


下載本文檔
版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,enzyme linked immunosorbent assay)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專(zhuān)一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法?;驹恚菏箍乖蚩贵w結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的
2、底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無(wú)定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。雙抗夾心法夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般的操作步驟為:將具有專(zhuān)一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體;加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié);洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專(zhuān)一的一次抗體,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié);洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結(jié);洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。間接法間接法常
3、用于檢測(cè)抗體,一般的操作步驟為:1 / 3將已知的抗原固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余的抗原。加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗原進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)。洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié)。洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤(pán)中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。競(jìng)爭(zhēng)法競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:將具有專(zhuān)一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體;加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié);加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái)。洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。注:當(dāng)需要偵
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2025屆上海市西南位育中學(xué)化學(xué)高一下期末監(jiān)測(cè)試題含解析
- 地?zé)崮荛_(kāi)發(fā)突破-洞察及研究
- 植物營(yíng)養(yǎng)素對(duì)森林病蟲(chóng)害的調(diào)控作用-洞察闡釋
- 企業(yè)級(jí)AI模型在ERP中的應(yīng)用-預(yù)測(cè)與決策支持-洞察闡釋
- 裝飾品綠色設(shè)計(jì)研究-洞察闡釋
- 內(nèi)蒙古赤峰市第二中學(xué)2025屆高一化學(xué)第二學(xué)期期末學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè)模擬試題含解析
- 后現(xiàn)代敘事中的象征主義與敘事功能-洞察闡釋
- 邊緣感知算法的智能數(shù)據(jù)處理-洞察闡釋
- 創(chuàng)新生態(tài)系統(tǒng)對(duì)組織變革的影響機(jī)制-洞察闡釋
- 質(zhì)量檢驗(yàn)效率提升-洞察闡釋
- 《中學(xué)心理危機(jī)干預(yù)體系構(gòu)建》
- 智慧農(nóng)業(yè)項(xiàng)目建設(shè)方案
- 人工智能模擬題
- 2024年下半年江蘇南通啟東市部分事業(yè)單位選調(diào)工作人員14人易考易錯(cuò)模擬試題(共500題)試卷后附參考答案
- 教師資格考試小學(xué)美術(shù)面試試題及答案指導(dǎo)(2025年)
- 住家保姆合同協(xié)議書(shū)模板
- 《秦腔》課件統(tǒng)編版高中語(yǔ)文選擇性必修下冊(cè)
- AI如何賦能藝術(shù)教育-筆記
- 第三講加快發(fā)展新質(zhì)生產(chǎn)力-2024年形勢(shì)與政策
- DB11T 485-2020 集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生管理規(guī)范
- 便秘的耳穴貼壓技術(shù)護(hù)理團(tuán)標(biāo)解讀
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論