人教版選修1血紅蛋白的提取與分 離作業(yè).docx

血紅蛋白的提取與分離一、單選題1將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000r/min的速度離心10min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是a. 血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層b. 甲苯層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層c. 脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層d. 甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、紅細(xì)胞破碎物沉淀層【答案】d【解析】試題分析：分離血紅蛋白溶液時(shí)，將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，經(jīng)過(guò)中速長(zhǎng)時(shí)離心后，可明顯看到試管中溶液分為4層，從上往下數(shù)，第1層為甲苯層，第2層為脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層為血紅蛋白水溶液，第4層為雜質(zhì)沉淀層?？键c(diǎn)：本題主要考查血紅蛋白的提取和分離的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力。2有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中，不正確的是()a可通過(guò)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度b凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在c血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑d整個(gè)過(guò)程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)【答案】c【解析】試題分析：血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是溶解細(xì)胞膜，c錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的知識(shí)應(yīng)用能力。3在血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，將經(jīng)處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000rmin的速度離心10min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是a血紅蛋白、甲苯層、脂類(lèi)物質(zhì)層、沉淀層b甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂類(lèi)物質(zhì)層c脂類(lèi)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層d甲苯層、脂類(lèi)物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層【答案】d【解析】血紅蛋白溶液離心后分為4層，從上到下，第1層為無(wú)色透明的甲苯層，第2層為白色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層是紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液，第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物，故本題正確答案為d。 【考點(diǎn)定位】血紅蛋白的提取和分離4以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是（ ）a. 洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂b. 豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少c. 在凝膠色譜法分離過(guò)程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白行程大d. 血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)【答案】c【解析】洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂，a項(xiàng)正確；豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少，b項(xiàng)正確；在凝膠色譜法分離過(guò)程中，血紅蛋白只在凝膠外部移動(dòng)，比分子量較小的雜蛋白行程小，c項(xiàng)錯(cuò)誤；血紅蛋白顯紅色，可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)，d項(xiàng)正確。5脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘焙?，其活性位點(diǎn)上含有兩個(gè)鎳離子，在大豆、刀豆種子中含量較高，土壤中的某些細(xì)菌也能夠分泌脲酶。實(shí)驗(yàn)室從土壤中分離得到了能夠分解尿素的細(xì)菌m，并分別研究了培養(yǎng)液中的、和尿素濃度對(duì)細(xì)菌m脲酶產(chǎn)量的影響（說(shuō)明：研究某一項(xiàng)時(shí)其他條件相同且適宜），結(jié)果如下表。下列說(shuō)法正確的是（ ）a所有脲酶都在核糖體上合成且在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上加工使其與鎳結(jié)合才具有活性b實(shí)驗(yàn)表明培養(yǎng)液中和對(duì)脲酶的影響為低濃度促進(jìn)，高濃度抑制c細(xì)菌m合成脲酶需要尿素誘導(dǎo)，尿素的最適誘導(dǎo)濃度在04%08%之間d凝膠色譜法分離脲酶時(shí)，脲酶比其他小分子蛋白質(zhì)在凝膠柱中移動(dòng)更慢【答案】c【解析】根據(jù)題意可知，細(xì)菌也能分泌脲酶，但細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)除核糖體外沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等其他細(xì)胞器，故細(xì)菌分泌的脲酶的過(guò)程與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)無(wú)關(guān)，a錯(cuò)誤；分析表中數(shù)據(jù)可知，培養(yǎng)液中尿素濃度在08時(shí)，培養(yǎng)液中和對(duì)脲酶的影響為低濃度促進(jìn)，高濃度抑制，但培養(yǎng)液中尿素濃度大于08%而小于10%時(shí)，沒(méi)有此規(guī)律，b錯(cuò)誤；表中數(shù)據(jù)表明，培養(yǎng)液中尿素的濃度在04%08%之間時(shí)，脲酶的產(chǎn)量相對(duì)較高，說(shuō)明細(xì)菌m合成脲酶需要尿素誘導(dǎo)，尿素的最適誘導(dǎo)濃度在04%08%之間，c正確；凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的小分子蛋白質(zhì)在凝膠柱中移動(dòng)更慢，d錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析和蛋白質(zhì)的分離【名師點(diǎn)睛】1分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)記錄時(shí)，應(yīng)注意分析實(shí)驗(yàn)的自變量與因變量之間的關(guān)系，即在遵循單一變量原則的前提下，一次只分析一種自變量與因變量之間的數(shù)值規(guī)律，找出自變量對(duì)因變量的影響。