中國ALK陽性非小細(xì)胞肺癌診斷專家共識(轉(zhuǎn)載).doc

CSCO腫瘤生物標(biāo)志物專家委員會（CBC）專家組隨著分子醫(yī)學(xué)進(jìn)展和靶向藥物的不斷涌現(xiàn)，晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）的治療已進(jìn)入到個(gè)體化治療的時(shí)代。目前臨床應(yīng)用的個(gè)體化靶向治療主要針對EGFR突變型和ALK融合基因型肺癌,這兩種基因變異型肺癌均具有明確的分子靶點(diǎn)、靶點(diǎn)檢測技術(shù)及上市的靶向藥物，臨床療效得到明顯提高。其他基因變異型肺癌的靶向藥物和伴隨分子診斷（companion diagnostics）技術(shù)正在快速研發(fā)中。肺癌中ALK變異主要為ALK基因發(fā)生重排與其他基因融合。其中，EML4-ALK（棘皮動物微管結(jié)合蛋白樣4-間變性淋巴瘤激酶）融合基因變異是其主要類型，約占所有NSCLC的5%左右1,2,3。肺癌中與ALK基因融合的其他基因還包括TFG、KIF5B等。針對ALK靶點(diǎn)的小分子抑制劑克唑替尼（Crizotinib）是一種ATP競爭性酪氨酸激酶抑制劑，可特異性靶向抑制ALK激酶，也可抑制c-MET和ROS1等信號通路。臨床試驗(yàn)顯示對于ALK陽性的晚期NSCLC患者，克唑替尼的療效顯著優(yōu)于傳統(tǒng)化療，二線單藥治療患者的中位PFS為7.7個(gè)月，有效率達(dá)到65.3% 4?；谄淞己玫寞熜Ш湍褪苄?，2013年初，中國食品和藥品監(jiān)督管理總局（CFDA）已批準(zhǔn)克唑替尼用于治療ALK融合陽性的局部晚期或轉(zhuǎn)移性NSCLC患者。檢測基因融合（gene fusion，又稱基因重排，gene rearrangement）的方法有多種，包括原位雜交技術(shù)、蛋白表達(dá)檢測技術(shù)和PCR檢測技術(shù)。目前針對ALK融合基因檢測常用的方法有三種熒光原位雜交（FISH）、基于PCR擴(kuò)增技術(shù)（RACE-PCR或RT-PCR聯(lián)合測序技術(shù)、qRT-PCR等）和免疫組織化學(xué)法（IHC）。上述三種方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)。FISH雖然是臨床試驗(yàn)驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)方法，但價(jià)格昂貴，操作規(guī)范要求較高，且不能區(qū)分ALK融合變體（fusion variants）的類型；RT-PCR對標(biāo)本取材要求較高，需專用的試劑盒進(jìn)行檢測；IHC簡便易行，但陽性標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一。ALK陽性的NSCLC雖然僅占全部NSCLC的5%，但是每年新發(fā)病例數(shù)在中國仍接近30,000例 5。因此，如何準(zhǔn)確診斷ALK陽性的NSCLC便成了臨床上的當(dāng)務(wù)之急。2013年3月29日， 中國臨床腫瘤學(xué)會（Chinese Society of Clinical Oncology, CSCO）腫瘤標(biāo)志物專家委員會組織相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜以趶B門討論了適合中國實(shí)際情況的ALK融合基因檢測流程，并就我國ALK陽性非小細(xì)胞肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成了專家共識。一、ALK陽性非小細(xì)胞肺癌的定義專家組共識：ALK陽性非小細(xì)胞肺癌是指包括ALK FISH檢測、或ALK序列融合變異、或ALK融合蛋白IHC特定方法檢測陽性的肺癌，是非小細(xì)胞肺癌的一個(gè)分子亞型，常見于腺癌，該類患者通?？蓮腁LK抑制劑治療中獲益。隨著腫瘤分子生物學(xué)的進(jìn)展，臨床上對NSCLC的認(rèn)識正不斷深入。