臨床診療實驗室檢驗

1、臨床診療實驗室檢驗第一頁，共126頁。血樣的采集及抗凝處理血沉、血紅蛋白含量的測定血沉、血紅蛋白含量的測定紅細胞壓積測定紅細胞壓積測定 紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù) 白細胞計數(shù)白細胞計數(shù) 白細胞分類計數(shù)白細胞分類計數(shù) 血小板計數(shù)血小板計數(shù) 尿液、糞便的檢查尿液、糞便的檢查 第二頁，共126頁。實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?:讓同學(xué)們熟練掌握一些常用動讓同學(xué)們熟練掌握一些常用動物的采血方法物的采血方法 實驗器材實驗器材 :采血針、注射器、消毒器皿、采血針、注射器、消毒器皿、剪毛剪、酒精棉滅菌干棉球、小試管、標剪毛剪、酒精棉滅菌干棉球、小試管、標簽紙、試管架等簽紙、試管架等 第三頁，共126頁。實實 驗驗 藥藥 品品

2、 ：3.8%枸櫞酸鈉、草酸鹽合劑、肝素等等；生理鹽水 實實 驗驗 動動 物物 ： 豬、羊、兔、雞等 第四頁，共126頁。 末稍采血末稍采血心臟采血心臟采血靜脈采血可根據(jù)動物的種類可根據(jù)動物的種類和用血量的多少來和用血量的多少來選擇適當(dāng)?shù)牟裳竭x擇適當(dāng)?shù)牟裳椒?，主要的采血方法，主要的采血方法有：法有：第五頁，?26頁。 末稍（毛細血管）采血：用血量比較少，比如馬牛在耳尖部；豬、羊在耳邊緣；仔豬和小動物還可剪去尾尖部采血。 此操作方法比較簡單。第六頁，共126頁。 適用于一些小動物和家禽用血量大時可采用適用于一些小動物和家禽用血量大時可采用此方法。此方法。 操作方法：操作方法：雞的采血方法：1

3、、常用方法，右、常用方法，右側(cè)臥保定，用手在左側(cè)觸摸心搏動最明顯的側(cè)臥保定，用手在左側(cè)觸摸心搏動最明顯的地方刺入或是從胸骨脊前端至背部下凹處連地方刺入或是從胸骨脊前端至背部下凹處連線的線的1/2處垂直刺入處垂直刺入24cm或是三叉神經(jīng)處即或是三叉神經(jīng)處即可采得。可采得。2、對成年雞還可以將其仰臥保定，、對成年雞還可以將其仰臥保定，在胸腔入口處水平進針。在胸腔入口處水平進針。第七頁，共126頁。 兔的心臟采血：將兔仰臥保將兔仰臥保定，在第定，在第3 3肋間胸骨的左緣肋間胸骨的左緣處用注射針垂直刺入心臟。處用注射針垂直刺入心臟?；蛴檬钟|摸心搏動最明顯處或用手觸摸心搏動最明顯處進針。進針。第八頁，共

4、126頁。 豬、兔豬、兔的靜脈采血：耳靜脈、如用量多時，的靜脈采血：耳靜脈、如用量多時，對仔豬或中等大小的豬可選擇前腔靜脈采血。對仔豬或中等大小的豬可選擇前腔靜脈采血。 部位：部位：將仰臥保定，拉直兩前肢使體中線將仰臥保定，拉直兩前肢使體中線垂直或使兩前肢向后與體中紅線平行。手持垂直或使兩前肢向后與體中紅線平行。手持針管，針頭斜向后方與地面呈針管，針頭斜向后方與地面呈6060角，向右角，向右側(cè)或左側(cè)胸前窩刺入進側(cè)或左側(cè)胸前窩刺入進2-5cm,2-5cm,即可。即可。第九頁，共126頁。 牛、馬、羊牛、馬、羊: 一般都在頸靜脈，在上一般都在頸靜脈，在上1/3與中與中1/3交界處，局部剪毛，消毒，

5、手壓近心端，交界處，局部剪毛，消毒，手壓近心端，待靜脈怒張時，右手持針頭對冷血管刺入即待靜脈怒張時，右手持針頭對冷血管刺入即可。奶牛還可以有腹壁皮下靜脈（乳前靜可。奶牛還可以有腹壁皮下靜脈（乳前靜脈），牛還可能在尾中靜脈（脈），牛還可能在尾中靜脈（2、3尾椎間）。尾椎間）。第十頁，共126頁。第十一頁，共126頁。 1、EDTA二鈉鹽二鈉鹽，一般配成，一般配成1%的濃度。的濃度。0.1ml可使可使5ml的血的血液不凝固。液不凝固。 2、草酸鹽合劑、草酸鹽合劑，銨鹽和鉀鹽按，銨鹽和鉀鹽按3:2的比例，配成的比例，配成2%的濃度。此的濃度。此溶液溶液0.5ml可以使可以使5ml的血液不的血液不凝固

6、。凝固。第十二頁，共126頁。 3、枸櫞酸鈉，、枸櫞酸鈉，常用常用3.8%的濃度效果最好，的濃度效果最好，1ml可使可使4ml的血液不凝固。的血液不凝固。 4、肝素，、肝素，是一種生理性的抗凝劑。所用制是一種生理性的抗凝劑。所用制劑多為肝素的鈉鹽或是鉀鹽，常用濃度為劑多為肝素的鈉鹽或是鉀鹽，常用濃度為1%，0.1ml可使可使10ml的血液不凝固。的血液不凝固。第十三頁，共126頁。1、在采血過程中要對動物和用血量的多少選、在采血過程中要對動物和用血量的多少選擇適當(dāng)?shù)牟裳椒?。擇適當(dāng)?shù)牟裳椒ā?、采血過程中要對動物進行必要的保定。、采血過程中要對動物進行必要的保定。3、采血的基本步驟為保定、剪

7、毛、消毒、進、采血的基本步驟為保定、剪毛、消毒、進針、采血、止血幾個步驟。針、采血、止血幾個步驟。第十四頁，共126頁。4、若血液需要加抗凝劑時，應(yīng)、若血液需要加抗凝劑時，應(yīng)根據(jù)實驗的項目及抗凝劑的特根據(jù)實驗的項目及抗凝劑的特點來選擇適當(dāng)?shù)目鼓齽?。點來選擇適當(dāng)?shù)目鼓齽?、實驗項目應(yīng)盡早進行，抗凝、實驗項目應(yīng)盡早進行，抗凝血不宜放置過久。血不宜放置過久。第十五頁，共126頁。實習(xí)：血沉、血紅蛋白測定實習(xí)：血沉、血紅蛋白測定F實驗?zāi)康?、實驗?zāi)康?、實驗器材實驗器材F實驗藥品、實驗動物實驗藥品、實驗動物F操作方法及注意事項操作方法及注意事項F臨床診斷意義臨床診斷意義第十六頁，共126頁。實驗?zāi)康膶嶒?/p>

8、目的 ： 讓同學(xué)們了解并掌握血沉、血紅蛋白測定的方法，及在操作所注意事項 。 實驗器材實驗器材 ： 血沉架、血沉管、血紅蛋白吸管、比色管、比色架、小試管、吸爾球、脫脂棉等 。第十七頁，共126頁。沙利氏標準比色柱及測定管沙利氏標準比色柱及測定管血沉及血沉管血沉及血沉管第十八頁，共126頁。第十九頁，共126頁。 實驗藥品實驗藥品 ： 3.8%枸櫞酸鈉、1%鹽酸溶液、蒸餾水、酒精、乙醚等 實驗動物實驗動物 ：羊、兔羊、兔 等。等。第二十頁，共126頁。第二十一頁，共126頁。實驗步驟實驗步驟(魏氏法魏氏法)：v取取5ml刻度試管加刻度試管加3.8%枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉1ml再再采靜脈血采靜脈血4ml

