除菌過濾法規(guī)要求和相關(guān)方案(簡化-chj)

1、新版GMP對除菌過濾的要求和相關(guān)解決方案2DisclaimerThis presentation is the Confidential work product of Pall Corporation and no portion of this presentation may be copied, published, performed, or redistributed without the express written authority of a Pall corporate officer. Pall Corporation3提綱 新版GMP的要求概述除菌過濾工藝 滅菌方法

2、決策樹的理念滅菌方法決策樹的理念 “除菌級”過濾器 過濾器的完整性 過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證 氣體過濾器的選擇 過濾器滅菌方式的選擇4附錄1 無菌藥品 第十一章 滅菌工藝第六十一條 無菌藥品應(yīng)當(dāng)盡可能采用加熱方式進(jìn)行最終滅菌，最終滅菌產(chǎn)品中的微生物存活概率（即無菌保證水平，SAL）不得高于10-6。采用濕熱滅菌方法進(jìn)行最終滅菌的，通常標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0值應(yīng)當(dāng)大于8分鐘，流通蒸汽處理不屬于最終滅菌。 對熱不穩(wěn)定的產(chǎn)品，可采用無菌生產(chǎn)操作或過濾除菌的替代方法 EU GMP Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products (2008) 無菌藥品的生產(chǎn)8

3、3. Where possible, heat sterilisation is the method of choice. 新版GMP5附錄1 無菌藥品第七十五條 （一）可最終滅菌的產(chǎn)品不得以過濾除菌工藝替代最終滅菌工藝。如果藥品不能在其最終包裝容器中滅菌，可用0.22m（更小或相同過濾效力）的除菌過濾器將藥液濾入預(yù)先滅菌的容器內(nèi)。由于除菌過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可采用熱處理方法來彌補(bǔ)除菌過濾的不足。 （二）應(yīng)當(dāng)采取措施降低過濾除菌的風(fēng)險(xiǎn)。宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器再次過濾藥液，最終的除菌過濾濾器應(yīng)當(dāng)盡可能接近灌裝點(diǎn)。新版GMP6歐盟GMP Annex 1 Manufactur

4、e of Sterile Medicinal Products (2008)無菌藥品的生產(chǎn) 110. 一般認(rèn)為，如果可能在藥品最終容器中對藥品滅菌，僅僅利用過濾并不足以達(dá)到滅菌目的。在目前可用的滅菌方法中，應(yīng)當(dāng)首選蒸汽滅菌。 111. Due to the potential additional risks of the filtration method as compared with other sterilization processes, a second filtration via a further sterilised micro-organism retaining f

5、ilter, immediately prior to filling, may be advisable. The final sterile filtration should be carried out as close as possible to the filling point.7滅菌方法決策樹 Decision Trees for the Selection of Sterilisation Methods (CPMP/QWP/O54/98)滅菌方法決策樹 簡介 （Introduction）u應(yīng)當(dāng)盡可能采用在產(chǎn)品最終容器中滅菌。如果因?yàn)楫a(chǎn)品處方的穩(wěn)定性不能采用最終熱滅菌的，則

6、應(yīng)采用最終滅菌方法的替代方法，過濾除菌和/或無菌工藝。 水基溶液制品 （Aqueous Products) 非水液體、半固體或干粉劑 (Non-aqueous Liquid, Semi-solid or Dry Powder Products)8產(chǎn)品是否可以在產(chǎn)品是否可以在 121121濕熱滅濕熱滅菌菌 15 15 分鐘分鐘產(chǎn) 品 是 否 可 以 濕 熱 滅 菌產(chǎn) 品 是 否 可 以 濕 熱 滅 菌 Fo8 Fo8 分鐘，達(dá)到分鐘，達(dá)到 SAL10SAL10-6-6采用高壓滅菌鍋采用高壓滅菌鍋121121、15 15 分鐘分鐘否否是是藥液能否適合過濾是否可以通藥液能否適合過濾是否可以通過微生物

7、截留過濾器過濾過微生物截留過濾器過濾否否采用濕熱滅菌采用濕熱滅菌Fo8 Fo8 分鐘分鐘無菌配藥和灌封無菌配藥和灌封否否除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合是是是是水基溶液制品9非水液體、半固體或干粉劑產(chǎn)品是否可以在產(chǎn)品是否可以在 160160干熱滅干熱滅菌菌 120 120 分鐘分鐘產(chǎn)品是否可以在改變時(shí)間或者溫度的情況下，產(chǎn)品是否可以在改變時(shí)間或者溫度的情況下，進(jìn)行干熱滅菌，達(dá)到進(jìn)行干熱滅菌，達(dá)到 SAL10SAL10-6-6采用采用160160、120120分鐘分鐘否否是是否否采用干熱滅菌，采用干熱滅菌，達(dá)到達(dá)到 SAL10 SAL10-6-6使用預(yù)先滅菌的組分及無菌混合和灌封

