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血紅蛋白的提取與分離一、單選題1將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000r/min的速度離心10min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依次是a. 血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層b. 甲苯層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層c. 脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層d. 甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、紅細(xì)胞破碎物沉淀層【答案】d【解析】試題分析:分離血紅蛋白溶液時(shí),將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,經(jīng)過(guò)中速長(zhǎng)時(shí)離心后,可明顯看到試管中溶液分為4層,從上往下數(shù),第1層為甲苯層,第2層為脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層為血紅蛋白水溶液,第4層為雜質(zhì)沉淀層??键c(diǎn):本題主要考查血紅蛋白的提取和分離的相關(guān)知識(shí),意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解,把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力。2有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中,不正確的是()a可通過(guò)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度b凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻,不能有氣泡存在c血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑d整個(gè)過(guò)程不斷用磷酸緩沖液處理,是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)【答案】c【解析】試題分析:血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是溶解細(xì)胞膜,c錯(cuò)誤??键c(diǎn):本題考查有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)知識(shí),意在考查考生的知識(shí)應(yīng)用能力。3在血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)中,將經(jīng)處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000rmin的速度離心10min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依次是a血紅蛋白、甲苯層、脂類(lèi)物質(zhì)層、沉淀層b甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂類(lèi)物質(zhì)層c脂類(lèi)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層d甲苯層、脂類(lèi)物質(zhì)層、血紅蛋白、沉淀層【答案】d【解析】血紅蛋白溶液離心后分為4層,從上到下,第1層為無(wú)色透明的甲苯層,第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層是紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液,第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物,故本題正確答案為d。 【考點(diǎn)定位】血紅蛋白的提取和分離4以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是( )a. 洗滌紅細(xì)胞時(shí),使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂b. 豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時(shí)雜蛋白較少c. 在凝膠色譜法分離過(guò)程中,血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白行程大d. 血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)【答案】c【解析】洗滌紅細(xì)胞時(shí),使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂,a項(xiàng)正確;豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時(shí)雜蛋白較少,b項(xiàng)正確;在凝膠色譜法分離過(guò)程中,血紅蛋白只在凝膠外部移動(dòng),比分子量較小的雜蛋白行程小,c項(xiàng)錯(cuò)誤;血紅蛋白顯紅色,可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè),d項(xiàng)正確。5脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘焙?,其活性位點(diǎn)上含有兩個(gè)鎳離子,在大豆、刀豆種子中含量較高,土壤中的某些細(xì)菌也能夠分泌脲酶。實(shí)驗(yàn)室從土壤中分離得到了能夠分解尿素的細(xì)菌m,并分別研究了培養(yǎng)液中的、和尿素濃度對(duì)細(xì)菌m脲酶產(chǎn)量的影響(說(shuō)明:研究某一項(xiàng)時(shí)其他條件相同且適宜),結(jié)果如下表。下列說(shuō)法正確的是( )a所有脲酶都在核糖體上合成且在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上加工使其與鎳結(jié)合才具有活性b實(shí)驗(yàn)表明培養(yǎng)液中和對(duì)脲酶的影響為低濃度促進(jìn),高濃度抑制c細(xì)菌m合成脲酶需要尿素誘導(dǎo),尿素的最適誘導(dǎo)濃度在04%08%之間d凝膠色譜法分離脲酶時(shí),脲酶比其他小分子蛋白質(zhì)在凝膠柱中移動(dòng)更慢【答案】c【解析】根據(jù)題意可知,細(xì)菌也能分泌脲酶,但細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)除核糖體外沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等其他細(xì)胞器,故細(xì)菌分泌的脲酶的過(guò)程與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)無(wú)關(guān),a錯(cuò)誤;分析表中數(shù)據(jù)可知,培養(yǎng)液中尿素濃度在08時(shí),培養(yǎng)液中和對(duì)脲酶的影響為低濃度促進(jìn),高濃度抑制,但培養(yǎng)液中尿素濃度大于08%而小于10%時(shí),沒(méi)有此規(guī)律,b錯(cuò)誤;表中數(shù)據(jù)表明,培養(yǎng)液中尿素的濃度在04%08%之間時(shí),脲酶的產(chǎn)量相對(duì)較高,說(shuō)明細(xì)菌m合成脲酶需要尿素誘導(dǎo),尿素的最適誘導(dǎo)濃度在04%08%之間,c正確;凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較小的小分子蛋白質(zhì)在凝膠柱中移動(dòng)更慢,d錯(cuò)誤??