9、將之混勻。將之混勻。v用血沉管吸以上血液至用血沉管吸以上血液至“0”刻度處，用刻度處，用脫脂棉擦去管外壁的血液。脫脂棉擦去管外壁的血液。第二十二頁，共126頁。3.將血沉管垂直放置于血沉架上，并開始將血沉管垂直放置于血沉架上，并開始計時，每隔計時，每隔15min計下紅細胞下降的刻計下紅細胞下降的刻度（毫米數(shù)），共計數(shù)四次值。度（毫米數(shù)），共計數(shù)四次值。附：附：雞的血沉正常參考值其它的見書（雞的血沉正常參考值其它的見書（mm）15min、30min、45min、60min分別為：分別為： 0.6 1.3 1.94 3.36第二十三頁，共126頁。 血沉的病理變化可呈血沉的病理變化可呈現(xiàn)加快或變慢

10、。血沉測現(xiàn)加快或變慢。血沉測定是一種非特異性試驗，定是一種非特異性試驗，它只能說明體內(nèi)存在有它只能說明體內(nèi)存在有病理過程，不能單獨用病理過程，不能單獨用于疾病診斷。于疾病診斷。第二十四頁，共126頁。1血沉加快：見于各種貧血、急性全身性感、血沉加快：見于各種貧血、急性全身性感、各種急性局部炎癥、創(chuàng)傷、手術(shù)、骨折、創(chuàng)各種急性局部炎癥、創(chuàng)傷、手術(shù)、骨折、創(chuàng)傷等細胞受到損傷及某些毒物中毒等。傷等細胞受到損傷及某些毒物中毒等。2血沉變慢：血沉變慢： 可見于脫水、高熱性疾病、可見于脫水、高熱性疾病、心力衰竭、以及某些引起纖維蛋白原含量心力衰竭、以及某些引起纖維蛋白原含量嚴重減低的肝臟疾患等。嚴重減低的肝

11、臟疾患等。 第二十五頁，共126頁。注意事項注意事項血沉管必須垂直放置血沉管必須垂直放置如果傾斜血沉?xí)涌?。如果傾斜血沉?xí)涌臁?.1.血沉管必須是干燥干血沉管必須是干燥干凈的，否則也會影響凈的，否則也會影響血沉的速度。血沉的速度。第二十六頁，共126頁。注意事項注意事項3.3. 室溫條件要在室溫條件要在2020左右，左右，否則也會影響血沉的速否則也會影響血沉的速度，溫度升高血沉加快，度，溫度升高血沉加快，溫度降低，血沉減慢。溫度降低，血沉減慢。4. 4. 血液很抗凝劑的比例應(yīng)血液很抗凝劑的比例應(yīng)為為4:14:1；否則也會影響結(jié)果。；否則也會影響結(jié)果。第二十七頁，共126頁。實驗步驟：實驗步驟

12、：（1）在測定管內(nèi)加在測定管內(nèi)加1%1%鹽酸溶液至鹽酸溶液至“20/2”20/2”刻度處?？潭忍帯＃?）用血紅蛋白吸管吸血20l的血液， 加入測定管內(nèi)并混勻，注意不要產(chǎn)生氣泡。第二十八頁，共126頁。血紅蛋白吸管的使用血紅蛋白吸管的使用 1.1.清洗方法清洗方法：先用蒸餾水先用蒸餾水 酒精酒精 乙醚乙醚三個步驟進行。三個步驟進行。 2. 2. 注意點：使用前后都要將管內(nèi)洗干凈。注意點：使用前后都要將管內(nèi)洗干凈。 特別要將管內(nèi)的血液擠干凈才可進行以上特別要將管內(nèi)的血液擠干凈才可進行以上三步的洗滌。三步的洗滌。 第二十九頁，共126頁。實驗步驟實驗步驟（3）靜置十分鐘，然后向比色管內(nèi)滴加鹽靜置十分

13、鐘，然后向比色管內(nèi)滴加鹽酸溶液并搖勻，再與標準比色板進行比酸溶液并搖勻，再與標準比色板進行比色。再加再比色，色。再加再比色，反復(fù)進行反復(fù)進行直到比色管內(nèi)直到比色管內(nèi)的顏色與標準比色板一致為止。的顏色與標準比色板一致為止。（4 4）讀取液體凹面的刻度即為血紅蛋白）讀取液體凹面的刻度即為血紅蛋白的含量。的含量。第三十頁，共126頁。 5.11 7.07 （g/100ml）其它動物的正常值的見書其它動物的正常值的見書第三十一頁，共126頁。（1）血紅蛋白含量增多：多見于機體脫水而）血紅蛋白含量增多：多見于機體脫水而血液濃縮和各種疾病，腹瀉、嘔吐等血液濃縮和各種疾病，腹瀉、嘔吐等（2）血紅蛋白含量降低

14、：主要是由于紅細胞）血紅蛋白含量降低：主要是由于紅細胞損失過多或生成不足所致，可見于各種貧損失過多或生成不足所致，可見于各種貧血和失血、溶血、紅細胞生成障礙等。血和失血、溶血、紅細胞生成障礙等。第三十二頁，共126頁。各種器材必須干凈干燥各種器材必須干凈干燥用血紅蛋白吸血不能多用血紅蛋白吸血不能多也不能少也不能少讀數(shù)時若管內(nèi)有氣泡可讀數(shù)時若管內(nèi)有氣泡可有蘸取酒精少許并接觸有蘸取酒精少許并接觸氣泡部位即會消除氣泡部位即會消除第三十三頁，共126頁。血紅蛋白吸管外壁的液體一定要擦干凈，血紅蛋白吸管外壁的液體一定要擦干凈，否則結(jié)果就會偏大。否則結(jié)果就會偏大。比色的時候一定要用光面比色，另外加鹽比色的

15、時候一定要用光面比色，另外加鹽酸的時候要一滴一滴的加，不能過快，否酸的時候要一滴一滴的加，不能過快，否則顏色就會變淺則顏色就會變淺 。第三十四頁，共126頁。紅細胞壓積測定紅細胞壓積測定 紅細胞壓積，又稱紅細胞比容，是指紅細胞在血液中所占容積的比值。紅細胞壓積與血液中紅細胞的數(shù)量及其大小有關(guān)。獸醫(yī)臨床上常用PCV判定貧血；也通過PCV了解血液的濃縮程度，作為補液量的參考。獸醫(yī)臨床上常采用溫氏法測定PCV。第三十五頁，共126頁。紅細胞壓積測定紅細胞壓積測定原理原理 將抗凝血置于特制將抗凝血置于特制的溫氏管中，并經(jīng)離心沉的溫氏管中，并經(jīng)離心沉淀，紅細胞即下沉并壓緊淀，紅細胞即下沉并壓緊到最小容積

