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實驗實驗5 物理因素對微生物生長的影響物理因素對微生物生長的影響 1 了解不同物理因素對微生物生長的影響及其實驗方法了解不同物理因素對微生物生長的影響及其實驗方法 2 了解芽孢對不良環(huán)境的抵抗力了解芽孢對不良環(huán)境的抵抗力 一 實驗目的 環(huán)境因素 包括物理因素 化學因素和生物因環(huán)境因素 包括物理因素 化學因素和生物因 素 如素 如溫度溫度 滲透壓 滲透壓 紫外線紫外線 pH 氧氣 某 氧氣 某 些化學藥品及拮抗菌等對微生物的生長繁殖 生理些化學藥品及拮抗菌等對微生物的生長繁殖 生理 生化過程產(chǎn)生影響 不良的環(huán)境條件使微生物的生生化過程產(chǎn)生影響 不良的環(huán)境條件使微生物的生 長受到抑制 甚至導致菌體的死亡 但是某些微生長受到抑制 甚至導致菌體的死亡 但是某些微生 物產(chǎn)生的芽孢 對惡劣的環(huán)境條件有較強的抵抗能物產(chǎn)生的芽孢 對惡劣的環(huán)境條件有較強的抵抗能 力 力 二 實驗原理 7小組小組 4人人 組組 1 1 溫度溫度是影響微生物生長與存活的重要因素之一 當是影響微生物生長與存活的重要因素之一 當 微生物處于最適生長溫度時 其生長速度最快 微生物處于最適生長溫度時 其生長速度最快 不適不適 宜的溫度可以導致細菌形態(tài)和代謝的改變或使微生物宜的溫度可以導致細菌形態(tài)和代謝的改變或使微生物 的蛋白質(zhì)凝固變性而導致菌體死亡 的蛋白質(zhì)凝固變性而導致菌體死亡 本次試驗選擇三個培養(yǎng)溫度 本次試驗選擇三個培養(yǎng)溫度 4 室溫 室溫 37 2 紫外線紫外線主要作用于細胞內(nèi)的主要作用于細胞內(nèi)的DNADNA 使同一條鏈 使同一條鏈DNADNA 相鄰嘧啶間形成胸腺嘧啶二聚體 引起雙鏈結(jié)構(gòu)相鄰嘧啶間形成胸腺嘧啶二聚體 引起雙鏈結(jié)構(gòu) 扭曲變形 阻礙堿基正常配對 從而抑制扭曲變形 阻礙堿基正常配對 從而抑制DNADNA的的 復制 輕則使微生物發(fā)生突變 重則造成微生物復制 輕則使微生物發(fā)生突變 重則造成微生物 死亡 死亡 紫外線紫外線對微生物生長的影響隨照射劑量 時間和對微生物生長的影響隨照射劑量 時間和 照射距離的變化而不同 劑量大 時間長 距離短時照射距離的變化而不同 劑量大 時間長 距離短時 易殺死微生物 劑量小 時間短 距離長時就會有少易殺死微生物 劑量小 時間短 距離長時就會有少 量個體殘存下來 某些個體會發(fā)生變異 量個體殘存下來 某些個體會發(fā)生變異 紫外線透過物質(zhì)的能力弱 一層黑紙足以擋住紫外線透過物質(zhì)的能力弱 一層黑紙足以擋住 紫外線的通過 本實驗是驗證紫外線的殺菌作用紫外線的通過 本實驗是驗證紫外線的殺菌作用 及不同微生物對紫外線的抵抗能力 及不同微生物對紫外線的抵抗能力 三 實驗材料 1 菌種菌種 大腸桿菌大腸桿菌 枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 2 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 3 其他物品其他物品 無菌培養(yǎng)皿 無菌水 微量移液槍 無菌培養(yǎng)皿 無菌水 微量移液槍 無菌槍頭 培養(yǎng)箱 紫外線燈 無菌槍頭 培養(yǎng)箱 紫外線燈 無菌黑紙無菌黑紙 四 實驗內(nèi)容 1 微生物生長的最適溫度 1 取取9支裝有滅過菌的牛肉膏蛋白胨瓊脂試管 分別標明支裝有滅過菌的牛肉膏蛋白胨瓊脂試管 分別標明 4 室溫 室溫 37 三種溫度和三種菌名 三種溫度和三種菌名 2 向每支新鮮的斜面上劃線接種 向每支新鮮的斜面上劃線接種 3 將上述各管分別按不同溫度培養(yǎng)將上述各管分別按不同溫度培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果 后觀察結(jié)果 周五下午放學后觀察結(jié)果 2 微生物對高溫的抵抗能力 不同的微生物對高溫的抵抗力不同 芽孢桿菌的不同的微生物對高溫的抵抗力不同 芽孢桿菌的 芽孢對高溫有較強的抵抗能力 芽孢對高溫有較強的抵抗能力 1 取取9支裝有滅過菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液試管 支裝有滅過菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液試管 每管裝有 每管裝有5mL培養(yǎng)液 按順序培養(yǎng)液 按順序1至至9編號 編號 2 按照按照10 接種量接入液體種子 用移液槍 接種量接入液體種子 用移液槍 大腸桿菌大腸桿菌 不處理不處理 100 10min 100 20min 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 不處理不處理 100 10min 100 20min 枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌 不處理不處理 100 10min 100 20min 3 將各管置于將各管置于37 搖床中振蕩培養(yǎng)搖床中振蕩培養(yǎng)24h后 根據(jù)渾后 根據(jù)渾 濁情況判斷耐熱情況 濁情況判斷耐熱情況 3 紫外線對微生物的影響 1 取無菌培養(yǎng)皿取無菌培養(yǎng)皿3個 分別標明大腸桿菌 枯草芽孢桿個 分別標明大腸桿菌 枯草芽孢桿 菌 金黃色葡萄球菌等試驗菌的名稱 菌 金黃色葡萄球菌等試驗菌的名稱 2 用移液槍分別吸取大腸桿菌 枯草芽孢桿菌 金黃用移液槍分別吸取大腸桿菌 枯草芽孢桿菌 金黃 色葡萄球菌菌液色葡萄球菌菌液0 1mL 加在相應(yīng)的平板上 再用無菌 加在相應(yīng)的平板上 再用無菌 涂棒涂布均勻 然后用無菌黑紙遮蓋部分平板 涂棒涂布均勻 然后用無菌黑紙遮蓋部分平板 3 紫外燈預熱 紫外燈預熱10 15min后 把蓋有黑紙的平板置后 把蓋有黑紙的平板置 紫外燈下 打開培養(yǎng)皿蓋 紫外線照射紫外燈下 打開培養(yǎng)皿蓋 紫外線照射20 min 取去 取去 黑紙 蓋上皿蓋 黑紙 蓋上皿蓋 4 37 倒置培養(yǎng)倒置
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