玉米莖腐病抗性鑒定接種方法探究

1、玉米莖腐病抗性鑒定接種方法探究摘要：采用玉米播種時埋菌接種和成株期傷莖根埋法接 種相結(jié)合的方法，對20個夏玉米品種進行莖腐病的人工接 種抗病性鑒定，探索玉米莖腐病人工接種的新方法。結(jié)果表 明，此接種方法能很好地誘發(fā)玉米植株發(fā)病，20個夏玉米品 種對玉米莖腐病表現(xiàn)出不同程度的抗性水平，發(fā)病率為 4. 8%38. 9%,抗病類型有s、r、mr、hr4種類型。關(guān)鍵詞：玉米莖腐??；人工接種；抗病性鑒定中圖分類號：s435. 131文獻標識碼：a doi編碼：10. 3969/j. issn. 1006-6500. 2012. 04. 042study on inocula tion met hod o

2、f corn st alk rot resistance identificationsun shu-qin, yang xiu-rong, tian tao(tianjin institute of plant protection, tianjin 300381,china)abstract： in order to find the new inoculation method of the disease resistance identification of corn stalk rot, resistance of 20 summer maize varieties were i

3、dentified by axtificial inocula tion in this paper the method was to inocula tion inoculum at seeding st age and injuring stem and buring root at adult stage the result showed that the method was effective. 20 summer corn varieties showed different degree of resistance level, incidence was 4. 8%38.

4、9% and disease resistance type had 4 types： s, r, mr, hr.key words： corn stalk rot； artificial inoculation； resistance identification玉米莖腐病(corn stalk rot)俗稱玉米青枯病，主要 由鐮刀菌屬(fusarium spp.)和腐霉菌屬(pythium spp.) 病原菌單獨或復合侵染植株根系，造成根部和莖基部腐爛的 一類土傳病害。病株根系發(fā)育不良，莖基部變軟，莖部及地 面上13節(jié)間多出現(xiàn)黑色軟腐，嚴重者倒伏。莖髓部空松， 顏色由白色變?yōu)闇\粉色。果穗下

5、垂，穗柄柔軟，籽粒干癟， 脫粒困難，一般減產(chǎn)10%20%。種植抗病品種是預防玉米莖腐病大發(fā)生的主要措施，而 抗病品種的選育和篩選主要通過人工接種進行抗病性鑒定。 目前人工接種的方法主要為根埋法。但我們在研究中發(fā)現(xiàn)， 采用根埋法進行人工接種，玉米莖腐病的發(fā)病率很低，尤其 是遇干旱條件，導致鑒定結(jié)果可靠性差，不能很好地反映抗 性材料的抗性水平。為了更真實地反映抗性材料的抗性水 平，提高抗病性鑒定的準確率，我們對玉米莖腐病的接種方 法進行了改進，在播種的同時接種病原菌，后期再輔以傷莖根埋法接種，以提高莖腐病的發(fā)病程度。1材料和方法1.1材料采集天津主要玉米產(chǎn)區(qū)莖腐病典型病樣，采用常規(guī)的組 織分離法分

6、離病原物。選用分離頻率較高的病原物（即本地 區(qū)的優(yōu)勢病原菌種群）作為供試菌種，經(jīng)鑒定為腫囊腐霉（pythium inflatum）o供試20個夏玉米品種，分別為：嘉玉5號、唐4078、正大22、hc902、hc903、農(nóng)單905、津0902、金穗1號、德 利農(nóng)988、隆平206、寧玉311、粟玉1號、大玉3號、冀豐 223、肅玉一號、聯(lián)豐20、源申213、京科739、冀植5號、 邯豐13號。供試玉米品種由天津市種子管理站提供。12方法1.2. 1病原物接種體的制備將pda斜面培養(yǎng)的腫囊腐 霉菌接種于經(jīng)高壓滅菌的玉米粒培養(yǎng)基上（制備方法為：玉 米粒浸泡1夜，開水煮1 h左右，待充分漲滿后裝入耐高

