GB-T17814-1999飼料中丁基輕基茵香醚、二丁基輕基甲苯和乙氧喹的測定.pdf

GB/r 1 7 8 1 4 一 1 9 9 9前言 隨著我國飼料工業(yè)的不斷發(fā)展 ， 抗氧化劑在飼料中的使用逐漸增加 考慮到抗氧化劑在飼料中用量的多少所帶來的利弊， 必須建立檢測其含量的方法 我國食品中抗氧化劑 B HA, B H T的檢測已有國家標準。 氣相色譜法單項測定 B HA, B H T或 E Q 的方法已有介紹。 國外檢測抗氧化劑的方法很多， 主要是氣相色譜和高壓液相色譜法。 但在我國目前還未見檢測飼料中抗氧化劑的方法的報導(dǎo)， 更沒有制定國家標準。 根據(jù)我國復(fù)核檢驗不同品種的國外進口抗氧化劑以及我國目前使用抗氧化劑的情況來看， 主要是復(fù)合型抗氧化劑或復(fù)配使用。 因此， 建立能同時檢測多組分復(fù)合型抗氧化劑的檢測方法勢在必行。 鑒于此， 特制定本標準。 本標準由全國飼料工業(yè)標準化技術(shù)委員會提出。 本標準由國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心( 北京) 負責起草。 本標準主要起草人 謝發(fā)明、 宋榮、 韓華瓊、 范理 。免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t )免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載中華 人 民 共 和 國 國 家 標 準飼料中丁基輕基茵香醚、 二丁基 輕基甲苯和乙氧哇的測定D e t e r mi n a t i o n o f b u t y l h y d r o x y a n i s o l e , d i b u t y l h y d r o x y t o l u e n e a n d e t h o x y q u i n i n f e e d sG B / T 1 7 8 1 4 - - 1 9 9 9， 范 圍 本標準規(guī)定了飼料中抗氧化劑丁基經(jīng)基茵香醚( B H A) 、 二丁基經(jīng)基甲苯( B H T) 和乙氧座( E Q) 測定方法的試劑、 儀器、 設(shè)備、 操作方法和注意事項。 本標準適用于配合飼料、 魚粉中抗氧化劑B H A, B H T , E Q的測定。2 引用標準 下列標準所包含的條文， 通過在本標準中引用而構(gòu)成為本標準的條文。本標準出版時， 所示版本均為有效。所有標準都會被修訂， 使用本標準的各方應(yīng)探討使用下列標準最新版本的可能性。 G B / T 1 4 6 9 9 . 1 -1 9 9 3 飼料采樣方法3 原理 樣品中B H A, B H T, E Q用正己烷提取， 離心分離后( 如遇干擾待測組分的樣品， 則需取上清液， 用柱層析凈化處理) ， 取上清液用氣相色譜、 F I D檢測器檢測， 外標法定量4 試荊 除特殊注明外， 本標準所用試劑均為分析純， 分析用水為燕餾水( 或離子交換水) 。4 門正己烷。4 . 2 丙酮。4 . 3 二抓甲烷。4 . 4 二氯甲烷一 丙酮( 9 +1 ) 混合液4 . 5 無水硫酸鈉: 5 0 0 C 烘4 h ,4 . 6 氟羅里硅f: 孔徑1 7 7 - 1 4 9 p = ( 8 0 -1 0 0目) ， 5 5 0 C 烘4 h ， 存于干燥器中。4 . 7 助濾劑C e l i t e 5 4 5 2 0 - 4 5 p m,4 . 8 醫(yī)用脫脂棉。4 . 9 B H A標準物: 純度 9 8 0 0 ,4 . 1 0 B H T標準物: 純度 9 8 Y 0 ,4 . 1 1 E Q標準物: 純度 9 504 . 1 2 B H A, B H T, E Q混合標準溶液: 稱取上述標準物各5 0 0 . 0 0 m g ( 視其純度， 換算成1 0 0 %再稱樣) ，置于5 0 M I . 棕色容量瓶中， 以正己烷溶解并定容。此液為 1 0 m g / m L 。然后稀釋成系列標準液:1 . 0 0 m g / m L , O . 5 0 m g / m L , O . 