浙科版選修1 第一部分 第1課時 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 課件（62張）.pptx

第1課時大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 第一部分微生物的利用 選修1生物技術實踐 一 微生物培養(yǎng)的基本條件 二 細菌的培養(yǎng)與分離 達標檢測 內容索引 一 微生物培養(yǎng)的基本條件 2 分類 病毒界 放線菌藍細菌 生物界 真菌界原生動物原生植物 原生生物界 1 微生物 1 特點 簡單 形體的單細胞 多細胞或沒有的低等生物 新知導學 結構 微小 細胞結構 病毒 細菌 原核 真菌 3 用途 許多種來源于放線菌和霉菌 酒由發(fā)酵產生 由紅曲霉和毛霉發(fā)酵制成 微生物能用于治理 在新能源領域也將發(fā)揮巨大作用 抗生素 酵母 腐乳 環(huán)境污染 2 培養(yǎng)基 1 概念 培養(yǎng)基是微生物生存的環(huán)境和 2 分類 培養(yǎng)基按物理性質?？煞譃楹?一般都含有水 氮源和無機鹽四類營養(yǎng)物質 另外還需滿足微生物生長對ph 特殊營養(yǎng)物質和氧氣的要求 通常細菌培養(yǎng)基要用和 來配制 還要加入一定量的氯化鈉以維持一定的 霉菌培養(yǎng)基一般用配制或添加的豆芽汁即可 3 酸堿性 細菌通常要求在的環(huán)境中生長 霉菌要求在 的環(huán)境中生長 因此 在制備培養(yǎng)基時需調節(jié)培養(yǎng)基的酸堿度 營養(yǎng)物質 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 碳源 蛋白胨 酵母 提取物 滲透壓 無機物 蔗糖 中性偏堿 中性偏 酸 有關培養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)的三點提醒 1 不同微生物對營養(yǎng)的需求不同 所以培養(yǎng)不同的微生物所需要的營養(yǎng)可能不同 2 對異養(yǎng)微生物來說 含c h o n的有機物既是碳源又是氮源 能源 3 培養(yǎng)微生物時營養(yǎng)物質要協(xié)調 營養(yǎng)物質過少不能滿足微生物的營養(yǎng)需要 過多對微生物的生長有抑制作用 3 滅菌操作 1 常見滅菌方法 對于培養(yǎng)皿 試管 三角瓶 鑷子等常采用法滅菌 對于不能加熱滅菌的化合物 如尿素等 只能用過濾 但玻璃砂漏斗使用前也要在121 下用紙包好滅菌 實驗操作過程中 一般采用的方法對接種環(huán)進行滅菌 高壓蒸汽滅菌 g6玻璃砂漏斗 灼燒 2 高壓蒸汽滅菌操作的要求 滅菌前各種用品均需用牛皮紙或報紙包好 在 下滅菌15min 實驗過程中不能用 因為其易吸水 吸水后容易引起污染 如培養(yǎng)基中有 為防止其分解碳化 要用g cm2壓力 90 以上 滅菌30min 121 脫脂棉 葡萄糖 500 探究1 圖示解讀結合所學知識 完成下圖橫線上大腸桿菌的結構名稱 然后思考 互動探究 核糖體 莢膜 細胞壁 類核區(qū) dna 鞭毛 1 大腸桿菌與酵母菌相比 在結構上最主要的區(qū)別是什么 答案 答案大腸桿菌是原核生物 與酵母菌相比 最主要的區(qū)別是沒有由核膜包被的細胞核 2 大腸桿菌是革蘭氏性 的腸道桿菌 在腸道中一般對人 但也有一些菌株對人體是的 可以侵襲并產生 但是 任何大腸桿菌如果進入人的系統(tǒng) 都會對人體產生危害 3 應用 大腸桿菌是技術中被廣泛采用的工具 陰 兼性厭氧 有害 腸黏膜 毒素 無害 泌尿 基因工程 探究2 歸納概括1 培養(yǎng)基的成分 2 培養(yǎng)基的類型 探究3 比較異同1 比較消毒和滅菌的不同之處 2 幾種消毒和滅菌方法及其適用范圍 煮沸消毒 巴氏消毒 紫外線 接種工具 試管口 干熱滅菌 耐高溫 高壓蒸汽滅菌 1 滅菌與消毒的原理是相同的 僅僅是作用的條件不同 抑菌和滅菌的程度不同 2 對培養(yǎng)基ph的調節(jié) 需在滅菌之前進行 例1 2017 紹興高二月考 下列有關大腸桿菌的敘述 正確的是a 大腸桿菌細胞內的dna全部位于擬核區(qū)b 大腸桿菌是原核生物 屬于兼性厭氧菌c 大腸桿菌的細胞壁與植物細胞的細胞壁的結構 功能非常相近d 大腸桿菌對人類無害 答案 解析 解析大腸桿菌是原核生物 屬于兼性厭氧菌 b項正確 大腸桿菌的小型環(huán)狀dna分子 質粒 位于細胞質中 a項錯誤 大腸桿菌的細胞壁的成分和功能與植物細胞的細胞壁不同 c項錯誤 任何大腸桿菌如果進入人的泌尿系統(tǒng) 都會對人體產生危害 d項錯誤 例2 2017 溫州高二檢測 下列關于滅菌的敘述 正確的是a 用于細菌等微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基都必須用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌b 錐形瓶 培養(yǎng)皿 移液管等器具的高壓蒸汽滅菌時間一般為15min 121 條件下 c 超凈工作臺或接種箱用紫外燈滅菌30min即可d 滅菌后的培養(yǎng)基 器具就已經達到了完全無菌 答案 解析 解析培養(yǎng)基通?？