果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)

1、文檔來源為 :從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word 版本可編輯.歡迎下載支持果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)（反交組）綜合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容果蠅分離定律的實(shí)果蠅自由組合的實(shí)驗(yàn)分析果蠅的伴性遺傳實(shí)驗(yàn)分析實(shí)驗(yàn)第一部分果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、理解和驗(yàn)證分離定律；2、了解兩對不連鎖基因的雜交方法，驗(yàn)證自由組合定律；3、正確認(rèn)識伴性遺傳的正、反交的差別，驗(yàn)證伴性遺傳規(guī)律；4、 理解連鎖和交換的原理， 學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)處理和重組值的計(jì)算方法， 繪制遺傳學(xué)圖。 二、實(shí)驗(yàn)原理（1）分離定律一對等位基因在雜合子中，各自保持其獨(dú)立性，在配子型城市，彼此分開，隨即進(jìn)入不同的配子，在一般情況下：F1雜合子的配子分離比為：1: 1; F2表型

2、分離比是3: 1;F2 基因型分離比為 1 ： 2： 1。P 黑檀體（e e） x灰體（+ ）F1灰體（+e）F2 灰體（ + ） :灰體（+e） :黑檀體 （ee）121（2） 自由組合定律支配兩對 （或兩對以上） 不同形狀的等位基因， 在雜合狀態(tài)保持其獨(dú)立性。 配子形成時(shí)，各等位基因彼此獨(dú)立分離， 不同對的基因自由組合。 在一般情況下， F1 配子分離比是1：1: 1: 1;F2基因型分離比率（1:2:1）2, F2表型比率：9: 3: 3: 1P長翅黑檀體（+ee）x短翅灰體（+mm）F1長翅灰體 （+m +e）F2 長翅灰體 :長翅黑檀體 :短翅灰體 :短翅黑檀體 9331（3）伴性遺

3、傳由性染色體所攜帶的基因在遺傳時(shí)與性別相聯(lián)系的遺傳方式。 果蠅野生型紅眼（ X+ ） 和突變型白眼（ Xw ） 是一對相對性狀， X+ 對 Xw 是顯性。 將顯性純合的紅眼雌蠅（ X+X+ ）與白眼雄蠅（ XwY ）雜交， F1 不論雌雄均表現(xiàn)為紅眼。 F1 雌雄個(gè)體互交， F2 紅眼與白 眼的比例為3 ： 1 ，但無白眼雌蠅。白眼（X+X+）? 紅眼（XwY）S紅眼（X+ Xw）?（X+Y） S紅眼雌 X+X + 紅眼雌 X+X w 紅眼雄 X+ Y 白眼雄 XwY 紅眼 ：白眼 =3 ： 1 雌性 ：雄性 =1 ： 1三、實(shí)驗(yàn)材料1、果蠅材料：陜師大生命科學(xué)學(xué)院遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室保存的:陜師大生

4、命科學(xué)學(xué)院遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室保存的6和 26 號品系：品系體色眼色翅型剛毛6灰白 w(1)短 m(1)卷 sn(1)26黑檀體e（3）紅長直2、實(shí)驗(yàn)器具與藥品與藥品用具：解剖鏡、麻醉瓶、毛筆、培養(yǎng)瓶、白瓷板、死蠅瓶:解剖鏡、麻醉瓶、毛筆、培養(yǎng)瓶、白瓷板、死蠅瓶藥品：乙醚:乙醛四、實(shí)驗(yàn)步驟（技術(shù)路線）1）挑選至少4 只 6 處女蠅， 4 只 26 雄蠅放入培養(yǎng)瓶（親本雜交瓶） ，貼標(biāo)簽J （78天）倒去親本果蠅J （35天）F1 代果蠅出現(xiàn)J （23天）移出 56 對雌雄蠅（無需處女蠅）放入新的培養(yǎng)瓶（ F1 瓶） ，貼標(biāo)簽J （78天）倒去 F1 親本J （35天）F2 代果蠅出現(xiàn)，觀察統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)歸類

