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文檔簡介
獸藥殘留分析技術(shù)
與殘留檢測實驗室建設(shè)第一頁,共五十七頁。第一局部獸藥殘留及其危害第二頁,共五十七頁。獸藥典型的獸藥是指用于預防和治療畜禽疾病的藥物。隨著集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)的開展,一些化學的、生物的藥用成分被開發(fā)成具有某些成效的動物保健品或飼料添加劑,也屬于獸藥的范疇。獸藥的主要用于防病治病、促進生長、提高生產(chǎn)性能、改善動物性食品的品質(zhì)等。第三頁,共五十七頁。獸藥在動物性食品中的殘留獸藥的原形化合物及其代謝物在動物的細胞、組織、器官或可食性產(chǎn)品〔如奶、蛋〕中的蓄積、貯存,稱為食品動物的獸藥殘留?!勃M義〕化學物殘留:除獸藥外還包括通過食物鏈進入動物體內(nèi)的農(nóng)藥〔如殺蟲劑、除草劑等〕和環(huán)境污染物(如重金屬、霉菌毒素等)?!矎V義〕第四頁,共五十七頁。獸藥在生態(tài)環(huán)境中的殘留在生產(chǎn)中大量使用的抗菌藥物、抗寄生蟲藥物及各種促生長制劑等藥物都會以原形或以有活性的代謝產(chǎn)物形式隨動物糞便、尿液或其他排泄物進入環(huán)境。這些物質(zhì)在環(huán)境土壤、微生物、水生生物、植物等蓄積或貯存。第五頁,共五十七頁。獸藥殘留的產(chǎn)生外因獸藥和添加劑的使用
--防治動物疫病
--使用藥物添加劑環(huán)境污染物內(nèi)因獸藥的體內(nèi)過程
--消除規(guī)律第六頁,共五十七頁。獸藥殘留的產(chǎn)生獸藥殘留產(chǎn)生的主要原因不遵守休藥期的規(guī)定標簽外用藥
--劑量、劑型、給藥途徑、療程、適應癥、動物非法使用違禁藥物污染
--飼料加工、貯藏、運輸?shù)谄唔?,共五十七頁。獸藥殘留的危害急性毒性作用〔瘦肉精〕慢性毒性作用〔氯霉素、氨基糖苷類〕特殊毒性作用〔三致作用、激素樣作用、過敏反響〕--雌激素類〔己烯雌酚〕、同化激素〔苯丙酸諾龍〕--喹惡啉類〔卡巴氧〕--硝基呋喃類〔呋喃西林、呋喃它酮〕--砷制劑--苯并咪唑類--殺蟲劑〔666〕--氯羥吡啶、SM2等--甲醛、苯酚等第八頁,共五十七頁。獸藥殘留的危害對人類腸道微生物的影響
--破壞或抑制人體胃腸菌群中敏感菌的生長
--導致條件性病原菌的大量繁殖或體外病原菌侵入腸道
--改變腸道菌群的代謝活性,使菌群改變藥物和食物固有活性和毒性的的生物轉(zhuǎn)化能力發(fā)生變化
--引起細菌耐藥性的產(chǎn)生,導致人類感染性疾病治療的失敗第九頁,共五十七頁。第二局部獸藥殘留分析技術(shù)第十頁,共五十七頁。獸藥殘留分析技術(shù)的特點待測物質(zhì)濃度低樣品基質(zhì)復雜,干擾物質(zhì)多獸藥殘留代謝產(chǎn)物多樣或不明動物種類多樣,對藥物代謝存在差異第十一頁,共五十七頁。殘留標示物的選擇用藥后體內(nèi)存在多個殘留成分,那么需要監(jiān)控總殘留物??倸埩粑镌隗w內(nèi)的各組分比例相對穩(wěn)定,選擇總殘留物中1種或2種組分作為“參照物〞,稱為“殘留標示物〞。通過測定殘留標示物的含量表示樣品殘留量和MRLs。選擇殘留標示物的原那么--消除慢、含量高、穩(wěn)定、毒性大第十二頁,共五十七頁。獸藥殘留分析方法的要求快速高通量定量準確度和精確度確證法定要求質(zhì)控要求第十三頁,共五十七頁。獸藥殘留分析方法的要求ELISALC/MS/MS準確度定量精確度法定要求確證質(zhì)控要求高通量快速LCorGC第十四頁,共五十七頁。分析方法的總體思路高水平(LevelⅠ)方法