梢赃M行高壓蒸汽滅菌 若培養(yǎng)基中有碳酸氫鈉 尿素等高溫易分解的成分 就不能用此方法 a項錯誤 超凈工作臺或接種箱用紫外燈滅菌30min 同時還需打開過濾風 c項錯誤 滅菌后的培養(yǎng)基 器具不一定達到了完全無菌 而且要防止二次污染 d項錯誤 三種常用滅菌方法的比較 二 細菌的培養(yǎng)與分離 1 細菌的培養(yǎng) 1 繁殖方式 細菌以的方式繁殖 分裂速度很快 約分裂一次 2 人們在培養(yǎng)細菌時 需要將已有細菌的培養(yǎng)物轉移到新的培養(yǎng)基中 一般用轉移帶菌的培養(yǎng)物 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗中采用擴大培養(yǎng)大腸桿菌 新知導學 分裂 20min 接種環(huán) lb液體培養(yǎng)基 2 細菌的分離方法 1 劃線分離法 通過在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)的操作 由于劃線過程中 接種環(huán)上的菌液逐漸減少 因此劃線的細菌間距離加大 經過培養(yǎng)可獲得 2 涂布分離法 用此法分離時 需要先將培養(yǎng)的菌液 通常稀釋10 5 10 7倍 取ml稀釋度不同的菌液 加在培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上 用涂布在培養(yǎng)基平面上 然后進行培養(yǎng) 通常以每個培養(yǎng)皿中有個以內的單菌落最為合適 3 兩種分離法的比較 分離法 方法簡單 分離法 單菌落更易分開 但操作復雜些 接種環(huán) 劃線 最后部分 單菌落 稀釋 0 1 固體 玻璃刮刀 20 劃線 涂布 3 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 1 實驗內容 將大腸桿菌擴大培養(yǎng)和劃線分離 即用培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)大腸桿菌 培養(yǎng)后再在培養(yǎng)基上劃線進行分離 隨后培養(yǎng)基上就會形成一個個單獨的菌落 lb液體 lb固體平面 2 實驗步驟 高壓蒸 汽 倒平板 接種 三角瓶 連續(xù)劃線 單個菌落 單菌落 劃線 4 探究1 圖示解讀固體培養(yǎng)基經高壓蒸汽滅菌后 待培養(yǎng)基冷卻到60 時 需擱置斜面 圖甲 或倒平板 圖乙 請回答下列問題 互動探究 1 如何確定制備的培養(yǎng)基滅菌是否合格 答案將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一定時間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌產生 2 在固體培養(yǎng)基凝固前擱置斜面的目的是什么 答案增大接種面積 3 平板冷凝后 為什么要將平板倒置 答案平板冷凝后 皿蓋上會凝結水珠 凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高 將平板倒置 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā) 又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基 造成污染 答案 1 請用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程 2 甲 乙 丙中的滅菌方法是 3 丁中的操作需要等待才能進行 4 觀察甲 乙 丙 丁四幅圖 熟悉倒平板的操作流程 請?zhí)羁?灼燒滅菌 丙 乙 甲 丁 平板冷卻凝固 探究2 科學探究1 平板劃線及培養(yǎng)結果接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線 將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面 下圖為平板劃線示意圖 a 及培養(yǎng)后菌落分布示意圖 b 1 a圖中 填圖中序號 區(qū)域為起始處 在圖中 填圖中字母 區(qū)域更易獲得單菌落 a b 每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒 除第一次劃線外 每一次劃線的起點都是第一次劃線的末端 2 下圖中甲為劃線分離法中最重要的環(huán)節(jié) 乙為操作的結果 判斷下列正誤 2 劃線分離的注意事項 1 第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán) 