細(xì)胞融合的原理與技術(shù)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上細(xì)胞融合的原理與技術(shù)摘要：細(xì)胞工程是生物工程主要組成之一，出現(xiàn)于20世紀(jì)70年代末至80年代初，是在細(xì)胞水平上改變細(xì)胞的遺傳特性或通過(guò)大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)以獲得人們所需物質(zhì)的技術(shù)過(guò)程。隨著細(xì)胞融合技術(shù)的不斷改進(jìn)和完善，動(dòng)物、植物及微生物細(xì)胞融合技術(shù)無(wú)論在基礎(chǔ)理論研究還是在實(shí)際應(yīng)用中產(chǎn)生的影響將日益顯著。1.細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合技術(shù)是20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新興細(xì)胞工程技術(shù)。細(xì)胞融合(cell fusion)也稱細(xì)胞雜交( cellhybridization) 、原生質(zhì)體融合(protoplast fusion)或體細(xì)胞雜交(somatic hybridizatio

2、n), 是指細(xì)胞通過(guò)介導(dǎo)和培養(yǎng), 在離體條件下用人工方法將不同種的細(xì)胞通過(guò)無(wú)性方式融合( 合并) 成一個(gè)核或多核的雜合細(xì)胞的過(guò)程。體細(xì)胞融合后可形成四倍體或多倍體細(xì)胞，由此形成的雜交細(xì)胞，其特性會(huì)有很大的變化。細(xì)胞融合大體分三個(gè)階段進(jìn)行。第一階段是制出細(xì)胞融合體。首先要用氧把細(xì)胞分散開(kāi)，再把細(xì)胞壁溶解掉，這時(shí)的細(xì)胞就成了原生質(zhì)體。原生質(zhì)體用聚乙烯乙二醇(PEG)處理后，再把PEG洗掉，形成原生質(zhì)體的結(jié)合。第二階段是融合子的鑒定。利用利于融合子生存的培養(yǎng)基刪選出已經(jīng)融合的雜種細(xì)胞。第三階段是培養(yǎng)融合細(xì)胞階段。融合細(xì)胞在細(xì)菌培養(yǎng)基或是不含有細(xì)菌的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)合細(xì)胞反復(fù)分裂后，形成細(xì)胞團(tuán)

3、，把細(xì)胞團(tuán)移植于含有植物激素的培養(yǎng)基里長(zhǎng)出莖、葉，再把它們移植于土壤之中或嫁接于植物體上，繼續(xù)生長(zhǎng)形成新植物。1.1動(dòng)物細(xì)胞融合一些致癌病毒雖然能夠誘導(dǎo)細(xì)胞融合,但由于具有毒性大等潛在的危險(xiǎn)性而在應(yīng)用上受到很大的限制,由此科研人員又試圖嘗試使用滅活的病毒來(lái)作為促融物,并且以異種細(xì)胞作為融合對(duì)象。1965年,英國(guó)Harris等報(bào)告滅活病毒可以用來(lái)融合不同種動(dòng)物的細(xì)胞,并且指出由此產(chǎn)生的雜交細(xì)胞可以存活。當(dāng)時(shí)世界上許多報(bào)刊很快就對(duì)這一發(fā)現(xiàn)在生物學(xué)上的重要性做出了評(píng)價(jià),認(rèn)為這是在細(xì)胞融合研究中的又一次突破。他們的貢獻(xiàn)在于證明了滅活的病毒可以作為一般方法用來(lái)在一定的條件下融合動(dòng)物細(xì)胞,而且差異很大的動(dòng)

4、物種之間的細(xì)胞可以被誘導(dǎo)融合,融合的細(xì)胞可以存活。1967年Weise和Green發(fā)現(xiàn)在人和鼠的融合細(xì)胞中,人的染色體優(yōu)先丟失,并證明利用這一特點(diǎn)有可能對(duì)人染色體上的基因進(jìn)行定位。1970年Ladda又進(jìn)一步發(fā)展了去核的小鼠成纖維細(xì)胞進(jìn)行融合實(shí)驗(yàn),開(kāi)始了各種細(xì)胞重組的研究工作。從發(fā)現(xiàn)病毒能夠誘導(dǎo)細(xì)胞融合之后,動(dòng)物細(xì)胞融合的研究工作迅速發(fā)展起來(lái)。然而,由于HVJ誘導(dǎo)細(xì)胞融合存在著病毒制備困難、操作復(fù)雜、滅活病毒的效價(jià)差異大等原因,人們一直試圖發(fā)現(xiàn)一種替代物作介質(zhì)誘導(dǎo)細(xì)胞融合。1.2植物細(xì)胞融合植物細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展可追溯到1937年,Mi-chel用0. 5 mol/L硝酸鈉處理原生質(zhì)體使之凝集

