芳酸及其酯類藥物分析.ppt

第七章 芳酸及其酯類 藥物的分析,藥物分析教研室,Analysis of Aromatic carboxylic acids & esters,Contents,第一節(jié) 結構與性質,特點,均有苯環(huán)、羧酸或其酯 水楊酸類和苯甲酸類結構中的羧基直接與苯環(huán)相連 除了酸性基團外，各自具有本身的官能團 分子中苯環(huán)、羧酸和取代基的相互影響，使芳酸的酸性強度各有不同,第一節(jié) 結構與性質,(一)苯甲酸類,苯甲酸 (benzoic acid),丙磺舒 (probenecid),甲芬那酸 (mefenamic acid),羥苯乙酯 (ethylparoben),(二)水楊酸類,第一節(jié) 結構與性質,水楊酸 SA (salicylic acid),阿司匹林(aspirin),對氨基水楊酸鈉 (PAS-Na),雙水楊酯salsalate,貝諾酯 (Benorilate),(三)其它芳酸類,氯貝丁酯(clofibrate),布洛芬(ibuprofen),第一節(jié) 結構與性質,第二節(jié) 鑒 別,(一)鐵鹽,紫堇色,赭色,米黃色,第二節(jié) 鑒 別,布洛芬,第二節(jié) 鑒 別,氯貝丁酯,羥肟酸鐵配位化合物,第二節(jié) 鑒 別,(二)重氮化-偶合反應,貝諾酯,橙紅色,(三)氧化反應,第二節(jié) 鑒 別,甲芬那酸H2SO4 深藍色,隨即變?yōu)樽鼐G色,(四)水解反應,第二節(jié) 鑒 別,(五)分解產(chǎn)物的反應,(六) UV,第二節(jié) 鑒 別,(七) IR,-COOH -OH,-COOH,Ph-C,鄰位取代Ph,第二節(jié) 鑒 別,N-H O-H,N-H,Ph:C=C,芳胺,酚,第三節(jié) 特殊雜質檢查,一、阿司匹林,生產(chǎn)工藝,ASA,副產(chǎn)物,SA,溶液澄清度 水楊酸 易碳化物 熾灼殘渣 重金屬,第三節(jié) 特殊雜質檢查,1.溶液澄清度(Na2CO3溶液),醋酸苯酯,水楊酸苯酯,乙酰水楊酸苯酯,阿司匹林樣品0.50g，加溫熱至約45C的碳酸鈉試液10ml溶解后，溶液應該澄清。,2.水楊酸,第三節(jié) 特殊雜質檢查,二、對氨基水楊酸鈉,第三節(jié) 特殊雜質檢查,間氨基酚,第三節(jié) 特殊雜質檢查,1.雙相滴定法(Ch.P),樣品0.3g,合并乙醚液,HCl滴定液滴定,消耗滴定液不得超過0.30ml,第三節(jié) 特殊雜質檢查,2.HPLC法(USP),色譜條件 色譜柱C18，(250mm4.6mm，10m) 流動相NaH2PO4(0.05M)-Na2HPO4(0.05M)-MeOH(含氫氧化四丁基胺1.9g)（425:425:150） 檢測波長254nm 內標磺胺,間氨基酚雜質限量=10(C/W)(Ru/Rs)(%),C標準對照液濃度 WPAS-Na含量 Ru供試溶液中間氨基酚與磺胺峰相應值之比 Rs標準溶液中間氨基酚與磺胺峰相應值之比,0.25%,第三節(jié) 特殊雜質檢查,樣品中含有-COOH，-SO3H基團時，選用的離子對試劑應為帶正電荷的有機胺鹽 除離子對試劑外，還需加入磷酸鹽或其它緩沖液，以控制流動相的酸度，使酸性官能團解離 樣品中含有-NH2，-NH-基團或其它陽離子時，應選用烷基磺酸鹽或硫酸鹽作為離子化試劑 樣品中若同時含有不同性質的基團時，則以上規(guī)則選擇的離子對試劑均為合理,三、二氟尼柳,第三節(jié) 特殊雜質檢查,色譜柱：C18 流動相：水-甲醇-乙腈-冰醋酸 檢測波長：254nm 供試品溶液的色譜圖中如果有雜質，各雜質的峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積。,第三節(jié) 特殊雜質檢查,四、甲芬那酸,銅鹽原子吸收分光光度法 有關物質HPLC,五、氯貝丁酯,對氯酚GC、HPLC 揮發(fā)性雜質GC,第四節(jié) 含量測定,一、酸堿滴定法(Acid-base titration method),苯甲酸 pKa 4.20 水楊酸 pKa 2.98 酸性較強,羧酸鄰位-OH，吸電子基團，使酸性增加； 分子內氫鍵，更增加了其極性,直接滴定,Aspirin、丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法,第四節(jié) 含量測定,1.