--確證和定量被分析物質(zhì)中等水平(LevelⅡ)方法
--定量但不需要確證被分析物質(zhì)低水平(LevelⅢ)方法
--篩選第十五頁,共五十七頁。分析方法的總體思路采用快速、大量檢測樣品的篩選分析方法,能鑒別含有殘留物的陽性樣品采用充分可靠的分析方法,殘留量的值不具有確證性,但具相應的準確度和有效性采用經(jīng)過確認的分析方法對殘留物進行鑒別和測定,殘留量的值必須是有效和肯定的酶聯(lián)免疫法液相色譜法氣相色譜法液質(zhì)聯(lián)用法氣質(zhì)聯(lián)用法三級二級一級第十六頁,共五十七頁?!昂Y選〞到“確證〞的方法體系定性定量飼料產(chǎn)品尿樣動物組織三級方法二級方法一級方法定性為主定量為主定性為輔GC/MSLC/MSLC/MS/MSGC/MS/MSGCHPLC第十七頁,共五十七頁。獸藥殘留分析技術(shù)用于殘留分析的樣本制備技術(shù)樣品的前處理技術(shù)殘留檢測方法的選擇第十八頁,共五十七頁。樣本的范圍可食性組織及產(chǎn)品
--肝、腎、肌肉、脂肪、皮膚、血液
--奶、蛋
--其他加工食品其他
--毛發(fā)、尿、糞便等第十九頁,共五十七頁。樣本的收集取樣方法--代表性原那么、隨機采樣--各種標準規(guī)定活體檢測--一般采集毛發(fā)、血液、尿液和糞便屠宰場取樣--藥物的靶組織--其他高濃度的樣本:肝、腎、膽汁、注射部位--排泄物:尿液第二十頁,共五十七頁。樣本的貯存容器材料
--一般為玻璃或塑料預處理
--勻化、縮分、過篩、離心、過濾、防腐、抑制降解等貯存溫度要求第二十一頁,共五十七頁。樣品前處理技術(shù)提取方法
--組織搗碎法
--振蕩法凈化方法
--液—液萃取
--液—固萃取濃縮與富集
--旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮
--氣流吹蒸法:氮氣、空氣第二十二頁,共五十七頁。樣品的前處理技術(shù)——提取提取化合物特性基質(zhì)組成提取劑選擇沉淀劑選擇設(shè)計順序效率試驗配比試驗干擾試驗影響凈化第二十三頁,共五十七頁。樣品的前處理技術(shù)——凈化凈化液液萃取SPE純化相似相溶小柱選擇濃縮富集效率試驗配比試驗上樣洗滌洗脫第二十四頁,共五十七頁。殘留檢測方法簡介快速篩選方法
--酶免疫測定(EIA)--ELISA--放射免疫測定法(RIA)--金標試紙條(Dipstick)--生物傳感器
--微生物抑制測定法:抗菌藥
--TLC第二十五頁,共五十七頁。殘留檢測方法簡介化學定量方法--氣相色譜法〔GC〕--高效液相色譜法〔HPLC〕--原子熒光(AF)--原子吸收(AA)第二十六頁,共五十七頁。殘留檢測方法簡介儀器確證方法
