病原微生物標(biāo)本采集、運(yùn)送

1、word整理版病原微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集、運(yùn)送操作規(guī)程正確的標(biāo)本采集，運(yùn)送，保存和處理對(duì)于微生物檢驗(yàn)工作質(zhì)量至關(guān)重要， 為 了準(zhǔn)確檢出病原菌，避免漏檢與誤診，臨床醫(yī)護(hù)人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握微 生物標(biāo)本的選擇，采集，運(yùn)送，保存及處理的一般原則。一、標(biāo)本采集的一般原則1 .早期采集采集時(shí)間最好在病程早期，急性期，且必須在使用抗菌藥物之前采集，確保 病原菌的檢出。2 .無菌操作采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)盡量減少或避免感染部位附近或皮膚黏膜正常菌群的污染， 使 病原菌與正常菌群混淆，造成臨床誤診。采集的標(biāo)本應(yīng)存放在無菌容器內(nèi)， 容器 不能使用消毒劑處理，標(biāo)本中也不能添加防腐劑，以免降低病原菌的檢出。3 .適量的標(biāo)本

2、標(biāo)本量過少可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。4 .適當(dāng)?shù)牟杉椒▽?duì)于厭氧菌，需氧菌或兼性厭氧菌的采集方法是不同的， 用于厭氧菌培養(yǎng)的 標(biāo)本應(yīng)盡量用注射器采集抽取物，室溫保存，不能冷藏和冷凍。5 .盛放標(biāo)本的容器采集標(biāo)本應(yīng)存放在無菌，防漏，應(yīng)帶有螺旋蓋的容器內(nèi)。二、標(biāo)本的運(yùn)送1 .標(biāo)本采集后立即送檢，若有延遲也應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，否則會(huì)影響病原 菌的檢出，一般性的細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本若需延遲送檢時(shí)， 應(yīng)置于4度冰箱保存，且不 能超過24小時(shí)。2 .臨床標(biāo)本最佳運(yùn)送時(shí)間取決于標(biāo)本的量，少量液體（小于1ml）或組織（小于1cm3）應(yīng)在1530分鐘內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，較多量的標(biāo)本置于運(yùn)送培養(yǎng)基中可放 1224 小時(shí)，厭氧培養(yǎng)

3、標(biāo)本原則上是床邊接種， 如延遲送檢，需保存在厭氧運(yùn)送培養(yǎng)基 中，室溫保存，不得超過24小時(shí)。三、不同標(biāo)本的米集，運(yùn)送（一）血液標(biāo)本采集，運(yùn)送1 .血培養(yǎng)指針征當(dāng)患者出現(xiàn)：發(fā)熱（大于38度）或低溫（小于36度），寒戰(zhàn)，白細(xì)胞增多， 皮膚黏膜出血，休克，多器官衰竭，血壓降低，c反應(yīng)蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出現(xiàn)粒細(xì)胞減少，血小板減少等，具備上述一種或幾種體征時(shí)，臨床懷 疑菌血癥應(yīng)采集血液標(biāo)本進(jìn)行血培養(yǎng)，對(duì)入院危重感染患者應(yīng)在未使用抗菌藥物 治療前，及時(shí)做血培養(yǎng)。2 .對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培 養(yǎng)標(biāo)本。必須同時(shí)或間隔短時(shí)間內(nèi)采集2套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。成年

4、患者：推薦同時(shí)采集2 3套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本），采血量每瓶不少于5ml;嬰幼兒患者：推薦同時(shí)采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo) 本，采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1% .在采取血培養(yǎng)后的25 天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。兩個(gè)例外：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血 癥。3 .血標(biāo)本采集的量是影響檢出率的最重要的因素。檢出率與采血量成比例增長(zhǎng)，每增加1ml的血液，病原菌的檢出率就會(huì)相應(yīng) 增加。兒童患者血液中病原菌濃度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人。采用一對(duì)（需 氧瓶+厭氧瓶）組合，比采用二個(gè)需氧瓶的組合可檢出更多的葡萄球菌、腸桿菌 科細(xì)菌和厭氧菌。采血量不能