如分析培養(yǎng)液中尿素濃度對(duì)脲酶產(chǎn)量的影響是，鎳離子和錳離子濃度都是無(wú)關(guān)變量，只分析尿素濃度變化與脲酶產(chǎn)量之間的數(shù)值變化規(guī)律，可得出尿素的最適誘導(dǎo)濃度在04%08%之間。2凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，小分子蛋白質(zhì)會(huì)進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，故其移動(dòng)的路徑較長(zhǎng)，在凝膠柱中移動(dòng)更慢；而分子較大的蛋白質(zhì)不進(jìn)入凝膠顆粒，只在凝膠顆粒之間移動(dòng)，故其移動(dòng)的路徑較短，移動(dòng)速度較快，最先被分離出來(lái)。6下列說(shuō)法中正確的是（ ）a制酒和制醋的微生物進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生co2的場(chǎng)所都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)b探究麥芽糖酶的專(zhuān)一性實(shí)驗(yàn)中，可選擇斐林試劑檢驗(yàn)麥芽糖是否分解c低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍的實(shí)驗(yàn)原理是低溫可抑制紡錘體的形成，從而抑制染色體著絲點(diǎn)分裂，使染色體不能分別移向兩極d用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較小【答案】d【解析】試題分析：制酒的微生物是酵母菌，進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳，場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，而制醋的微生物是醋酸菌，不能產(chǎn)生二氧化碳；a錯(cuò)誤；斐林試劑是鑒定還原性糖的，麥芽糖本身就是還原性糖，b錯(cuò)誤；低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍的實(shí)驗(yàn)原理是低溫抑制紡錘體的形成，使子染色體不能分別移向兩極，c錯(cuò)誤；相對(duì)分子量大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程短、速度快，先到達(dá)色譜柱的下端，而相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)則進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)、速度慢，最后達(dá)到色譜柱的下端，d正確?？键c(diǎn)：本題考查基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的原理與操作相關(guān)知識(shí)的知識(shí)。意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用的能力。7為了提取血紅蛋白，從學(xué)校附近的屠宰場(chǎng)取新鮮的豬血，對(duì)豬血處理的正確操作是a. 要在采血容器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕cb. 取血回來(lái)后，馬上進(jìn)行高速長(zhǎng)時(shí)間離心c. 將離心后的血細(xì)胞加入清水緩慢攪拌d. 重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止【答案】a【解析】為了防止血液凝固，要在采血容器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c，a正確；取血后，應(yīng)進(jìn)行低速短時(shí)間離心，b錯(cuò)誤；離心后的血細(xì)胞加入蒸餾水和40%體積的甲苯，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?，使紅細(xì)胞破裂，c錯(cuò)誤；紅細(xì)胞重復(fù)洗滌直到上清液不再呈現(xiàn)黃色為止，d錯(cuò)誤。8蛋白質(zhì)的分離與提純技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)，下列有關(guān)敘述不正確的a. 根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能通過(guò)半透膜的特性，可將樣品中各種不同蛋白質(zhì)分離b. 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小，可通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì)c. 根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，可通過(guò)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)d. 根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過(guò)離心沉降法分離蛋白質(zhì)【答案】a【解析】試題分析：蛋白質(zhì)分子不能通過(guò)半透膜，但溶液中的小分子物質(zhì)則可以透過(guò)半透膜，因此可以將蛋白質(zhì)和溶液中的小分子物質(zhì)分離，a項(xiàng)錯(cuò)誤；電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小，可通過(guò)電泳使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)分子的分離，b項(xiàng)正確；凝膠色譜法的原理是：分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動(dòng)快，而分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長(zhǎng)，流動(dòng)慢，所以可以根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，通過(guò)凝膠色譜法使大分子的蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)，小分子的蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)，從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)分子的分離，c項(xiàng)正確；根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過(guò)離心沉降法使不同密度的蛋白質(zhì)分子位于不同層次的離心液中，從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離，d項(xiàng)正確?？键c(diǎn)：本題考查蛋白質(zhì)的提取和分離的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。9下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過(guò)程及原理敘述，正確的是a. 為了防止血液凝固，應(yīng)在采血器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕cb. 