng)藥的基本概況31.2有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法51.3 四種有機(jī)磷農(nóng)藥簡(jiǎn)介72 樣品采集與預(yù)處理92.1實(shí)驗(yàn)儀器和材料92.2樣品的來(lái)源與采集102.3樣品預(yù)處理103 四種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜分離113.1流動(dòng)相比例、流動(dòng)相pH 和流速的選擇113.2四種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖113.3方法學(xué)考察134 西瓜樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定與分析154.1色譜條件164.2測(cè)試樣品164.3計(jì)算四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法174.4兩種西瓜樣品的檢測(cè)結(jié)果分析175 結(jié)論17致謝18參考文獻(xiàn)180高效液相色譜法檢測(cè)西瓜中四

2、種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留摘 要 ：本文結(jié)合高效液相色譜法對(duì)青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)發(fā)中銷(xiāo)售的西瓜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)，并結(jié)合有機(jī)磷農(nóng)藥的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及性質(zhì)建立了一種在高效液相色譜法的基礎(chǔ)上能夠檢測(cè)四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。關(guān)鍵詞： 西瓜；檢測(cè)；農(nóng)藥Checking out the Four Kinds Of Organic PhosphorusPesticide Residues In Watermelon By HPLCAbstract ： In this paper ， combined with HPLC method ， researched the watermelon of RT-ma

3、rt supermarket in Chengyang District of Qingdao City. And it established a method combined with the structure characteristics and properties of organophosphorus pesticide to check out four kinds of pesticides.Key words ： Watermelon ;Detection; Pesticide引言 青島市最近發(fā)生了毒西瓜事件，以 青島市膠州市和即墨市為主要城市，共有 12 個(gè)人吃了西瓜

4、后，出現(xiàn)頭暈、嘔吐等癥狀，經(jīng)有關(guān)部門(mén)鑒定該種西瓜名叫“黑美人”，其中含有農(nóng)藥殘留涕滅威，涕滅威是一種有機(jī)磷農(nóng)藥。如果食用含有涕滅威超標(biāo)的食物會(huì)使人產(chǎn)生惡心等癥狀，重者會(huì)使人昏迷，甚至死亡。盡管城陽(yáng)地區(qū)還沒(méi)發(fā)生西瓜中有機(jī)磷農(nóng)藥超標(biāo)的事件，但已經(jīng)引起該地區(qū)的人恐慌了，所以研究出一種能夠檢測(cè)西瓜中有機(jī)磷農(nóng)藥的現(xiàn)實(shí)可行的方法是十分重要的。這是本論文的出發(fā)點(diǎn) ，所以 文對(duì)青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)發(fā)所售西瓜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析，結(jié)合 HPLC的原理研究出了能夠檢測(cè)西瓜四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。另外，現(xiàn)在基本上沒(méi)有對(duì)青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)發(fā)所售西瓜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的研究。所以在有機(jī)磷殘留方面，本論文對(duì)青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)

5、發(fā)所售西瓜的質(zhì)量評(píng)價(jià)有很重要的作用。在我國(guó)， 檢測(cè)和分析食品中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法一般都采用氣相色譜法。當(dāng)用氣相色譜法檢測(cè)物質(zhì)的含量時(shí)，盡管在靈敏度方面要優(yōu)于液相色譜1法，但是檢測(cè)部分對(duì)熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥時(shí)，氣相色譜法就遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如液相色譜法容易操作。因?yàn)橐合嗌V法具有對(duì)那些熱不穩(wěn)定性物質(zhì)有較好的檢測(cè)效果，同時(shí)還具有不會(huì)浪費(fèi)過(guò)多實(shí)驗(yàn)用品和所用時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)。1 有機(jī)磷農(nóng)藥及其檢測(cè)方法1.1有機(jī)磷農(nóng)藥的基本概況有機(jī)磷農(nóng)藥的定義和分類(lèi)有機(jī)磷農(nóng)藥是含磷有機(jī)化合物，英文簡(jiǎn)寫(xiě)為 OPPs，大多是磷酸酯或酰胺類(lèi)的化合物，對(duì)動(dòng)物和人體具有危害作用，在自然條件下可以自行分解?，F(xiàn)在在我國(guó)所有賣(mài)農(nóng)藥的地方，有機(jī)磷農(nóng)藥品種