5、、融合。但那時(shí)還不能用酶法大量制備原生質(zhì)體,使實(shí)驗(yàn)受到原生質(zhì)體數(shù)量的限制,因此植物細(xì)胞融合的起步比動(dòng)物細(xì)胞融合要遲十年左右。直到1960年Cocking用酶法大量制備有活力的原生質(zhì)體獲得成功,才使植物原生質(zhì)體的融合工作迅速發(fā)展起來(lái)。1972年美國(guó)科學(xué)家Carlson等將粉藍(lán)煙草和郎氏煙草兩個(gè)異種的體細(xì)胞融合成功。20世紀(jì)70年代,細(xì)胞融合的研究范圍又?jǐn)U展到植物間、動(dòng)物間、動(dòng)植物間、甚至人體細(xì)胞與動(dòng)植物細(xì)胞之間。1.3微生物細(xì)胞融合1975年原生質(zhì)體融合技術(shù)已擴(kuò)展運(yùn)用到微生物中,匈牙利的Ferenczy首先報(bào)道PEG促使真菌融合,以后的成功報(bào)道涉及酵母、霉菌、細(xì)菌、放線菌等多種微生物的種間以至屬

6、間,使細(xì)胞融合技術(shù)繼動(dòng)、植物之后,在微生物中也形成了實(shí)驗(yàn)體系。2.細(xì)胞融合技術(shù)細(xì)胞融合技術(shù)作為細(xì)胞工程的核心基礎(chǔ)技術(shù)之一,已在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保等領(lǐng)域取得了開(kāi)創(chuàng)性的研究成果,而且應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)大。細(xì)胞融合技術(shù)不僅為核質(zhì)關(guān)系、基因調(diào)控、遺傳互補(bǔ)、細(xì)胞免疫學(xué)、腫瘤發(fā)生、基因定位、衰老控制等理論領(lǐng)域的研究提供了有力的手段,而且被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、遺傳學(xué)、發(fā)生生物學(xué),特別是在單克隆抗體及動(dòng)植物遠(yuǎn)緣雜交育種等方面具有十分重要的意義。細(xì)胞融合技術(shù)大體上可分為化學(xué)誘導(dǎo)融合、生物誘導(dǎo)融合和物理誘導(dǎo)融合三類。2.1化學(xué)誘導(dǎo)融合2.1.1鹽類融合法此法是應(yīng)用最早的誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法。鹽類融合劑對(duì)原生質(zhì)體的破壞小

7、。今后研究應(yīng)提高其融合率 ,使其對(duì)液泡化發(fā)達(dá)的原生質(zhì)體能夠誘發(fā)融合。 2.1.2高鈣和高 pH值融合法Keller首先發(fā)現(xiàn)高 Ca2 +和高 pH值可以誘發(fā)融合。Melchers用此法將煙草種內(nèi) 2個(gè)光敏感突變體誘導(dǎo)融合成功并獲得 100余株體細(xì)胞雜種。提高該方法的使用范圍是亟待解決的問(wèn)題。 2.1.3聚乙二醇融合法 ( PEG法)1974 年發(fā)現(xiàn)的高效融合劑聚乙二醇(PEG)使不同科屬的植物原生質(zhì)體之間都可以融合，融合率可達(dá)30%。聚乙二醇是乙二醇的多聚化合物，存在一系列不同分子量的多聚體。PEG可與水分子借氫鍵結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞脫水而發(fā)生質(zhì)膜結(jié)構(gòu)的變化，從而引起細(xì)胞融合。為了發(fā)揮PEG 促進(jìn)細(xì)