--HPLC-PDA--GC-MS--GC-MS-MS--HPLC-MS--LC-MS-MS第二十七頁,共五十七頁。樣品處理技術(shù)進展SPE的應用與自動化膜別離技術(shù)免疫親和色譜(IAC)凝膠滲透色譜〔GPC〕分子印跡技術(shù)其他技術(shù)〔自動索氏提取法、超聲波輔助提取、超臨界流體萃取、強化溶劑萃取、微波輔助萃取、加速溶劑萃取法〕第二十八頁,共五十七頁。色譜分析技術(shù)進展超高效液相色譜系統(tǒng)(UPLC)第二十九頁,共五十七頁。色譜分析技術(shù)進展高效毛細管電泳色譜系統(tǒng)(HPCE)第三十頁,共五十七頁。色譜分析技術(shù)進展高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——GC-MS/MS、LC-MS/MS第三十一頁,共五十七頁。色譜分析技術(shù)進展高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——GC-MS/MS第三十二頁,共五十七頁。色譜分析技術(shù)進展高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——LC-MS/MS第三十三頁,共五十七頁。色譜分析技術(shù)進展高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)(Q-TOF、Q-Exactive)第三十四頁,共五十七頁。檢測技術(shù)開展趨勢分析檢測方法篩選方法確證方法快速簡便價格廉價現(xiàn)場應用注重時效性儀器更新快多組分分析靈敏度高提高準確性第三十五頁,共五十七頁。限制我國殘留檢測開展的問題問題:標準依賴性強,但標準滯后?!獦藴手菩抻喅绦蚧⑿瘜е拢簶藴蕦嵤┬Ч^差。——標準出臺后很快又被淘汰——現(xiàn)有標準限制了檢測技術(shù)開展第三十六頁,共五十七頁。限制我國殘留檢測開展的問題問題:照搬國外的殘留監(jiān)控內(nèi)容?!獧z測方法缺乏驗證——缺乏藥理研究,沒有“中國特色〞的MRL導致:殘留檢測根底較差?!獙Σ煌幬锏臍埩絷P(guān)注程度不一第三十七頁,共五十七頁。警惕殘留檢測開展的誤區(qū)誤區(qū)一:“兩極〞分化檢測方法篩選方法確證方法本錢上升一物多用注重首創(chuàng)忽略了篩選方法的初衷儀器追新型盲目多殘留水平看指標過猶不及不切實際沒有聯(lián)系第三十八頁,共五十七頁。警惕殘留檢測開展的誤區(qū)誤區(qū)二:習慣“參考〞方法可行數(shù)據(jù)可信國外文獻資料國內(nèi)文獻資料實驗條件重現(xiàn)國外文獻資料國內(nèi)文獻資料實驗數(shù)據(jù)參考撰稿發(fā)表內(nèi)容相似知其然,而不知所以然難以提升自身水平第三十九頁,共五十七頁。警惕殘留檢測開展的誤區(qū)誤區(qū)三:只認“原形〞藥物消化吸收分布轉(zhuǎn)運動物體內(nèi)藥物原形氧化還原水解結(jié)合結(jié)構(gòu)變化代謝物缺乏藥代動力學研究,盲目檢測第四十頁,共五十七頁。正確引導殘留檢測開展方向積極研究藥物代謝和殘留消除規(guī)律藥理學藥效研究藥代研究藥物對機體的實際作用機體內(nèi)藥物的生物轉(zhuǎn)化藥物的生物利用度藥物的標示殘留物藥物劑型研究消除規(guī)律研究確定監(jiān)控的靶點制定休藥期危險性評估第四十一頁,共五十七頁。正確引導殘留檢測開展方向重視飼料投入品的調(diào)查和監(jiān)測飼料藥物添加劑國外引進人用藥品企業(yè)自創(chuàng)禁用化合物清單允許添加的藥物要求檢測違禁藥標簽不明示藥名要求出具合格報告出現(xiàn)干擾物質(zhì)有特征組分未知組分分析新添加物第四十二頁,共五十七頁。第三局部殘留檢測實驗室建設(shè)第四十三頁,共五十七頁。殘留實驗室的功能動物性食品中獸藥殘留檢測飼料產(chǎn)品中違禁藥物(危害物質(zhì))檢測殘留分析技術(shù)的推廣應用殘留分析技術(shù)的研發(fā)和標準化工作第四十四頁,共五十七頁。殘留實驗室的建設(shè)要求硬件要求