2007年Soda6和Rikova7兩個(gè)小組分別發(fā)現(xiàn)肺癌中存在EML4-ALK融合基因變異現(xiàn)象。2009年Shaw3等將ALK基因重排陽性的肺癌列為非小細(xì)胞肺癌的一個(gè)特定的分子亞型。根據(jù)專家的討論，從檢測方法學(xué)角度考慮到ALK融合型肺癌不僅是基因序列層面的改變即序列重排，ALK融合蛋白也是該類疾病中的重要變異，因此將此類疾病統(tǒng)稱為ALK陽性非小細(xì)胞肺癌。二、ALK檢測適宜人群：ALK陽性肺癌的臨床病理特征專家組共識：晚期非小細(xì)胞肺癌患者使用ALK-TKI治療前必須檢測ALK融合變異狀態(tài)?？蓛?yōu)先在病理組織學(xué)特點(diǎn)富集的優(yōu)勢患者中進(jìn)行ALK分子檢測，但單純依靠臨床特征與病理分型選擇適宜人群并不能完全包括所有的ALK陽性NSCLC患者，對于潛在懷疑存在ALK融合變異的患者均可進(jìn)行ALK融合基因檢測。研究報(bào)道年輕、不吸煙的肺腺癌患者的EML4-ALK融合基因表達(dá)率較高3，且在EGFR、KRAS、HER2或TP53等基因未發(fā)生突變的NSCLC患者中，ALK融合陽性的比例達(dá)25% 8，我國大陸和臺灣地區(qū)EGFR、KRAS均為野生型的腺癌中ALK陽性比例高達(dá)3042 9,10。病理形態(tài)學(xué)研究提示在含印戒細(xì)胞的粘液型或?qū)嵭韵侔┲校珹LK的發(fā)生率高于其他類型的肺腺癌（46.2% vs 8%） 11。在具有ALK關(guān)聯(lián)的臨床病理特征、已明確EGFR/KRAS等分子分析結(jié)果的患者中開展ALK檢測會提高檢出率，有助于臨床實(shí)際工作的開展。但ALK融合性肺癌并非只存在于肺腺癌、含印戒細(xì)胞的肺癌中，研究發(fā)現(xiàn)在肺鱗癌、腺鱗癌、EGFR突變型或KRAS突變型肺癌中也可存在ALK融合變異12。晚期肺癌患者也可能受到臨床取材小樣本的局限性，即活檢組織標(biāo)本有時(shí)無法保證肺腺癌的準(zhǔn)確診斷，因此應(yīng)考慮對不能判斷組織學(xué)類型的肺癌（NSCLC NOS）也進(jìn)行ALK檢測。三、ALK融合基因的檢測方法學(xué)專家組共識：ALK FISH、Ventana IHC或基于序列特異性的PCR技術(shù)均可作為ALK陽性肺癌的診斷技術(shù)，檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該根據(jù)組織標(biāo)本類型選擇合適的檢測技術(shù)。當(dāng)懷疑一種技術(shù)的可靠性時(shí)（如FISH的腫瘤細(xì)胞融合率接近15時(shí)），可以考慮采用另一種技術(shù)加以驗(yàn)證。目前，最常見的ALK基因重排的融合變異為2號染色體短臂倒位突變inv(2)(p21p23)，形成EML4-ALK融合基因，并編碼含EML4的氨基末端和ALK的胞內(nèi)酪氨酸激酶的融合蛋白生成。ALK融合基因或融合蛋白可在腫瘤組織標(biāo)本中檢測到。目前常用的ALK基因變異或融合蛋白檢測方法分為以下三種：熒光原位雜交（FISH）技術(shù)、免疫組織化學(xué)（IHC）和基于PCR的方法（包括qRT-PCR、RACE-PCR或特異性RT-PCR聯(lián)合測序技術(shù)）。1、熒光原位雜交（Fluorescent in situ hybridization, FISH）大部分克唑替尼治療ALK融合陽性NSCLC的臨床試驗(yàn)均是基于FISH的診斷，因此，F(xiàn)ISH檢測目前仍是診斷ALK融合基因的參照標(biāo)準(zhǔn)方法 13,14。FDA已批準(zhǔn)的雅培FISH分離探針試劑盒（Vysis ALK Break Apart FISH Probe Kit）可用于診斷ALK融合基因的表達(dá)。該試劑盒設(shè)計(jì)的兩種探針分別標(biāo)記ALK基因的兩端，300 kb的3端和442 kb的5端分別標(biāo)記為橘紅色和綠色。