8、胞融合的效力，必須采用較高的濃度(40%50%，分子量為6000)，但PEG 在高濃度下，細(xì)胞可能因脫水而受到顯著的破壞。因此，選擇合適的分子量、濃度及作用時(shí)間是PEG融合技術(shù)的關(guān)鍵。影響原生質(zhì)體融合的因素很多。特別是環(huán)境中的陽(yáng)離子存在，融合時(shí)的pH 也對(duì)原生質(zhì)體融合有較明顯的影響。一般來(lái)講鈣、鎂離子有助于融合。如有鈣離子存在時(shí)，可得到較高的融合率。但在缺乏鈣離子時(shí)，若pH 較低，融合頻率也較高。這是因?yàn)殁}離子和帶負(fù)電荷的PEG與細(xì)胞膜表面分子相互作用，使原生質(zhì)體帶電，彼此易于附著發(fā)生凝集所致。PEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合由于具有容易制備和控制、活性穩(wěn)定、使用方便等特點(diǎn)，在細(xì)胞融合領(lǐng)域取得了可喜的成績(jī)，

9、大量的研究仍采用此法。雖然PEG作為融合劑有很多成功的報(bào)道，但存在著對(duì)細(xì)胞損傷大、殘存有毒性、融合率較底及經(jīng)驗(yàn)性大等缺陷。2.2 物理誘導(dǎo)融合2.2.1細(xì)胞電融合技術(shù)細(xì)胞電融合是以脂質(zhì)膜和脂質(zhì)一蛋白質(zhì)膜的電學(xué)性質(zhì)為基礎(chǔ)的，以雙向電泳和電子擊穿細(xì)胞質(zhì)膜的聯(lián)合作用為手段，和細(xì)胞電注射構(gòu)成一對(duì)互補(bǔ)技術(shù)。在短時(shí)間強(qiáng)電場(chǎng)的作用下，細(xì)胞膜發(fā)生可逆性電擊穿(Reverisb leb reakdown)，瞬時(shí)失去其高電阻和低通透特性，然后在數(shù)分鐘后恢復(fù)原狀。當(dāng)可逆電擊穿發(fā)生在兩個(gè)相鄰細(xì)胞的接觸區(qū)時(shí)，即可誘導(dǎo)他們的膜相互融合，從而導(dǎo)致細(xì)胞融合。細(xì)胞融合分為兩步：第一步是建立細(xì)胞間接觸(cell-to-cell

10、contact) ； 第二步，接受區(qū)膜結(jié)構(gòu)受擾動(dòng)而紊亂，然后恢復(fù)并融合。根據(jù)其誘導(dǎo)細(xì)胞接觸的性質(zhì)，分為特異性和非特異性兩大類。非特異性細(xì)胞電融合法是指在進(jìn)行細(xì)胞電融合時(shí)，無(wú)法排除親本細(xì)胞的自體融合而只進(jìn)行雙親本間的細(xì)胞雜交融合。主要原因是細(xì)胞間的相互接觸是無(wú)選擇性的，是非特異性細(xì)胞聚集。非特異性電融合技術(shù)包括細(xì)胞物理聚集電融合法和細(xì)胞化學(xué)聚集電融合法。細(xì)胞融合所必需的兩個(gè)步驟為：細(xì)胞間接觸；接觸區(qū)的膜結(jié)構(gòu)受到瞬間擾動(dòng)而導(dǎo)致融合。只要其中的任意一步有特異性，就能形成特異性的細(xì)胞融合。與使用PEG的化學(xué)法相比，電融合誘導(dǎo)法是一種非常高效的細(xì)胞融合方法。電融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于：融合頻率高，是PEG的1