键c(diǎn):生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析和蛋白質(zhì)的分離【名師點(diǎn)睛】1分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)記錄時(shí),應(yīng)注意分析實(shí)驗(yàn)的自變量與因變量之間的關(guān)系,即在遵循單一變量原則的前提下,一次只分析一種自變量與因變量之間的數(shù)值規(guī)律,找出自變量對(duì)因變量的影響。如分析培養(yǎng)液中尿素濃度對(duì)脲酶產(chǎn)量的影響是,鎳離子和錳離子濃度都是無(wú)關(guān)變量,只分析尿素濃度變化與脲酶產(chǎn)量之間的數(shù)值變化規(guī)律,可得出尿素的最適誘導(dǎo)濃度在04%08%之間。2凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),小分子蛋白質(zhì)會(huì)進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,故其移動(dòng)的路徑較長(zhǎng),在凝膠柱中移動(dòng)更慢;而分子較大的蛋白質(zhì)不進(jìn)入凝膠顆粒,只在凝膠顆粒之間移動(dòng),故其移動(dòng)的路徑較短,移動(dòng)速度較快,最先被分離出來(lái)。6下列說(shuō)法中正確的是( )a制酒和制醋的微生物進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生co2的場(chǎng)所都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)b探究麥芽糖酶的專(zhuān)一性實(shí)驗(yàn)中,可選擇斐林試劑檢驗(yàn)麥芽糖是否分解c低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍的實(shí)驗(yàn)原理是低溫可抑制紡錘體的形成,從而抑制染色體著絲點(diǎn)分裂,使染色體不能分別移向兩極d用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì),相對(duì)分子質(zhì)量較小【答案】d【解析】試題分析:制酒的微生物是酵母菌,進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳,場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),而制醋的微生物是醋酸菌,不能產(chǎn)生二氧化碳;a錯(cuò)誤;斐林試劑是鑒定還原性糖的,麥芽糖本身就是還原性糖,b錯(cuò)誤;低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍的實(shí)驗(yàn)原理是低溫抑制紡錘體的形成,使子染色體不能分別移向兩極,c錯(cuò)誤;相對(duì)分子量大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程短、速度快,先到達(dá)色譜柱的下端,而相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)則進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程長(zhǎng)、速度慢,最后達(dá)到色譜柱的下端,d正確??键c(diǎn):本題考查基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的原理與操作相關(guān)知識(shí)的知識(shí)。意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn),包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能,并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用的能力。7為了提取血紅蛋白,從學(xué)校附近的屠宰場(chǎng)取新鮮的豬血,對(duì)豬血處理的正確操作是a. 要在采血容器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕cb. 取血回來(lái)后,馬上進(jìn)行高速長(zhǎng)時(shí)間離心c. 將離心后的血細(xì)胞加入清水緩慢攪拌d. 重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止【答案】a【解析】為了防止血液凝固,要在采血容器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c,a正確;取血后,應(yīng)進(jìn)行低速短時(shí)間離心,b錯(cuò)誤;離心后的血細(xì)胞加入蒸餾水和40%體積的甲苯,置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?,使紅細(xì)胞破裂,c錯(cuò)誤;紅細(xì)胞重復(fù)洗滌直到上清液不再呈現(xiàn)黃色為止,d錯(cuò)誤。8蛋白質(zhì)的分離與提純技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù),下列有關(guān)敘述不正確的a. 根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能通過(guò)半透膜的特性,可將樣品中各種不同蛋白質(zhì)分離b. 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小,可通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì)c. 根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小,可通過(guò)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)d. 根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,可通過(guò)離心沉降法分離蛋白質(zhì)【答案】a【解析】試題分析:蛋白質(zhì)分子不能通過(guò)半透膜,但溶液中的小分子物質(zhì)則可以透過(guò)半透膜,因此可以將蛋白質(zhì)和溶液中的小分子物質(zhì)分離,a項(xiàng)錯(cuò)誤;電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小,可通過(guò)電泳使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)分子的分離,b項(xiàng)正確;凝膠色譜法的原理是:分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快,而分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢,所以可以根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小,通過(guò)凝膠色譜法使大分子的蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái),小分子的蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái),從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)分子的分離,c項(xiàng)正確;根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,可通過(guò)離心沉降法使不同密度的蛋白質(zhì)分子位于不同層次的離心液中,從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離,d項(xiàng)正確??键c(diǎn):本題考查蛋白質(zhì)的提取和分離的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。9下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過(guò)程及原理敘述,正確的是a. 為了防止血液凝固,應(yīng)在采血器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕cb. 紅細(xì)胞洗滌使用5倍體積的蒸餾水,直到離心后上清液不呈現(xiàn)黃色為止c. 