8、使用預(yù)先滅菌的組分及無菌混合和灌封否否除菌過濾和無菌工藝過程除菌過濾和無菌工藝過程是是是是輻射滅菌，吸收劑量輻射滅菌，吸收劑量 25KGy25KGy否否產(chǎn)品是否可以采用非干熱滅菌的其它滅菌方法，產(chǎn)品是否可以采用非干熱滅菌的其它滅菌方法，如最低吸收劑量達(dá)到如最低吸收劑量達(dá)到25KGy25KGy的輻射滅菌方法的輻射滅菌方法產(chǎn)品可否采用經(jīng)過驗(yàn)證的低劑量輻射滅菌產(chǎn)品可否采用經(jīng)過驗(yàn)證的低劑量輻射滅菌（ref.ISO 11137)ref.ISO 11137)經(jīng)過驗(yàn)證的輻射劑量，輻射滅菌經(jīng)過驗(yàn)證的輻射劑量，輻射滅菌是是否否是是產(chǎn)品可否可以通過微生物截留過濾器過濾產(chǎn)品可否可以通過微生物截留過濾器過濾10第一個(gè)

9、專題的要點(diǎn) 嚴(yán)格意義上的除菌過濾 新版GMP與歐盟、美國一樣，對上述嚴(yán)格意義上的除菌過濾以及除菌過濾器，提出了嚴(yán)格的要求。 風(fēng)險(xiǎn) 嚴(yán)格意義上的除菌過濾工藝是極高風(fēng)險(xiǎn)的工藝。 國內(nèi)法法規(guī)對此高風(fēng)險(xiǎn)給予關(guān)注和進(jìn)行嚴(yán)格的要求，顯然是非常必要的11新版GMP的要求概述 除菌過濾工藝 滅菌方法決策樹的理念 “除菌級除菌級”過濾器過濾器 過濾器的完整性 過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證 氣體過濾器的選擇 過濾器滅菌方式的選擇12附錄1 無菌藥品第七十五條 （一）可最終滅菌的產(chǎn)品不得以過濾除菌工藝替代最終滅菌工藝。如果藥品不能在其最終包裝容器中滅菌，可用0.22m（更小或相同過濾效力）的除菌過濾器將藥液濾入預(yù)先滅菌的

10、容器內(nèi)。由于除菌過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可采用熱處理方法來彌補(bǔ)除菌過濾的不足。 （二）應(yīng)當(dāng)采取措施降低過濾除菌的風(fēng)險(xiǎn)。宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器再次過濾藥液，最終的除菌過濾濾器應(yīng)當(dāng)盡可能接近灌裝點(diǎn)。新版GMP13重要概念 除菌級過濾器 定義：u經(jīng)過適當(dāng)驗(yàn)證，可以從流體中去除所有微生物，產(chǎn)生無菌濾出液的過濾器。（FDA，無菌藥物工業(yè)指南，2004）（對細(xì)菌截留驗(yàn)證如何進(jìn)行，有詳細(xì)說明。）u當(dāng)用至少達(dá)到107/cm2過濾面積濃度的缺陷假單胞菌（P. diminuta）進(jìn)行挑戰(zhàn)，可以產(chǎn)生無菌濾出液的過濾器。 (FDA，無菌藥物工業(yè)指南，1987)uLRV不小于7/cm2（中國藥典，20

11、10）14歷史 上世紀(jì)60s，0.45um孔徑的膜被認(rèn)為是“除菌級”的液體過濾器，并被成功應(yīng)用于注射劑的除菌過濾。 挑戰(zhàn)微生物：黏質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens） 美國FDA的Frances Bowman博士，觀察到經(jīng)0.45um過濾器“除菌”過濾后的培養(yǎng)基，被某種可以在104106/cm2挑戰(zhàn)水平下穿透該孔徑濾膜的微生物反復(fù)污染。 ASTM F-838標(biāo)準(zhǔn)的出臺，該挑戰(zhàn)水平成為驗(yàn)證液體除菌級過濾器的標(biāo)準(zhǔn)方法。 Committee D19. F838-05 Standand test Method for Determining Bacterial Retention of

12、 Membrane Filters Utilized for Liquid Filtration. American Society for Testing and Materials International (ASTM): 2005 15微生物截留 因?yàn)槿狈I(yè)界內(nèi)的統(tǒng)一的衡量標(biāo)準(zhǔn)，孔徑精度/標(biāo)稱對預(yù)測微生物截留和比較不同生產(chǎn)商生產(chǎn)的過濾器產(chǎn)品沒有實(shí)際的意義。 用微生物截留能力來定義除菌級過濾器。 確認(rèn)和驗(yàn)證 濾膜級別 工藝驗(yàn)證16影響微生物截留的因素 過濾器源 包括過濾器類型、結(jié)構(gòu)、基礎(chǔ)聚合物、表面改性化學(xué)、孔徑分布和過濾膜的厚度等 工藝源 流體組分（配方、表面活性劑、添加劑） 流體性