6、有很多，大約占我國(guó)所有殺蟲(chóng)劑品種總量的百分之三十七，但產(chǎn)量卻高的讓人難以想象，大約占農(nóng)藥的百分之七十四。有機(jī)磷農(nóng)藥可以用在農(nóng)業(yè)上，例如消滅害蟲(chóng)，保護(hù)莊稼，但殘留在莊稼上的農(nóng)藥會(huì)在食物鏈中的富集，人們吃了含有農(nóng)藥殘留的食物便會(huì)中毒，這使得人們的身體健康受到影響。有機(jī)磷農(nóng)藥的種類(lèi)非常多，相對(duì)應(yīng)的性能也就很多了。比如化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定、殺蟲(chóng)效率高、易氧化、遇熱易分解等等。有機(jī)磷農(nóng)藥的基本性質(zhì)及其殘留危害有機(jī)磷農(nóng)藥純品的顏色大多是白色，呈晶體狀態(tài)，有機(jī)磷農(nóng)藥在工業(yè)上也會(huì)有很重要的用途，但與農(nóng)業(yè)上用的稍有不同，一般為黃色油狀液體，有跟大蒜或韭菜相似的臭味。密度大多比 1 要大，溶于有機(jī)溶劑 , 在水中基本上

7、沒(méi)有溶解性，具有較高的沸點(diǎn)，在自然條件下能保存較長(zhǎng)時(shí)間，但在堿性條件下比較容易分解。在人和動(dòng)物體內(nèi)容易蓄積，從而使人和動(dòng)物中毒。農(nóng)藥殘留（ pesticide residues ）指的是農(nóng)藥在被人們使用之后在環(huán)境中、生物體和農(nóng)副產(chǎn)品中殘存的降解物農(nóng)藥原體、有毒代謝物、農(nóng)藥原體和雜質(zhì)的總稱(chēng)。2現(xiàn)在人們大多都使用非持久性的有機(jī)磷農(nóng)藥，這種有機(jī)磷農(nóng)藥有幾周至幾個(gè)月的降解半衰期。有相關(guān)數(shù)據(jù)說(shuō)明在某種生態(tài)環(huán)境下有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留期可以很長(zhǎng)時(shí)間，殘留在在植物體內(nèi)的有機(jī)磷農(nóng)藥被人和動(dòng)物食用后，會(huì)在其體內(nèi)發(fā)生蓄積作用。人們?nèi)绻诤荛L(zhǎng)一段時(shí)期內(nèi)食用農(nóng)殘超標(biāo)的食物，不僅會(huì)危及到自身的身體健康，而且有的甚至?xí)z傳給影

8、響下一代。1.2有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法現(xiàn)在，有百分之七十九的農(nóng)藥殘留是用氣相色譜法 ( 英文簡(jiǎn)寫(xiě)為 GC)來(lái)檢測(cè)和分析的，現(xiàn)在許多國(guó)家都會(huì)用氣相色譜法檢測(cè)和分析食品中的農(nóng)藥殘留。當(dāng)用氣相色譜法檢測(cè)食品中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時(shí)，具有不會(huì)浪費(fèi)過(guò)多實(shí)驗(yàn)用品和所用時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，上文中還提到盡管在靈敏度和精確度方面要優(yōu)于液相色譜法，但是檢測(cè)部分對(duì)熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥時(shí)，氣相色譜法就遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如液相色譜法容易操作，另外這是在有熟悉和掌握有關(guān)氣相色譜法的實(shí)驗(yàn)儀器的人來(lái)操作的前提下才能保證其較高的精確度，精密度高的儀器會(huì)比較貴，而水果蔬菜的保存期又相對(duì)較短，這使得在檢測(cè)農(nóng)藥殘留時(shí)，人們一般不會(huì)選擇氣相色譜法，所以說(shuō)氣相色

9、譜法一般在實(shí)驗(yàn)室才會(huì)用得到。色譜法 (Chromatography) 是根據(jù)分析物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的目的，由于電信號(hào)可以在儀器上顯示出來(lái)，所以色譜儀是一種采用電信號(hào)來(lái)代替所測(cè)物質(zhì)的濃度，電信號(hào)包括電壓和電流等，最后把所測(cè)得的電信號(hào)接到記錄儀上記錄下來(lái)的分離分析方法?，F(xiàn)在，氣相色譜法、薄層色譜法、高效液相色譜法及串聯(lián)色譜技術(shù)是檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的主要和首選方法。高效液相色譜法（ HPLC），又稱(chēng)高壓液相色譜，它來(lái)源于色譜法，與色譜法有著密不可分的聯(lián)系，高效液相色譜法作的流動(dòng)相為液體，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入到