利用0.9%的nacl對(duì)血紅蛋白溶液的透析12小時(shí),可以去除小分子雜質(zhì)d. 在凝膠柱中加入蛋白樣品后即可連接緩沖溶液洗脫瓶進(jìn)行洗脫和收集樣品【答案】a【解析】試題分析:為了防止血液凝固,應(yīng)在采血器中預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c,a正確;紅細(xì)胞洗滌使用5倍體積的生理鹽水,直到離心后上清液不呈現(xiàn)黃色為止,b錯(cuò)誤;利用磷酸緩沖液對(duì)血紅蛋白溶液的透析12小時(shí),可以去除小分子雜質(zhì),c錯(cuò)誤;在凝膠柱中加入蛋白樣品后,等樣品完全進(jìn)入凝膠層后才能連接緩沖溶液洗脫瓶進(jìn)行洗脫和收集樣品,d錯(cuò)誤??键c(diǎn):本題考查血紅蛋白提取和分離的過(guò)程及原理。10下列試劑可用于血紅蛋白釋放的是0.9%的生理鹽水甲苯磷酸緩沖液蒸餾水梓檬酸鈉a. b. c. d. 【答案】d【解析】0.9%的生理鹽水是洗滌紅細(xì)胞是應(yīng)用的試劑,不能用于血紅蛋白釋放,錯(cuò)誤;甲苯的作用是溶解細(xì)胞膜的磷脂,加速血紅蛋白的釋放,正確;磷酸緩沖液用于粗分離蛋白質(zhì),不能用于釋放血紅蛋白,錯(cuò)誤;蒸餾水作用是使紅細(xì)胞吸水脹破,釋放其中的血紅蛋白,正確;檸檬酸鈉的作用是采血時(shí),防止血液凝固,不能用于血紅蛋白的釋放,錯(cuò)誤。故選d?!究键c(diǎn)定位】蛋白質(zhì)的提取和分離 【名師點(diǎn)睛】在蒸餾水和甲苯作用下,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。加入蒸餾水后紅細(xì)胞液體積與原血液體積要相同。加入甲苯的目的是溶解細(xì)胞膜,有利于血紅蛋白的釋放和分離。11凝膠色譜法中所用的凝膠的化學(xué)本質(zhì)大多是( )a.糖類(lèi)化合物b.脂質(zhì)c.蛋白質(zhì)d.核酸【答案】a【解析】試題分析:凝膠主要是多糖類(lèi)化合物構(gòu)成的,如葡萄糖或瓊脂糖,故a正確。b、c、d錯(cuò)誤??键c(diǎn):本題考查血紅蛋白的提取和分離相關(guān)知識(shí),意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記掌握程度。12紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來(lái)提取和分離血紅蛋白。下列對(duì)血紅蛋白提取和分離的敘述,錯(cuò)誤的是a血紅蛋白的提取和分離一般按照“樣品處理粗提取純化純度鑒定處理”b純化過(guò)程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液c粗分離時(shí)透析的目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)d可經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定【答案】b【解析】試題分析:血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:樣品處理粗提取純化純度鑒定處理,a正確;純化過(guò)程中要用緩沖液充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液,b錯(cuò)誤;血紅蛋白溶液的粗分離采用的方法是透析,即將凝集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析,去掉分子量較小的雜質(zhì),c正確;通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后可經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定,d正確。考點(diǎn):本題是對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)操作的考查。13可以利用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)有()制備較純凈的細(xì)胞膜 運(yùn)用差速離心法分離各種細(xì)胞器dna的粗提取 分離并純化血紅蛋白 制成細(xì)胞懸浮液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)abcd【答案】c【解析】試題分析:哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器,因此制備較純凈的細(xì)胞膜使用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞為原料最好,故正確;由于哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞器,故錯(cuò)誤;由于哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核,沒(méi)有dna分子,故錯(cuò)誤;哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中含有血紅蛋白,故正確;哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核,不能進(jìn)行分裂,故錯(cuò)誤。綜上所述,故c正確??键c(diǎn):本題考查細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能的有關(guān)知識(shí),意在考查考生識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。14已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其相對(duì)分子質(zhì)量大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示,下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是a. 分子甲與分子乙所帶電荷性質(zhì)不同b. 若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動(dòng)速度最慢c. 若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子丁存在于沉淀中,則分子甲也一定存在于沉淀中d. 將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋內(nèi),則分子乙也一定保留在袋內(nèi)【答案】b【解析】在當(dāng)場(chǎng)的作用下,帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng),據(jù)此分析圖示可知:甲與乙所帶電荷性質(zhì)相同,a錯(cuò)誤;凝膠色譜法是依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì),相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)在凝膠顆粒外部移動(dòng),路程短、移動(dòng)速度較快,甲的相對(duì)分子質(zhì)量最小,移動(dòng)速度最慢,b正確;與甲相比分子丁的分子量較大,如果將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子丁存在于沉淀中,則分子甲不會(huì)存在于沉淀中,c錯(cuò)誤;與乙相比丙的分子量較大,如果將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋內(nèi),分子乙不一定保留在袋內(nèi),d錯(cuò)誤。