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文檔簡介
第3章基因工程第1節(jié)重組DNA技術的基本工具1.P70從社會中來:番木瓜容易受番木瓜環(huán)斑病毒的侵襲。當番木瓜被這種病毒感染后,產(chǎn)量會大大下降??茖W家通過精心設計,用“分子工具”培育出了轉(zhuǎn)基因番木瓜,它可以抵御番木瓜環(huán)斑病毒。
DNA雙螺旋的直徑只有2nm,對如此微小的分子進行操作,是一項非常精細的工作,更需要專門的“分子工具”。那么,科學家究竟用到了哪些“分子工具”?這些“分子工具”各具有什么特征呢?2.P71旁欄思考題:你能根據(jù)所掌握的知識,推測限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么嗎?3.P72旁欄思考題:DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?為什么?4.P73思考·討論:重組DNA分子請你根據(jù)圖3-3中的相關信息找到兩條片段上EcoR
I的識別序列和切割位點。然后,用剪刀進行“切割”。待切割位點全部切開后,將從下面那條DNA鏈上切下的片段重組到上面那條DNA鏈的切口處,并用透明膠條將切口粘連起來。討論(1)剪刀和透明膠條分別代表哪種“分子工具”?
(2)你制作的黏性末端的堿基能不能互補配對?如果不能,可能是什么原因造成的?(3)你插入的DNA片段能稱得上一個基因嗎?5.P73到社會中去:隨著生物技術的飛速發(fā)展,生產(chǎn)和銷售“分子工具的公司大量涌現(xiàn)。感興趣的話,你可以登錄這些公司的網(wǎng)站,查詢和了解相關產(chǎn)品的特點、價格和使用說明等。有些這樣的公司已成功上市,你還可以通過分析公司的股票價格走勢,大致了解公司的經(jīng)營狀況以及投資者目前對該行業(yè)的認可程度。6.P74練習與應用一、概念檢測1.DNA連接酶是重組DNA技術常用的一種工具酶。下列相關敘述正確的是()
A.能連接DNA分子雙鏈堿基對之間的氫鍵B.能將單個脫氧核苷酸加到DNA片段的末端,形成磷酸二酯健
C.能連接用同種限制酶切開的兩條DNA片段,重新形成磷酸二酯鍵
D.只能連接雙鏈DNA片段互補的帖性末端,不能連接雙鏈DNA片段的平末端
2.在重組DNA技術中,將外源基因送入受體細胞的載體可以是()
A.大腸桿菌的質(zhì)粒B.切割DNA分子的酶C.DNA片段的黏性末端D.用來識別特定基因的DNA探針二、拓展應用1.想一想。為什么限制酶不切制細菌本身的DNA分子?2.有2個不同來源的DNA片段A和B.
A片段用限制酶SpeI進行切制,B片段分別用限制酶HindIII.
XbaI。EcoRV和XhoI進行切制。各限制酶的識別序列和切制位點如下。(1)哪種限制酶切制B片段產(chǎn)生的DNA能與限制酶SpeI切制A片段產(chǎn)生的DNA片連接?為什么?
(2)不同的限制酶切制可能產(chǎn)生相同的末端,這在基因工程操作中有什么意義?7.P75探究與實踐:DNA的粗提取及鑒定結果分析與評價
(1)你提取出白色絲狀物或沉淀物了嗎?用二苯胺試劑鑒定的結果如何?(2)你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些雜質(zhì)嗎?