5、滿足推薦的量時(shí)，應(yīng)首先滿足需氧瓶的需要。推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本，不推薦靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如 果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時(shí)從外周靜脈采集另外一個(gè)血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助 陽(yáng)性結(jié)果的判讀。4 .血標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)在采血之前，血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用 75%酉精消毒并干燥。然后再進(jìn)行穿 刺部位的皮膚消毒。嚴(yán)格按照“酒精、含碘消毒劑、酒精”的消毒步驟操作，并 等待足夠的消毒時(shí)間。嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈， 除非 帶有無菌手套.不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭 ；采集后的血培養(yǎng)瓶 應(yīng)在1小時(shí)之內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室，血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍。 （二）痰培養(yǎng)

6、標(biāo)本采集，運(yùn)送 1.痰培養(yǎng)指征上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，會(huì)咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子標(biāo)本 培養(yǎng)。下呼吸道感染：凡是咳嗽，咳痰，痰呈膿性，粘稠或血性等都可采集痰標(biāo) 本。2 .標(biāo)本的采集采集前囑咐病人先用清水漱口，摘去牙托，因唾液中口咽部定植菌的濃度可 達(dá)108-109/ml ,去除表面的菌群。教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液。 在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本；標(biāo)本采集后12h內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理，采集標(biāo) 本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo)；無痰可用3%5%NaCl 5ml霧吸約5min 導(dǎo)痰；也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等方法取痰。3 .正常的痰標(biāo)本低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞小于 25個(gè)

7、，白細(xì)胞大于10個(gè)。如果低倍視野下鱗 狀上皮細(xì)胞大于25個(gè)，白細(xì)胞小于10個(gè)應(yīng)不做或僅在特殊要求時(shí)做培養(yǎng)， 如做 培養(yǎng)，報(bào)告中注明“鏡檢結(jié)果表明標(biāo)本口咽分泌物污染明顯” 。4痰培養(yǎng)方法的局限性多數(shù)引起肺炎的病原菌不能培養(yǎng)出，如病毒，軍團(tuán)菌，衣原體等。影響因素 很多：如黏液包裹、定植菌污染。建議痰培養(yǎng)同時(shí)做血培養(yǎng)和痰涂片鏡檢。5 .注意事項(xiàng)常規(guī)的痰培養(yǎng)需在2小時(shí)內(nèi)送檢，若懷疑嗜血桿菌，肺炎鏈球菌感染時(shí)必需 隨留隨送；標(biāo)本中不能混入唾液與鼻咽分泌物等。（三）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集，運(yùn)送1 .尿培養(yǎng)指征尿路感染，腎結(jié)核，泌尿系結(jié)石，膀胱排空功能受損或前列腺增生等患者， 出現(xiàn)尿頻，尿急，尿痛等膀胱刺激癥狀，肉

8、眼膿尿或血尿，尿常規(guī)檢查有白細(xì)胞 或亞硝酸鹽陽(yáng)性，不明原因的發(fā)熱，尿道口有膿性分泌物等癥狀，需采集尿培 養(yǎng)標(biāo)本送檢。2 .標(biāo)本的采集清潔中段尿液，囑咐患者用肥皂水清洗，棄去開始流出的尿液，以沖刷尿道 口的細(xì)菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿； 導(dǎo)尿管尿液，留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本 常通過專門的采樣端口采集，不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液， 采樣端口用 酒精消毒；必要時(shí)，可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過 30分鐘；將注射器針頭插入采 樣端口，抽吸出尿液；注入無菌杯或試管中。膀胱穿刺尿，無菌操作，用無菌注 射器刺入膀胱抽取510ml尿液送檢，主要用于厭氧菌的培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的 嬰幼兒標(biāo)本的采集，此法可避免尿液

9、標(biāo)本的污染。3 .標(biāo)本的米集量一般成人采集10-15ml,嬰幼兒不得少于1ml。診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿 頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療48-72小時(shí)后再采集第二份標(biāo)本。對(duì)于癥 狀不明顯的病人，需采集2-3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時(shí)，應(yīng)連續(xù) 3天采集晨尿。4 .室溫都有利于病原菌和污染菌生長(zhǎng)繁殖， 標(biāo)本采集后立即送檢和接種，室溫下 存放不能超過2小時(shí)，（夏季保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏），4-8度冷藏保存時(shí)間 也不能超過24小時(shí)，冷藏的尿液不能用于淋球菌的培養(yǎng)。5 .注意事項(xiàng)必須無菌操作，采用帶蓋防滲漏的無菌杯收集，多次收集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng)。集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng)。導(dǎo)尿管末端的尿液