16、，可測得每升到最小容積，可測得每升血液中紅細胞所占容積的血液中紅細胞所占容積的比值。比值。器材與試劑器材與試劑 溫氏測定管；溫氏測定管；細而長毛細吸管或長針頭；細而長毛細吸管或長針頭；離心機；抗凝劑等。離心機；抗凝劑等。溫氏管及充血長針頭溫氏管及充血長針頭第三十六頁，共126頁。紅細胞壓積測定紅細胞壓積測定 測定方法：F用長的毛細吸管吸取乙二胺四乙酸二鈉（用長的毛細吸管吸取乙二胺四乙酸二鈉（EDTANa2EDTANa2）抗凝血液，插入溫氏管底部，自下而上加入血液至刻抗凝血液，插入溫氏管底部，自下而上加入血液至刻度度“10”10”處。處。F將壓積管置于水平離心機中，以將壓積管置于水平離心機中，以

17、3000r/min3000r/min速度離心速度離心3030 60min60min（馬（馬30min30min，牛、羊、豬，牛、羊、豬60min60min）。）。F離心后，管內(nèi)血柱分為四層，最上面一層為淡黃色的離心后，管內(nèi)血柱分為四層，最上面一層為淡黃色的是血漿，中間一層薄薄的灰白色的為白細胞和血小板是血漿，中間一層薄薄的灰白色的為白細胞和血小板層，第三層層，第三層紅黑色紅黑色薄層為含薄層為含還原還原血紅蛋白的紅細胞層，血紅蛋白的紅細胞層，最下層為最下層為含氧合含氧合血紅蛋白的紅細胞層。讀取紅細胞層血紅蛋白的紅細胞層。讀取紅細胞層所達到的毫米數(shù)，即為每所達到的毫米數(shù)，即為每100ml100ml

18、血液中紅細胞壓積容血液中紅細胞壓積容量的百分率。量的百分率。第三十七頁，共126頁。紅細胞壓積測定紅細胞壓積測定 注意事項溫氏管壁一側(cè)自上而下標有溫氏管壁一側(cè)自上而下標有0 01010刻度，供測定血沉之用；另刻度，供測定血沉之用；另一側(cè)自下而上標有一側(cè)自下而上標有0 01010刻度，供測定刻度，供測定PCVPCV用，用，0 01010之間共有之間共有100100個刻度，測定時應(yīng)正確選用。個刻度，測定時應(yīng)正確選用。抗凝劑宜選用抗凝劑宜選用EDTANaEDTANa2 2，因不改變其細胞體積及形態(tài)。，因不改變其細胞體積及形態(tài)。放置或冷藏的抗凝全血必須讓其回到室溫，測定時必須輕輕而充分放置或冷藏的抗凝

19、全血必須讓其回到室溫，測定時必須輕輕而充分地把血液混勻。地把血液混勻。血樣不能溶血，且用來吸取血液的毛細吸管或長針頭的尖端血樣不能溶血，且用來吸取血液的毛細吸管或長針頭的尖端不能離開液面，否則管內(nèi)會產(chǎn)生氣泡。不能離開液面，否則管內(nèi)會產(chǎn)生氣泡。讀取結(jié)果時不能把細胞層最上方的灰白層（白細胞和血小板）讀取結(jié)果時不能把細胞層最上方的灰白層（白細胞和血小板）計入。計入。 第三十八頁，共126頁。紅細胞壓積測定紅細胞壓積測定 診斷意義：診斷意義：紅細胞壓積容量值增高：紅細胞壓積容量值增高：多因機體脫水而使血液濃縮，紅多因機體脫水而使血液濃縮，紅細胞數(shù)相對增多所致，可見于各種脫水性疾病過程中，細胞數(shù)相對增多

20、所致，可見于各種脫水性疾病過程中，PCVPCV是判定動物脫水程度的標準之一，并可依此而計算是判定動物脫水程度的標準之一，并可依此而計算補液數(shù)量，但要結(jié)合臨床癥狀及其他檢測方法綜合判斷。補液數(shù)量，但要結(jié)合臨床癥狀及其他檢測方法綜合判斷。紅細胞壓積容量值降低：紅細胞壓積容量值降低：多因紅細胞減少所致，可見多因紅細胞減少所致，可見于各型貧血及伴有貧血的其他疾病過程中。于各型貧血及伴有貧血的其他疾病過程中。 第三十九頁，共126頁。紅細胞計數(shù)概念紅細胞計數(shù)概念、實驗原理實驗原理實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?、實驗所需的試劑實驗所需的試劑實驗器材實驗器材、實驗的主要方法及步驟、實驗的主要方法及步驟注意事項注意事項、臨

21、床意義、臨床意義第四十頁，共126頁。概概 念念紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)（Red blood cell count，簡稱，簡稱RBC ）是指計算）是指計算每每mm3血液中所含紅細胞的數(shù)目。其血液中所含紅細胞的數(shù)目。其計數(shù)方法有計數(shù)方法有顯微鏡計數(shù)法、光電顯微鏡計數(shù)法、光電比濁法、電子計數(shù)儀計數(shù)法等。比濁法、電子計數(shù)儀計數(shù)法等。目前獸醫(yī)臨床多采用在試管內(nèi)稀目前獸醫(yī)臨床多采用在試管內(nèi)稀釋的血液后的顯微鏡計數(shù)法。釋的血液后的顯微鏡計數(shù)法。第四十一頁，共126頁。 實驗原理：實驗原理： 將全血在試管內(nèi)用稀釋液稀釋將全血在試管內(nèi)用稀釋液稀釋400倍倍或或200倍倍，在血細胞計數(shù)在血細胞計數(shù)室內(nèi)，數(shù)一定體積的

22、紅細胞數(shù)，室內(nèi)，數(shù)一定體積的紅細胞數(shù)，然后再計算出然后再計算出1mm3 血液內(nèi)的血液內(nèi)的紅細胞數(shù)。紅細胞數(shù)。第四十二頁，共126頁。 實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?掌握紅細胞計數(shù)方法，并能判掌握紅細胞計數(shù)方法，并能判斷紅細胞的形態(tài)了解它的臨床斷紅細胞的形態(tài)了解它的臨床意義意義 實驗所需的試劑實驗所需的試劑 生理鹽水、蒸餾水、酒精、乙生理鹽水、蒸餾水、酒精、乙醚及動物血液等醚及動物血液等 。第四十三頁，共126頁。 實驗器材實驗器材 顯微鏡、計數(shù)板、計顯微鏡、計數(shù)板、計數(shù)器、血蓋片、小試數(shù)器、血蓋片、小試管、管、5ml5ml吸管、吸（洗）吸管、吸（洗）爾球、脫脂棉、擦鏡爾球、脫脂棉、擦鏡紙等紙等 血球計數(shù)板

23、的正面及側(cè)面圖第四十四頁，共126頁。 實驗的主要方法及步驟實驗的主要方法及步驟 此實驗常用的方法為試管稀釋法此實驗常用的方法為試管稀釋法 血液的稀釋血液的稀釋（400倍）倍）取取4ml（精確的（精確的應(yīng)該取應(yīng)該取3.99ml）生理鹽水于小試管中，）生理鹽水于小試管中，然后用血紅蛋白吸管吸血液然后用血紅蛋白吸管吸血液10l，將，將管外壁的血液擦拭干凈，放置于裝有管外壁的血液擦拭干凈，放置于裝有生理鹽水的小試管中，混勻，吸上清生理鹽水的小試管中，混勻，吸上清液清洗數(shù)次后備用。液清洗數(shù)次后備用。 第四十五頁，共126頁。2、尋找計數(shù)室：、尋找計數(shù)室：將計數(shù)板蓋將計數(shù)板蓋上血蓋片平放在顯微鏡的上血蓋

