MS固體培養(yǎng)基的配制

1、；MS固體培養(yǎng)基的配制一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)，掌握MS固體培養(yǎng)基的配制技術(shù)及操作技能。二、材料與用具配制 MS培養(yǎng)基的各種母液、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)母液、瓊脂、蔗糖、蒸餾水、移液管、量筒、電飯煲、全自動高壓滅菌器、 pH試紙、0.1mol/L的 NaOH、0.1mol/L 的 HCl、培養(yǎng)瓶、標(biāo)簽、鉛筆等。三、方法與步驟（一）按母液順序和規(guī)定量，用吸管提取母液，放入盛有一定量（ 150-200ml ）純凈水的量筒中。母液一30ml/L母液二15ml/L母液三15ml/L母液四15ml/L母液五30ml/L母液六7.5ml/L1-8 組 4 人配 1L，9-10 組 3 人配 1L。（二）加入植物生長

2、調(diào)節(jié)物質(zhì)加入的具體調(diào)節(jié)物質(zhì)與量視培養(yǎng)物不同而異（本次實(shí)驗(yàn)不加生長調(diào)節(jié)劑）。（三）定容加純凈水定容至1000ml。（四）倒入預(yù)先用鉛筆標(biāo)好刻度的電飯煲中。 .；（五）加糖、加熱：加入蔗糖20g/L 并開始加熱。（六）加瓊脂粉12g/L ：在電飯煲中給培養(yǎng)基加溫至冒熱氣時均勻緩慢地加入瓊脂粉，用玻璃棒不斷攪拌至全部熔解并煮沸。（七）調(diào)節(jié) pH 值：煮沸后，用試紙測試 pH 值，用 0.1mol/L 的NaOH或 0.1mol/L 的 HCl 把培養(yǎng)基的 pH 調(diào)整到 5.6 5.8 ；加水至預(yù)先標(biāo)注的刻度處，煮沸 1-2 分鐘。（八）培養(yǎng)基分注把配置好的培養(yǎng)基用燒杯分注到培養(yǎng)瓶中，分注前用量筒量取

3、30ml 水倒入培養(yǎng)瓶測試，每瓶裝30ml（3 瓶/100ml）左右。分注后立即加蓋，貼上標(biāo)簽，注明培養(yǎng)基的名稱、配制時間、配制人姓名。（九）培養(yǎng)基滅菌，無菌水、無菌瓶、無菌紙片制作。1. 將蒸餾水注入滅菌腔，直至水流進(jìn)入水位板中間的水位指示器。2. 將待滅菌的物品放入提籃中，將提籃放入滅菌腔中。3. 插上電源，打開開關(guān)。4. 旋緊“排汽旋鈕”，關(guān)閉滅菌腔蓋，直至指示燈“ LOCKED”亮起。5. 選擇滅菌程序，按“ SET/ENT”鍵設(shè)置溫度為 121，保溫時間 20min。6. 長按“ START”鍵開始滅菌。7. 滅菌結(jié)束時，所有程序執(zhí)行完畢且溫度低于 80時，指示燈“COMP”閃爍，系統(tǒng)發(fā)出 5 聲長聲。 .；8. 先旋松“排汽旋鈕” ，打