5、，結(jié)果分析，卡方檢測，結(jié)論，總結(jié)等2）反交組的具體分配反交組， 26 號 8 管、 6 號 8 管確認(rèn)親本蠅性狀，有三齡幼蟲時(shí)，倒去已有成蠅反交組（2管/4位一26號）U攵集26處女蠅和26 3各8只，分別放入新培養(yǎng)瓶；交換臺后，每4位同學(xué)做1管正交6（ ? ）X 26 （ S ）或1管反交26（ ? ） X 6（5 ）,每管4對 親本蠅，貼標(biāo)簽；每4人1管P1X P2 （親本瓶）待F1成蠅出現(xiàn)后，統(tǒng)計(jì)并觀察性狀，分別挑選 45對F1拿3轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)管，貼標(biāo)簽；每 2 人 1 管 （F1 瓶）每兩位同學(xué)統(tǒng)計(jì)一個(gè)雜交管中的F2 ，統(tǒng)計(jì)至200 只左右，并分別寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告（若 F2 數(shù)量太少，相同

6、雜交組同學(xué)可合并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)）五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表格實(shí)驗(yàn)記錄表格（自行設(shè)計(jì)）六、預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法（一）正交組 6（?） X1 、分離定律2、自由組合定律3、伴性遺傳4、三點(diǎn)測驗(yàn)（二）反交組 26（孕）1 、分離定律2、自由組合定律（灰長3、伴性遺傳（灰:黑檀體=3:1）;（灰紅：灰白擅紅檀白=3:3:1:1 ）;（紅眼：白眼=1:1;雌:雄=1:1）;（預(yù)期有 8 種表型）6（$）：（灰:黑檀體=3:1）;（灰長：灰短:檀長檀短=9:3:3:1 ）（紅眼：白眼=3:1 ;雌:雄=1:1 ）;4、為何不能驗(yàn)證三點(diǎn)測驗(yàn)？ （ F1 S為三顯性個(gè)體，故 F2?均為顯性表型 ）。實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注

7、意的幾個(gè)問題實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性保證：時(shí)間；認(rèn)真；盡量減少人為誤差（處女蠅的挑選、親本雜交后或 F1 接種后的時(shí)間） 。剛開始放入雜交親本或F1 接種后，每天要觀察果蠅的生活情況， 若有死亡要及時(shí)補(bǔ)充。每次觀察統(tǒng)計(jì)時(shí)均要麻醉，或雜交開始放入親本或放入 F1 時(shí)也要麻醉。放入時(shí)將雜交管平放，待果蠅蘇醒后再豎立。對于F2代的統(tǒng)計(jì)要及時(shí)（嚴(yán)格 8h內(nèi)，最多12h）挑出孵化出的F2代成蠅，統(tǒng)計(jì)后丟棄；每只 F2 代要統(tǒng)計(jì)各種性狀（眼色、體色、剛毛、翅型、雌雄） 。性梳、剛毛等結(jié)構(gòu)一定要用解剖鏡觀察。翅型、體色、剛毛、雌雄等性狀在剛剛孵化出時(shí)不易辨認(rèn)，可再放回管中 1 2h 之后再觀察。每次統(tǒng)計(jì)必須要有記錄

8、。若出現(xiàn)例外要及時(shí)報(bào)告值班教師，并要進(jìn)行記錄、分析。不要存在心理暗示。統(tǒng)計(jì)過的果蠅入死蠅瓶。雜交結(jié)束后，每個(gè)實(shí)驗(yàn)均要做卡方檢驗(yàn)，以驗(yàn)證是否符合相關(guān)定律。實(shí)驗(yàn)第二部分果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)過程及觀察記錄第一周：1） 選取每組實(shí)驗(yàn)所要用的各種果蠅表型 （黑檀體 紅眼 長翅 直剛毛為母本和灰體 白眼 短 翅 卷剛毛為父本）分別培養(yǎng)使其產(chǎn)卵。每天按7： 008： 00， 13： 0014： 00， 21：0022： 00 三份額時(shí)間段觀察收集果蠅。注：處女蠅的鑒別與挑選和收集。每組至少挑選 5-10 只處女蠅。新羽化的雌身體細(xì)長，幼嫩的幾乎透明，一般在8-10h 沒有交配能力，或經(jīng)過 7-10 天的隔離飼

