XXXX年careHPV產品培訓

1、Sample & Assay Technologies12013年年careHPV 產品培訓產品培訓 Sample & Assay Technologies2HPV與子宮頸癌HPV致癌過程致癌過程2008年諾貝爾醫(yī)學獎獲得者：楚爾年諾貝爾醫(yī)學獎獲得者：楚爾.豪森豪森Sample & Assay Technologies3確定疾病疾病病理預防疾病子宮頸癌的預防史組織細胞分子2003年1925年1942年1996年2001年2006年2012年一級預防二級預防三級預防宮頸癌陰道鏡PAPLBCTBSHC2careHPVGardasilHPVCervarixSample &am

2、p; Assay Technologies4陰道鏡+組織活檢1925年德國學者HansHinselman發(fā)明了陰道鏡（colposcope）Sample & Assay Technologies5陰道鏡+組織活檢CT=結締組織 BM=基底膜L1=基底細胞（1層）L2= 副基底細胞（2層）L3=中間層細胞（約8層）L4=表層細胞（約5至6層）L5=脫落的表層鱗狀細胞 ）正常宮頸上皮結構Sample & Assay Technologies6陰道鏡+組織活檢CIN 宮頸上皮內瘤變（ Cervical intraepithelial neoplasia ）CIN1：上皮層的下1/3細

3、胞成熟紊亂，伴細胞核異型。CIN2伴挖空細胞變化：上皮層下1/2的結構紊亂并出現(xiàn)符合惡性和病毒感染的細胞學標準。CIN3：幾乎全層的上皮細胞結構紊亂，細胞和胞核顯著異型，可見典型和不典型核分裂。正常宮頸上皮 宮頸管（A=宮頸外口，B=宮頸峽部，C=宮頸腺體的分布區(qū)域）Sample & Assay Technologies7陰道鏡+組織活檢 根據Hamperl的分類：I=CIN2，II=原位癌累及腺體，III=早期間質浸潤，IV=微小浸潤癌， IV a= 明顯間質浸潤，IVb= 明顯向外生長的腫塊(見 TNM 和 FIGO分類)。.微浸潤性鱗狀細胞癌癌前病變的演變和癌Sample &am

4、p; Assay Technologies8細胞學（CTOLOGY）- PAP（巴氏涂片）巴氏涂片（PAP SMEAR）于1943年Papanikolaou發(fā)表文獻報道巴氏分級巴氏分級巴氏I級正常涂片中沒有不正常細胞。巴氏級炎癥炎癥引起的細胞異形改變。巴氏級核異質細胞變化嚴重，可能由炎癥或腫瘤引起，但不能肯定，需進一步隨診檢查確診。巴氏級可疑癌高度懷疑是宮頸癌。巴氏級癌確定是宮頸癌。Georgios Papanikolaou (1883-1962) Sample & Assay Technologies9細胞學（CTOLOGY）- PAP（巴氏涂片）巴氏涂片巴氏涂片法的特點：巴氏涂片法

5、的特點：n厚度不均，細胞重疊多，背景不干凈n假陰性率高，檢測結果可信度低液基細胞液基細胞學的特點：液基細胞學的特點：n薄層涂片，結構清晰，背景干凈。n提高了陽性檢測率，減少了漏診。Sample & Assay Technologies10細胞學（CTOLOGY）- LBC（液基細胞學）LBC（液基細胞學）-ThinPrep （HOLOGIC）、SurePath（BD）SurePath cytology collection systemThinPrep cytology collection systemSurePath梯度離心細胞富集技術ThinPrep膜吸附技術Sample &am

6、p; Assay Technologies11細胞學（CTOLOGY）- TBS（The Bethesda System）2001 TBS（上皮細胞異常（上皮細胞異常 ）-鱗狀細胞鱗狀細胞 * 非典型鱗狀細胞（ASC） - 意義不明(ASC-US) - 不除外上皮內高度病變(ASC-H) * 鱗狀上皮內低度病變（LSIL）* 鱗狀上皮內高度病變（HSIL） * 鱗狀細胞癌-腺細胞腺細胞 * 非典型（AGC） * 頸管原位腺癌（AIS） * 腺癌Sample & Assay Technologies12ASC-US：非典型鱗狀細胞：非典型鱗狀細胞-意義不明確意義不明確Sample &am

7、p; Assay Technologies13鱗狀上皮低度病變（鱗狀上皮低度病變（LISL）Sample & Assay Technologies14鱗狀上皮高度病變（鱗狀上皮高度病變（HISL）Sample & Assay Technologies15Marie-Helene Mayrand, M.D.,2007Sample & Assay Technologies16細胞學技術流程Sample & Assay Technologies17盡管細胞學篩查的廣泛應用，但腺癌的死亡率卻在增加美國子宮頸腺細胞癌的發(fā)生增加Age-adjusted rates per

8、100,000 women in the US0123456789101973197719781982198319871988199219931996鱗鱗癌癌腺癌腺癌A=宮頸外口B=宮頸峽部C=宮頸腺體的分布區(qū)域Sample & Assay Technologies18digene HC2- Hybrid Capture 2雜交捕獲第二代技術HC2 在分子水平上檢測在分子水平上檢測WHO認定的認定的13種高危型種高危型HPV病毒病毒（當前（當前HPV檢測的金標準）檢測的金標準）1、DNA變性2、全長RNA雞尾酒探針雜交3、抗體捕獲4、二抗結合5、信號檢測HC2 檢測原理檢測原理Samp