11、00倍；操作簡(jiǎn)便、快速；對(duì)細(xì)胞無(wú)毒；可在鏡下觀察融合過(guò)程。故這種方法得以在短期內(nèi)被廣泛采用，成為細(xì)胞融合的主要技術(shù)手段。該方法的缺點(diǎn)是必須購(gòu)置專用的細(xì)胞電融合設(shè)備。2.2.2 激光誘導(dǎo)法激光誘導(dǎo)細(xì)胞融合術(shù)是利用激光微束對(duì)相鄰細(xì)胞接觸區(qū)的細(xì)胞膜進(jìn)行破壞(或擾動(dòng))，可將兩個(gè)不同特性、不同大小的細(xì)胞在顯微鏡下實(shí)現(xiàn)融合。即利用光鑷捕捉并拖動(dòng)一個(gè)細(xì)胞使之靠近另一個(gè)細(xì)胞并緊密接觸，然后對(duì)接觸處進(jìn)行脈沖激光束處理，使質(zhì)膜發(fā)生光擊穿，產(chǎn)生微米級(jí)的微孔。這樣，由于質(zhì)膜上微孔的可逆性，細(xì)胞開(kāi)始變形融合，最終成為一個(gè)細(xì)胞。使用此技術(shù)時(shí)， 使細(xì)胞接觸的方法可用光俘虜法；用低濃度的融合劑PEG (5% )使細(xì)胞聚法。目

12、前，最新穎的方法是利用激光光阱建立兩細(xì)胞間接觸，即光鑷(potical tweezers)利用激光高斯光束光場(chǎng)的梯度力把細(xì)胞從光束邊緣拉向光束中間，在光斑直徑與光波波長(zhǎng)尺度相比擬時(shí)，指向束腰的軸向梯度力要大于沿光束方向的散射力，該梯度力把細(xì)胞豎直地拉到激光束腰下方處，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的操作。激光微束融合法與病毒法、PEG法、電融合法相比較，可選擇任意兩個(gè)細(xì)胞進(jìn)行融合，易于實(shí)現(xiàn)特異性細(xì)胞融合，作用于細(xì)胞的應(yīng)力小，定時(shí)、定位性強(qiáng)，損傷小，參數(shù)易于控制，操作方便，可利用監(jiān)控器清晰地觀察整個(gè)融合過(guò)程，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，無(wú)菌，無(wú)毒性。但它只能逐一處理細(xì)胞，不能像其他方法一樣同時(shí)處理大量細(xì)胞。而且由于其所需設(shè)備

13、昂貴復(fù)雜，操作技術(shù)難度大，很難推廣應(yīng)用。在微生物原生質(zhì)體融合中應(yīng)用激光微束技，融合效率較低且喪失了高度選擇性的優(yōu)點(diǎn)有賴后續(xù)步驟檢出融合子激光誘導(dǎo)融合技術(shù)仍處在發(fā)展初期，還有待進(jìn)一步完善。2.3生物誘導(dǎo)融合(仙臺(tái)病毒(HvJ)誘導(dǎo)法)1962年日本的岡田善雄(Okada)偶然發(fā)現(xiàn)了由日本血凝性病毒(HVJ)或稱仙臺(tái)病毒引起的艾氏腹水瘤細(xì)胞融合成多核細(xì)胞的現(xiàn)象。岡田善雄的研究為人工誘導(dǎo)體細(xì)胞雜交奠定了方法學(xué)基礎(chǔ)。細(xì)胞融合現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)引起細(xì)胞學(xué)界的高度重。1965年英國(guó)的Harris和Watkins在利用滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合方面做了大量的工作，并進(jìn)一步利用這種滅活病毒來(lái)誘導(dǎo)不同種動(dòng)物細(xì)胞間的融合。自從

14、發(fā)現(xiàn)活病毒可在體內(nèi)介導(dǎo)癌細(xì)胞融合后，人們又實(shí)現(xiàn)了滅活病毒促進(jìn)動(dòng)物異種細(xì)胞的融合，從而打破了細(xì)胞融合的種屬屏障，推動(dòng)細(xì)胞融合技術(shù)躍上新的臺(tái)階。但是，利用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合，存在著許多問(wèn)題，如病毒制備困難、操作復(fù)雜、滅活病毒的效價(jià)差異大、實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性差、融合率很低等。目前，這種方法主要適用于動(dòng)物細(xì)胞融合，用于實(shí)驗(yàn)室研究。2.4新細(xì)胞融合技術(shù)2.4.1離子束細(xì)胞融合技術(shù)雷電、輻射等自然過(guò)程中產(chǎn)生的低能離子可作用于生物體，20世紀(jì)80 年代中期，中國(guó)科學(xué)院等離子體物理研究所余增亮等人發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了離子注入生物效應(yīng)和粒子沉積生物效應(yīng)的存在，建立了質(zhì)量、能量、電荷三因子作用機(jī)制體系。在離子束與生物體相互