24、片平放在顯微鏡的載物臺上，在載物臺上，在低倍鏡下低倍鏡下，暗視野暗視野下尋找計數(shù)室。（一下尋找計數(shù)室。（一個計數(shù)室有九個大方格，其個計數(shù)室有九個大方格，其中中間的一個中中間的一個大大方格為紅細方格為紅細胞計數(shù)室，共有胞計數(shù)室，共有2525個個中中方方格，每個中方格又分成格，每個中方格又分成1616個個小小方格）。方格）。血血 細細 胞胞 計計 數(shù)數(shù) 室室 第四十六頁，共126頁。紅細胞計數(shù)室紅細胞計數(shù)室第四十七頁，共126頁。3、充液充液：將配好的稀釋液用吸管吸將配好的稀釋液用吸管吸取一滴充在計數(shù)板與血蓋片之間，取一滴充在計數(shù)板與血蓋片之間，并靜置并靜置12min，等待紅細胞全部，等待紅細胞全

25、部下沉方可計數(shù)。下沉方可計數(shù)。第四十八頁，共126頁。計計 數(shù)數(shù) 室室 充充 液液 方方 法法 第四十九頁，共126頁。4.計數(shù)計數(shù)：在在高倍鏡高倍鏡下計數(shù)，計紅細胞計下計數(shù)，計紅細胞計數(shù)室中的四角的及中央的一個總共數(shù)室中的四角的及中央的一個總共是是5 5個中方格的紅細胞數(shù)，分別按照一個中方格的紅細胞數(shù)，分別按照一定的順序及壓線的原則定的順序及壓線的原則(數(shù)上不數(shù)下，數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右數(shù)左不數(shù)右)來計數(shù)，來計數(shù)， 五個中方格分別五個中方格分別用：用：x1、 x2 、x3、x4 、x5 表示表示。總總數(shù)用數(shù)用X表示表示。第五十頁，共126頁。其中一個中方格計數(shù)方法其中一個中方格計數(shù)方法第五十

26、一頁，共126頁。5.計算：計算：每立方毫米血液中所含每立方毫米血液中所含的紅細胞總數(shù)用的紅細胞總數(shù)用“R”表示表示 R=R=（x x1 1+x+x2 2+x+x3 3+x+x4 4+x+x5 5）5 51010400=x400=x2000020000各種動物正常數(shù)值見參考書（注意各種動物正常數(shù)值見參考書（注意單位）單位）第五十二頁，共126頁。其中其中：x1x5為五個中方格的紅細胞數(shù)為五個中方格的紅細胞數(shù) 5 5表示：紅細胞室的面積為表示：紅細胞室的面積為1 1平方平方mm,mm,計計數(shù)室有數(shù)室有2525個中方格個中方格 ，而計數(shù)時只數(shù)，而計數(shù)時只數(shù)5 5個中個中方格的數(shù)目，要算成方格的數(shù)目

27、，要算成1 1平方平方mmmm要乘以要乘以5 5 1010表示：計數(shù)室的深度為表示：計數(shù)室的深度為0.1mm0.1mm，要算成，要算成1mm,1mm,所以要乘以所以要乘以1010 400400表示：血液的稀釋倍數(shù)表示：血液的稀釋倍數(shù)第五十三頁，共126頁。注意事項：注意事項： 1.1.所用的器材必須是清潔干燥的，否則就所用的器材必須是清潔干燥的，否則就會影響結(jié)果會影響結(jié)果 2 2吸取液體的量一定要準確，過多或過少吸取液體的量一定要準確，過多或過少都會影其結(jié)果都會影其結(jié)果3 3使用顯微鏡一定要規(guī)范，將其平放使用顯微鏡一定要規(guī)范，將其平放4.4.充液時要將稀釋液搖勻，量不可過多也充液時要將稀釋液搖

28、勻，量不可過多也不能太少，不能有氣泡不能太少，不能有氣泡第五十四頁，共126頁。注意事項：注意事項： 5尋找計數(shù)室時光圈要盡量關(guān)小，不要關(guān)尋找計數(shù)室時光圈要盡量關(guān)小，不要關(guān)死，否則在高倍鏡下就看不到計數(shù)室死，否則在高倍鏡下就看不到計數(shù)室 6在計數(shù)時，不要把雜質(zhì)和紅細胞相混淆，在計數(shù)時，不要把雜質(zhì)和紅細胞相混淆，否則就會影響結(jié)果否則就會影響結(jié)果 7五個中方格一定要找準確，特別是中間五個中方格一定要找準確，特別是中間的中方格的確定的中方格的確定第五十五頁，共126頁。臨床意義臨床意義: 紅細胞增多：紅細胞增多：紅細胞和血紅蛋白含量增紅細胞和血紅蛋白含量增多，絕大多數(shù)為相對增多，見于各種因多，絕大多

29、數(shù)為相對增多，見于各種因素導(dǎo)致的脫水等。素導(dǎo)致的脫水等。 紅細胞減少：紅細胞減少：紅細胞和血紅蛋白含量降低，紅細胞和血紅蛋白含量降低，主要是由于紅細胞損失過多或生成不足所主要是由于紅細胞損失過多或生成不足所致，可見于各種貧血和失血、溶血、紅細致，可見于各種貧血和失血、溶血、紅細胞生成障礙等胞生成障礙等。第五十六頁，共126頁。概念及實驗原理概念及實驗原理實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康膶嶒炈璧脑噭嶒炈璧脑噭嶒炂鞑膶嶒炂鞑膶嶒灥闹饕椒安襟E實驗的主要方法及步驟注意事項注意事項臨床意義臨床意義第五十七頁，共126頁。概念及實驗原理概念及實驗原理 白細胞計數(shù)白細胞計數(shù)（white blood cell c

30、ount）指指一定體積血液內(nèi)所含的白細胞總數(shù)。一定體積血液內(nèi)所含的白細胞總數(shù)。 白細胞計數(shù)白細胞計數(shù)是用是用1%3%冰醋酸或冰醋酸或1%鹽酸鹽酸將血液中的將血液中的紅細胞破壞紅細胞破壞后，只保留白細胞后，只保留白細胞并計數(shù)每并計數(shù)每微升微升血液中的白細胞數(shù)，再推算血液中的白細胞數(shù)，再推算出每升血液中的白細胞數(shù)出每升血液中的白細胞數(shù)(109 個個/L)。第五十八頁，共126頁。白細胞計數(shù)白細胞計數(shù)F實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?掌握白細胞計數(shù)方法，并能判斷白細胞的形掌握白細胞計數(shù)方法，并能判斷白細胞的形態(tài)了解它的臨床意義態(tài)了解它的臨床意義 F實驗所需的試劑實驗所需的試劑1%1% 3%3%冰醋酸或冰醋酸或1%

31、1%鹽酸鹽酸、蒸餾水、酒精、乙、蒸餾水、酒精、乙醚及動物血液等醚及動物血液等 。實驗器材實驗器材顯微鏡、計數(shù)板、計數(shù)器、血蓋片、小試管、顯微鏡、計數(shù)板、計數(shù)器、血蓋片、小試管、0.5ml0.5ml吸管、吸爾球、擦鏡紙等吸管、吸爾球、擦鏡紙等 第五十九頁，共126頁。實驗的主要方法及步驟實驗的主要方法及步驟(注意與紅細胞區(qū)別注意與紅細胞區(qū)別)實驗實驗步驟步驟紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)白細胞計數(shù)白細胞計數(shù)血液血液稀釋稀釋取取4ml的生理鹽水于小試管中，然后的生理鹽水于小試管中，然后用血紅蛋白吸管吸血液用血紅蛋白吸管吸血液10l，將管，將管外壁的血液擦拭干凈，放置于裝有外壁的血液擦拭干凈，放置于裝有生理鹽