10、裝有固定相的色譜柱內(nèi)，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析，是一種非常重要的分離分析技術(shù)。3另外 HPLC的色譜柱具有重復(fù)使用多次而幾乎不影響分離效果的特點(diǎn)，經(jīng)高效液相色譜分析后的樣品比較容易回收，同時(shí)對(duì)樣品的破壞壞程度較小。 HPLC的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭和檢測(cè)池等）中，如果流動(dòng)相流型發(fā)生變化，從而導(dǎo)致柱效率降低，所以在用高效液相色譜法分析物質(zhì)時(shí)，一定要盡最大可能保證流動(dòng)相的流型。1.3四種有機(jī)磷農(nóng)藥簡(jiǎn)介馬拉硫磷馬拉硫磷又稱(chēng)馬拉松，英文名稱(chēng)為 malathion ，實(shí)驗(yàn)式為 C10H19O6PS2，相對(duì)分

11、子質(zhì)量為 330.358 ， 化學(xué)名稱(chēng)為 O，O-二甲基 -S-1 ，2- 二 ( 乙氧基羰基 ) 乙基硫代磷酸酯，是一種高效殺蟲(chóng)劑。馬拉硫磷的熔點(diǎn)為 2.9-3.7 攝氏度，沸點(diǎn)為 156-159 攝氏度，在 15 攝氏度時(shí)，每升水可以溶解 145 mg。在 PH值高于 7.0 時(shí)就會(huì)失去功效，原因是發(fā)生了水解反應(yīng)，在光照條件下相對(duì)穩(wěn)定，但不耐高溫，溫度過(guò)高會(huì)發(fā)生分解，甚至燃燒所以在運(yùn)輸過(guò)程中要注意控制溫度。當(dāng)人體發(fā)生馬拉硫磷中毒時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出頭痛、惡心和多汗等癥狀，如果誤食的話(huà)應(yīng)立即送往醫(yī)院，首先對(duì)病人進(jìn)行催吐。如不慎進(jìn)入到眼睛里，用溫水沖洗即可。敵敵畏敵敵畏又稱(chēng)二氯松，英文名稱(chēng)為 dich

12、lorvos ，實(shí)驗(yàn)式為 C4H7C12O4P，相對(duì)分子質(zhì)量為 221.98 ，化學(xué)名稱(chēng)為 O，O-二甲基 -O-(2 ，2- 二氯乙烯基 ) 磷酸酯，是一種廣泛的高效殺蟲(chóng)劑。敵敵畏的熔點(diǎn)為 -60 攝氏度，沸點(diǎn)為74 攝氏度，在室溫下，每升水可以溶解10g 左右，能與大多數(shù)有機(jī)溶劑混溶。在堿性條件下水解很快，在光照條件下相對(duì)穩(wěn)定，但不耐高溫，溫度過(guò)高會(huì)發(fā)生分解，甚至燃燒所以在運(yùn)輸過(guò)程中要注意控制溫度。4當(dāng)人體發(fā)生敵敵畏中毒時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出頭痛、腹瀉和流口水等癥狀，嚴(yán)重者會(huì)動(dòng)作不自主、瞳孔縮小、脈搏和呼吸減慢，甚至停止。人如果誤食，應(yīng)立即送往醫(yī)院，首先對(duì)病人進(jìn)行催吐，如果不進(jìn)行救治，可在數(shù)十分鐘內(nèi)

13、死亡 。如果皮膚接觸到敵敵畏，應(yīng)最快速用肥皂水反復(fù)沖洗。樂(lè)果樂(lè)果又稱(chēng)樂(lè)戈，英文名稱(chēng)為 dimethoate 實(shí)驗(yàn)式為 C5H12NO3PS2，相對(duì)分子質(zhì)量為 229.12 ，化學(xué)名稱(chēng)為 O，O-二甲基 S-(N- 甲基氨基甲酰甲基 ) 二硫代磷酸酯，是一類(lèi)光譜殺蟲(chóng)劑。樂(lè)果的熔點(diǎn)為 52-52.5 攝氏度，沸點(diǎn)為 86 攝氏度，微溶于水，溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑。在堿性條件下水解很快，在光照條件下相對(duì)穩(wěn)定，但不耐高溫，溫度過(guò)高會(huì)發(fā)生分解，甚至燃燒，與強(qiáng)氧接觸會(huì)發(fā)生反應(yīng)。當(dāng)人體發(fā)生樂(lè)果中毒時(shí)，會(huì)出現(xiàn)中間期肌無(wú)力綜合癥的癥狀，嚴(yán)重者會(huì)呼吸困難，甚至死亡。人如果口服中毒，應(yīng)立即送往醫(yī)院，首先對(duì)病人用生理鹽水