(3)與其他同學提取的DNA進行比較,看看實驗結果有何不同,分析產(chǎn)生差異的原因。
8.P75進一步探究:本實驗只是對DNA進行了粗提取,請查閱資料,了解實驗室提取純度較高的DNA的一一種方法,并與本實驗中所使用的方法進行比較,總結兩種方法的異同。第2節(jié)基因工程的基本操作程序1.P76從社會中來:1997年,我國政府首次批準商業(yè)化種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。到2015年,我國已有成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉新品種100多個,減少農(nóng)藥用量40萬噸,增收節(jié)支社會經(jīng)濟效益450億元。你知道轉(zhuǎn)基因抗蟲棉抗蟲的機制是什么嗎?培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉一般需要哪些步驟?2.P79旁欄思考題:用PCR技術可以擴增mRNA嗎?3.P80旁欄思考題:將生物的所有DNA直接導入受體細胞不是更簡便嗎?如果這么做,效果會怎樣?4.P83到社會中去:轉(zhuǎn)基因抗蟲棉在世界范圍內(nèi)被廣泛種植,有效控制了棉鈴蟲的種群數(shù)量,顯著減少了農(nóng)藥的用量。面對棉鈴蟲的危害,有了抗蟲棉是否就可以一勞永逸、高枕無憂呢?根據(jù)棉鈴蟲對傳統(tǒng)農(nóng)藥產(chǎn)生抗性的發(fā)展歷史,科研人員推測棉鈴蟲存在對Bt抗蟲蛋白產(chǎn)生抗性的可能。請你查閱資料,了解以下問題。
(1)在實際種植過程中,棉鈴蟲是否對轉(zhuǎn)Bt基因的抗蟲棉產(chǎn)生了嚴重的抗性?證據(jù)是什么?(2)科研工作者在沒有發(fā)現(xiàn)棉鈴蟲出現(xiàn)抗性之前,就應該想辦法應對。他們想出的延緩棉鈴蟲對Bt抗蟲蛋白產(chǎn)生抗性的措施有哪些?這些措施的原理是什么?有效嗎?2.P83練習與應用一、概念檢測1.研究人員將一種海魚的抗凍蛋白基因afp整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上,然后用它侵染番茄細胞,獲得了抗凍的番茄品種。判斷下列相關表述是否正確。
(1)afp基因是培育抗凍番茄用到的目的基因。()
(2)構建含有afp基因的Ti質(zhì)粒需要限制酶、DNA連接酶和核酸酶。()
(3)只要檢測出番茄細胞中含有afp基因,就代表抗凍番茄培育成功。()
2.利用PCR既可以快速擴增特定基因,也可以檢測基因的表達。下列有關PCR的敘述錯誤的是()
A.
PCR用的DNA聚合酶是一種耐高溫酶B.變性過程中雙鏈DNA的解開不需要解旋酶
C.復性過程中引物與模板鏈的結合遵循堿基互補配對原則
D.延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP和4種核糖核苷酸
二、拓展應用
1.研究人員在研究轉(zhuǎn)基因煙草中外源卡那霉素抗性基因的遺傳穩(wěn)定性時,發(fā)現(xiàn)44株轉(zhuǎn)基因煙草中有4株該基因的遺傳不符合孟德爾遺傳規(guī)律,在它們的自交后代中出現(xiàn)了較多的沒有卡那霉素抗性的植株。請查找相關資料,嘗試對這個問題作出解釋。2.八氫番茄紅素合酶(其基因用psy表示)和胡蘿卜素脫飽和酶(其基因用crtl表示)參與β-胡蘿卜素的合成。pmi為磷酸甘露醇異構酶基因,它編碼的蛋白質(zhì)可使細胞在特殊培養(yǎng)基上生長??茖W家將psy和crtl基因轉(zhuǎn)入水稻,使水稻胚乳中富含β-胡蘿卜素,由此生產(chǎn)出的大米稱為“黃金大米”。請根據(jù)以上信息回答下列問題。(1)科學家在培育“黃金大米”時,將crtl和psy基因?qū)撕琾mi基因的質(zhì)粒中,構建了質(zhì)粒pSYN12424。該項研究的目的基因是_________________________標記基因是_______,質(zhì)粒pSYN12424的作用是___________________。
(2)在構建質(zhì)粒載體時,目
的基因序列中能否含有用到的限制酶的識別序列?為什么?
(3)請查找相關資料,了解科學家為什么要培育“黃金大米”以及當前關于“是否要推廣*黃金大米””的各種爭論。你還可以提出自己的看法,并與同學交流討論。3.P85探究·實踐:DNA片段的擴增及電泳鑒定結果分析與評價
(1)你是否成功擴增出DNA片段?判|斷的依據(jù)是什么?
(2)你進行電泳鑒定的結果是幾條條帶?如果不止一+
條條帶,請分析產(chǎn)|生這個結果的可能原因。第3節(jié)基因工程的應用1.P87從社會中來:胰島素是治療糖尿病的特效藥物。傳統(tǒng)生產(chǎn)胰島素的方法是從豬、牛等動物的胰腺中提取。曾經(jīng)生產(chǎn)供一位糖尿病病人使用一年的胰島素,需要上千頭牛,生產(chǎn)的成本非常高。1978年,科學家將編碼人胰島素的基因?qū)氪竽c桿菌細胞中,使大腸桿菌表達重組人胰島素。我國擁有自主知識產(chǎn)權的基因工程藥物--重組人胰
島素已經(jīng)研制成功并得到廣泛應用。除了生產(chǎn)胰島素,基因工程還有哪些應用呢?2.P91異想天開:假如某位心臟病病人換上經(jīng)過改造的豬心臟后,過上了健康人的生活。在生活中,他會遭到歧視嗎?對此你怎么看?3.P92到社會中去:轉(zhuǎn)基因技術自誕生以來,發(fā)展迅速,研發(fā)對象已涵蓋至少35科、200多種的植物,涉及大豆、玉米和棉花等重要作物,以及牧草、花卉和林木等。請調(diào)查:
(1)目前我國批準發(fā)放了哪些轉(zhuǎn)基因作物的生產(chǎn)應用安全證書和進口安全證書?