在無ALK融合基因表達(dá)的腫瘤細(xì)胞中，橘紅色和綠色重疊為黃色或者相互粘合（兩個(gè)信號之間的間隔小于兩個(gè)信號的直徑）；而在存在ALK融合基因表達(dá)的腫瘤細(xì)胞中，橘紅色和綠色信號相互分離（間隔2個(gè)信號直徑）。標(biāo)本FISH陽性結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)為單個(gè)視野中的50個(gè)肺癌細(xì)胞中至少有25個(gè)存在分離信號，或者兩個(gè)不同視野中的100個(gè)肺癌細(xì)胞中至少有15個(gè)存在分離信號。詳細(xì)的FISH陽性判讀標(biāo)準(zhǔn)可參見雅培ALK分離FISH探針試劑盒說明書 15。ALK FISH技術(shù)適用的組織樣本類型：10中性福爾馬林固定后石蠟包埋標(biāo)本（FFPE樣本），防脫玻片切片厚度35m。原位雜交技術(shù)檢測ALK變異也存在不足之處。首先，F(xiàn)ISH檢測對于操作和判讀技術(shù)要求較高，診斷醫(yī)師必須經(jīng)過嚴(yán)格的FISH操作和結(jié)果判讀培訓(xùn)。只有經(jīng)FISH操作經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師判定的結(jié)果才具有可靠性。其次，晚期NSCLC患者通常只能提供2mm左右的小活檢組織，很難保證每個(gè)視野均存在50個(gè)以上的肺癌細(xì)胞進(jìn)行陽性判讀。FISH檢測結(jié)果的判斷界值（cut off）也存在商榷之處，研究發(fā)現(xiàn)少數(shù)ALK FISH陰性、IHC陽性的患者能從靶向藥物明顯獲益16。最后，目前FISH檢測的成本昂貴，且不能明確ALK融合基因的具體融合變體。因此，雖然FISH檢測仍是診斷的重要手段，但現(xiàn)階段尚無法適用于中國ALK陽性NSCLC患者的大規(guī)模篩查和診斷。2、免疫組織化學(xué)法（immunohistochemistry, IHC）2.1 常規(guī)免疫組織化學(xué)技術(shù)（IHC）由于FISH檢測在中國存在經(jīng)濟(jì)適用性和技術(shù)操作普及的困難與不足，已有較多學(xué)者不斷探索其他的分子診斷檢測方法。免疫組織化學(xué)技術(shù)（IHC）因其具有簡便易行、價(jià)格便宜、操作方法成熟等特點(diǎn)，成為潛在有效的篩查方法。早期的ALK融合蛋白的IHC抗體敏感性較低（ALK1, Dako），因此不適宜用于ALK融合基因的檢測17。隨著技術(shù)的改進(jìn)，新一代具有高度親和力的D5F3（Cell Signaling, Beverly, Mass）和5A4（Abcam, Boston, Mass）抗體檢測ALK 融合蛋白的敏感性和特異性分別達(dá)到了100%和95%-99% 17,18,19，為其臨床應(yīng)用提供了充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。總結(jié)已報(bào)道的數(shù)據(jù)后發(fā)現(xiàn)（表1），常規(guī)（指非自動化儀器輔助的手工操作）IHC檢測的強(qiáng)陽性與FISH檢測陽性之間存在高度的一致性。IHC 3+到0分的患者FISH陽性率分別為97.4%、62.5%、14.3%和0%?，F(xiàn)有數(shù)據(jù)也證實(shí)ALK IHC陽性與克唑替尼臨床療效之間存在相關(guān)性20。 采用IHC法需注意以下兩點(diǎn)：第一，由于ALK的蛋白表達(dá)與神經(jīng)外胚層的分化有關(guān)，故其可能在小細(xì)胞肺癌和正常人的腦組織中存在表達(dá)25。因此，不建議在小細(xì)胞肺癌中使用ALK融合蛋白的IHC檢測。第二，常規(guī)IHC的陽性標(biāo)準(zhǔn)判定尚未統(tǒng)一。