32、水的小試管中，混勻生理鹽水的小試管中，混勻吸吸2%的冰醋酸溶液的冰醋酸溶液0.38ml或或0.4ml；再用；再用沙利氏吸管吸取供檢血液沙利氏吸管吸取供檢血液20l加入試管內(nèi)，加入試管內(nèi)，混勻，混勻，尋找尋找計數(shù)計數(shù)室室將計數(shù)板蓋上血蓋片平放在顯微鏡將計數(shù)板蓋上血蓋片平放在顯微鏡的載物臺上，在低倍鏡下，暗視野的載物臺上，在低倍鏡下，暗視野下尋找計數(shù)室下尋找計數(shù)室與紅細胞計數(shù)相似，只是將鏡頭調(diào)到白細與紅細胞計數(shù)相似，只是將鏡頭調(diào)到白細胞計數(shù)室中（四角的胞計數(shù)室中（四角的4個大方格中的任何個大方格中的任何一個）。一個）。充液充液將配好的稀釋液用吸管吸取一滴充將配好的稀釋液用吸管吸取一滴充在計數(shù)板與血

33、蓋片之間，并靜置在計數(shù)板與血蓋片之間，并靜置12min再計數(shù)。再計數(shù)。同紅細胞計數(shù)同紅細胞計數(shù)計數(shù)計數(shù)在高倍鏡下計數(shù)，計紅細胞計數(shù)室在高倍鏡下計數(shù)，計紅細胞計數(shù)室中的四角的及中央的一個總共是中的四角的及中央的一個總共是5個個中中方格的紅細胞數(shù)方格的紅細胞數(shù)用低倍鏡計數(shù)，計用低倍鏡計數(shù)，計4個角上的個角上的4個大方格個大方格（共有（共有164=64個中方格）的白細胞按順個中方格）的白細胞按順序全部數(shù)完序全部數(shù)完計算計算每立方毫米血液中所含的紅細胞總每立方毫米血液中所含的紅細胞總數(shù)（個數(shù)（個/mm3）=（x1+x2+x3+x4+x5）510400=X20000白細胞數(shù)（個白細胞數(shù)（個/mm3）=W

34、/41020= W50或白細胞數(shù)（個或白細胞數(shù)（個/L）=W/41020106第六十頁，共126頁。白細胞計數(shù)白細胞計數(shù)血細胞計數(shù)室血細胞計數(shù)室右上角的一個白細胞計數(shù)室右上角的一個白細胞計數(shù)室第六十一頁，共126頁。一個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)一個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)第六十二頁，共126頁。注意事項注意事項(與紅細胞計數(shù)相似與紅細胞計數(shù)相似) 所用的器材必須是清潔干燥的，否所用的器材必須是清潔干燥的，否則就會影響結(jié)果則就會影響結(jié)果 吸取液體的量一定要準確，過多或吸取液體的量一定要準確，過多或過少都會影其結(jié)果過少都會影其結(jié)果使用顯微鏡一定要規(guī)范，一定要平使用顯微鏡一定要規(guī)范，一定要平放放第六十三頁，共1

35、26頁。注意事項注意事項尋找計數(shù)室時光圈一定要關(guān)到最小，太尋找計數(shù)室時光圈一定要關(guān)到最小，太亮就會找不到計數(shù)室亮就會找不到計數(shù)室在計數(shù)時，不要把雜質(zhì)和白細胞相混淆，在計數(shù)時，不要把雜質(zhì)和白細胞相混淆，否則就會影響結(jié)果否則就會影響結(jié)果四個大方格的白細胞數(shù)之間的誤差不能四個大方格的白細胞數(shù)之間的誤差不能超過超過20%第六十四頁，共126頁。診斷意義診斷意義u白細胞總數(shù)增多：白細胞總數(shù)增多：多數(shù)多數(shù)細菌感染細菌感染性疾病，性疾病，如鏈球菌、肺炎雙球菌等，在嚴重的組織如鏈球菌、肺炎雙球菌等，在嚴重的組織損傷，急性大出血，急性溶血，某些中毒損傷，急性大出血，急性溶血，某些中毒（敵敵畏中毒、酸中毒及尿毒癥

36、等）以及（敵敵畏中毒、酸中毒及尿毒癥等）以及注射異體蛋白（血清、疫苗）后，均可導(dǎo)注射異體蛋白（血清、疫苗）后，均可導(dǎo)致白細胞數(shù)目增多。致白細胞數(shù)目增多。白血病時，白細胞白血病時，白細胞(病病理性理性)數(shù)持久性、進行性增多，紅細胞數(shù)目數(shù)持久性、進行性增多，紅細胞數(shù)目卻明顯下降。卻明顯下降。第六十五頁，共126頁。診斷意義診斷意義u白細胞總數(shù)減少：白細胞總數(shù)減少：某些某些病毒性病毒性疾病，如犬傳染性肝炎、疾病，如犬傳染性肝炎、貓泛白細胞減少癥、流行性感冒、馬傳染性貧血時，白細貓泛白細胞減少癥、流行性感冒、馬傳染性貧血時，白細胞總數(shù)減少；胞總數(shù)減少；伴有再生障礙性貧血的疾病時，白細胞總伴有再生障礙性

37、貧血的疾病時，白細胞總數(shù)減少數(shù)減少；此外長期使用磺胺類及氯霉素類藥物、；此外長期使用磺胺類及氯霉素類藥物、X線照線照射，惡病質(zhì)及各種疾病的瀕死期等均會引起白細胞射，惡病質(zhì)及各種疾病的瀕死期等均會引起白細胞數(shù)減少。數(shù)減少。u在治療過程中，全身癥狀好轉(zhuǎn)，白細胞減少時說明在治療過程中，全身癥狀好轉(zhuǎn)，白細胞減少時說明病情好轉(zhuǎn)。如果病情沒有好轉(zhuǎn)，白細胞總數(shù)減少時病情好轉(zhuǎn)。如果病情沒有好轉(zhuǎn)，白細胞總數(shù)減少時說明機體已進入敗血癥期，病情惡化。說明機體已進入敗血癥期，病情惡化。第六十六頁，共126頁。白細胞分類計數(shù)概念白細胞分類計數(shù)概念實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康膶嶒炈璧脑噭嶒炈璧脑噭嶒炂鞑膶嶒炂鞑膶嶒灢襟E實驗步

38、驟注意事項注意事項臨床意義臨床意義第六十七頁，共126頁。概概 念念F白細胞分類計數(shù)（白細胞分類計數(shù)（Differential count of white cell，簡稱，簡稱DC）是指將血液制成薄是指將血液制成薄片，染色后用油鏡觀察，求出各種白細胞片，染色后用油鏡觀察，求出各種白細胞所占百分比。即可計算出每所占百分比。即可計算出每mmmm3 3血液中各類血液中各類白細胞的絕對值。白細胞分類計數(shù)對疾病白細胞的絕對值。白細胞分類計數(shù)對疾病的診斷、預(yù)后及療效觀察具有重要的意義的診斷、預(yù)后及療效觀察具有重要的意義 第六十八頁，共126頁。實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?讓同學(xué)們掌握血涂片的制作的方法和染色方法，