9、養(yǎng)沒有與任何雄蠅交配過的蠅都屬于處女蠅 。2）雜交接種的步驟：I接種：把選出的雌雄果蠅，根據(jù)雜交實(shí)驗(yàn)要求搭配起來，裝入一個(gè)培養(yǎng)瓶內(nèi)，每瓶放 56對，貼上標(biāo)簽，寫明雜交組合的親本、雜交日期、實(shí)驗(yàn)者姓名。n培養(yǎng)：第二天檢查培養(yǎng)瓶，親蠅若有死亡應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充，將培養(yǎng)瓶放在25 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意隨時(shí)檢查培養(yǎng)基是否發(fā)霉，如有污染應(yīng)立即更換新的培養(yǎng)基。第二周：對果蠅生活史進(jìn)行細(xì)心觀察。淘汰親本果蠅：第一周接種的親蠅，經(jīng)7-8天培養(yǎng)后，再過3-4天，F(xiàn)1代將孵出，為避免親子蠅混淆，應(yīng)將親本果蠅移到死蠅瓶中。即當(dāng)瓶壁上出現(xiàn)黑色蛹時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室移去親本，之后繼續(xù)將培養(yǎng)瓶存放在恒溫箱內(nèi)保存。第三周：觀察記錄 F1

10、 表型：再經(jīng)35 天（即接種雜交親本后的約 1112 天） ， F1 成蟲開始羽化，在實(shí)驗(yàn)室中取出 F1 成蠅，觀察記錄其表型和數(shù) F1 兄妹交（自交） ：取一新培養(yǎng)瓶，放1015對 F1 果蠅。進(jìn)行 F1 自交。貼好標(biāo)簽，寫明 F1 的基因型、雜交日期、實(shí)驗(yàn)者姓名。第四周：78 天后，移去F1 兄妹交（自交）的個(gè)體。第五周： 再過 2 天左右即接種 F1 果蠅 10 左右天后， F2 開始羽化。仔細(xì)觀察F2 的各種表型，并詳細(xì)記錄。 前兩天時(shí)，我們組每天去三次，即新羽化的果蠅F2 代無自交，后續(xù)時(shí)間緊張，我們每天去一次，所以我們從11.2. 12.3號這段時(shí)間內(nèi)觀察記錄F2。共收集229 只

11、果蠅。 觀察記錄結(jié)果見原始數(shù)據(jù)表。數(shù)據(jù)的收集過程本次實(shí)驗(yàn)自 10 月 21 日起至 12 月 3 日至，歷時(shí)42 天，共收集子二代229 只。10月21日27日：收集6號3 , 26號？，每隔8h收集一次。10月27日：親本合管，6號3 , 26號?雜交，每管5只3, 5只？，分兩管。11 月 3 日：倒掉親本，繼續(xù)培養(yǎng)。11 月 6 日：F1 代成蠅開始出現(xiàn)，將收集到的F1 代分四管培養(yǎng)，兩人負(fù)責(zé)一管。11月14日：停止收集F1代，此時(shí)四個(gè)小管中都有 3-5對F1代？、3果蠅。11 月 21 日：開始收集F2 代，并按性狀開始計(jì)數(shù)。12月3日：F2代收集結(jié)束。原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表觀察性別體色眼色翅

12、型剛毛日期灰黑檀紅白長短殘直卷11.20+3只+2130303003011.21+10只5582649108211.22+號+6文檔來源為：從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持.+9只5472818017211.23+號+6只3360424204211.24+號+16只97133142114114211.25+號+15只123114132150015011.26+號+52只32203319361623290411111.27+號+14只771317794112211.28+號+28只131520817117210151311.29+號+12只4811193111010211.30+