13、質(zhì)（pH值、粘度、滲透壓，離子強(qiáng)度） 工藝條件（時(shí)間、溫度、壓差、流速、滅菌方法和重復(fù)使用） 產(chǎn)品、料液和生產(chǎn)環(huán)境中實(shí)際微生物負(fù)荷的特點(diǎn)和水平17工藝風(fēng)險(xiǎn)評估因素較高風(fēng)險(xiǎn)因素較低風(fēng)險(xiǎn)較高水平、小的生物體微生物污染水平較低水平、大的生物體較高壓差較低較高流速較低促進(jìn)生長的產(chǎn)品殺菌的，或含防腐劑的室溫或更高溫度冷藏較長時(shí)間較短18附錄1 無菌藥品第五十八條 應(yīng)當(dāng)根據(jù)所用滅菌方法的效果確定滅菌前滅菌前產(chǎn)品微生物污染水平的監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)，并定期監(jiān)控。必要時(shí)，還應(yīng)當(dāng)監(jiān)控?zé)嵩蚣?xì)菌內(nèi)毒素。 新版GMP19歐盟GMP Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Product

14、s (2008)無菌藥品的生產(chǎn) 80. 滅菌之前應(yīng)當(dāng)監(jiān)測微生物污染水平。應(yīng)當(dāng)建立與所使用方法效率相關(guān)的，滅菌之前的污染限值。對于無菌灌裝產(chǎn)品對于無菌灌裝產(chǎn)品和最終滅菌產(chǎn)品均應(yīng)按批進(jìn)行微生物污染水平分析。和最終滅菌產(chǎn)品均應(yīng)按批進(jìn)行微生物污染水平分析。20歐盟GMP指南 Note for guidance on Manufacture of the Finished Dosage Form (1996)成品劑型生產(chǎn)規(guī)范指南 7. Special Items (特別事項(xiàng)) 對于過濾除菌而言，必須在申請文件中注明過濾之前容許的微生物污染水平的最大值。大多數(shù)情況下，藥品中可以接受的水平為10 CFU /

15、100 ml，取決于待過濾藥品體積與過濾器直徑的相對比例。如果達(dá)不到上述要求，有必要利用細(xì)菌截留過濾器進(jìn)行預(yù)過濾，以達(dá)到足夠低的微生物污染水平。21附錄1 無菌藥品第五十七條 應(yīng)當(dāng)盡可能縮短藥液從開始配制到滅菌（或除菌過濾）的間隔時(shí)間。應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品的特性及貯存條件建立相應(yīng)的間隔時(shí)間控制標(biāo)準(zhǔn)。歐盟GMP附錄1，第79條的規(guī)定，與上述一致。新版GMP22產(chǎn)品中的R.pickettii細(xì)菌（皮氏羅爾斯頓氏菌） (Leo et al. 1997)起始時(shí)間起始時(shí)間24小時(shí)后小時(shí)后23工藝驗(yàn)證研究 注意事項(xiàng)：膜片、最差條件、批次、產(chǎn)品家族 挑戰(zhàn)微生物的選擇 挑戰(zhàn)流體的制備 測試程序和方案形成 非殺菌性的流

16、體 殺菌性/抑菌的流體24第二個(gè)專題的要點(diǎn) 什么是除菌級的過濾器？（除菌過濾器） 10“過濾芯，如果膜片面積是1m2，那么整支的截留效率是多少？（區(qū)別于國產(chǎn)過濾器的不正確宣稱。） 市場上最好的微生物負(fù)荷控制過濾器，EAV的單支截留效率是多少？ 細(xì)菌截留驗(yàn)證的考慮要點(diǎn)是什么？ 細(xì)菌截留工藝驗(yàn)證，是無菌保障的關(guān)鍵，是最重要的驗(yàn)證項(xiàng)目。25新版GMP的要求概述 除菌過濾工藝 滅菌方法決策樹的理念 “除菌級”過濾器 過濾器的完整性過濾器的完整性 過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證 氣體過濾器的選擇 過濾器滅菌方式的選擇26附錄1 無菌藥品第七十五條 非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求： （三）除菌過濾器使用

17、后使用后，必須采用適當(dāng)?shù)姆椒⒓磳ζ渫暾赃M(jìn)行檢查并記錄。常用的方法有起泡點(diǎn)試驗(yàn)、擴(kuò)散流試驗(yàn)或壓力保持試驗(yàn)。新版GMP27歐盟GMP Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products (2008)無菌藥品的生產(chǎn) 113. 已滅菌的過濾器的完整性，需要使用適當(dāng)?shù)姆椒?，在過濾前進(jìn)行確認(rèn)，并需要在使用后立刻進(jìn)行確認(rèn)，包括氣泡點(diǎn)、擴(kuò)散流或壓力保持測試。過濾工藝驗(yàn)證中應(yīng)確定過濾一定量藥液所需時(shí)間及過濾器二側(cè)的壓力；任何明顯偏離正常時(shí)間或壓力的情況應(yīng)有記錄并進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查結(jié)果應(yīng)歸入批記錄。 關(guān)鍵氣體和空氣過濾器的完整性需要在使用后確認(rèn)。其它過濾器的完整性需