14、反復(fù)洗胃 。如果皮膚接觸到樂(lè)果，盡快用流動(dòng)著的肥皂水及清水反復(fù)沖洗。如不慎入眼，提起眼瞼，用流動(dòng)清水或生理鹽水沖洗，并及時(shí)趕往醫(yī)院就醫(yī)。對(duì)硫磷對(duì)硫磷又稱(chēng)乙基對(duì)硫磷，英文名稱(chēng)為 Parathion ，實(shí)驗(yàn)式為 C10H14NO5PS，相對(duì)分子質(zhì)量為 291.27 ，化學(xué)名稱(chēng)為 O，O-二乙基 -O-(4- 硝基苯基 ) 硫代磷酸酯，是一種高效、廣譜的有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑和殺螨劑。對(duì)硫磷的熔點(diǎn)為 6.1 攝氏度，沸點(diǎn)為 157-162 攝氏度（在壓強(qiáng)為 80Pa 的條件下），相對(duì)密度為 1.2656 ，難溶于水，溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑。在堿性條件下水解很快，在光照條件下相對(duì)穩(wěn)定，但不耐高溫，溫度過(guò)高會(huì)發(fā)生分解

15、，甚至燃燒，與強(qiáng)氧接觸會(huì)發(fā)生反應(yīng)。當(dāng)人體發(fā)生對(duì)硫磷中毒時(shí)，會(huì)出現(xiàn)嘔吐、頭痛和全身軟弱無(wú)力等癥狀，嚴(yán)重者會(huì)呼吸困難，甚至死亡。人如果口服中毒，應(yīng)立即送往醫(yī)院，首先對(duì)病人用5生理鹽水反復(fù)洗胃。如果皮膚接觸到對(duì)硫磷，盡快用流動(dòng)著的肥皂水及清水反復(fù)沖。2 樣品采集及預(yù)處理2.1實(shí)驗(yàn)儀器與材料實(shí)驗(yàn)儀器配有紫外檢測(cè)器的HPLC(1100型) ，孔徑為 150×的色譜柱（ Zorbax elipse XDB C18 ），濾膜的厚度為 0.45 微米，高速組織搗碎機(jī)，氮吹濃縮儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。實(shí)驗(yàn)材料和試劑甲醇，超純水，二氯甲烷，無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉；馬拉硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品、敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)樣品、對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品、樂(lè)

16、果標(biāo)準(zhǔn)樣品。采用每毫升 100 微克作為四種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)濃度。配制有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液步驟：先用微量進(jìn)樣器量取 1mL四種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)品，然后用甲醇分別定容為每毫升 10 微克的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，并放在冰箱里保存?zhèn)溆谩?(1) 從冰箱里取出儲(chǔ)備液，用微量進(jìn)樣器量取每毫升10 微克的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 毫升于 100 毫升容量瓶中，然后用甲醇定容為每毫升0.1 微克的混合標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液備用；(2)用微量進(jìn)樣器量取每毫升10 微克的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 毫升于 20 毫升容量瓶中，用甲醇定容為每毫升 0.5 微克的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液備用；(3)用微量進(jìn)樣器量取每毫升10微克標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液 1 毫升于 10 毫升容量瓶中，

17、然后用甲醇定容為每毫升 1.0 微克的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液備用； (4) 用微量進(jìn)樣器量取每毫升 10 微克的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液 1 毫升于 10 毫升容量瓶中，然后用微量進(jìn)樣器量取 1 毫升甲醇加到容量瓶中定容為每毫升 5.0 微克的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液備用； (5) 用微量進(jìn)樣器量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 1 毫升制成每毫升 10.0 微克的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)液備用。2.2樣品的來(lái)源與采集6樣品來(lái)源樣品取自青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)發(fā)中銷(xiāo)售的京欣西瓜和浙江平湖西瓜。樣品的采集從青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)發(fā)中挑選個(gè)頭大、品質(zhì)好的兩種西瓜樣品各五個(gè)，帶回實(shí)驗(yàn)室。2.3樣品的預(yù)處理用清水對(duì)采集的兩種西瓜樣品進(jìn)行清洗，然后用去離子水清洗，用紗布輕輕擦干。取一個(gè)京欣西

