儀器分析劉英68課件

儀器分析環(huán)/境/與/生/化/工/程/學(xué)/院主講人：劉英項(xiàng)目三色譜法定性定量分析方法3.21色譜定性分析方法2色譜定量分析方法CONTENTS目錄學(xué)習(xí)目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)：1、理解色譜定性分析方法；2、掌握色譜定量分析方法。能力目標(biāo)：1、能利用色譜的定性分析方法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性；2、學(xué)會(huì)利用色譜定量分析方法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。重難點(diǎn)：色譜定量分析方法一、色譜定性分析方法1.利用純物質(zhì)定性①利用保留值定性：通過(guò)對(duì)比試樣中具有與純物質(zhì)相同保留值的色譜峰，來(lái)確定試樣中是否含有該物質(zhì)及在色譜圖中位置。不適用于不同儀器上獲得的數(shù)據(jù)之間的對(duì)比。②利用加入法定性：將純物質(zhì)加入到試樣中，觀(guān)察各組分色譜峰的相對(duì)變化。一、色譜定性分析方法1.利用純物質(zhì)定性①利用保留值定性：通過(guò)對(duì)比試樣中具有與純物質(zhì)相同保留值的色譜峰，來(lái)確定試樣中是否含有該物質(zhì)及在色譜圖中位置。不適用于不同儀器上獲得的數(shù)據(jù)之間的對(duì)比?！跋嗤纳V條件”試樣標(biāo)樣一、色譜定性分析方法①利用保留值定性一、色譜定性分析方法②利用加入法定性：將純物質(zhì)加入到試樣中，觀(guān)察各組分色譜峰的相對(duì)變化。試樣加標(biāo)試樣“峰高加入法”“相同的色譜條件”一、色譜定性分析方法2.利用文獻(xiàn)保留值定性相對(duì)保留值γ21：僅與柱溫和固定液性質(zhì)有關(guān)。

在色譜手冊(cè)中都列有各種物質(zhì)在不同固定液上的相對(duì)保留值數(shù)據(jù)，可以用來(lái)進(jìn)行定性鑒定。一、色譜定性分析方法3.保留指數(shù)（I）又稱(chēng)Kovats指數(shù)，是一種重現(xiàn)性較好的定性參數(shù)。測(cè)定方法：將正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定其保留指數(shù)為分子中碳原子個(gè)數(shù)乘以100（如正己烷的保留指數(shù)為600）。待測(cè)物質(zhì)X的保留指數(shù)（IX）是通過(guò)選定正構(gòu)烷烴，其分別具有Z和Z＋n個(gè)碳原子。被測(cè)物質(zhì)X的（調(diào)整）保留時(shí)間應(yīng)在兩個(gè)正構(gòu)烷烴的調(diào)整保留值之間：一、色譜定性分析方法保留指數(shù)計(jì)算方法一、色譜定性分析方法4.與其他分析儀器聯(lián)用的定性方法小型化的臺(tái)式色質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS，LC-MS）；色譜-紅外光譜儀聯(lián)用儀；組分的結(jié)構(gòu)鑒定。一、色譜定性分析方法二、色譜定量分析方法色譜定量分析依據(jù)色譜峰面積A或峰高h(yuǎn)與組分的量（濃度或質(zhì)量）成正比。一般多以峰面積A進(jìn)行定量。二、色譜定量分析方法1.峰面積的測(cè)量方法（1）峰高（h）乘半峰寬（W1/2）：近似將色譜峰當(dāng)作等腰三角形。此法算出的面積是實(shí)際峰面積的0.94倍：A=h·W1/2（2）峰高乘平均峰寬：當(dāng)峰形不對(duì)稱(chēng)時(shí)，可在0.15h和0.85h處分別測(cè)定峰寬，由下式計(jì)算峰面積：

