南京農業(yè)大學動科繁殖新技術茆達干重點總結

1、茆達干繁殖新技術的重點內容有些答案有出入 有些PPT上沒有 是我網(wǎng)上找的大家還是以PPT為主 僅供參考細胞因子（cytokine，CK）:是指由免疫細胞和某些非免疫細胞經剌激而合成、分泌 的一類具有生物學效應的小分子蛋白物質的總稱。CK能調節(jié)白細胞生理功能、介導炎癥反應、參與免疫應答和組織修復等，是除免疫球蛋白和補體之外的又一類免疫分子。腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）：是一類能引起腫瘤組織出血壞死的細胞因 子，分為TNF-a和TNF-3兩類。前者主要由單核/巨噬細胞產生，又稱惡病質素；后者主要 由活化T細胞產生，又稱淋巴毒素。血睪屏障（blood-testi

2、s barrier , BTB ）相鄰的支持細胞基底部、血管內皮基膜、結締組織和曲精細管基膜牢固緊密連接組成的屏障結構，可防止精子與免疫系統(tǒng)接觸。生殖免疫技術的應用：1、激素測定2、發(fā)情、排卵鑒定3、性別控制4、早期妊娠診斷5、 免疫去勢6誘導發(fā)情、超數(shù)排卵 7、胚胎分割激素測定? RIA （定義）：放射免疫技術為一種將放射性同位素測量的高度靈敏性、精確性和抗 原抗體反應的特異性相結合的體外測定超微量（10-910-15g ）物質的新技術。關鍵點：酶高效催化性能抗原抗體特異性微量活性物質? EIA （定義）通過固相載體與酶標記的抗原抗體結合來進行激素測定的方法。? 熒光免疫測定? 化學發(fā)光免疫

3、測定抗體的制備1單抗的制備雜交瘤技術 將B細胞與能長期生存、不斷繁殖的細胞（瘤細胞）雜交（融合）。2多抗制備多克隆抗體的條件：免疫原、佐劑、用于免疫的動物 免疫原的要求：1免疫原性：用特異免疫球蛋白的形成或致敏淋巴細胞的產生來衡量。2反應原性：被特異免疫球蛋白識別從而被結合的能力。3完全抗原：可與抗體結合產生沉淀反應，而半抗原則不能，但卻能抑制沉淀反應（抗體的 結合位點已被圭封閉）。流程：1免疫原與佐劑的乳化 2初次免疫3加強免疫4血液收集抗體類型類型：A、D、E、G、M、Y、N哺乳動物的抗體IgG 80% （老齡動物），各亞類對蛋白酶的敏感性不同禽類抗體含量最多的是IgY抗體的產生 1致敏階

4、段2反階段3效應階段免疫耐受? 免疫耐受是機體對抗原刺激表現(xiàn)為“免疫不應答”的現(xiàn)象? 免疫耐受具有免疫特異性? 自身耐受可以避免自身免疫病的發(fā)生免疫耐受引起的因素：抗原劑量抗原類型 細胞類型 免疫途徑 免疫對象激素免疫主動免疫： 激素作為抗原免疫，刺激機體產生抗體（多次）被動免疫： 激素抗體免疫動物，使其與體內相應的激素發(fā)生特異性結合。 （一次）抑制素免疫抑制素： 性腺分泌的糖蛋白質激素，在雌性動物主要產生于卵巢的顆粒細胞。作用：INH可以選擇性地抑制垂體 FSH的分泌，從而影響動物的內分泌調控，參與優(yōu)勢卵泡 的選擇，調節(jié)卵泡的發(fā)育，參與精子的發(fā)生。INH 合成天然抑制素、抑制素合成肽、重組抑

5、制素 雌激素免疫原理： 雄烯二酮是合成雌激素的前體。 因此， 以雄烯二酮免疫母羊產生的抗體與 內源性雄烯二酮發(fā)生免疫反應，使合成雌激素的前體物質濃度大大降低，雌激素合成減少， 外周血液中雌激素水平降低， 解除對下丘腦和垂體的抑制作用， 刺激卵泡發(fā)育， 最終導致排 卵數(shù)增加。基因免疫： 用一定的方法將帶有目的基因的表達載體轉化到動物體內，其表達產物經抗原遞呈，誘導機體產生特異性抗體并引起相應免疫應答的技術基因免疫作用：激活細胞免疫與體液免疫轉基因動物： 用實驗室方法將所需要的目的基因導入動物的受精卵， 使外源基因與動物本身 的基因整合在一起， 在動物發(fā)育過程中表達， 并能穩(wěn)定地遺傳給后代的技術。

6、 這種在基因組 中穩(wěn)定地整合有人工的外源基因的動物稱轉基因動物基本程序：1 表達載體的構建 （上游 ）2 外源基因的導入 （中游 ）3 外源基因活性的檢測 （下游 ）4 轉基因動物家系的建立和擴繁外源基因的導入 （中游 ） 方法：1 原核注射法 借助顯微操作儀，將外源基因直接注入單細胞受精卵的原核中。2逆轉錄病毒感染法RNA病毒感染宿主細胞后， 逆轉錄成相應的 DNA,并整合到宿主的染色體DNA上，得到轉基因動物3胚胎干細胞介導法 將外源基因導入ESC陽性細胞植入正常發(fā)育的囊胚腔或與早期卵裂 隙球孵育，獲得嵌合體胚胎再進行移植；或作為供體核進行核移植。4 精子載體法5生殖細胞轉染法 在原理和方法上與 ESC技術相似，在制作轉基因家禽方面有明顯的優(yōu)勢。6 細胞核移植法 體外培養(yǎng)的體細胞經外源 DNA 轉化后，通過篩選可獲得陽性細胞，作為 核供體，通過體細胞核移植技術，可直接獲得轉基因動物。轉基因動物的生產研究：改