18、要定期進(jìn)行檢測。28歐盟GMP EMEA Inspections -Good Manufacturing Practice -Questions & Answers歐盟GMP問題和解答 問：如何進(jìn)行除菌過濾器的完整性檢測？ 答：法規(guī)（附錄1） 過濾器應(yīng)當(dāng)被檢測2次，在使用前而且在滅菌后，和使用后均進(jìn)行完整性檢測。 另外，檢測應(yīng)當(dāng)原位進(jìn)行以確認(rèn)濾殼內(nèi)的整體過濾器的完整性。EMA/Regulatory/Inspections/(GMP/GDP compliance)/Q&A29美cGMP FDA Guidance for Industry Sterile Drug Products

19、 Produced by Aseptic Processing （Sept. 2004）FDA無菌藥物工業(yè)指南 (2004年9月) 過濾器的完整性檢測可以在使用前進(jìn)行，并且應(yīng)當(dāng)在使用后常規(guī)進(jìn)行。過濾后進(jìn)行完整性檢測是非常重要的，可以探查到過濾器在使用過程中可能發(fā)生的任何泄漏或者穿孔。前進(jìn)流和氣泡點(diǎn)，當(dāng)正確使用時(shí)，是兩種可以使用的完整性檢測方法。成品過濾器的完整性檢測規(guī)范應(yīng)當(dāng)與細(xì)菌截留驗(yàn)證研究的數(shù)據(jù)保持一致。30完整性檢測 一種對過濾器進(jìn)行的可以關(guān)聯(lián)到其細(xì)菌截留能力的非破壞性物理性檢測。 主要目的： 在不損壞過濾器的前提下確定是否存在可能危及過濾器截留能力的缺陷。 在相關(guān)工藝條件下建立測試過濾器

20、與已被驗(yàn)證的細(xì)菌挑戰(zhàn)過的過濾器的同一性。 完整性試驗(yàn)結(jié)果要與細(xì)菌截留測試相關(guān)聯(lián)。 細(xì)菌截留測試是一種破壞性試驗(yàn)，不能用來證明將用于生產(chǎn)的過濾器的完整性。31完整性檢測原理潤濕液體通過界面張力的分子引力，潤濕液體通過界面張力的分子引力，被牢牢鎖定在微孔間隙中被牢牢鎖定在微孔間隙中32氣體在濕潤濾膜上擴(kuò)散顯示了氣體在低壓下擴(kuò)散漫過濕潤濾膜的孔，而液體在毛細(xì)管力的作用下留在孔里, 允許“擴(kuò)散流”通過。33濕潤濾膜的起泡點(diǎn)顯示了氣流在較高壓力下穿過濕潤濾膜的孔，液體被擠出較大的那些濾孔，允許“大量氣流”通過。34膜特性曲線圖 測量氣體在壓力作用下的運(yùn)動情況（被測量的氣流穿過的濕潤濾膜的孔隙率和分布都一

21、樣，只是測量面積不同。）35膜特性曲線圖低壓線性部分 氣體擴(kuò)散穿過濕潤濾膜孔里的液體 “擴(kuò)散流” 隨著壓力的增加，氣流不再呈線性關(guān)系 從單純的擴(kuò)散流轉(zhuǎn)變?yōu)榇蟮臍饬骱蛿U(kuò)散流混合體 “起泡點(diǎn)區(qū)”在“起泡點(diǎn)區(qū)”以上，在高壓作用下又變成線性相關(guān)了 大部分氣流是因?yàn)樽杂闪鲃拥臍怏w穿過了敞開的膜孔。 小部分氣流是因?yàn)闅怏w擴(kuò)散穿過依舊潤濕的膜孔。三個(gè)特征部分是完整性測試的基礎(chǔ)024681012141618202500300035004000Pressure (mbar)Flow (ml/min)Diffusive FlowBubble Point RegionBulk Flow10” Cartridge (

22、5000 cmEFA)142 mm disc (100 cmEFA)Increasing PressureIncreasing Flowrate (mil/min)1 2 336非破壞性方法與過濾性能相關(guān)聯(lián)破壞性方法破壞性方法非破壞性方法非破壞性方法3738完整性測試方法選擇 三種原理 方式 手動 自動39何時(shí)進(jìn)行完整性檢測完整性測試使用前使用后滅菌前滅菌后40雙重（冗余）除菌過濾器的完整性區(qū)別二種不同情況 組合過濾器和雙重（冗余）除菌過濾器不同的完整性要求 組合過濾器：u每個(gè)都需要通過完整性檢測 雙重（冗余）：u“首要”過濾器通過完整性檢測后，“次要”過濾器不用再進(jìn)行完整性檢測，產(chǎn)品放行。u