紅細(xì)胞洗滌使用5倍體積的蒸餾水，直到離心后上清液不呈現(xiàn)黃色為止c. 利用0.9%的nacl對(duì)血紅蛋白溶液的透析12小時(shí)，可以去除小分子雜質(zhì)d. 在凝膠柱中加入蛋白樣品后即可連接緩沖溶液洗脫瓶進(jìn)行洗脫和收集樣品【答案】a【解析】試題分析：為了防止血液凝固，應(yīng)在采血器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c，a正確；紅細(xì)胞洗滌使用5倍體積的生理鹽水，直到離心后上清液不呈現(xiàn)黃色為止，b錯(cuò)誤；利用磷酸緩沖液對(duì)血紅蛋白溶液的透析12小時(shí)，可以去除小分子雜質(zhì)，c錯(cuò)誤；在凝膠柱中加入蛋白樣品后，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后才能連接緩沖溶液洗脫瓶進(jìn)行洗脫和收集樣品，d錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查血紅蛋白提取和分離的過(guò)程及原理。10下列試劑可用于血紅蛋白釋放的是0.9%的生理鹽水甲苯磷酸緩沖液蒸餾水梓檬酸鈉a. b. c. d. 【答案】d【解析】0.9%的生理鹽水是洗滌紅細(xì)胞是應(yīng)用的試劑，不能用于血紅蛋白釋放，錯(cuò)誤；甲苯的作用是溶解細(xì)胞膜的磷脂，加速血紅蛋白的釋放，正確；磷酸緩沖液用于粗分離蛋白質(zhì)，不能用于釋放血紅蛋白，錯(cuò)誤；蒸餾水作用是使紅細(xì)胞吸水脹破，釋放其中的血紅蛋白，正確；檸檬酸鈉的作用是采血時(shí)，防止血液凝固，不能用于血紅蛋白的釋放，錯(cuò)誤。故選d?！究键c(diǎn)定位】蛋白質(zhì)的提取和分離 【名師點(diǎn)睛】在蒸餾水和甲苯作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。加入蒸餾水后紅細(xì)胞液體積與原血液體積要相同。加入甲苯的目的是溶解細(xì)胞膜，有利于血紅蛋白的釋放和分離。11凝膠色譜法中所用的凝膠的化學(xué)本質(zhì)大多是（ ）a.糖類(lèi)化合物b.脂質(zhì)c.蛋白質(zhì)d.核酸【答案】a【解析】試題分析：凝膠主要是多糖類(lèi)化合物構(gòu)成的，如葡萄糖或瓊脂糖，故a正確。b、c、d錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查血紅蛋白的提取和分離相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記掌握程度。12紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白。下列對(duì)血紅蛋白提取和分離的敘述，錯(cuò)誤的是a血紅蛋白的提取和分離一般按照“樣品處理粗提取純化純度鑒定處理”b純化過(guò)程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液c粗分離時(shí)透析的目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)d可經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定【答案】b【解析】試題分析：血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：樣品處理粗提取純化純度鑒定處理，a正確；純化過(guò)程中要用緩沖液充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液，b錯(cuò)誤；血紅蛋白溶液的粗分離采用的方法是透析，即將凝集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析，去掉分子量較小的雜質(zhì)，c正確；通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后可經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定，d正確。考點(diǎn)：本題是對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)操作的考查。13可以利用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)有()制備較純凈的細(xì)胞膜 運(yùn)用差速離心法分離各種細(xì)胞器dna的粗提取 分離并純化血紅蛋白 制成細(xì)胞懸浮液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)abcd【答案】c【解析】試題分析：哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器，因此制備較純凈的細(xì)胞膜使用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞為原料最好，故正確；由于哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞器，故錯(cuò)誤；由于哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，沒(méi)有dna分子，故錯(cuò)誤；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中含有血紅蛋白，故正確；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，不能進(jìn)行分裂，故錯(cuò)誤。綜上所述，故c正確?？键c(diǎn)：本題考查細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。14已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其相對(duì)分子質(zhì)量大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示，下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是a. 分子甲與分子乙所帶電荷性質(zhì)不同b. 若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲移動(dòng)速度最慢c. 若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min，分子丁存在于沉淀中，則分子甲也一定存在于沉淀中d. 將樣品裝入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋內(nèi)，則分子乙也一定保留在袋內(nèi)【答案】b【解析】在當(dāng)場(chǎng)的作用下，帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，據(jù)此分析圖示可知：甲與乙所帶電荷性質(zhì)相同，a錯(cuò)誤；凝膠色譜法是依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)在凝膠顆粒外部移動(dòng)，路程短、移動(dòng)速度較快，甲的相對(duì)分子質(zhì)量最小，移動(dòng)速度最慢，b正確；與甲相比分子丁的分子量較大，如果將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min，分子丁存在于沉淀中，則分子甲不會(huì)存在于沉淀中，c錯(cuò)誤；與乙相比丙的分子量較大，如果將樣品裝入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋內(nèi)，分子乙不一定保留在袋內(nèi)，d錯(cuò)誤。