9、le & Assay Technologies19Marie-Helene Mayrand, M.D.,2007Sample & Assay Technologies20宮頸癌篩查方法敏感性比較Sample & Assay Technologies21Sample & Assay Technologies22HC2 HPV檢測作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析檢測作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析高危型高危型HPV DNA檢測可作為宮頸癌初檢測可作為宮頸癌初篩方法的有效性研究篩方法的有效性研究中國以人群為中國以人群為基礎的基礎的17個篩查研究綜合分析個篩查研究綜

10、合分析Sample & Assay Technologies23CIN2+平均敏感性平均敏感性96.3%CIN3+平均敏感性平均敏感性97.5%HC2 HPV檢測作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析檢測作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析Sample & Assay Technologies24確定疾病疾病病理預防疾病組織細胞分子2003年1925年1942年1996年2001年2008年2012年一級預防二級預防三級預防宮頸癌陰道鏡PAPLBCTBSHC2ASCUS分流（FDA 1999）GardasilHPVCervarixHC230歲以上婦女聯(lián)合細胞學篩查（FDA 2003）

11、HC225-64歲婦女宮頸癌初篩（EUROGIN）Sample & Assay Technologies25子宮頸癌篩查方案Sample & Assay Technologies26發(fā)展中國家子宮頸癌發(fā)病數(shù)量占全球總數(shù)的85%子宮頸癌篩查面臨的現(xiàn)狀69.2 69.17.745.3發(fā)達國家發(fā)達國家發(fā)展中國家發(fā)展中國家乳腺癌宮頸癌IARC, Globacan 2008Sample & Assay Technologies27宮頸癌篩查的挑戰(zhàn)宮頸癌篩查的挑戰(zhàn)TextTextTextTextTextText水電專有實驗室冷藏運輸條件專業(yè)技術人員醫(yī)療條件Sample &

12、Assay Technologies28careHPV的誕生背景比爾&梅琳達蓋茨基金出資成立國際宮頸癌防治聯(lián)盟（ACCP）帕斯（美國適宜衛(wèi)生科技組織）在ACCP的經驗基礎上啟動START項目PATH與QIAGEN共同協(xié)作下完成了careHPV快速檢測系統(tǒng)可靠性驗證careHPVSTART-UP1999年2003年2008年Sample & Assay Technologies29喬友林 教授 首位獲得IARC獎章的中國科學家Sample & Assay Technologies30比爾.蓋茨夫婦參觀凱杰公司和care HPV檢測現(xiàn)場演示Sample & Assa

13、y Technologies31careHPV 產品組成振蕩器振蕩器 基因雜交信號擴大儀基因雜交信號擴大儀磁性板架磁性板架控制器控制器care宮頸刷宮頸刷 & 宮頸細胞保存液宮頸細胞保存液1ml/管，50管/盒，15-30 保存24個月 careHPV試劑盒：試劑盒：96測試/盒，4-25 可保存可保存12個月個月Sample & Assay Technologies32 簡便、準確、高效簡便、準確、高效試劑顏色編碼操作數(shù)字編碼簡單易學即可用交流電供電，也可用蓄電池供電，2.5小時出檢測結果實現(xiàn)即時檢測，及時追蹤careHPV是一套完整的檢測系統(tǒng)，實驗在15-40度環(huán)境下都可進

14、行,無需專用實驗室試劑低溫冷凍成干粉可在常溫下運輸試劑盒自帶洗液不需額外準備Sample & Assay Technologies33careHPV 檢測原理（HC2 + 磁珠捕獲法）Sample & Assay Technologies34careHPV 臨床驗證數(shù)據35，000人份全球開展careHPV 臨床驗證研究的分布區(qū)域Sample & Assay Technologies35careHPV 臨床驗證數(shù)據35，000人份HPVToday 2791.5%95.8%Sample & Assay Technologies36careHPV 最簡便、可靠的子宮

15、頸癌篩查方法Sample & Assay Technologies37careHPV vs PapcareHPV細胞學從分子生物學層面進行檢測：針對HPV潛伏期、感染期、亞臨床期、臨床癥狀期、癌癥相關期均可?？深A測疾病風險。從形態(tài)學層面進行檢測：只針對臨床癥狀期、癌癥相關期，不可預測風險，只能描述當前情況。臨床敏感度達90%，客觀的檢測方法，不受人為因素的影響，準確可靠，漏診率低 臨床敏感度50%-70%，專家水平也只有85%左右，主觀的檢測方法，無法避免人為因素的干擾，結果有一定的可疑性漏診率高一次檢測結果陰性可在3-5年再常規(guī)篩查。必須每年篩查一次對人員要求低，簡單培訓即可操作，機

16、器判讀，對專業(yè)知識要求低對人員要求高，必須經過專業(yè)培訓，人工判讀，必須要有較好的專業(yè)知識2.5小時可出結果，實現(xiàn)即時檢測及時追蹤難以實現(xiàn)當天出結果，報告周期長Sample & Assay Technologies38careHPV vs PCRcareHPVPCR全長探針，全長探針，87.8-95.8% L1片段為引物，缺失而漏診，片段為引物，缺失而漏診，83%左右左右無需無需DNA純化純化酶促反應，為避免酶被抑制，需要酶促反應，為避免酶被抑制，需要DNA純化純化實驗室條件要求低實驗室條件要求低專門的專門的PCR實驗室（通過臨檢中心認證）實驗室（通過臨檢中心認證）實驗操作占地面積小，實驗操作占地面積小，140cm寬寬 x 64cm深深 x 64cm高。高。實驗占地面積大，三個獨立的實驗區(qū)域最少需