15下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的敘述,錯(cuò)誤的是( )a樣品的處理就是通過(guò)一系列操作收集到血紅蛋白溶液b通過(guò)透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì),此為樣品的粗提取c可通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化d可通過(guò)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度【答案】b【解析】試題分析:樣品的處理就是通過(guò)一系列操作收集到血紅蛋白溶液,所以a正確;通過(guò)透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),此為樣品的粗提取,b錯(cuò)誤;可通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化,c正確;sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法是蛋白質(zhì)純化鑒定使用最多的方法,所以d正確??键c(diǎn):本題考查提取和分離血紅蛋白的相關(guān)知識(shí),意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀(guān)點(diǎn),通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理,做出合理判斷或得出正確結(jié)論的能力。二、非選擇題16請(qǐng)回答下列有關(guān)細(xì)胞和分子生物學(xué)技術(shù)的問(wèn)題:(1)dna粗提取的實(shí)驗(yàn)原理是:dna在不同濃度的nacl溶液中的溶解度不同,在 mol/l的nacl溶液中的最低;鑒定dna所用的試劑是 ,沸水浴加熱呈 色;實(shí)驗(yàn)中使用酒精的目的是 ;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水,第一次目的是使成熟的雞血紅細(xì)胞漲破釋放出dna,第二次目的是 。(2)pcr技術(shù)的中文全稱(chēng)是 ,在操作過(guò)程中需要添加引物,它的化學(xué)本質(zhì)是 。反應(yīng)過(guò)程中控制不同溫度的意義是不同的: 90以上時(shí) ,雙鏈dna解聚為單鏈;50左右時(shí) ,引物與兩條單鏈dna結(jié)合; 72左右時(shí)延伸,taq dna聚合酶有最大活性,使dna新鏈沿著 方向延伸。(3)血紅蛋白的提取和分離試驗(yàn)中,分離純化常用的方法有凝膠色譜法和電泳法,前者的原理是 ,后者的原理是 ,在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是 ?!敬鸢浮浚?)0.14 二苯胺 藍(lán) 除去溶于酒精的蛋白質(zhì) 稀釋nacl溶液(2)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) dna或rna 變性 復(fù)制 5端向3端(3)根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) (2分)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同(2分)讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的ph范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能【解析】試題分析:(1)dna粗提取的實(shí)驗(yàn)原理是:dna在不同濃度的nacl溶液中的溶解度不同,在0.14mol/l的nacl溶液中的最低;鑒定dna所用的試劑是二苯胺試劑,沸水浴加熱呈藍(lán)色;實(shí)驗(yàn)中使用酒精的目的是除去溶于酒精的蛋白質(zhì);實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水,第一次目的是使成熟的雞血紅細(xì)胞漲破釋放出dna,第二次目的是稀釋nacl溶液。(2)pcr技術(shù)的中文全稱(chēng)是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),引物其實(shí)是一段核苷酸序列,它的本質(zhì)是dna或rna,反應(yīng)過(guò)程中控制不同溫度的意義是不同的: 90以上時(shí)變性,50左右時(shí)復(fù)制,72左右時(shí)延伸,taq dna聚合酶有最大活性,使dna新鏈沿著5端向3端方向延伸。(3)血紅蛋白的提取和分離試驗(yàn)中,凝膠色譜法的原理是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì),電泳法的原理各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同,在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的ph范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能??键c(diǎn):本題考查dna的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)、pcr技術(shù)及血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn),意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。17(10分)紅細(xì)胞中含有大量的血紅蛋白,紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶o2右co2,可選用豬、牛、羊或其他哺乳動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來(lái)提取和分離血紅蛋白。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題:(1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步: 、 、 和 。(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來(lái),馬上進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是 。以上所述的過(guò)程即是 ,它包括 、 、分離血紅收溶液和透析。(3)然后通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是 。(4)電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及 、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離?!敬鸢浮浚?)樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定(2)防止血液凝固 樣品處理 紅細(xì)胞的洗滌 血紅蛋白的釋放 (3)通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子量大的雜蛋白除去(4)分子的大小【解析】血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步,分別是:樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。在實(shí)驗(yàn)中加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固;樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅收溶液和透析四步。樣品純化的目的是通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子量大的雜蛋白除去,進(jìn)而使sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法中遷移速率只取決于分子大小。電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離??键c(diǎn):本題考查血紅蛋白的相關(guān)知識(shí),意在考查考生能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn),包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟,掌握相關(guān)
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