39、讓同學(xué)們掌握血涂片的制作的方法和染色方法，并能夠識別涂片制作的好壞并能識別各種白細并能夠識別涂片制作的好壞并能識別各種白細胞。胞。實驗所需的試劑實驗所需的試劑 瑞氏染色液、緩沖液、蒸餾水、香柏油等瑞氏染色液、緩沖液、蒸餾水、香柏油等 實驗器材實驗器材 載玻片、脫脂棉、玻璃鉛筆、吸水紙、染色缸及載玻片、脫脂棉、玻璃鉛筆、吸水紙、染色缸及染色架、試管架、顯微鏡、擦鏡紙、分數(shù)計數(shù)器染色架、試管架、顯微鏡、擦鏡紙、分數(shù)計數(shù)器等等 第六十九頁，共126頁。實驗步驟實驗步驟（一）血涂片的制作：（一）血涂片的制作：1 1、取兩張載玻片，一張作為載片，選一張邊、取兩張載玻片，一張作為載片，選一張邊緣比較光滑的

40、玻片作為推片。緣比較光滑的玻片作為推片。2 2、將被檢血液滴在載片的右端中間。、將被檢血液滴在載片的右端中間。3 3、右手持推片置于血滴前方，并輕輕向后移、右手持推片置于血滴前方，并輕輕向后移動推片，使之與血液接觸，待血液擴散開動推片，使之與血液接觸，待血液擴散開后，再以后，再以30304545角度向前均速推進涂角度向前均速推進涂抺抺，即形成一血膜。即形成一血膜。第七十頁，共126頁。推推 片片第七十一頁，共126頁。推推 片片 第七十二頁，共126頁。影響血膜厚薄長短的幾個因素：影響血膜厚薄長短的幾個因素：血液血液的多少的多少角度角度（指兩玻片之間的銳角）的大?。ㄖ竷刹Ｆg的銳角）的大小推

41、片的推片的速度速度第七十三頁，共126頁。合格血涂片應(yīng)具備：合格血涂片應(yīng)具備：F血液分布應(yīng)均勻，厚度適宜，白細胞分類血液分布應(yīng)均勻，厚度適宜，白細胞分類計數(shù)的血膜宜稍厚，進行紅細胞形態(tài)及血計數(shù)的血膜宜稍厚，進行紅細胞形態(tài)及血液原蟲檢查的血片宜稍薄。液原蟲檢查的血片宜稍薄。F邊緣整齊邊緣整齊，能明顯分，能明顯分出頭、體、尾出頭、體、尾三部分。三部分。對光觀察呈對光觀察呈霓虹色霓虹色。 F血膜位于玻片中央，占玻片面積中間的血膜位于玻片中央，占玻片面積中間的2/32/3為最佳為最佳第七十四頁，共126頁。血血 涂涂 片片第七十五頁，共126頁。實驗步驟實驗步驟（二）血涂片的染色（瑞氏染色法）：（二）

42、血涂片的染色（瑞氏染色法）：1.待血膜干燥后在血膜的兩端用玻璃鉛筆劃兩條豎線。待血膜干燥后在血膜的兩端用玻璃鉛筆劃兩條豎線。2.把玻片平放在染色架上，滴加瑞氏染液數(shù)滴（以蓋把玻片平放在染色架上，滴加瑞氏染液數(shù)滴（以蓋滿血膜為度）染色滿血膜為度）染色12min。3.加等量的緩沖液，用吸爾球吹勻，再染色加等量的緩沖液，用吸爾球吹勻，再染色35min4.用細小的流水沖洗，吸水紙吸干，待檢用細小的流水沖洗，吸水紙吸干，待檢。 第七十六頁，共126頁。染染 色色第七十七頁，共126頁。（三）鏡（三）鏡 檢檢 先用先用低倍鏡低倍鏡找到圖像，再用找到圖像，再用高倍鏡高倍鏡觀察觀察血膜細胞上分布情況及染色質(zhì)量

43、等。再換血膜細胞上分布情況及染色質(zhì)量等。再換用用油鏡油鏡進行觀察計數(shù)。進行觀察計數(shù)。計數(shù)方法：計數(shù)方法：通常在血片的兩端或兩端的上通常在血片的兩端或兩端的上下部按二區(qū)或四區(qū)計數(shù)法有順序地移動血下部按二區(qū)或四區(qū)計數(shù)法有順序地移動血片，分別記錄各種白細胞數(shù)，最后計算出片，分別記錄各種白細胞數(shù)，最后計算出各種白細胞所占百分比。各種白細胞所占百分比。第七十八頁，共126頁。計數(shù)方法計數(shù)方法第七十九頁，共126頁。白細胞的分類及識別白細胞的分類及識別白白 細細 胞胞 有粒白細胞有粒白細胞無粒白細胞無粒白細胞嗜酸性粒白細胞嗜酸性粒白細胞 嗜堿性粒白細胞嗜堿性粒白細胞 嗜中性粒白細胞嗜中性粒白細胞 晚幼型晚

44、幼型 桿狀核桿狀核 分葉核分葉核 單核細胞單核細胞 淋巴細胞淋巴細胞 小淋巴細胞小淋巴細胞 大淋巴細胞大淋巴細胞 第八十頁，共126頁。 綿羊血涂片綿羊血涂片1.1.嗜堿性粒細胞嗜堿性粒細胞 2.2.桿桿狀核型嗜酸性粒細胞狀核型嗜酸性粒細胞 3.3.分葉型嗜酸性粒細胞分葉型嗜酸性粒細胞 4.4.晚幼型嗜中性粒細胞晚幼型嗜中性粒細胞 5.5.桿狀核嗜中性粒細胞桿狀核嗜中性粒細胞 6.6.分葉型嗜中性細胞分葉型嗜中性細胞 7.7.單核細胞單核細胞 8 8大淋巴細胞大淋巴細胞 9.9.中淋巴細胞中淋巴細胞 10.10.小淋小淋巴細胞巴細胞 11.11.血小板血小板 12.12.紅細胞紅細胞第八十一頁

45、，共126頁。 豬血涂片豬血涂片1.1.嗜堿性粒細胞嗜堿性粒細胞 2.2.晚幼型嗜酸性粒細胞晚幼型嗜酸性粒細胞 3.3.分葉型嗜酸性粒細分葉型嗜酸性粒細胞胞 4.4.晚幼型嗜中性晚幼型嗜中性粒細胞粒細胞 5.5.桿狀核嗜桿狀核嗜中性粒細胞中性粒細胞 6.6.分葉分葉型嗜中性細胞型嗜中性細胞 7.7.單單核細胞核細胞 8 8大淋巴細胞大淋巴細胞 9.9.中淋巴細胞中淋巴細胞 10.10.小小淋巴細胞淋巴細胞 11.11.漿細胞漿細胞 12.12.血小板血小板 13.13.紅細紅細胞胞第八十二頁，共126頁。 牛血涂片牛血涂片1.1.分葉型嗜堿性粒細分葉型嗜堿性粒細胞胞 2.2.桿狀核型嗜酸桿狀核