15下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）a樣品的處理就是通過(guò)一系列操作收集到血紅蛋白溶液b通過(guò)透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取c可通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化d可通過(guò)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度【答案】b【解析】試題分析：樣品的處理就是通過(guò)一系列操作收集到血紅蛋白溶液，所以a正確；通過(guò)透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取，b錯(cuò)誤；可通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化，c正確；sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法是蛋白質(zhì)純化鑒定使用最多的方法，所以d正確?？键c(diǎn)：本題考查提取和分離血紅蛋白的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀(guān)點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理判斷或得出正確結(jié)論的能力。二、非選擇題16請(qǐng)回答下列有關(guān)細(xì)胞和分子生物學(xué)技術(shù)的問(wèn)題：（1）dna粗提取的實(shí)驗(yàn)原理是：dna在不同濃度的nacl溶液中的溶解度不同，在 mol/l的nacl溶液中的最低；鑒定dna所用的試劑是 ，沸水浴加熱呈 色；實(shí)驗(yàn)中使用酒精的目的是 ；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水，第一次目的是使成熟的雞血紅細(xì)胞漲破釋放出dna，第二次目的是 。（2）pcr技術(shù)的中文全稱(chēng)是 ，在操作過(guò)程中需要添加引物，它的化學(xué)本質(zhì)是 。反應(yīng)過(guò)程中控制不同溫度的意義是不同的： 90以上時(shí) ，雙鏈dna解聚為單鏈；50左右時(shí) ，引物與兩條單鏈dna結(jié)合； 72左右時(shí)延伸，taq dna聚合酶有最大活性，使dna新鏈沿著 方向延伸。（3）血紅蛋白的提取和分離試驗(yàn)中，分離純化常用的方法有凝膠色譜法和電泳法，前者的原理是 ，后者的原理是 ，在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是 ?！敬鸢浮浚?）0.14 二苯胺 藍(lán) 除去溶于酒精的蛋白質(zhì) 稀釋nacl溶液（2）多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) dna或rna 變性 復(fù)制 5端向3端（3）根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) （2分）各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同（2分）讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的ph范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能【解析】試題分析：（1）dna粗提取的實(shí)驗(yàn)原理是：dna在不同濃度的nacl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/l的nacl溶液中的最低；鑒定dna所用的試劑是二苯胺試劑，沸水浴加熱呈藍(lán)色；實(shí)驗(yàn)中使用酒精的目的是除去溶于酒精的蛋白質(zhì)；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水，第一次目的是使成熟的雞血紅細(xì)胞漲破釋放出dna，第二次目的是稀釋nacl溶液。（2）pcr技術(shù)的中文全稱(chēng)是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，引物其實(shí)是一段核苷酸序列，它的本質(zhì)是dna或rna，反應(yīng)過(guò)程中控制不同溫度的意義是不同的： 90以上時(shí)變性，50左右時(shí)復(fù)制，72左右時(shí)延伸，taq dna聚合酶有最大活性，使dna新鏈沿著5端向3端方向延伸。（3）血紅蛋白的提取和分離試驗(yàn)中，凝膠色譜法的原理是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)，電泳法的原理各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同，在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的ph范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能?？键c(diǎn)：本題考查dna的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)、pcr技術(shù)及血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。17（10分）紅細(xì)胞中含有大量的血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶o2右co2，可選用豬、牛、羊或其他哺乳動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：（1）血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步： 、 、 和 。（2）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是 。以上所述的過(guò)程即是 ，它包括 、 、分離血紅收溶液和透析。（3）然后通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是 。（4）電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及 、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離?！敬鸢浮浚?）樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定（2）防止血液凝固 樣品處理 紅細(xì)胞的洗滌 血紅蛋白的釋放 （3）通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子量大的雜蛋白除去（4）分子的大小【解析】血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步,分別是：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。在實(shí)驗(yàn)中加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固；樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅收溶液和透析四步。樣品純化的目的是通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子量大的雜蛋白除去，進(jìn)而使sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法中遷移速率只取決于分子大小。電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離?？键c(diǎn)：本題考查血紅蛋白的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)