推薦常規(guī)方法IHC的判讀如下：IHC 3+：5%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)顆粒狀細(xì)胞質(zhì)強(qiáng)著色；IHC 2+：5%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)中度細(xì)胞質(zhì)著色；IHC 1+：5%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)微弱或模糊的細(xì)胞質(zhì)著色或5%的腫瘤細(xì)胞有任何程度的著色；IHC 0：腫瘤細(xì)胞無著色。2.2 Ventana IHC另一種由羅氏公司開發(fā)的Ventana ALK融合蛋白IHC診斷試劑盒已經(jīng)在歐洲獲批用于診斷ALK陽性NSCLC。由于其在自動化儀器上操作，可使檢測流程和結(jié)果判讀都得以標(biāo)準(zhǔn)化。該技術(shù)平臺方法使用了基于非內(nèi)源性半抗原、信號擴(kuò)增多聚體和辣根過氧化物酶（HRP）系統(tǒng)的染色信號放大技術(shù)。在不影響檢測特異性的前提下，大大提高了ALK融合蛋白IHC檢測的敏感性。結(jié)果判讀時(shí)采用簡單易行的二分類系統(tǒng)，即僅為陽性和陰性兩種，陽性結(jié)果即可診斷為ALK陽性非小細(xì)胞肺癌。數(shù)據(jù)表明其與FISH結(jié)果的吻合率達(dá)到98.8%，結(jié)果判讀的可重復(fù)性為99.7% 26，應(yīng)用前景好，期待其在中國正式獲批后可應(yīng)用于臨床診斷。常規(guī)或Ventana IHC技術(shù)適用的臨床標(biāo)本類型：10中性福爾馬林固定后石蠟包埋標(biāo)本（FFPE樣本），防脫玻片切片厚度35m。由于常規(guī)IHC存在上述優(yōu)缺點(diǎn)，考慮到臨床實(shí)踐中的可操作性和患者可接受性，我們推薦在條件缺乏的地區(qū)可采用常規(guī)IHC法進(jìn)行ALK陽性NSCLC患者的篩查，且經(jīng)常規(guī)IHC檢出為陽性的患者必須接受FISH、序列特異性的PCR技術(shù)或Ventana IHC其中任意一種技術(shù)的進(jìn)一步確診。3、基于PCR擴(kuò)增的方法：3.1 實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time quantitative reversetranscriptase-polymerase chain reaction, qRT-PCR）RT-PCR法檢測ALK融合基因的特點(diǎn)在于快速、簡便易行、能同時(shí)明確ALK已知的融合變體的類型。既往RT-PCR的不足之處在于假陰性率高，這是由于RT-PCR對于RNA的質(zhì)量要求較高，若結(jié)果為陰性，則很難判定是真陰性還是RNA降解所致的假陰性。此外，目前在NSCLC中已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了20多種不同的ALK融合變體，不能排除仍有未知融合變體的存在。因此，無法檢測未知的融合型是其最大的不足之處。這些因素限制了RT-PCR在ALK融合基因診斷中的應(yīng)用。國家藥品食品管理局（SFDA）已批準(zhǔn)的可用于臨床的ALK融合基因檢測的試劑盒（人類EML4-ALK融合基因檢測試劑盒，熒光定量qRT-PCR方法），通過多重引物RT-PCR法，需100-500ng腫瘤組織的RNA，即可檢測出EML4-ALK融合基因的陽性信號。該試劑盒可檢測7種不同的EML4-ALK融合基因型，基本涵蓋了常見的EML4-ALK融合基因型。該方法適用于福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）的腫瘤組織樣本和各類新鮮組織或細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。不過，qRT-PCR法也存在著無法檢測未知的融合變體和對RNA提取質(zhì)量要求較高等不足之處，需要臨床上提高組織標(biāo)本的保存質(zhì)量。3.2 RACE-PCR聯(lián)合測序方法廣東省肺癌研究所張緒超等9采用cDNA末端快速擴(kuò)增PCR（RACE-PCR）聯(lián)合測序（Sequencing，Seq）技術(shù)成功檢測分析了ALK基因的融合變異。