46、型嗜酸性粒細胞性粒細胞 3.3.分葉型分葉型嗜酸性粒細胞嗜酸性粒細胞 4.4.晚晚幼型嗜中性粒細胞幼型嗜中性粒細胞 5.5.桿狀核嗜中性粒細胞桿狀核嗜中性粒細胞 6 6、7 7分葉型嗜中性細分葉型嗜中性細胞胞 8.8.單核細胞單核細胞 9 9大大淋巴細胞淋巴細胞 10.10.中淋巴中淋巴細胞細胞 11.11.小淋巴細胞小淋巴細胞 12.12.血小板血小板 1313紅細胞紅細胞第八十三頁，共126頁。 雞血涂片雞血涂片1.1.嗜堿性粒細嗜堿性粒細胞胞 2.2.嗜酸性嗜酸性粒細胞粒細胞 3.3.嗜嗜中 性 粒 細 胞中 性 粒 細 胞 4.4.淋巴細胞淋巴細胞 5 .5 . 單 核 細 胞單 核

47、細 胞 6.6.紅細胞紅細胞 7.7.血小板血小板 8.8.核核的殘余的殘余第八十四頁，共126頁。嗜堿性白細胞嗜堿性白細胞第八十五頁，共126頁。嗜酸性白細胞嗜酸性白細胞第八十六頁，共126頁。嗜中性白細胞嗜中性白細胞桿桿狀狀核核分分葉葉核核幼幼稚稚第八十七頁，共126頁。淋巴細胞淋巴細胞小淋巴細胞小淋巴細胞大淋巴細胞大淋巴細胞中淋巴細胞中淋巴細胞第八十八頁，共126頁。單核細胞單核細胞第八十九頁，共126頁。血血 小小 板板第九十頁，共126頁。注意事項：注意事項：載玻片應(yīng)事先處理干凈。載玻片應(yīng)事先處理干凈。 推制血片時用力要均勻，兩張玻片不要壓推制血片時用力要均勻，兩張玻片不要壓的太緊的

48、太緊 推片的邊緣要平整光滑，否則血膜邊緣不推片的邊緣要平整光滑，否則血膜邊緣不均勻且不整齊。均勻且不整齊。畫線是起到防止染色液外溢的作用，對染畫線是起到防止染色液外溢的作用，對染色效果沒有影響。色效果沒有影響。滴加瑞氏染液的量不宜太少。滴加瑞氏染液的量不宜太少。第九十一頁，共126頁。注意事項：注意事項：沖洗時應(yīng)將蒸餾水或清水沖洗時應(yīng)將蒸餾水或清水直接向血膜上傾直接向血膜上傾倒，倒，使液體自血片使液體自血片邊緣溢出邊緣溢出，讓沉淀物從，讓沉淀物從液面浮去液面浮去染色良好的血涂片應(yīng)呈染色良好的血涂片應(yīng)呈櫻桃紅色櫻桃紅色，若呈淡，若呈淡紫色，是紫色，是染色時間過長染色時間過長造成的，若呈紅色造成的

49、，若呈紅色是是染色時間過短染色時間過短造成的。染色液造成的。染色液偏堿偏堿時血時血片呈煙灰色；片呈煙灰色；偏酸偏酸時血片呈鮮紅色。時血片呈鮮紅色。第九十二頁，共126頁。兩個概念：兩個概念：F核左移核左移 ：分析嗜中性白細胞的增減變化時，分析嗜中性白細胞的增減變化時，桿狀核桿狀核和和晚幼晚幼細胞增多，甚至出現(xiàn)髓細胞細胞增多，甚至出現(xiàn)髓細胞的比例增高，稱為的比例增高，稱為“核左移核左移”。F核右移核右移 ：若若分葉核分葉核細胞顯著增多，并且細細胞顯著增多，并且細胞核分為胞核分為4 45 5葉葉甚至甚至多葉多葉的比例較多者，的比例較多者，則稱為則稱為“核右移核右移”，表示造血機能減退。，表示造血機

50、能減退。 第九十三頁，共126頁。 臨床意義：臨床意義：嗜中性白細胞增多：嗜中性白細胞增多：常見于各種急性感染常見于各種急性感染性疾病、急性炎癥及重癥燒傷、創(chuàng)傷。性疾病、急性炎癥及重癥燒傷、創(chuàng)傷。 嗜中性白細胞減少：嗜中性白細胞減少：由于骨髓造血機能受由于骨髓造血機能受到抑制，對嗜中性白細胞的生成不足，最到抑制，對嗜中性白細胞的生成不足，最急性感染。常見于病毒性疾病及各種疾病急性感染。常見于病毒性疾病及各種疾病的重危期（如中毒性休克、胃腸破裂等）。的重危期（如中毒性休克、胃腸破裂等）。第九十四頁，共126頁。 嗜酸性白細胞增多：嗜酸性白細胞增多：見于某些寄生蟲病見于某些寄生蟲?。ㄈ绺纹x病、

51、球蟲病、旋毛蟲?。ㄈ绺纹x病、球蟲病、旋毛蟲病等），某些過敏性疾病（蕁麻疹等）以等），某些過敏性疾?。ㄊn麻疹等）以及濕疹、疥癬等皮膚病。及濕疹、疥癬等皮膚病。 嗜酸性白細胞減少：嗜酸性白細胞減少：見于某些疾病的重見于某些疾病的重癥期，也可見于應(yīng)用皮質(zhì)類固醇藥物。癥期，也可見于應(yīng)用皮質(zhì)類固醇藥物。嗜酸性白細胞長時間消失，表示預(yù)后不嗜酸性白細胞長時間消失，表示預(yù)后不良，但消失后又重新出現(xiàn)則說明病情好良，但消失后又重新出現(xiàn)則說明病情好轉(zhuǎn)。轉(zhuǎn)。第九十五頁，共126頁。 淋巴細胞增多：淋巴細胞增多：見于某些慢性傳染?。ㄈ缫娪谀承┞詡魅静。ㄈ缃Y(jié)核病、布氏桿菌病等結(jié)核病、布氏桿菌病等) )、淋巴性白血病

52、；、淋巴性白血??；急性傳染病的恢復(fù)期、某些病毒性疾病急性傳染病的恢復(fù)期、某些病毒性疾病（如流行性感冒等）及血孢子蟲病等。（如流行性感冒等）及血孢子蟲病等。 淋巴細胞減少：淋巴細胞減少：當(dāng)嗜中性白細胞絕對值增當(dāng)嗜中性白細胞絕對值增多時，伴隨減少的常常是淋巴細胞。說明多時，伴隨減少的常常是淋巴細胞。說明機體與病原處于斗爭階段，此后淋巴細胞機體與病原處于斗爭階段，此后淋巴細胞由少逐漸增多，往往是預(yù)后良好的指征。由少逐漸增多，往往是預(yù)后良好的指征。 第九十六頁，共126頁。 單核細胞增多：單核細胞增多：原蟲?。ㄈ珏F蟲病、梨形原蟲?。ㄈ珏F蟲病、梨形蟲病等）、慢性細菌性疾病（如結(jié)核、布蟲病等）、慢性細菌性

53、疾?。ㄈ缃Y(jié)核、布氏桿菌病等）以及病毒性疾?。ㄈ珩R傳染氏桿菌病等）以及病毒性疾病（如馬傳染性貧血）。性貧血）。 單核細胞減少：單核細胞減少：急性傳染病的初期和各種急性傳染病的初期和各種疾病的垂危期。疾病的垂危期。 嗜堿性白細胞的增多或減少：嗜堿性白細胞的增多或減少：此種情況較此種情況較少見，對其增多、減少的意義尚不是很清少見，對其增多、減少的意義尚不是很清楚。診斷意義不是很大。楚。診斷意義不是很大。 第九十七頁，共126頁。 血小板計數(shù)概念血小板計數(shù)概念 原原 理理 實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?器材與試劑器材與試劑 操作方法操作方法 注意事項注意事項 臨床意義臨床意義 第九十八頁，共126頁。概概 念念F