1 0 m g / m L , O . 0 5 m g / ml -0 . 0 1 m g / ml _ ,國家質(zhì)f技術(shù)監(jiān)督局 1 9 9 9 一 0 8 一 1 0 批準2 0 0 0 一 0 2 一 0 ， 實施免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t )免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載G B / T 1 7 8 1 4 -1 9 9 95 儀器、 設(shè)備5 門氣相色譜儀: 帶 F I D檢測器5 . 2 氮氣鋼瓶: 氮氣純度為9 9 . 9 9 %05 . 3 氫氣發(fā)生器: 氫氣純度為9 9 . 9 9 % o5 . 4 空氣鋼瓶: 一般壓縮空氣。5 . 5 離心機: 4 0 0 0 r / m i n ,5 . 6 粉碎機: 粉碎粒度達 4 0目。5 . 7 超聲波處理機。5 . 8 微型混合器。5 . 9 分析天平: 感量0 . 0 0 0 1 g e5 . 1 0 具塞刻度玻璃試管: 1 0 mL ,5 . 1 1 鋁制試管架 。5 . 1 2 具活塞層析柱: 1 5 c m X 0 1 c m.5 門3 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器: 帶抽真空裝置( 或真空泵) 。5 . 1 4 濃縮燒瓶: 1 5 0 mL， 帶 5 mL刻度尾接管6 樣 品6 . 1 按 G S / T 1 4 6 9 9 . 1 取得樣品口6 . 2 配合飼料: 以四分法縮分樣品至約中， 避光低溫保存?zhèn)溆谩? . 3 魚粉: 如為均勻粉狀， 可直接取樣2 5 0 g ， 粉碎， 過孔徑4 2 0 p m( 4 0目 ) 篩， 混勻， 裝人密閉廣口 瓶7 測定步驟7 . 1 試樣制備7 門門提取 按6 . 1 或6 . 2 稱取樣品2 . 0 0 0 g 于1 0 m L具塞刻度試管中， 加人少許無水硫酸鈉， 再加5 . 0 m L正己烷， 加塞。 在微型混合器上混合 0 . 5 mi n ， 將試管放到試管架上， 連同試管架一起放人超聲波處理槽內(nèi)， 槽內(nèi)水位以剛好 與試管中試樣液位取齊或稍過， 超聲提取 1 5 mi n 。取出. 將試管外水液擦去， 放人離心機， 以 4 0 0 0 r / m i n離心 2 mi n ， 取出試管。上清液為待測溶液。7 . 1 . 2 凈化7 . 1 . 2 . 1 如遇干擾待測組分的樣品， 須作如下柱層析凈化處理 : 首先按 7 . 1 . 1 提取樣品， 只是提取液由5 . 0 ml正己烷改為 1 0 . 0 m L正己烷。7 . 1 . 2 . 2 裝柱: 層析柱底先放少許脫脂棉， 再加少許( 約2 g ) 無水硫酸鈉， 用正己烷調(diào)制氟羅里硅土適量( 約4 g ， 以裝滿柱為準) ， 濕法填充于層析柱中， 上端先加約5 g 助濾劑， 再加約5 g無水硫酸鈉， 鋪平7 . 1 . 2 . 3 淋洗: 用移液管準確吸取 7 . 1 . 2 . 1 所得上清液 5 . 0 mL上柱。先以3 0 mL正己烷淋洗， 再以8 0 n il , =氛甲烷一 丙酮( 4 . 4 ) 混合液淋洗， 速度以大約每分鐘 2 mL為宜。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至約 1 ml . .用正己烷定容至 2 . 0 m l， 待測。了 . 2 測定 分別取系列混合標準溶液( 4 . 1 2 ) 1 p L進樣， 測得不同濃度B H A , B H T , E Q的峰面積( 或峰高) ， 以濃度為橫坐標， 峰面積( 或峰高) 為縱坐標， 分別繪制工作曲線。同時取樣品待測液 1 p L進樣， 測得峰面積 或峰高) 分別與工作曲線相比較定量， 或按式( 1 ) 計算求得。7 . 