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急性呼吸窘迫綜合征 Acuterespiratorydistresssyndrome ARDS 中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院鄒江 理論復(fù)習(xí) ARDS的定義ARDS的病因 定義 多種原發(fā)病過程中 因急性肺損傷引起的急性呼吸衰竭 以進行性呼吸困難和頑固性低氧血癥為特征 病因 直接肺損傷因素 嚴(yán)重肺部感染 肺挫傷 吸入有毒氣體等間接肺損傷因素 肺外嚴(yán)重感染及膿毒癥 嚴(yán)重胸外創(chuàng)傷 急重癥胰腺炎等 實驗?zāi)康?復(fù)制急性呼吸窘迫綜合征的實驗動物模型觀察急性呼吸窘迫綜合征家兔的表現(xiàn) 并探討其發(fā)生機制 實驗動物 家兔 性別 體重 實驗分組 生理鹽水組 0 2ml kg生理鹽水 NS 經(jīng)家兔耳緣靜脈注入油酸組 0 2ml kg油酸 OA 經(jīng)家兔耳緣靜脈注入 1 稱重2 固定 背部交叉仰臥位固定3 記錄呼吸曲線 張力換能器BL 410系統(tǒng) 實驗步驟 4 給藥 耳緣靜脈注入 油酸組 0 2ml kg油酸 緩慢 2分鐘注射完 生理鹽水組 0 2ml kg生理鹽水 5 給藥后記錄家兔呼吸情況 1小時后處死家兔6 在甲狀軟骨下緣2 3cm行頸部正中切口 分離氣管后夾閉并游離氣管和食道 開胸 小心取出心臟和肺 細(xì)心剪去食管 心臟及肺門周圍組織 觀察肺外觀 并稱重計算肺系數(shù)肺系數(shù) 肺重 g 體重 kg 7 肺泡灌洗 bronchoalvagelavage BAL 方法 將橡皮管插入氣管后用線固定 然后用注射器將10ml生理鹽水正壓緩慢注入肺內(nèi) 反復(fù)抽吸三次 回收灌洗液 灌洗液于3000rpm min 離心15min 細(xì)胞沉淀用1ml生理鹽水重懸8 取10ul重懸液抹片 染色 顯微鏡下觀察細(xì)胞細(xì)胞種類 注意事項 油酸注射應(yīng)平穩(wěn)在2分鐘注完 并保證全部注入靜脈內(nèi) 溢出或注入皮下組織均可造成模型復(fù)制失敗切斷氣管前注意先夾閉 避免血液 組織液等進入影響實驗結(jié)果分離肺臟時勿損傷肺表面 以免肺內(nèi)水腫液外流 影響肺系數(shù)的準(zhǔn)確性和肺泡灌洗液的收集 實驗結(jié)果 生理鹽水組 油酸組 呼吸幅度與頻率 肺大體觀顏色質(zhì)量 支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞數(shù)目與分類 指標(biāo) 分組 發(fā)紺 0 15 30 60 給藥前 給藥后 肺系數(shù) 推片 染色 顯微鏡下觀察并描述涂片 低倍鏡計數(shù)高倍鏡分類 細(xì)胞涂片的制作與白細(xì)胞染色分類 推片 取一滴重懸細(xì)胞液置于載玻片的一端 左手持載玻片 右手以邊緣平滑的推片的一端從懸液前方后移接觸懸液 懸液即沿推片散開 然后按推片與載片夾角保持30 45度平穩(wěn)地向前移動 載片上保留下一層薄膜 涂片制成后可手持玻片在空氣中揮動 使細(xì)胞膜迅速干燥 以免細(xì)胞皺縮 染色 取幾滴瑞士染色液加在涂片上 2分鐘后 用自來水洗凈 將玻片風(fēng)干涂片觀察 顯微鏡下觀察涂片 對比描述細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞種類 正常大鼠的肺切片HE染色 油酸誘導(dǎo)的大鼠肺切片HE染色 討論 本次試驗制備的家兔急性呼吸窘迫綜合征的實驗動物模型是否成功 靜脈注射油酸為什么會引起急性呼吸窘迫綜合征 急性呼吸窘迫綜合征的治療措施有