7、溫 高壓的塑料袋中，封口后121 £高壓滅菌lh,冷卻后備用）。 25 i生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待菌絲布滿玉米粒后即可用于接種。1.2.2試驗設(shè)計 試驗在天津市植物保護研究所玉米莖腐病抗病鑒定內(nèi)進行。每抗病鑒定品種隨機排列播種，每品種播種3行（3次重復），每行40株左右，密度較常規(guī)大田大些。每畦設(shè)保護行2行和感病品種對照（齊31） 2行。1.2.3接種方法2011年6月8日采用穴播法播種夏玉 米，每穴先施入玉米粒培養(yǎng)菌1020 g,后播種、覆土、踩 實。噴施玉米田封閉除草劑1次，出苗后常規(guī)田間管理。于 玉米抽雄期（8月16 0）采用傷莖根埋法接種。具體接種方 法為：用鐵鍬沿距地面24 c

8、m的莖部表皮和不定根向下挖 610 cm深的小坑（要對莖基部和不定根造成傷口），在小 坑中接種玉米粒培養(yǎng)菌3050 g,再將小坑埋嚴踩實。接種 后大水漫灌23次，增加玉米田的濕度。1.2.4調(diào)查方法及抗性評價 玉米進入乳熟后期進行調(diào) 查，逐株調(diào)查每份鑒定品種的發(fā)病狀況。剝開近地面玉米葉 片，著重調(diào)查莖基部節(jié)位。莖節(jié)或節(jié)間變褐色或黑褐色，莖 節(jié)變軟，剖開髓部可見髓部空松，顏色變深，即為發(fā)病株。 記載調(diào)查總株數(shù)和發(fā)病株數(shù)，計算發(fā)病株率，并對鑒定品種 進行抗性評價。2 結(jié)果與分析采用播種時接種和抽雄期傷莖根埋接種相結(jié)合的方法， 通過人工接種天津地區(qū)玉米莖腐病的優(yōu)勢致病種一一腫囊 腐霉對玉米成株期進行

9、抗病性鑒定。試驗結(jié)果表明，20個夏 玉米均有不同程度的發(fā)病，發(fā)病率為4. 8%38. 9%,感病品 種發(fā)病率達到了 49.6%,較好地反映了鑒定品種的抗性水平 （表2）o試驗說明，采用2種接種方法相結(jié)合能使玉米在成株期達到較高的發(fā)病水平。3. 1玉米莖腐病的發(fā)病條件不同地區(qū)，引起玉米莖腐病的病原菌也不盡相同，所以在進行人工接種時，一定要使用本地區(qū)或本玉米產(chǎn)區(qū)的優(yōu)勢致病小種。另外，玉米灌漿中期至蠟熟期，連續(xù)陰雨，光照不足,重陰暴晴是發(fā)病的有利條件，因此，在人工接種后應連續(xù)灌水23次，增加田間濕度，加大發(fā)病率。3. 2玉米莖腐病的接種方法玉米莖腐病的接種方法很多，目前國內(nèi)使用較多的是根埋法，但存在

10、發(fā)病率低的問題。本研究組在根埋法的基礎(chǔ)上, 采用播種時接種，相當于增加了田間的初侵染源，加大了植 株的發(fā)病幾率。在根埋法接種時，對莖基部和不定根造成傷 口，降低植株對病原的抵抗力，從而增加病原菌的侵染幾率。 劉愛國等在對玉米進行莖腐病的抗病鑒定時，采用播種前將 上年采集的玉米莖腐病株粉碎，隨整地翻入土壤，進行玉米 莖腐病接種，也是加大初侵染源。本試驗方法雖能誘發(fā)植物 發(fā)病，但也存在接種工作量大的缺陷，人工接種作為抗病性 鑒定的必要手段，需要今后的不斷努力創(chuàng)新，探尋更為方便 簡捷的接種方法，提高工作效率。參考文獻：1 王曉鳴.玉米抗病蟲性鑒定與調(diào)查技術(shù)j作物 雜志,2005(6):53-55.2 王波，馬曉靜玉米新組合莖腐病抗性鑒定的分析 j.安徽科技學院學報,2011,25(2):18-23.3 崔俊明，胡素蘭，謝榮芝，等玉米青枯病發(fā)病影 響因素分析j河南農(nóng)業(yè)科學，1993 (5)： 16-19.4 田雪亮，陳錫嶺玉米苗枯病抗性鑒定方法的改進 j.湖北農(nóng)業(yè)科學,2006,45 (5): 599-601.5 李春霞，蘇俊，龔士琛，等玉米莖腐病接種方法的 研究j 玉米科學,2001,9(2)： 72-7