23、“首要”過濾器，更下游（靠近灌裝點(diǎn)）的過濾器u如果“首要”過濾器完整性失敗，檢測“次要”過濾器，如果通過，產(chǎn)品放行。41濾過流體無菌性保證 完整性測試本身并不足以確保濾過流體的無菌性，其它因素也應(yīng)滿足： 生產(chǎn)商具備質(zhì)量控制和質(zhì)量保證系統(tǒng)以確保過濾膜和成品過濾器的質(zhì)量和一致性。 使用者應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證研究以確證產(chǎn)品、工藝條件和除菌級過濾器達(dá)到細(xì)菌挑戰(zhàn)測試的要求。 使用者應(yīng)確保產(chǎn)品/過程控制（例如，操作參數(shù)，微生物污染水平控制）到位。一旦滿足這些要素，完整性測試的局限性就會被降至最低。42第三個(gè)專題的要點(diǎn) 完整性檢測的法規(guī)要求，國內(nèi)外區(qū)別 完整性檢測的原理，可以舉個(gè)生活中的例子，以建立聽眾的直觀聯(lián)想，更

24、說明完整性檢測，僅僅為一項(xiàng)物理檢測。 重點(diǎn)講關(guān)聯(lián)。如果不關(guān)聯(lián)，完整性檢測，就對無菌保障來說，沒有意義了！ 還可以推薦一下FF的方法，對于大的膜片，由于BP 順便說一下自動儀器檢測的優(yōu)點(diǎn)43新版GMP的要求概述 除菌過濾工藝 滅菌方法決策樹的理念 “除菌級”過濾器 過濾器的完整性 過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證 氣體過濾器的選擇 過濾器滅菌方式的選擇44附錄1 無菌藥品第六十二條 可采用濕熱、干熱、離子輻射、環(huán)氧乙烷或過濾除菌的方式進(jìn)行滅菌。每一種滅菌方式都有其特定的適用范圍，滅菌工藝必須與注冊批準(zhǔn)的要求相一致，且應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證。第六十三條 任何滅菌工藝在投入使用前，必須采用物理檢測

25、手段和生物指示劑，驗(yàn)證其對產(chǎn)品或物品的適用性及所有部位達(dá)到了滅菌效果。新版GMP45附錄1 無菌藥品第四十一條 過濾器應(yīng)當(dāng)盡可能不脫落纖維。嚴(yán)禁使用含石棉的過濾器。過濾器不得因與產(chǎn)品發(fā)生反應(yīng)、釋放物質(zhì)或吸附作用而對產(chǎn)品質(zhì)量造成不利影響。第七十五條 非最終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求： （四）過濾除菌工藝應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，驗(yàn)證中應(yīng)當(dāng)確定過濾一定量藥液所需時(shí)間及過濾器二側(cè)的壓力。任何明顯偏離正常時(shí)間或壓力的情況應(yīng)當(dāng)有記錄并進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查結(jié)果應(yīng)當(dāng)歸入批記錄。 （五）同一規(guī)格和型號的除菌過濾器使用時(shí)限應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，一般不得超過一個(gè)工作日。新版GMP46歐盟GMP Annex 1 Manufactur

26、e of Sterile Medicinal Products (2008)無菌藥品的生產(chǎn)112. Fibre-shedding characteristics of filters should be minimal.113. The time taken to filter a known volume of bulk solution and the pressure difference to be used across the filter should be determined during validation and any significant differences

27、from this during routine manufacturing should be noted and investigated. Results of these checks should be included in the batch record. 114. The should not be used for more than one working day unless such use has been validated.115. The filter should not affect the product by removal of ingredient

28、s from it or by release of substances into it.47確認(rèn)和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)使用者使用者生產(chǎn)商生產(chǎn)商裝置膜片裝置水或乳糖肉湯（saline lactose broth, SLB）的細(xì)菌截留與水或溶劑完整性的關(guān)聯(lián)-Q, LQ, L產(chǎn)品細(xì)菌截留V*-化學(xué)兼容，對過濾器完整性的影響VQQ溶出物VQQ析出物E-滅菌方法，對過濾器完整性的影響VQQ完整性檢測（水或溶劑）VQ, LQ, L完整性檢測方法選擇（產(chǎn)品）V-毒性檢測-QQ細(xì)菌內(nèi)毒素V-Q, L顆粒物E-Q無纖維釋放E-Q總有機(jī)碳（TOC）和電導(dǎo)率E-QL = 批放行標(biāo)準(zhǔn)Q = 確認(rèn)V = 特定工藝驗(yàn)證V*=