18、瓜樣本其中可以食用的部分用高速組織搗碎機(jī)搗碎混勻。取 1 升勻漿于分液漏斗中進(jìn)行萃取，剩下的勻漿放入-20 攝氏度冰箱長(zhǎng)期保存?zhèn)溆?，將溶液的PH值調(diào)節(jié)為中性，加入約40 克氯化鈉，待氯化鈉完全溶解，然后加入二氯甲烷50 毫升于水樣中，振蕩萃取5 分鐘，靜置分層后，收集有機(jī)相，共萃取 3次，合并 3 次萃取液，用無(wú)水硫酸鈉干燥。將干燥后的萃取液轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至5 毫升，然后在氮吹濃縮儀上繼續(xù)濃縮至1 毫升。浙江平湖西瓜樣本的處理過(guò)程如京欣西瓜。3 四種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜分離3.1流動(dòng)相比例、流動(dòng)相pH 和流速的選擇實(shí)驗(yàn)選擇甲醇 : 水= 68.5:31.5（體積比），選擇中性或微酸

19、性條件下來(lái)對(duì)流動(dòng)相 pH 進(jìn)行選擇，選擇pH 為 6作為流動(dòng)相的最優(yōu)pH;一般的實(shí)驗(yàn)流速分為每分鐘 0.6 毫升，每分鐘 0.8 毫升和每分鐘 1.0 毫升，流速對(duì)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響可以忽略不計(jì)，所以用每分鐘1.0 毫升的流速來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)，在此條件下可以對(duì)四種農(nóng)藥殘留分離和分析。3.2四種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖在色譜條件下：紫外檢測(cè)器，流速為每分鐘1 毫升，流動(dòng)相 pH 為 6，甲醇 :水 = 68.5:31.5（體積比），進(jìn)樣量均為 20L， 對(duì)不同的濃度下四種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品做色譜圖。7圖 3.2-11樂(lè)果、 2敵敵畏、 3馬拉硫磷、 4對(duì)硫磷圖 3.2-21樂(lè)果、 2敵敵畏、 3馬拉硫磷

20、、 4對(duì)硫磷圖 3.2-381樂(lè)果、 2敵敵畏、 3馬拉硫磷、 4對(duì)硫磷圖 3.2-41樂(lè)果、 2敵敵畏、 3馬拉硫磷、 4對(duì)硫磷圖 3.2-591樂(lè)果、 2敵敵畏、 3馬拉硫磷、 4對(duì)硫磷3.3方法學(xué)考察工作曲線(xiàn)從上圖的分析結(jié)果中可以得出，四種標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)磷農(nóng)藥的的峰面積與質(zhì)量濃度的有很好的線(xiàn)性關(guān)系，可以滿(mǎn)足定量分析的要求。由高效液相色譜儀得出的色譜圖，可以觀(guān)察到四種農(nóng)藥的峰面積，做出峰面積與有機(jī)磷農(nóng)藥在不同濃度下時(shí)的線(xiàn)性回歸，如下圖根據(jù)美國(guó) EPA，方法檢出限為MDL=S× t(n ，1-a) ，若對(duì)本實(shí)驗(yàn)做七次重復(fù)試驗(yàn)，置信水平就會(huì)達(dá)到百分之99，查 t值為 3. 14 。10T

21、表示自由度為 n-1 時(shí)的 Student s t值； 1-a 表示置信水平； S 表示 n 次加標(biāo)測(cè)定濃度的標(biāo)準(zhǔn)偏差；N表示重復(fù)測(cè)定的加標(biāo)樣品數(shù)。四種農(nóng)藥的線(xiàn)性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、最低檢出限如下表所示。表四種有機(jī)磷農(nóng)藥組分的線(xiàn)性關(guān)系和最低檢出限線(xiàn)性方程最低檢出限 ( g/L)有機(jī)磷農(nóng)藥相關(guān)系數(shù)y = 82.90x + 45.781.0對(duì)硫磷0.999y = 117.48x + 88.401.5馬拉硫磷0.993y = 208.89x + 445.681.1樂(lè)果0.999y = 177.79x + 678.811.1敵敵畏0.9993.3.2 計(jì)算西瓜樣品回收率和精密度精密度用以表示測(cè)量方法的