13、號+31只19222011256217314712.1+號+12只841208493010212.2+號+9只277245900541+2+1+3+3+1+1+1+12.3號12只66936675084總計(jì)1271021725716069146776176539文檔來源為 :從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word 版本可編輯.歡迎下載支持229 只實(shí)驗(yàn)第三部分果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)之?dāng)?shù)據(jù)處理及分析（反交組）經(jīng)過觀察 F2 的各種性狀，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，記錄結(jié)果，現(xiàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及分析。（一）分離定律（以黑檀體，灰體為一對相對性狀）世代果蠅數(shù)目灰體（ + ）黑檀體（ee）F217257F2 代 X2 檢驗(yàn)：灰體（ + ）黑檀體

14、（ ee）F2 表型O17257E171.857.3(O-E)20.040.09(O-E)2/E0.000230.00157由自由度 df=2-1=1 ，當(dāng) P=0.05 時(shí)，查得 X2=3.84 ，實(shí)驗(yàn)的到 X2=0.0018 ，兩者比較0.0018V 3.814 ,所以在5%勺顯著水平上差異不顯著，觀察頻數(shù)與理論頻數(shù)之間的差異屬于隨機(jī)誤差，因此本實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合孟德爾第一遺傳定律一一分離定律，即黑檀體（e e） X灰體（+）得到的 F2 代出現(xiàn)灰體 ：黑檀體 =3 ： 1 的分離比。（二）自由組合定律世代果蠅數(shù)目灰體長翅灰體短翅黑檀體長翅黑檀體短翅F2129433615自由組合定律的x2檢驗(yàn)表

15、F2 表型O灰體長翅129灰體短翅43黑檀體長翅36黑檀體短翅15總計(jì)223E125.441.841.813.9223(O-E) 212.961.4433.641.21(O-E)2/E0.100.030.800.091.02分析：有df （自由度） =4-1=3，當(dāng) P=0.05 時(shí)，查x2 表得x2=7.82 ，實(shí)驗(yàn)所得值為1.02，與查表所得 x2 值比較， 1.02<7.82,統(tǒng)計(jì)學(xué)上認(rèn)為在5%顯著水準(zhǔn)上差異不顯著，觀察頻數(shù)與理論頻數(shù)間的差異屬于隨即誤差。遺傳學(xué)上認(rèn)為該次雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合基因自由組合定律：兩對基因的遺傳是自由組合的，即灰體長翅：灰體短翅：黑檀體長翅：黑檀體短翅 =9

16、 ： 3： 3:1.（三）伴性遺傳定律世代果蠅數(shù)目紅眼雌性紅眼雄性 白眼雄性 白眼雌性F211643628伴性遺傳的x2檢驗(yàn)表F2 表型紅眼雌紅眼雄白眼雌白眼雄總計(jì)O11643862229E114.557.25057.25229(O-E) 22.25203.066422.56(O-E) 2/E0.0193.547-0.3943.96分析：有df（自由度） =4-1=3 ，當(dāng)P=0.05 時(shí)，查x2 表得x2=7.82 ，實(shí)驗(yàn)所得值為3.96與查表所得x2 值比較， 3. 96<7.82,統(tǒng)計(jì)學(xué)上認(rèn)為在5%顯著水準(zhǔn)上差異不顯著，觀察頻觀察頻數(shù)與理論頻數(shù)間的差異屬于隨即誤差。遺傳學(xué)上認(rèn)為該次雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合伴性遺傳。即有：顯性純合的紅眼雌蠅（ X+X+ ）與白眼雄蠅（ XwY ）雜交， F1 不論雌雄均表現(xiàn)為紅眼。 F1 雌雄個(gè)體互交， F2 紅眼與白眼的比例為3 ： 1，但無白眼雌蠅。白眼（X+X+）? 紅眼（XwY）S紅眼（X+ Xw）?（X+Y） S紅眼雌 X+X +