10、也不能用于培養(yǎng)， 很難避免沒有尿道菌群污染。在使用抗菌藥物前留取標(biāo)本，尿液中不能加任何防 腐劑或消毒劑，抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。（四）糞便標(biāo)本采集，運(yùn)送1 .送檢指征當(dāng)患者出現(xiàn)腹瀉，大便每天大于或等于 3次，糞便的性狀異常，可為稀便， 水樣便，粘液便，膿血便或血便，伴有惡心，嘔吐，食欲不振，發(fā)熱，腹痛及全 身不適等，大便鏡檢白細(xì)胞大于等于 5個(gè)每高倍視野，抗菌藥物治療后的腹瀉 等。2 .標(biāo)本的采集方法，時(shí)間與量盡可能在發(fā)病早期（急性期）或應(yīng)用抗菌藥物治療之前，采集新鮮的糞便， 懷疑沙門菌感染時(shí)，應(yīng)在發(fā)病2周以后采集。自然排便法，排便后，挑取有膿血 或粘液部位的大便，液狀糞便取絮狀物盛于無菌的容器內(nèi)；

11、直腸拭子采集法，用 于排便困難的患者或嬰幼兒。一般用拭子采集大于 2g的標(biāo)本送檢，若標(biāo)本為水 樣，采集大于2ml的標(biāo)本于無菌容器中送檢。3 .標(biāo)本的運(yùn)送與保存標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢，室溫條件下不能超過2小時(shí)，如不能及時(shí)送檢可加 入ph7.0磷酸鹽甘油緩沖保存液中或?qū)ｉT的大使運(yùn)送培養(yǎng)基中置4度冰箱保存，但不能超過24小時(shí)。高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本必須符合特殊標(biāo)本的安全要 求。4 .注意事項(xiàng)最好在用藥前，采集新鮮的標(biāo)本盛裝在無菌容器內(nèi)， 立即送檢，提高陽(yáng)性檢 測(cè)結(jié)果。厭氧菌的培養(yǎng)盡量避免與空氣接觸和正常的菌群污染。（五）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本的采集及運(yùn)送1 .送檢指征凡是當(dāng)患者有外傷感染，術(shù)后切

12、口感染，導(dǎo)管感染，臍帶殘端感染，有膿液 和分泌物時(shí)，應(yīng)采集標(biāo)本培養(yǎng)。2 .標(biāo)本的采集時(shí)間和方法在使用抗生素前或停用藥1 2天以后，或使用下一次抗生素前采集，對(duì)膿月中性分泌物應(yīng)先用生理鹽水或 75%勺酒精沖洗潰瘍表面滲出物，盡可能抽取膿液 于無菌杯內(nèi)送檢。對(duì)于封閉性膿月中時(shí)，應(yīng)無菌操作抽取膿液310ml于無菌試管 內(nèi)或血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)送檢，懷疑厭氧菌感染時(shí)，應(yīng)做床旁接種或注入?yún)捬跗績(jī)?nèi)（ 3 10ml）送檢，最佳方法是采集組織送檢。3 .標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)于2小時(shí)內(nèi)送微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理，若不能及時(shí)送檢，需氧 培養(yǎng)的標(biāo)本除對(duì)環(huán)境敏感的淋病奈瑟菌， 腦膜炎奈瑟菌和流感嗜血桿菌外，可保 存在4度冰箱中，但保存時(shí)間不能超過24小時(shí)；厭氧培養(yǎng)時(shí)，需用厭氧瓶或厭氧 袋在室溫下保存，但不能超過 24小時(shí)。4 .注意事項(xiàng)盡可能在用抗生素前采集，若患者也用藥，應(yīng)在檢驗(yàn)單上注明抗菌藥名，并 在下次用藥前采集；對(duì)于開放性的傷口，采集前應(yīng)先除去表面污染菌，以防帶入 與感染無關(guān)的皮膚定值菌。干燥結(jié)痂的標(biāo)本一般不做培養(yǎng)，除非有滲出物。采集 標(biāo)本時(shí)應(yīng)無菌操作。（六）穿刺液標(biāo)本的采集與運(yùn)送穿刺液主要包括腦脊液，胸腹水，心包液，膽汁，關(guān)節(jié)液及鞘膜液，在正常標(biāo)本中，上述液體是無菌的，在排除污染的情