22、重現(xiàn)性，一般測(cè)定5 到 10 次，用來(lái)說(shuō)明所測(cè)的數(shù)據(jù)之間相互的接近程度。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）指的是：標(biāo)準(zhǔn)偏差與計(jì)算結(jié)果算術(shù)平均值的比值，即：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）=標(biāo)準(zhǔn)偏差（ SD）/ 計(jì)算結(jié)果的算術(shù)平均值（ X）× 100%。分析測(cè)試結(jié)果的精密度一般用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)表示。用微量進(jìn)樣器量取濃度為每毫升 9 微克的超純水 1 毫升，加入濃度為每毫升 10 微克的標(biāo)準(zhǔn)濃度混合液中，按照 3.2 的實(shí)驗(yàn)方法來(lái)分析，進(jìn)行 7 次重復(fù)試驗(yàn)后得下表。表樣品回收率（ n=7）有機(jī)磷農(nóng)藥加標(biāo)量 / 平均測(cè)定量平均回收率g/m L/ g/m L/%對(duì)硫磷1.00.9191馬拉硫磷1.00.8383敵

23、敵畏1.00.9596樂(lè)果1.00.929211表四種有機(jī)磷農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) （n=7）有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)偏差（ SD）算術(shù)平均值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（ RSD）對(duì)硫磷0.0490.915.4%馬拉硫磷0.0470.835.7%敵敵畏0.0340.953.6%樂(lè)果0.0350.923.8%通過(guò)上表可以得知：樣品的平均回收率在百分之八十三至百分之九十五之間，說(shuō)明用高效液相色譜法對(duì)樣品進(jìn)行試驗(yàn)的回收率較高；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在百分之三點(diǎn)六至百分之五點(diǎn)七之間, 說(shuō)明用高效液相色譜法對(duì)樣品進(jìn)行試驗(yàn)的精密度也很高。4 西瓜樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定與分析4.1色譜條件檢測(cè)器使用紫外檢測(cè)器；流動(dòng)相為甲醇和超純水

24、，使用甲醇：超純水=67:33作為體積比；流速為每分鐘1 毫升，進(jìn)樣的體積為20L；流動(dòng)相的 pH 為 7。4.2測(cè)試樣品對(duì)青島市城陽(yáng)區(qū)大潤(rùn)發(fā)所售西瓜進(jìn)行有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)與分析，檢測(cè)結(jié)果如下圖。12京欣西瓜液相色譜圖圖 4.2-2浙江平湖西瓜液相色譜圖4.3計(jì)算四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法測(cè)定西瓜樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的濃度，用c2/c1 =a2/a1進(jìn)行計(jì)算：a1 表示標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖上的峰面積；a2 表示被測(cè)定樣品的色譜圖上的峰面積；c1 表示標(biāo)準(zhǔn)樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥濃度，單位為g/m L ；c2 表示被測(cè)定樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥濃度，單位為g/m L 。134.4兩種西瓜樣品的檢測(cè)結(jié)果分析兩種西瓜樣

25、品檢測(cè)結(jié)果匯總?cè)缦聵悠酚袡C(jī)磷農(nóng)藥濃度（ ug/L ）樂(lè)果敵敵畏馬拉硫磷對(duì)硫磷京欣西瓜34.222.500浙江平湖西瓜24.838.200國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于蔬菜和水果農(nóng)藥殘留最高限量規(guī)定中樂(lè)果 1.00mg kg、敵敵畏0.20mg kg、對(duì)硫磷 0.00 mg kg、馬拉硫磷 0.00 mg kg。所以?xún)煞N西瓜四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留都符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。5 結(jié)論使用高效液相色譜法同時(shí)檢測(cè)西瓜中四種有機(jī)磷農(nóng)藥的方法是本研究首次采用的。四種有機(jī)磷農(nóng)藥可以同時(shí)被 HPLC分離和制備， pH 為 7 時(shí)的流動(dòng)相、每分鐘流動(dòng)相的進(jìn)入量為 1.0 毫升以及 20 微升作為進(jìn)樣量時(shí)，高效液相色譜法能夠分離對(duì)硫磷、敵敵畏、馬