54、血小板是哺乳動物血液中的有形成分之一，血小板是哺乳動物血液中的有形成分之一，它有質(zhì)膜，沒有細胞核結(jié)構(gòu)，一般呈圓形它有質(zhì)膜，沒有細胞核結(jié)構(gòu)，一般呈圓形或橢圓形棒狀體，直徑或橢圓形棒狀體，直徑24m。貓的血小貓的血小板較大，與紅細胞大小相似。板較大，與紅細胞大小相似。F血小板具有特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生化組成，血小板具有特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生化組成，在正常血液中有較恒定的數(shù)量。在正常血液中有較恒定的數(shù)量。血小板壽血小板壽命約命約714d，每天約更新總量的，每天約更新總量的1/10，衰，衰老的血小板大多在脾臟中被清除。老的血小板大多在脾臟中被清除。 第九十九頁，共126頁。原原 理理 尿素尿素能溶解能溶解紅細

55、胞紅細胞和和白細胞白細胞而使血小板而使血小板形態(tài)保持完整性，稀釋液中的形態(tài)保持完整性，稀釋液中的枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉有有防凝防凝作用，作用，甲醛可固定血小板的形態(tài)。甲醛可固定血小板的形態(tài)。血血液經(jīng)此稀釋液稀釋后，在血細胞計數(shù)室內(nèi)液經(jīng)此稀釋液稀釋后，在血細胞計數(shù)室內(nèi)直接計數(shù)直接計數(shù)，以求得每微升血液中的血小板，以求得每微升血液中的血小板數(shù)。數(shù)。第一百頁，共126頁。器材與試劑器材：器材：血小板計數(shù)使用的器材與白細胞計血小板計數(shù)使用的器材與白細胞計數(shù)相同。數(shù)相同。試劑：試劑：常用復(fù)方尿素稀釋液：尿素常用復(fù)方尿素稀釋液：尿素10g10g，枸，枸櫞酸鈉櫞酸鈉0.5g0.5g，40%40%甲醛液甲醛液0.1

56、ml0.1ml，加蒸餾水，加蒸餾水至至100ml100ml，此液在室溫中可保存，此液在室溫中可保存10d10d左右。左右。稀釋液中的枸櫞酸鈉有抗凝作用，甲醛可稀釋液中的枸櫞酸鈉有抗凝作用，甲醛可固定血小板的形態(tài)。固定血小板的形態(tài)。第一百零一頁，共126頁。操作方法操作方法（一）稀釋血液：（一）稀釋血液：取稀釋液取稀釋液0.38ml0.38ml（或（或0.4ml0.4ml）置于小試管中，用血紅蛋白吸管吸取血液置于小試管中，用血紅蛋白吸管吸取血液20l20l，用脫脂棉擦去管外壁的血液后將其，用脫脂棉擦去管外壁的血液后將其吹入盛有稀釋液的試管底部，再吸吹數(shù)次，吹入盛有稀釋液的試管底部，再吸吹數(shù)次，以

57、洗出血紅蛋白吸管內(nèi)粘附的血液，混勻，以洗出血紅蛋白吸管內(nèi)粘附的血液，混勻，靜置靜置15min15min左右左右，以使紅細胞和白細胞溶解，以使紅細胞和白細胞溶解，然后再混勻。然后再混勻。第一百零二頁，共126頁。操作方法操作方法（二）尋找計數(shù)室：（二）尋找計數(shù)室：方法同紅白細胞計數(shù)一方法同紅白細胞計數(shù)一致。致。（三）充液：（三）充液：用毛細吸管或用玻棒蘸取稀釋用毛細吸管或用玻棒蘸取稀釋好的血液充入計數(shù)室內(nèi)，靜置好的血液充入計數(shù)室內(nèi)，靜置15min15min左右左右（使血小板下沉）。（使血小板下沉）。（四）計數(shù)及計算：（四）計數(shù)及計算：在在高高倍鏡下計數(shù)一個大倍鏡下計數(shù)一個大方格內(nèi)的血小板總數(shù)，乘

58、以方格內(nèi)的血小板總數(shù)，乘以200200，或計數(shù)，或計數(shù)5 5個中方格（個中方格（8080個小方格）內(nèi)的血小板數(shù)乘個小方格）內(nèi)的血小板數(shù)乘以以10001000，即得每微升血液中血小板個數(shù)。，即得每微升血液中血小板個數(shù)。第一百零三頁，共126頁。注意事項注意事項所用的器材必須清潔干燥，稀釋液必須新所用的器材必須清潔干燥，稀釋液必須新鮮無沉淀。所有的操作必須規(guī)范操作鮮無沉淀。所有的操作必須規(guī)范操作。采血要迅速，以防止血小板離體后破裂、采血要迅速，以防止血小板離體后破裂、聚集等造成誤差。聚集等造成誤差。由于血小板體積小，質(zhì)量輕，不易下沉，由于血小板體積小，質(zhì)量輕，不易下沉，所以要靜置一段時間，在夏季還

59、應(yīng)保持濕所以要靜置一段時間，在夏季還應(yīng)保持濕度。另外在計數(shù)時由于血小板體積小，常度。另外在計數(shù)時由于血小板體積小，常不在同一焦距上，要利用顯微鏡的細調(diào)節(jié)不在同一焦距上，要利用顯微鏡的細調(diào)節(jié)器來調(diào)節(jié)焦距，才能看清楚。器來調(diào)節(jié)焦距，才能看清楚。第一百零四頁，共126頁。1.1.血小板數(shù)增多：血小板數(shù)增多：原發(fā)性血小板增多。見于原發(fā)性血小板增原發(fā)性血小板增多。見于原發(fā)性血小板增多癥，是一種多癥，是一種原因不明的出血性疾病原因不明的出血性疾病。繼發(fā)性血小板增多。多為繼發(fā)性血小板增多。多為暫時性暫時性的，見于的，見于急性、慢性出血，骨折，創(chuàng)傷，手術(shù)后；急性、慢性出血，骨折，創(chuàng)傷，手術(shù)后；也可見于其他也可

60、見于其他骨髓增生性疾病骨髓增生性疾病，如真性紅，如真性紅細胞增多癥；慢性粒細胞性白血病、肺炎、細胞增多癥；慢性粒細胞性白血病、肺炎、胸膜炎及傳染性胸膜肺炎等。胸膜炎及傳染性胸膜肺炎等。第一百零五頁，共126頁。2.2.血小板數(shù)減少：血小板數(shù)減少：血小板生成減少血小板生成減少: :見于穗狀葡萄菌見于穗狀葡萄菌中毒病中毒病、某些真菌毒素某些真菌毒素中毒中毒、某些蕨類植物、某些蕨類植物中毒中毒、馬傳染性貧血和急性白血病馬傳染性貧血和急性白血病、敗血性疾病敗血性疾病等。等。血小板破壞過多血小板破壞過多: :見于見于免疫性免疫性血小板減少性血小板減少性紫斑（同族免疫性、自體免疫性）、感染紫斑（同族免疫性