高中生物選修三 動物細(xì)胞融合和單克隆抗體.ppt

植物體細(xì)胞雜交過程 雜種小植株 雜種植株 溫故知新 回憶已學(xué)知識 你是否已經(jīng)見到過動物細(xì)胞融合的實(shí)例 人 鼠 想像圖 2 2 2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體 鼠細(xì)胞 人細(xì)胞 人工誘導(dǎo) 一 動物細(xì)胞融合 雜交細(xì)胞 動物細(xì)胞融合 技術(shù) 是指 在一定的條件下 兩個或多個細(xì)胞融合形成一個細(xì)胞的過程 1 概念 2 誘導(dǎo)融合的因素化學(xué)法 聚乙二醇 PEG 誘導(dǎo)融合 物理法 電激融合生物法 滅活的病毒誘導(dǎo)融合 病毒顆粒黏附細(xì)胞表面 細(xì)胞膜連接 細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通 細(xì)胞融合 形成雜種細(xì)胞 為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑 滅活喪失感染性但保留融合活性 獲得雜種植株 去壁 原生質(zhì)體融合 誘導(dǎo)新壁 雜種植株 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞膜的流動性 結(jié)果 誘導(dǎo)方法 步驟 融合的原理 動物細(xì)胞融合 植物體細(xì)胞雜交 比較項(xiàng)目 植物 動物細(xì)胞融合的比較 獲得雜交細(xì)胞 小結(jié) 3 動物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用 問題 抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生 其化學(xué)本質(zhì)是什么 與抗原作用的特點(diǎn) 主要分布在哪里 二 單克隆抗體的制備 抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法 從血清中分離抗體 該法制備抗體的特點(diǎn) 產(chǎn)量低 純度低 且抗體的特異性差 多種漿細(xì)胞 動物體內(nèi) 多種抗體 抗原 提示 每一個效應(yīng)B淋巴細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強(qiáng)的抗體 如果利用單個效應(yīng)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖 克隆 形成細(xì)胞群 這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強(qiáng)的抗體 單克隆抗體 問題 怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強(qiáng)的抗體呢 材料 效應(yīng)B細(xì)胞在體內(nèi)只能由B淋巴細(xì)胞增殖 分化而來 不再進(jìn)行分裂 在體外培養(yǎng)的條件下 也很難分裂 思考 用什么方法才能讓B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖 雜交瘤細(xì)胞 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 動物細(xì)胞融合技術(shù) 單克隆抗體 既能產(chǎn)生特異性抗體 又能大量繁殖的細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖 一個漿細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 設(shè)計(jì)方案 讀下面一段文字資料 找出單克隆抗體的概念 人們發(fā)現(xiàn) 在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中 體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體 但是每個B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一 特異性強(qiáng)的抗體 要想獲得大量的單一抗體 必須用單個B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖 即克隆 單克隆抗體的概念 單 單個細(xì)胞克隆 無性繁殖單克隆抗體 單個細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體 單克隆抗體的制備 問題思考 Q1 Q2 細(xì)胞兩兩融合后 有哪些類型 B B B 瘤 瘤 瘤 哪種是需要的類型 要篩選嗎 細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑 其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷 人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑 但一般不分裂增殖 鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑 沒有S途徑 可是能不斷分裂增殖 你想到篩選雜交瘤細(xì)胞的方案了么 小資料 單克隆抗體的制備 問題思考 Question 經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞群進(jìn)行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體 還需怎么辦 有限稀釋法稀釋多次 稀釋 對能產(chǎn)生特異性抗體的單個雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆 即單細(xì)胞克隆 由它產(chǎn)生的抗體 即單克隆抗體 將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出 檢測抗體 多孔細(xì)胞培養(yǎng)板 單克隆抗體 雜交細(xì)胞 滅活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞 經(jīng)免疫的小鼠 提取 雜交瘤細(xì)胞 第一次篩選 用特定的選擇培養(yǎng)基 第二次篩選 能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 提取單克隆抗體 4 單抗制備過程中應(yīng)用了那些技術(shù) 動物細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) 1 此過程中至少進(jìn)行了幾次篩選 目的相同嗎 3 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) 特異性強(qiáng) 靈敏度高 可大量制備 2 最終從哪兒提取單克隆抗體 1 作為診斷試劑 最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確 高效 簡易 快速 如同位素標(biāo)記單克隆抗體 可診斷腫瘤 心血管畸形等 三 單克隆抗體的應(yīng)用 2 治療疾病和運(yùn)載藥物 生物導(dǎo)彈 單克隆抗體 藥物 治療腫瘤 生物導(dǎo)彈 單抗導(dǎo)向 藥物為彈頭 單克隆抗體的應(yīng)用 療效高 副作用小 1 科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合 得到雜交細(xì)胞 經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體 與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 A 經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B 沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C 經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D 沒經(jīng)過免疫的 淋巴細(xì)胞 A 鞏固練習(xí) 2 動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中 正確的是 誘導(dǎo)融合的方法完全相同B 所用的技術(shù)手段基本相同C 操作步驟基本相同D 都能形成雜種細(xì)胞 D 3 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是 A 由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B 由小鼠一個B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C 由小鼠一個B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D 由小鼠一個B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D 4 只能使動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是 A PEGB 滅活的病毒C 電刺激D 離心 B 5 單克隆抗體制備過程中 骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后 要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞 在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞A B C D C 6 生物導(dǎo)彈 是指 A 單克隆抗體B 雜交瘤細(xì)胞C 產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D 在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D 單克隆抗體的制備 有夢想 才會有創(chuàng)造 已成功的動物細(xì)胞融