A=h·(W0.15+W0.85)/2（3）峰高乘保留時(shí)間：在一定操作條件下，同系物的半峰寬與保留時(shí)間成正比，對(duì)于難于測(cè)量半峰寬的窄峰、重疊峰（未完全重疊），可用此法測(cè)定峰面積：∵W1/2∝

tR，W1/2＝b·tR，A=1.064h·W1/2

∴

A=h·b·tR二、色譜定量分析方法（4）微機(jī)自動(dòng)積分處理色譜峰分析結(jié)果二、色譜定量分析方法2.定量校正因子與組分性質(zhì)及檢測(cè)器性能有關(guān)。試樣中各組分質(zhì)量與其色譜峰面積成正比，即：mi=fiAi絕對(duì)校正因子：比例系數(shù)fi

，單位面積對(duì)應(yīng)的物質(zhì)量：

fi=mi/Ai定量校正因子與檢測(cè)器響應(yīng)值（靈敏度）成倒數(shù)關(guān)系：

fi=1/Si

二、色譜定量分析方法

相對(duì)校正因子fi'：即組分的絕對(duì)校正因子與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的絕對(duì)校正因子之比。當(dāng)mi、ms以質(zhì)量為單位時(shí)，所得相對(duì)校正因子稱(chēng)為相對(duì)質(zhì)量校正因子（f'm）；當(dāng)mi、ms以摩爾為單位時(shí)，所得相對(duì)校正因子稱(chēng)為相對(duì)摩爾校正因子（f'M）。二、色譜定量分析方法3.常用的定量方法（1）歸一化法特點(diǎn)及要求：

歸一化法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確；進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性和操作條件的變動(dòng)對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大；

不足：僅適用于試樣中所有組分全出峰的情況。二、色譜定量分析方法色譜峰分析結(jié)果（1）歸一化法二、色譜定量分析方法（2）外標(biāo)法（也稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法）依據(jù)峰面積A或峰高h(yuǎn)與組分的含量或濃度成正比，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。二、色譜定量分析方法（2）外標(biāo)法(標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制與測(cè)定:二、色譜定量分析方法標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制與測(cè)定:（2）外標(biāo)法二、色譜定量分析方法外標(biāo)法定量二、色譜定量分析方法（2）外標(biāo)法(也稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法)特點(diǎn)及要求：外標(biāo)法不使用校正因子，準(zhǔn)確性較高;操作條件變化對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確性影響較大;對(duì)進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性控制要求較高，適用于大批量試樣的快速分析。二、色譜定量分析方法（3）內(nèi)標(biāo)法適用于試樣中不是所有組分都能出峰的情況。

1.內(nèi)標(biāo)物要滿(mǎn)足以下四點(diǎn)要求：①試樣中不含有該物質(zhì)；②與被測(cè)組分性質(zhì)比較接近；③不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；④出峰位置應(yīng)位于被測(cè)組分附近，且與組分峰不重疊。二、色譜定量分析方法2.試樣配制：準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的試樣m樣(g)，準(zhǔn)確加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)物ms(g)，則：二、色譜定量分析方法二、色譜定量分析方法如以?xún)?nèi)標(biāo)物為基準(zhǔn)，則其相應(yīng)計(jì)算公式:提示：此時(shí)＝1.0。二、色譜定量分析方法內(nèi)標(biāo)法的特點(diǎn)(1)內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動(dòng)對(duì)定量結(jié)果的影響不大。(2)每個(gè)試樣的分析，都要進(jìn)行兩次稱(chēng)量，不適合大批量試樣的快速分析。

二、色譜定量分析方法（4）標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)得樣品中待測(cè)組分i（濃度為wi）的峰面積為Ai（或峰高h(yuǎn)i）；

濃度為wi→Ai再向該樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，總濃度為wiˊ(與樣品相比，濃度增量⊿wi)

，測(cè)得峰面積為Aiˊ(或峰高h(yuǎn)iˊ)，則：

濃度為wiˊ→Aiˊ

二、色譜定量分析方法（4）標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)得樣品中待測(cè)組分i（濃度為wi）的峰面積為Ai（或峰高h(yuǎn)i）；

濃度為wi→A