該方法的獨(dú)到之處在于采用cDNA末端快速擴(kuò)增（RACE）技術(shù)結(jié)合兩輪PCR技術(shù)來富集擴(kuò)增ALK基因的融合變體，敏感性高，不限于檢測EML4與ALK的融合，而且可以檢測到其它任何基因與ALK的融合，聯(lián)合PCR產(chǎn)物的直接測序步驟能夠明確融合是來自EML4-ALK多種變體中的具體哪一種。這具有一定的臨床意義。已知不同EML4-ALK融合基因變體的酪氨酸激酶活性程度有明顯差異，因而可能對臨床用藥劑量有一定的指導(dǎo)價(jià)值。該方法主要適用于各類新鮮組織或細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。3.3 特異性的RT-PCR聯(lián)合測序方法特異性RT-PCR是確認(rèn)NSCLC存在ALK融合基因的另一種快速診斷方法。技術(shù)優(yōu)勢在于其檢測突變轉(zhuǎn)錄本的高敏感性，如發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物則意味著ALK融合基因。該技術(shù)也存在一些不足。首先，RT-PCR分析必須基于單管多重技術(shù)（multiplex）,由于EML4-ALK融合基因至少存在11種變體和非EML4的其它融合配對者，所以任何基于PCR的檢測策略必須配對所有已知ALK融合基因的明確引物，否則對于潛在的非EML4基因的配對者與ALK基因融合就無法檢測出來，而且對于潛在的EML4第21外顯子與ALK融合的轉(zhuǎn)錄變體長度達(dá)1,284bp也可能難于檢測。第二，肺癌患者FFPE（formalin-fixed paraffin embedded，福爾馬林固定石蠟包埋）組織提取的RNA很容易降解，與新鮮冰凍組織相比，采用RT-PCR操作FFPE標(biāo)本RNA的難度較大。第三，存在出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增的風(fēng)險(xiǎn)而出現(xiàn)假陽性，需要較高的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，防止交叉污染出現(xiàn)。在常規(guī)臨床診斷實(shí)驗(yàn)室可能難于開展。開展基于PCR技術(shù)檢測ALK融合變異的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求應(yīng)該能夠保證檢測質(zhì)量，PCR實(shí)驗(yàn)室需要符合我國衛(wèi)生部（衛(wèi)計(jì)委）臨床檢測中心的臨檢PCR室資格認(rèn)證條件。各檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)做好室內(nèi)質(zhì)控，并積極參與外部質(zhì)控評價(jià)項(xiàng)目?？紤]到PCR擴(kuò)增片段的非特異性技術(shù)特點(diǎn)，判斷基于PCR技術(shù)診斷ALK融合變異陽性應(yīng)該滿足以下條件：PCR產(chǎn)物經(jīng)測序后序列比對確認(rèn)存在ALK融合序列、或基于融合變異序列特異性熒光探針的實(shí)時(shí)定量PCR檢測結(jié)果陽性。單純RT-PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳后的條帶觀察不推薦作為ALK融合基因診斷依據(jù)。上述多種技術(shù)都可以選擇，各有優(yōu)缺點(diǎn)，存在一定的互補(bǔ)性。結(jié)合臨床可獲得的各類生物材料樣本（手術(shù)或穿刺活檢組織、胸水細(xì)胞學(xué)和痰液細(xì)胞學(xué)等），如何有效利用各種檢測分析技術(shù)獲得最高的檢出率具有重要的科學(xué)意義和臨床意義。四、ALK陽性NSCLC的診斷流程鑒于ALK基因重排或融合的分子診斷各種方法均有優(yōu)缺點(diǎn)（表2），且我國適用于ALK變異檢測的肺癌患者人數(shù)眾多，需要在臨床建立一套行之有效的分子診斷流程。