3 計算免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t )免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載G B / T 1 7 8 1 4 - - 1 9 9 9 B F I A, B HT, E Q的含量 。按式( 1 ) 分別計算 : A , X m火 V 。 一A下 兀獲 ;爪 不式中: 。一 每千克樣品中含某組分的質(zhì)量, m g ;A , - 一 進樣樣液中B H A, B H T, E Q峰面積( 或峰高) , p V s ( 或m m) ;m 一 一 B H 八、 B HT, E Q標準物進樣的絕對量， n g ;V一 一 樣品提取定容體積， mL;A 一 一 標準液的B H A, B H T, E Q峰面積( 或峰高) , f , V s ( 或m m) ;m一 一 稱樣量, g ; V ; - 一 樣液的進樣體積, W L .如樣品用柱層析凈化處理， 則結(jié)果按式( 2 ) 計算 A, X m， X V V,似 =一 二 一份 悅 丫于 一 一-x; 下 月. 1入 從 入 v; v, (2)式 中: V,一一樣品提取液分取過柱體積一 一樣液進樣前定容體積， MI ., mL;其他符號同式( 1 ) ,7 . 4 氣相色譜參考條件7 . 4 . 1 氣相色譜儀， 帶 F I n檢測器。 色譜柱: H P - 1 石英毛細管柱， 2 5 載氣: 氮氣: 2 . 0 mI . / m i n ; 尾吹氣 隔墊吹掃: 6 m l - / m i n . 分流比: 2 0: 1 , 檢測器溫度: 2 4 0 C。 進樣口溫度: 2 1 0 C e 柱溫: 見圖 1 .mX聲 0 . 3 2 mm.; 3 0 mL / mi n ; 氫氣: 3 0 mL / mi n ; 空氣: 3 5 0 mL / mi n ,2 0 0 cit. 圖 1 程序升溫圖7 . 4 . 2 氣相色譜儀， 帶F I D檢測器 色譜柱: 5 % S E - 3 0 玻璃填充柱， 2 . 5 m X 尹 3 . 5 m m, 氣體流速: 氮氣: 4 0 m I - / m i n ; 氫氣: 2 5 m L / m i n ; 空氣: 2 5 0 m L / m i n , 進樣口、 檢測器溫度: 2 3 0 C , 柱溫 : 見圖 2 ,免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t )免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載G B / r 1 7 8 1 4 -1 9 9 92 0 0 ”1 0 - 圖 2 程序升溫圖7 . 4 . 3 B H A, B H T, E Q氣相色譜圖( 出峰順序: B H A, B HT , E Q) ， 見圖 3和圖 4 e的國gT葉陰卜0如 6沈側(cè) 01州皿.皿t.皿Tl叩66工r口口叱價媽動以圖 3 填 充柱圖 4 毛細管柱8 結(jié)果表述每個試樣平行測定兩次， 以其算術(shù)平均值為結(jié)果。結(jié)果表示到小數(shù)點后一位。9 允許差相對相差落1 5 %1 01 0 . 1注意事項測定 ) 。本標準的特點之一， 是以程序升溫去除色譜圖后面可能出現(xiàn)的雜質(zhì)峰( 避免干擾后續(xù)上機樣品的如色譜圖中， 前面各待測組分不受雜峰干擾， 則盡可不必采用凈化處理， 避繁求簡。但要常注意清洗進樣器。1 0 . 2 本標準也適合于維生素預(yù)混料、 單組分抗氧化劑B HA, B H T, E Q的測定， 而且可免除程序升溫節(jié)省時間。1 0 . 3 本標準檢測全過程， 盡可能避光( 或不在強光下) 操作， 以減少損失。1 0 . 4 如遇較難提取的試樣， 可于頭天稱樣， 加正己烷浸泡過夜 ， 第二天再提取測定。免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t )免費標準下載網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無需注冊 即可下載G B / T 1 7 8 1 4 -1 9 9 91 0