29、 可以用膜片或過濾器進(jìn)行驗(yàn)證E = 評估是否需要進(jìn)行測試PDA TR26，2008 “Sterilizing Filtration of Liquids”48 完整性 (100%) 100前進(jìn)流檢測 與相應(yīng)的細(xì)菌截留數(shù)據(jù)相關(guān)聯(lián) 挑戰(zhàn)試驗(yàn) (批次抽樣) 蒸氣高壓滅菌 (批次抽樣)經(jīng)過驗(yàn)證的除菌級過濾器上市標(biāo)準(zhǔn)49 濾出液品質(zhì) (抽樣) 內(nèi)毒素(熱原), 清潔度, pH, TOC, 電導(dǎo)率 依據(jù)USP標(biāo)準(zhǔn) 材料驗(yàn)證 生物安全u依據(jù)USP Biol. Toxicity, in vivo,(體內(nèi)的生物毒性 ）Class VI（第六級）-121C 可控的、清潔的裝配環(huán)境 高速純化水沖洗經(jīng)過驗(yàn)證的除菌級過

30、濾器上市標(biāo)準(zhǔn)50濾出液品質(zhì)測定每批抽樣測試： 潔凈度 內(nèi)毒素 電導(dǎo)率 TOC pH51高壓滅菌測試每批抽樣測試 重復(fù)高壓滅菌 完整性檢測52沖洗及完整性檢測三個(gè)作用 除顆粒及溶出物 水壓測試 確認(rèn)濾芯完整性53細(xì)菌挑戰(zhàn)試驗(yàn)每批經(jīng)完整性檢測后的濾芯抽樣： B. diminuta 107/cm2 確認(rèn)細(xì)菌截留效率 確認(rèn)與完整性檢測的關(guān)聯(lián)54制藥級證書 每支濾芯均有 提供追蹤依據(jù)：用戶和制造商55P級證書56確認(rèn)和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)使用者使用者生產(chǎn)商生產(chǎn)商裝置膜片裝置水或乳糖肉湯（saline lactose broth, SLB）的細(xì)菌截留與水或溶劑完整性的關(guān)聯(lián)-Q, LQ, L產(chǎn)品細(xì)菌截留V*-化學(xué)兼

31、容，對過濾器完整性的影響VQQ溶出物VQQ析出物E-滅菌方法，對過濾器完整性的影響VQQ完整性檢測（水或溶劑）VQ, LQ, L完整性檢測方法選擇（產(chǎn)品）V-毒性檢測-QQ細(xì)菌內(nèi)毒素V-Q, L顆粒物E-Q無纖維釋放E-Q總有機(jī)碳（TOC）和電導(dǎo)率E-QL = 批放行標(biāo)準(zhǔn)Q = 確認(rèn)V = 特定工藝驗(yàn)證V*= 可以用膜片或過濾器進(jìn)行驗(yàn)證E = 評估是否需要進(jìn)行測試PDA TR26，2008 “Sterilizing Filtration of Liquids”57附錄1 無菌藥品第六十二條 可采用濕熱、干熱、離子輻射、環(huán)氧乙烷或過濾除菌的方式進(jìn)行滅菌。每一種滅菌方式都有其特定的適用范圍，滅菌工

32、藝必須與注冊批準(zhǔn)的要求相一致，且應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證。 第六十四條 應(yīng)當(dāng)定期對滅菌工藝的有效性進(jìn)行再驗(yàn)證（每年至少一次）。設(shè)備重大變更后，須進(jìn)行再驗(yàn)證。應(yīng)當(dāng)保存再驗(yàn)證記錄。Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products (2008)84. Before any sterilisation process is adopted The validity of the process should be verified at scheduled intervals, at least annually, and whenever significant

33、 modifications have been made to the equipment. Records should be kept of the results. 新版GMP58再驗(yàn)證 經(jīng)過驗(yàn)證被用于特定除菌過濾工藝的除菌過濾器，在工藝條件發(fā)生改變或者過濾器制造方面發(fā)生改變是，需要進(jìn)行再驗(yàn)證。 包括但不限于下列情況，需要考慮進(jìn)行再驗(yàn)證： 單位面積的流速高于已驗(yàn)證的參數(shù) 過濾壓差超過被驗(yàn)證參數(shù) 暴露時(shí)間超過被驗(yàn)證的時(shí)間 過濾面積不變的情況下提高過濾量 過濾溫度改變 產(chǎn)品配方改變，包括濃度、pH或電導(dǎo)率 過濾器的滅菌程序改變 改變過濾器的制造商，或者過濾器的生產(chǎn)者改變了過濾膜的配方以及過

34、濾器的其它結(jié)構(gòu)性材料59美cGMP FDA Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing （Sept. 2004）FDA無菌藥物工業(yè)指南 (2004年9月) 每批使用之后，除菌過濾器通常應(yīng)當(dāng)被丟棄。但是，如果可以證明重復(fù)使用是有理由的，那么需要進(jìn)行可以體現(xiàn)最多處理批次的驗(yàn)證。 60歐盟GMP Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products (2008)無菌藥品的生產(chǎn) 114. 同一個(gè)過濾器不應(yīng)當(dāng)使用超過一個(gè)工作日除非經(jīng)過驗(yàn)證。61第四個(gè)專題