2 灼燒接種環(huán) 待其冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 3 劃線時 只能蘸取一次菌液 每次劃線以上次劃線的末端為起點 劃線最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連 4 劃線用力大小要適當 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 劃線分離過程中每次灼燒接種環(huán)的目的不同 探究3 科學探究1 涂布分離法用涂布分離法分離細菌時 需要先將培養(yǎng)的菌液稀釋 通常稀釋10 5 10 7倍 取0 1ml稀釋度不同的菌液 加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上 用玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上 然后進行培養(yǎng) 涂布操作如圖所示 a 將浸在盛有酒精的燒杯中 b 取不超過0 1ml的 滴加到培養(yǎng)基表面 c 將蘸有少量酒精的玻璃刮刀在火焰上引燃 待酒精燃盡后 冷卻8 10s d 用玻璃刮刀將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面 涂布時可轉動培養(yǎng)皿 使菌液分布均勻 玻璃刮刀 菌液 2 兩種分離方法的比較如圖是采用分離微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖 請思考并回答下列問題 1 獲得圖a效果和圖b效果的接種方法分別是什么 答案獲得圖a效果的接種方法為涂布分離法 獲得圖b效果的接種方法為劃線分離法 答案 2 某同學在分離土壤中的細菌時 發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片 最可能的原因是什么 應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象 答案最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌 應采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌 答案 a 接種前應對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌b 連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落c 接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次d 甲中a區(qū)域為劃線的起始位置 例3 2017 浙江效實中學檢測 在分離 純化大腸桿菌實驗中 劃線接種 甲 培養(yǎng)結果 乙 如圖所示 有關敘述錯誤的是 答案 解析 解析培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌 a項正確 菌液經過連續(xù)劃線 菌液中的菌體越來越少 最后容易形成單菌落 b項正確 在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌 因此按照圖中劃線順序 d c b a 整個劃線過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次 c項正確 每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端 因此劃線的起始區(qū)域菌落多 由圖乙可知 甲中d區(qū)域菌落多 為劃線的起始位置 d項錯誤 1 圖甲是利用法進行微生物接種 圖乙是利用法進行微生物接種 解析分析圖示可知 圖甲為用劃線分離法進行微生物接種 圖乙是利用涂布分離法進行微生物接種 例4 2017 嘉興高二檢測 圖甲 圖乙是微生物接種常用的兩種方法 請回答相關問題 答案 解析 劃線分離 涂布分離 2 這兩種方法所用的接種工具分別是和 對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是和酒精消毒 解析前者利用的工具是接種環(huán)或接種針 后者利用的工具是玻璃刮刀 對于接種環(huán)而言 滅菌的操作方法是灼燒 玻璃刮刀通常浸泡在70 的酒精中消毒 答案 解析 接種環(huán) 或接種針 玻璃刮刀 灼燒滅菌 3 下圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解 其接種方法是 填 圖甲 或 圖乙 解析題圖中 菌落均勻分布 分離效果較好 是涂布分離法操作的結果 答案 解析 圖乙 4 下列關于微生物培養(yǎng)和分離的敘述不正確的是 a 利用圖乙所示接種法可以分離微生物但不能對微生物進行計數(shù)b 