15、作用中，粒子的植入、動(dòng)量的傳遞和電荷交換可導(dǎo)致細(xì)胞表面被刻蝕，引起細(xì)胞膜透性和跨膜電場(chǎng)的改變，據(jù)此原理，發(fā)展了離子束誘導(dǎo)細(xì)胞融合技術(shù)。由于用于輻照的離子束的參數(shù)除了能量可調(diào)外，離子種類、電荷、質(zhì)量皆可調(diào)，因此，離子束的可操縱性高，可以用微束對(duì)細(xì)胞進(jìn)行超微加工，有目的地切割染色體用于基因工程和細(xì)胞工程，通過(guò)消除部分染色體或染色體的某些片段達(dá)到細(xì)胞非對(duì)稱融合的目的。此項(xiàng)研究一旦成功，將改變傳統(tǒng)的一對(duì)一細(xì)胞融合的弊端，減少供體細(xì)胞導(dǎo)入的染色體范圍，使融合更具目的性，大大減少篩選的工作量，將是細(xì)胞融合研究的一大進(jìn)步。2.4.2空間細(xì)胞融合技術(shù)植物細(xì)胞融合過(guò)程中由于地面上地球重力的存在，有液泡的原生質(zhì)體

16、與無(wú)液泡的原生質(zhì)體的密度差加大，異源細(xì)胞融合得率十分有限。在利用動(dòng)物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過(guò)程中，在地面上由于無(wú)法排除地球重力的影響，要提高B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合得率相當(dāng)困難?？臻g站微重力環(huán)境沒(méi)有重力沉降、熱對(duì)流和靜水壓等特點(diǎn)，不僅是研究重力生物學(xué)問(wèn)題的理想場(chǎng)所，而且也為那些在地面因重力限制而難以發(fā)展的生物技術(shù)提供了新的機(jī)遇。20世紀(jì)80年代以來(lái)，德國(guó)細(xì)胞電融合技術(shù)發(fā)明家Zimmermann等人在空間材料科學(xué)的啟發(fā)下，試圖利用空間微重力條件改進(jìn)細(xì)胞融合技術(shù)。大量的飛行實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在微重力條件下酵母細(xì)胞雜種得率有很大的增加。融合得率增加顯然是由于沒(méi)有重力沉降影響的緣故，雜種細(xì)胞活力增加可

17、能是細(xì)胞排列時(shí)間縮短引起的。最近的飛行試驗(yàn)結(jié)果表明在微重力條件下，哺乳動(dòng)物細(xì)胞融合得率增加10倍，有活力的雜種細(xì)胞數(shù)比地面對(duì)照增加2倍。植物有無(wú)液泡原生質(zhì)體的電融合得率，在微重力條件下比地面增加10-15倍。在取得這些成功實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究融合后的細(xì)胞在空間培養(yǎng)的可能性已經(jīng)開(kāi)始。2.4.3非對(duì)稱細(xì)胞融合技術(shù)即利用某種外界因素(常為射線，即融合，gamma-fusion) 輻照某一細(xì)胞原生質(zhì)體，選擇性地破壞其細(xì)胞核。并用碘乙酰胺堿性蕊香紅6 G處理在細(xì)胞核中含有優(yōu)良基因的第二種原生質(zhì)體，選擇性地使其細(xì)胞質(zhì)失活。然后融合來(lái)自這兩個(gè)原生質(zhì)體品系的細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)所需胞質(zhì)和細(xì)胞核基因的優(yōu)化組合，或