35、的要點(diǎn) 供應(yīng)商審計(jì)的重要性，即制藥企業(yè)需要確認(rèn)的工作，是過濾器的生產(chǎn)者已經(jīng)完成的工作（核心驗(yàn)證、持續(xù)驗(yàn)證）。 除菌過濾（器）工藝驗(yàn)證的必要性 工藝驗(yàn)證的項(xiàng)目概述 2004版FDA無菌藥物工業(yè)指南明確了，”如果復(fù)雜的過濾器驗(yàn)證超過了使用者的能力，測試通常由外部實(shí)驗(yàn)室或者過濾器的制造商來完成。“62新版GMP的要求概述 除菌過濾工藝 滅菌方法決策樹的理念 “除菌級”過濾器 過濾器的完整性 過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證 氣體過濾器的選擇氣體過濾器的選擇 過濾器滅菌方式的選擇63新版GMP正文第五章 設(shè)備 第六節(jié) 制藥用水 第九十八條 純化水、注射用水儲罐和輸送管道所用材料應(yīng)無毒、耐腐蝕；儲罐的通氣口應(yīng)安裝

36、不脫落纖維的疏水性除菌濾器；管道的設(shè)計(jì)和安裝應(yīng)避免死角、盲管。64美FDA 高純水系統(tǒng)檢查指南 （7/93)VII 儲罐 （Holding tank） The one component of the holding tank that generates the most discussion is the vent filter. It is expected that there be some program for integrity testing this filter to assure that it is intact. Typically, filters are now

37、 jacketed to prevent condensate or water from blocking the hydrophobic vent filter. If this occurs (the vent filter becomes blocked), possibly either the filter will rupture or the tank will collapse. There are methods for integrity testing of vent filters in place.65新版GMP附錄1 無菌藥品 第四十二條 進(jìn)入無菌生產(chǎn)區(qū)的生產(chǎn)用氣

38、體（如壓縮空氣、氮?dú)猓话扇夹詺怏w）均應(yīng)經(jīng)過除菌過濾，應(yīng)當(dāng)定期檢查除菌過濾器和呼吸過濾器的完整性。66歐盟GMP Annex 1 附錄1 81. 進(jìn)入無菌操作潔凈區(qū)域的物料、容器、設(shè)備和其它物品應(yīng)通過固定在墻內(nèi)的雙扉滅菌器滅菌和進(jìn)入，或其它可達(dá)到同樣不引入污染目的的程序。非可燃性氣體應(yīng)通過細(xì)菌截留過濾器。 113. 關(guān)鍵應(yīng)用的氣體和呼吸過濾器的完整性需要在使用后確認(rèn)。其它過濾器的完整性應(yīng)當(dāng)以適當(dāng)?shù)闹芷谶M(jìn)行確認(rèn)。67美cGMP FDA Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing （Se

39、pt. 2004）FDA無菌藥物工業(yè)指南 (2004年9月) D 氣體過濾u1. Membrane 膜式過濾器u我們推薦那些可以影響產(chǎn)品的，擔(dān)當(dāng)無菌屏障或者提供無菌氣體的過濾器，在安裝后進(jìn)行完整性檢測并在其后定期進(jìn)行（如，使用結(jié)束）。在可能損壞過濾器的活動之后，也推薦進(jìn)行完整性檢測。68附錄3 生物制品第二十五條 管道系統(tǒng)、閥門和呼吸過濾器應(yīng)當(dāng)便于清潔和滅菌。宜采用在線清潔、在線滅菌系統(tǒng)。密閉容器（如發(fā)酵罐）的閥門應(yīng)當(dāng)能用蒸汽滅菌。呼吸過濾器應(yīng)為疏水性材質(zhì)，且使用效期應(yīng)當(dāng)經(jīng)驗(yàn)證。新版GMP69歐盟GMP Annex 2 Manufacture of Biological Medicinal P

40、roducts for Human Use人用生物藥品的生產(chǎn) 17. Pipework systems, valves and vent filters should be properly designed to facilitate cleaning and sterilisation. The use of clean in place and sterilise in place systems should be encouraged. Valves on fermentation vessels should be completely steam sterilisable. Ai

41、r vent filters should be hydrophobic and validated for their scheduled life span.70概念 親水性過濾器 （Hydrophilic Filter）過濾膜可以被水基溶液潤濕并在低壓差下允許其濾過的過濾器。 疏水性過濾器 （Hydrophobic Filter）過濾膜排斥水和其它高表面張力液體，只有在高壓差下才可以被前述液體潤濕；只有被低表面張力液體，如乙醇，預(yù)潤濕時(shí)，才允許低壓差下水濾過的過濾器。71水侵入機(jī)理疏水濾膜疏水濾膜氣壓氣壓72水侵入實(shí)驗(yàn)機(jī)理疏水濾膜疏水濾膜氣壓氣壓73水突破壓力疏水濾膜疏水濾膜氣壓氣壓74