—實驗場地、格局、設(shè)施
—設(shè)備、標準物質(zhì)、試劑耗材
—人員軟件要求
—資質(zhì)認證與管理體系建設(shè)第四十五頁,共五十七頁。實驗室建設(shè)的硬件要求實驗場地和格局面積要大。根據(jù)具體功能分割,不同實驗室要求不一。〔天平室不宜太大,儀器室不宜太小〕根據(jù)實驗流程分割。明確每個實驗室名稱,防止功能混亂。第四十六頁,共五十七頁。功能實驗室樣品保存室天平室〔稱量〕樣品預處理室〔組織勻漿、飼料粉碎、分樣〕樣品檢測室〔ELISA檢測〕儀器分析室〔大型儀器設(shè)備〕清洗消毒室試劑保存室〔危險化學品〕耗材保存室標準物質(zhì)保存室第四十七頁,共五十七頁。實驗室建設(shè)的硬件要求必要設(shè)施平安設(shè)施:消防裝置、報警裝置等。環(huán)境設(shè)施:空調(diào)、通風柜、排氣扇、去濕機等。防護設(shè)施:醫(yī)藥箱、沖淋裝置。三廢收集與處理設(shè)施。第四十八頁,共五十七頁。實驗室建設(shè)的硬件要求設(shè)備(按流程分類)樣本的保存設(shè)備:冰箱、培養(yǎng)箱等。樣品前處理設(shè)備:勻漿機、粉碎機、濃縮儀等。檢測用設(shè)備:酶標儀、HPLC、LC-MS/MS等。設(shè)備(按功能分類)主要設(shè)備:出具檢測數(shù)據(jù)。輔助設(shè)備:對檢測數(shù)據(jù)有一定的影響。第四十九頁,共五十七頁。主要檢測用儀器設(shè)備儀器名稱數(shù)量總價(元)酶標儀1高效液相色譜儀2氣質(zhì)聯(lián)用儀1液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀1總計第五十頁,共五十七頁。主要檢測工程β-腎上腺素能激動劑(如瘦肉精、萊克多巴胺)精神類藥物(如安定、氯丙嗪)蛋白同化激素(如睪酮、群勃龍)糖皮質(zhì)激素(如地塞米松、氫化可的松)抗生素(如四環(huán)素類)抗菌藥物(如磺胺類、喹諾酮類、硝基呋喃類)抗蟲藥物(如硝基咪唑類)農(nóng)藥(如六六六、滴滴涕)其他(如蘇丹紅、三聚氰胺)第五十一頁,共五十七頁。實驗室建設(shè)的硬件要求標準物質(zhì)
—標準品和對照品
—標準溶液常用試劑
—水
—固體試劑
—液體試劑專用試劑
—試劑盒第五十二頁,共五十七頁。實驗室建設(shè)的硬件要求常用耗材玻璃儀器〔包括小容量玻璃儀器〕塑料制品〔離心管、槍頭等一次性用品〕防護用品〔手套、護目鏡等〕專用耗材色譜耗材〔色譜柱、樣品瓶等〕前處理耗材〔SPE小柱、濾膜等〕保存用耗材(密封袋、標準溶液瓶)第五十三頁,共五十七頁。實驗室建設(shè)的硬件要求人員了解行業(yè)動態(tài),關(guān)注食品平安。沒有固定專業(yè)要求,但要有化學實驗根底。大型儀器要盡量配備具有操作經(jīng)驗的人員。有較高的結(jié)果分析能力和判斷能力。第五十四頁,共五十
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