18、使前者被打碎的細(xì)胞核染色體片段中的個(gè)別基因滲入到后者原生質(zhì)體的染色體內(nèi)，實(shí)現(xiàn)有限基因的轉(zhuǎn)移，從而在保留親本之一全部?jī)?yōu)良性狀的同時(shí)改良其某個(gè)不良性狀。實(shí)踐表明非對(duì)稱細(xì)胞融合技術(shù)通過(guò)射線和X射線等照射，為實(shí)現(xiàn)供體親本少數(shù)基因的轉(zhuǎn)移，創(chuàng)造種間、屬間雜種提供了可能性。值得注意的是，此方法特別適用于細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因的轉(zhuǎn)移，通過(guò)輻照胞質(zhì)不育的原生質(zhì)體，破壞其染色體，與其具有優(yōu)良性狀品種的原生質(zhì)體融合，從而獲得實(shí)用的新的胞質(zhì)不育系。這些都是常規(guī)育種所做不到的。2.4.4高通量細(xì)胞融合芯片高通量細(xì)胞融合芯片利用微電極陣列在微米范圍內(nèi)(1040m)產(chǎn)生的高強(qiáng)度、高梯度輻射電場(chǎng)，使得細(xì)胞在特殊輻射電場(chǎng)的作用下產(chǎn)

19、生介電質(zhì)電泳力，精確處理和刺激預(yù)定的目標(biāo)細(xì)胞，從而使目標(biāo)細(xì)胞按照預(yù)先設(shè)計(jì)的方向(可以是任何預(yù)先設(shè)計(jì)好的方向)以預(yù)定的速度(可以是不同種的細(xì)胞以不同的速度定向)移動(dòng)，從而按照設(shè)計(jì)要求準(zhǔn)確地、大批量地得到目標(biāo)細(xì)胞配型，集成微電極陣列的微流控系統(tǒng)，可以方便靈活地實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的操作、隔離和轉(zhuǎn)移由于在微通道內(nèi)微電極間距可以做得很小，因此獲得同樣強(qiáng)度的輻射電場(chǎng)強(qiáng)度只需施加較低電壓的交變電場(chǎng)和脈沖即可，不用加載昂貴的高電壓發(fā)生裝置。高通量細(xì)胞融合芯片可以與化學(xué)誘導(dǎo)融合、電誘導(dǎo)融合等方法相互結(jié)合，比如：在細(xì)胞融合緩沖液中加入少量的PEG可大大提高細(xì)胞的融合率此外，二價(jià)陽(yáng)離子(例如：鈣離子)以及蛋白酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行預(yù)

20、處理，融合率也可大幅提高。2.4.5基于微流控芯片的細(xì)胞融合技術(shù)隨著微機(jī)電系統(tǒng)(MEMS)技術(shù)和微加工技術(shù)的發(fā)展。微電極陣列的設(shè)計(jì)加工制作也日趨成熟，加之微通道網(wǎng)絡(luò)可以整合到生物芯片之上，這將使得微流控系統(tǒng)成為細(xì)胞融合的理想平臺(tái)，利用微流控系統(tǒng)可以按照預(yù)定的要求大量融合異種細(xì)胞。目前，基于微流控芯片的細(xì)胞融合技術(shù)已成為細(xì)胞融合技術(shù)研究的重點(diǎn)領(lǐng)域。利用基于芯片技術(shù)的微流控系統(tǒng)不僅可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞甚至單個(gè)細(xì)胞的操控，比如轉(zhuǎn)移、定位、變形等，也可以同時(shí)輸送、合并、分離和分選大量細(xì)胞，細(xì)胞融合在芯片上可以通過(guò)并行或快速排隊(duì)的方式實(shí)現(xiàn)此外由于在微通道內(nèi)的腔體容積很小，所以會(huì)大幅減少細(xì)胞融合中所需的細(xì)胞數(shù)量，同時(shí)細(xì)胞融合率和雜合細(xì)胞的成活率會(huì)大大提高。3.細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用及發(fā)展前景縱觀細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展歷史，細(xì)胞融合技術(shù)的不斷改進(jìn)一方面表現(xiàn)在融合劑上，另一方面體現(xiàn)在新方法上，再者體現(xiàn)在融合對(duì)象的不斷擴(kuò)展上。融合劑走過(guò)了從活病毒，滅活病毒生物階段到PEG化學(xué)物質(zhì)階段；新方法不斷涌現(xiàn)，從生物學(xué)，化學(xué)方法，物理學(xué)方法過(guò)渡到各種方法的綜合應(yīng)用乃至應(yīng)用空間技術(shù)。