42、背景 歷史 第一代：棉卷或者玻璃纖維卷 第二代：u深層過濾的濾芯u含有硼硅酸鹽和聚丙烯成分u在細(xì)菌截留方面存在缺陷 第三代：u用于氣體過濾器的疏水膜過濾器u天然地對“水阻塞”（water blockage)更有抵抗能力u可以被更精細(xì)地生產(chǎn)為規(guī)定范圍的精度u減少截留能力對操作條件的依賴（如：氣流中的潮氣含量、壓差等）u完整性檢測數(shù)據(jù)可以與截留能力關(guān)聯(lián)PDA TR40 2005， Sterilizing Filtration of Gases75氣體除菌級過濾器 對于氣體除菌過濾器的細(xì)菌截留要求，尚沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。 多種應(yīng)用，按照關(guān)鍵程度分為3類 與無菌產(chǎn)品直接接觸（如：無菌灌裝中使用的壓縮空氣）

43、 不直接與無菌產(chǎn)品接觸（如：發(fā)酵過程通氣過濾器） 降低微生物負(fù)荷(微生物污染水平)（如：高效過濾器，HEPA） 液體細(xì)菌挑戰(zhàn)被認(rèn)為是氣體除菌過濾器的“最差條件”，因而，參照液體除菌級過濾器執(zhí)行的細(xì)菌截留驗(yàn)證是被廣泛接受的。 其它可以選擇的方法，包括細(xì)菌（孢子）氣溶膠挑戰(zhàn)和噬菌體/病毒氣溶膠挑戰(zhàn)試驗(yàn)。 76長期使用的選擇氣體除菌級過濾器平行安裝過濾器，當(dāng)其中一個(gè)在使用時(shí)，另外一個(gè)可以進(jìn)行完整性檢測和使用前準(zhǔn)備。使用冗余過濾器，如，兩個(gè)過濾器串聯(lián)連接，并采用定期完整性檢測和定期更換相結(jié)合的方法。定期完整性檢測和定期更換，結(jié)合使用。只在第一次滅菌后進(jìn)行完整性檢測。只在安裝完成后進(jìn)行完整性檢測。不檢測

44、完整性，只依靠歷史數(shù)據(jù)確定更換周期。 低風(fēng) 險(xiǎn)高77第五個(gè)專題的要點(diǎn) 氣體過濾器與液體過濾器的5個(gè)不同 原理不同（不被潤濕的情況下，截留效率比潤濕了，高10100倍） 除菌級定義不同（與液體） 完整性檢測要求不同（一般為定期）、一個(gè)獨(dú)特的方法 一般不需要進(jìn)行工藝驗(yàn)證 長期使用（重復(fù)使用）78新版GMP的要求概述 除菌過濾工藝 滅菌方法決策樹的理念 “除菌級”過濾器 過濾器的完整性 過濾器的確認(rèn)和工藝驗(yàn)證 氣體過濾器的選擇 過濾器滅菌方式的選擇過濾器滅菌方式的選擇79附錄3 生物制品第二十五條 管道系統(tǒng)、閥門和呼吸過濾器應(yīng)當(dāng)便于清潔和滅菌。宜采用在線清潔、在線滅菌系統(tǒng)。密閉容器（如發(fā)酵罐）的閥門

45、應(yīng)當(dāng)能用蒸汽滅菌。呼吸過濾器應(yīng)為疏水性材質(zhì)，且使用效期應(yīng)當(dāng)經(jīng)驗(yàn)證。第四十七條 培養(yǎng)基宜在線滅菌。向發(fā)酵罐或反應(yīng)罐中通氣以及添加培養(yǎng)基、酸、堿、消泡劑等成分所使用的過濾器宜在線滅菌。（歐盟GMP附錄2，37.If possible, media should be sterilised in situ. In-line sterilising filters for routine addition of gases, media, acids or alkalis, defoaming agents etc. to fermenters should be used where possible.）新版GMP80過濾器滅菌 濕熱滅菌 高壓滅菌 （Autoclave） 原位/在線蒸汽滅菌 （Steam in Place, SIP） 輻射滅菌 氣體滅菌81高壓滅菌注意事項(xiàng) 溫度設(shè)定。通常溫度高于130135時(shí)，多數(shù)塑料元件會不穩(wěn)定，可能影響過濾器的完整性和/或提高溶出物水平。 包裹物。過濾器滅菌時(shí)的包裹物應(yīng)當(dāng)足以形成保護(hù)屏障，防止過濾器滅菌后被再次污染；同時(shí)，在滅菌過程中，又應(yīng)當(dāng)滿足從過濾器中釋放的空氣和滅菌用蒸汽通過的要求。滅菌指示帶（條）的使用也應(yīng)降到最低，防止上述對氣體通過的阻擋。 關(guān)注滅菌周期開始階段的預(yù)真空設(shè)置，尤其是對大型的過濾器，可能需要調(diào)節(jié)預(yù)真空參數(shù)設(shè)置，以利