接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落c 利用圖甲所示接種法接種過程中 每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌d 圖乙所示接種法中使用的接種工具須保存在70 的酒精中 解析采用涂布分離法 可以通過培養(yǎng)基表面的菌落數(shù) 對微生物進行計數(shù) 但采用該方法計數(shù)通常比實際菌落數(shù)偏低 a項錯誤 答案 解析 劃線分離與涂布分離的比較 滅菌 劃線分離 涂布分離 學習小結 達標檢測 1 2017 杭州高二檢測 下列有關大腸桿菌培養(yǎng) 分離的敘述中 錯誤的是a 用lb液體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)大腸桿菌 再在lb固體培養(yǎng)基的平板上劃線分離b lb液體培養(yǎng)基與lb固體培養(yǎng)基成分的差異是有無瓊脂c 實驗時要設置空白對照實驗d 獲得大腸桿菌的單細胞形成的菌落 只能用劃線分離法分離 答案 解析 解析獲得大腸桿菌的單細胞菌落常用的方法有劃線分離法和涂布分離法 1 2 3 4 5 a 步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行b 步驟 中 待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋c 步驟 中 每次劃線前都需對接種環(huán)進行灼燒處理d 劃線接種結束后 將圖 平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2 如圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟 下列說法錯誤的是 答案 解析 1 2 3 4 5 解析由圖可知 步驟 是倒平板 步驟 是用接種環(huán)蘸取菌液 步驟 是進行平板劃線 步驟 是培養(yǎng) 步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行 防止被雜菌污染 a項正確 倒完平板后應立即蓋上培養(yǎng)皿蓋 冷卻后將平板倒過來放置 b項錯誤 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種 使下一次劃線時 接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端 從而通過劃線次數(shù)的增加 使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少 以便得到單菌落 c項正確 劃線接種結束后 將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 有利于培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染 d項正確 1 2 3 4 5 3 2017 浙江余姚期末 下列關于微生物的培養(yǎng)和分離的敘述中 不正確的是a 細菌能在液體培養(yǎng)基中以分裂方式迅速擴增b 噬菌體或大腸桿菌可在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖c 滅菌的目的是消滅與培養(yǎng)菌競爭的雜菌d 涂布分離法分散細菌得到單菌落的效果更好 解析噬菌體屬于病毒 營寄生生活 不能在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖 答案 解析 1 2 3 4 5 4 在劃線分離法操作中 錯誤的是a 將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒 直到接種環(huán)燒紅b 將燒紅的接種環(huán)在酒精燈火焰旁邊冷卻c 接種環(huán)在平板上的劃線位置是隨機的d 在蘸取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰 解析接種環(huán)灼燒及接種前后試管口要通過火焰 其目的是為了防止雜菌污染 將接種環(huán)先冷卻再接種可以避免高溫燙死菌種 因此a b d都是正確的 在平板上劃線時 要劃三至五條平行線 而不是隨機劃線 因此c選項錯誤 答案 解析 1 2 3 4 5 5 2017 蕭山中學聯(lián)考 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應用中的重要環(huán)節(jié) 下圖甲 乙 丙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作和實驗結果示意圖 請據(jù)圖回答有關問題 1 2 3 4 5 1 下圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時的實驗操