26、拉硫磷、樂(lè)果這四種有機(jī)磷農(nóng)藥。在該條件下，每升 1.5 微克、每升 1.1 微克、 每升 1.0 微克、每升 1.1 微克分別為馬拉硫磷、樂(lè)果、對(duì)硫磷、敵敵畏的最小檢出限；回收率在百分之八十四至百分之九十五之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為百分之三點(diǎn)七至百分之五點(diǎn)六3. ，具有較高的精密度。另外， HPLC測(cè)定西瓜中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，主要有以下四點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)： (1) 相對(duì)于流動(dòng)相來(lái)說(shuō)，以甲醇與水的比為 67:33 （體積比）為流動(dòng)相，比用甲醇與水的比為 7030（體積比）做流動(dòng)相，有很樂(lè)觀(guān)的分離效果，并且在操作上也更容易。 (2) 相對(duì)于流動(dòng)相的 pH 來(lái)說(shuō)，在 pH 為 6 時(shí)的流動(dòng)相下，有機(jī)磷農(nóng)藥中的的對(duì)硫

27、磷、馬拉硫磷、敵敵畏、樂(lè)果這四種成分能夠分離出來(lái)，出來(lái)的峰的對(duì)稱(chēng)性和峰的個(gè)數(shù)具有良好的效果。 (3) 對(duì)于精密度來(lái)說(shuō)，此次實(shí)驗(yàn)中，四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在百分之三點(diǎn)七至百分之五點(diǎn)六之間，所以在精密度上也很高。 (4) 相對(duì)于檢出限來(lái)說(shuō)， 樂(lè)果和對(duì)硫磷的檢出限每升 1.0 微14克和每升 1.1 微克分別為對(duì)硫磷和樂(lè)果的檢出限，檢出限降低之后，檢測(cè)的靈敏度自然就會(huì)得到提高。經(jīng)過(guò)上述實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明在檢測(cè)西瓜中敵敵畏、對(duì)硫磷、樂(lè)果和馬拉硫磷這四種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時(shí)，此種方具有比較樂(lè)觀(guān)的法分離效果，通過(guò)四種農(nóng)藥殘留的檢出限來(lái)看，該方法也具有較高的靈敏度。致謝現(xiàn)在，本論文基本完成，首先我要深深地感謝

28、我的導(dǎo)師孫萍老師！為了我能順利完成此篇論文，孫老師花費(fèi)了很多寶貴的時(shí)間，給予了我頗多的耐心，精心指導(dǎo)我完成了本篇論文。在此，我十分感謝孫老師對(duì)我的關(guān)懷和幫助，感謝導(dǎo)師兩年來(lái)對(duì)我的培育之恩。本文的研究，大多數(shù)工作是在海潤(rùn)農(nóng)大第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和青島農(nóng)業(yè)大學(xué)圖書(shū)館完成的，期間多虧了孫萍等老師和好友陳浩東同學(xué)、馬圣聽(tīng)同學(xué)的無(wú)私的付出和悉心關(guān)懷，我對(duì)他們表示深深地感謝。另外，我的父母在我大學(xué)期間給于我無(wú)私的關(guān)懷與照料，無(wú)微不至的支持和幫助，這樣才使我的學(xué)業(yè)能夠順利完成。還要感謝在本論文評(píng)議、評(píng)閱過(guò)程中提出寶貴建議的老師、專(zhuān)家，在此獻(xiàn)上我真誠(chéng)的敬意。參考文獻(xiàn)：1 楊克欽 . 俞宏 . 劉彥 . 何為華 .

29、張勁強(qiáng) . 李君 國(guó)內(nèi)外西瓜甜瓜農(nóng)藥殘留最高限量及其檢測(cè)技術(shù) 期刊論文 - 中國(guó)西瓜甜瓜 2002(2)2 林逢春 農(nóng)藥污染與生態(tài)環(huán)境 20003黃少文 ; 劉玉 ; 吳惠敏 GB 18406.2-2001. 農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無(wú)公害水果安全要求20014趙金輝；趙曉莉 農(nóng)藥污染對(duì)人體健康的危害及防治2003 （ 02）5 吳文君 , 劉惠霞 , 姬志勤等 . 農(nóng)藥學(xué)原理 M. 北京 : 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社 ,2000:17-18.6 天津市職業(yè)病防治院編 . 有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的防治 M. 北京 : 石油化學(xué)工業(yè)出社，1978:2-3.157中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室農(nóng)藥殘留國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)匯編19998 高曉輝

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