直接滴定法,乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定過程易水解,中性乙醇：對指示劑(酚酞)而言為中性， 可消除滴定誤差,pKa 36 的藥物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 pKa 69 的藥物要用非水溶液滴定法 若SA不合格，不宜采用本法,第四節(jié) 含量測定,2.水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis),取本品約1.5g，精密稱定，準確加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，緩緩煮沸10min，放冷，以酚酞為指示劑，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相當于45.04mg的C9H9O4,第四節(jié) 含量測定,0.5,第四節(jié) 含量測定,3.兩步滴定法(Two-step titration),Aspirin片,枸櫞酸 Citric acid,酒石酸 Trataric acid,水解產(chǎn)物 水楊酸SA HAc,第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc 第二步：水解后剩余滴定,第四節(jié) 含量測定,取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于阿司匹林0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇(對酚酞指示劑顯中性)20ml，振搖使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至顯粉紅色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15min，并時時振搖，迅速放冷至室溫，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4,第四節(jié) 含量測定,計算：稱取10片重 1.8240g,片粉重 0.5312g,CNaOH： 0.1032mol/L,C 0.05120mol/L,標示量 0.1g V- 3.02ml V0- 20.18ml,第四節(jié) 含量測定,二、亞硝酸鈉滴定法,對氨基水楊酸鈉,第四節(jié) 含量測定,三、雙相滴定法(Titrimetry in two phases),苯甲酸鈉為芳酸堿金屬鹽，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于終點的正確判斷 因此，利用苯甲酸能溶于有機溶劑的性質，采用雙相滴定法,分出H2O層，置具塞錐形瓶 乙醚層用H2O 5ml洗滌，洗液并入錐形瓶 加乙醚20ml，繼續(xù)用HCl滴定，至水層顯持續(xù)的橙紅色,第四節(jié) 含量測定,四、UV,1.直接UV法,2.離子交換-UV法,氯貝丁酯在226nm的波長處有最大吸收，但對氯酚等有關物質亦有吸收，干擾UV法的測定。根據(jù)氯貝丁酯為酯結構，不能發(fā)生電離，而有關物質可發(fā)生酸性解離的性質差異，采用陰離子交換色譜分離后，采用UV法測定。,第四節(jié) 含量測定,3.CPC-UV法(Column Partition Chromatography),利用固定相酸堿性的不同進行分離 利用藥物和固定相起化學反應而進行分離 利用生成離子對進行層析分離 單純靠選擇流動相進行分離,擔體：硅藻土(Celite 545) 固定相：一定pH的緩沖水溶液 流動相：與水不相混溶的有機溶劑(洗脫前必須先用水飽和),第四節(jié) 含量測定,a.SA測定,玻棉,磷酸-硅藻土,FeCl3-尿素 -硅藻土,供試液制備 用CHCl3 50ml洗滌，棄去 (洗去ASA) 10ml冰HAc-水飽和乙醚液(110)(使紫色配位化合物被分解，SA析出) 洗脫液收集于已盛有10ml甲醇和2滴HCl的50ml量瓶中，繼用30mlCHCl3洗，并稀釋至刻度,第四節(jié) 含量測定,測定：306nm測定供試液和SA對照品液,A供試液 A對照品液,SA與試劑生成紫色水楊酸鐵配位化合物，在柱上移動慢，帶窄，色澤較深 若有Fe3+洗下，黃色影響測定結果 消除干擾方法：于底部拌有磷酸的硅藻土，生成不溶解的FePO4,第四節(jié) 含量測定,b.ASA測定,供試液制備 洗脫 5,25mlCHCl3 ，棄去CHCl3 洗脫 10ml冰HA