IHC因其具有方便、易行、價(jià)格低的優(yōu)勢，適合于ALK陽性NSCLC的篩查。FISH和逆轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增聯(lián)合測序技術(shù)，則由于特異性高和結(jié)果判讀客觀，且qRT-PCR已獲SFDA批準(zhǔn)用于臨床檢測，適合于最終的確診。部分方法的具體操作流程和注意事項(xiàng)可參見SFDA批準(zhǔn)的產(chǎn)品說明書或Abott FISH說明書。 * 目前SFDA已批準(zhǔn)的qRT-PCR試劑盒可檢測至少7種融合型；一般RT-PCR技術(shù)可檢測少數(shù)融合型；RACE-PCR-Seq能檢測任何融合型變體。基于Ventana自動化平臺和試劑盒的IHC采用信號放大技術(shù)使得判讀較常規(guī)IHC更加客觀。專家組推薦ALK檢測的總體原則：應(yīng)綜合肺癌獲取的各類生物材料的特征、分子檢測方法的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)室自身?xiàng)l件，進(jìn)行多學(xué)科大協(xié)作，合理采取有效檢測方法和流程，以保證ALK融合型肺癌的檢出率和準(zhǔn)確率。適合ALK融合基因診斷的腫瘤樣本，包括各種組織樣本和細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。組織標(biāo)本獲取手段包括手術(shù)切除、支氣管鏡檢、經(jīng)皮肺穿刺、淋巴結(jié)活檢、手術(shù)活檢等。對于惡性胸腔積液、心包積液、痰液或支氣管灌洗液、細(xì)胞學(xué)穿刺和外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞等樣本，在細(xì)胞數(shù)量充足條件下可制備細(xì)胞學(xué)樣本蠟塊（cell block），檢測方法可采用FISH或IHC，如果是新鮮細(xì)胞標(biāo)本可考慮采用特異性PCR方法。考慮到細(xì)胞學(xué)樣本的細(xì)胞數(shù)量少等特點(diǎn)，細(xì)胞學(xué)標(biāo)本的檢測結(jié)果解釋需格外謹(jǐn)慎。綜合考慮上述討論因素：各類檢測技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)、各組織類型的技術(shù)適用性特點(diǎn)、ALK融合基因表達(dá)的臨床病理學(xué)富集特點(diǎn)，初步擬出以下用于臨床實(shí)踐的檢測流程圖（圖1）。專家組建議基于我國肺癌患者眾多，可考慮非排他性地優(yōu)先檢測部分潛在ALK陽性率較高的病理學(xué)特征富集的肺癌患者（如粘液型或含印戒細(xì)胞腺癌患者、EGFR基因狀態(tài)為野生型的腺癌）。對于適合檢測的腫瘤標(biāo)本可直接選擇FISH或序列特異性的RT-PCR方法或Ventana IHC進(jìn)行分子檢測診斷。對于EGFR基因狀態(tài)未知，或EGFR突變患者在EGFR-TKIs治療后原發(fā)或繼發(fā)耐藥的患者，由于存在EGFR和ALK雙陽性的可能28，因此也建議行ALK融合的檢測。ALK融合陽性NSCLC的具體診斷流程見圖1。圖1. 中國ALK陽性NSCLC患者的診斷流程圖注：（1）* 對于部分無條件行Ventana IHC檢測的醫(yī)療機(jī)構(gòu)或中心，常規(guī)ALK IHC可作為替代的篩選方法，但陽性標(biāo)本需以FISH、Ventana IHC或序列特異性的PCR技術(shù)進(jìn)一步確診。序列特異性的PCR技術(shù)包括基于熒光探針的qRT-PCR或RACE/RT-PCR聯(lián)合測序技術(shù)。（2）建議優(yōu)先在富集患者（粘液型腺癌、含印戒細(xì)胞成分、不吸煙、年齡60歲）的標(biāo)本中進(jìn)行篩選,但這些富集因素并非排他性的，即對其他疑有ALK融合變異患者均可進(jìn)行檢測（3）ALK抗體使用推薦：常規(guī)IHC建議使用C