HAS快速脫鈣液的研制和應用

1、    HAS快速脫鈣液的研制和應用        水楊酸溶液具有松解膠原、溶解脂肪的作用1，臨床上常用于疣和雞眼病的治療。由于骨組織中的主要成分是無機鹽和膠原，故我們試驗將水楊酸（salicylic acid）與鹽酸(hydrochloric acid)、醋酸(acelic acid)制成快速脫鈣液（簡稱HAS液），用于鈣化和骨組織標本的快速脫鈣，結果顯示其具有脫鈣作用迅速，組織結構保存良好，切片染色清晰的優(yōu)點。我們對HAS液的研制及應用進行總結，現(xiàn)介紹如下。一、材料與方法

2、1HAS液的配制：取36%38%的鹽酸8 ml，99%醋酸5 ml，水楊酸10 g，蒸餾水87 ml，按鹽酸、醋酸、水楊酸的順序依次加入蒸餾水中攪拌混合使成混懸液。2標本：我院1996年7月1998年6月，2年內骨髓穿刺標本22例，骨肉瘤髖關節(jié)離斷術后送檢下肢12例，股骨頭無菌壞死的股骨頭8例。（1）骨髓穿刺標本：呈短柱狀，長條形，長0.40.8 cm，直徑0.20.3 cm；（2）骨肉瘤標本：取腫物邊緣骨組成，體積（1.01.5）×(0.50.8）×（0.30.4）cm3；（3）股骨頭無菌性壞死標本：取病損處股骨頭橫截面，體積同上；（4）長管骨：髖關節(jié)離斷術后送檢的下肢，

3、取無病變的股骨或脛骨橫截面，體積同上。3. 方法與步驟：將待脫鈣標本置于有HAS液的塑料容器內，容器體積是HAS液量的3倍，HAS液量不少于待脫鈣標本總體積的10倍。（1） 室溫脫鈣：將待脫鈣標本置于HAS液中，室溫條件下每隔30分鐘檢查脫鈣效果，以注射針頭輕松穿入標本為完全脫鈣標準。（2） 微波內脫鈣：應用sharp3A65型，最大功率850 W，將待脫鈣標本置入500 ml HAS液中，入微波內加熱高檔（850 W）5分鐘，達100。骨髓穿刺標本繼續(xù)留機10分鐘，其他標本留置30分鐘為一循環(huán)，檢查脫鈣效果，按脫鈣情況決定是否重復以上操作。 二、結果1骨髓穿刺標本：室溫0.51小時可達脫鈣效

4、果；微波內一個循環(huán)即可。2其余病變骨：室溫下326小時均可達脫鈣效果。3HAS 液與Jenkins液室溫下脫鈣比較：取骨肉瘤標本12例，其中股骨11例，脛骨6例分別置入HAS液和Jenkins液中室溫下脫鈣，定期觀察脫鈣效果，記錄達完全脫鈣的時間，數(shù)據(jù)進行t檢驗（表1）。統(tǒng)計顯示兩種脫鈣液的標本脫鈣時間差異有非常顯著性。 表1兩種脫鈣液脫鈣時間比較標本例數(shù)h，±st值P值HAS液Jenkins液骨肉瘤127.5±3.737.0±11.48.52<0.005股骨頭無菌性壞死813.7±9.242.7±17.44.17<0.002 5長

5、管骨1717.2±8.949.5±23.65.280.0054HAS液脫鈣標本染色：HAS液脫鈣后的標本，無須流水沖洗，可直接入自動脫水機與當日取材的其它軟組織標本同步固定、脫水、透明、浸蠟、切片，HE染色顯示組織結構完整，染色清晰（1-4）。1骨髓惡性淋巴瘤標本HAS液微波內脫鈣1個循環(huán)HE ×4002顱骨轉移癌標本HAS 液微波內脫鈣1個循環(huán)，免疫組化標記細胞角蛋白LSAB法 ×1003骨化纖維瘤標本，用HAS液微波內脫鈣1個循環(huán)HE ×1004骨瘤標本，用HAS液微波內脫鈣2個循環(huán)HE ×100三、討論骨組織或鈣化標本中固有難溶

6、于水的羥磷灰石成分而使標本堅硬，不能直接用于制作切片，以往的脫鈣液常用Jenkins液，使羥磷灰石轉化為可溶于水的酸式磷酸鹽、氯化鈣等，使標本軟化。但是醋酸具有溶解膠原1，可能脫鈣和溶解膠原同時進行妨礙鈣離子析出。HAS液中加入水楊酸后，由于水楊酸具有松解膠原和溶解脂肪的作用2。使強酸較容易穿透組織，而且轉化的可溶性鈣鹽也較易析出，故HAS液可顯著加快脫鈣作用。應用微波輻射可加速組織內分子運動2 ，加速升溫（水楊酸溶于熱水和醇，水溶液化學作用大于醇溶液）到100更好發(fā)揮作用，而且微波還可以破壞蛋白質的交聯(lián)，使組織間隙通暢，有利于鈣鹽析出。HAS液100條件下脫鈣不影響染色效果，我們自1996年7月以來已應用該液處理各種骨組織或鈣化標本470例，顯示有明顯縮短脫鈣時間，組織結構保存完整，染色清晰的優(yōu)點，100快速脫鈣縮短了標本在酸性溶液中的滯留時間，減少了酸性溶液對染色效果的影響。HAS液具有快速脫鈣，組織結構保存完整，染色清晰的特點，具有很好的應用價值。作者單位：250021 濟南，山東省立醫(yī)院病理科參考文獻1葉松柏.消毒防腐藥，藥理學北京：