(2)你或你的親朋好友在日常生活中使用的生物產(chǎn)品,哪些在生產(chǎn)過程中用到了轉(zhuǎn)基因技術?4.P92練習與應用一、概念檢測1.將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后,重新導入大腸桿菌的細胞內(nèi),再通過發(fā)酵工程就能大量生產(chǎn)人生長激素。下列敘述,正確的是()
A.轉(zhuǎn)錄生長激素基因需要解旋酶和DNA連接酶B.發(fā)酵產(chǎn)生的生長激素屬于大腸桿菌的初生代謝物
C.大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長澈素的變異可以遺傳D.大腸桿菌質(zhì)粒標記基因中腺嘌呤和尿嘧啶的含量相等
2.下列不屬于基因工程應用的是()
A.培育青霉菌并從中提取青霉素B.利用乳腺生物反應器生產(chǎn)藥物
C.制造一種能分解石油的“超級細菌"D.制造一種能產(chǎn)生干擾索的基因工程菌二、拓展應用
1.除草劑的有效成分草甘膦能夠?qū)R坏匾种艵PSP合酶的活性,從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而導致植物死亡。草甘膦沒有選擇性,它在除掉雜草的同時也會使作物受損。解決這個問題的方法之一.就是培
育抗草甘膦的作物。
(1)下面是探究“轉(zhuǎn)人外源EPSP合酶基因能否使矮牽??共莞黍v”的流程,請補充完整。①用_______________等處理目的基因和Ti質(zhì)粒,構建重組Ti質(zhì)粒;
②將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)人農(nóng)桿菌中;
③利用含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染_______________細胞,再通過培育得到轉(zhuǎn)基因植株;
④用草甘膦同時噴灑轉(zhuǎn)基因植株和對照組植株。結果:對照組植株死亡,轉(zhuǎn)基因植株存活,但也受到了影響。
結論:____________________________________________________________
(2)請思考并回答下列問題。
①在該實驗中,對照組是怎樣設計的?
②如果增加轉(zhuǎn)入的外源EPSP合酶基因的數(shù)量,轉(zhuǎn)基因矮牽牛對草甘膦的抗性是否會增加?請你給出進-一步探究的思路。
2.下圖是某同學畫的兩幅基因工程卡通圖。一幅是一頭能進行光合作用的奶牛,一幅是一株能同時結出多種蔬滎和水果的植物。你能像這位同學-樣,展開想象的翅膀,用圖畫、文字或用音樂創(chuàng)作等,來暢想基因工程的未來嗎?第4節(jié)蛋白質(zhì)工程的原理和應用1.P93從社會中來:你見過用細菌畫畫嗎?右圖是用發(fā)出不同顏色熒光的細茵“畫”的美妙圖案。這些細茵能夠發(fā)出熒光,是因為在它們的體內(nèi)導入了熒光蛋白的基因。
最早被發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白是綠色熒光蛋白,科學家通過改造它,獲得了黃色熒光蛋白等。這些熒光蛋白在細胞內(nèi)生命活動的檢測、腫瘤的示蹤研究等領域有著重要應用。那么,科學家是怎樣對蛋白質(zhì)分子進行設計和改造的呢?2.P93旁欄思考題:你知道人類蛋白質(zhì)組計劃嗎?它與蛋白質(zhì)工程有什么關系?我國科學家承擔了什么任務?3.P94思考·討論:(1)怎樣得出決定這一段肽鏈的脫氧核苷酸序列?請把相應的堿基序列寫出來。
(2)確定目的基因的堿基序列后,怎樣才能合成或改造目的基因?4.P94異想天開:能不能根據(jù)人類需要的蛋白質(zhì)的結構,設計相應的基因,導入合適的宿主細胞中,讓宿主細胞生產(chǎn)5.P96到社會中去:酶制劑在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面都有廣泛的應用?,F(xiàn)在,酶制劑的生產(chǎn)已經(jīng)形成一個市場可觀的新興產(chǎn)業(yè)。蛋白質(zhì)工程的應用又為酶制劑產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供了強大助力。請查閱資料,了解我國酶制劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀和趨勢,分析蛋白質(zhì)工程在酶制劑產(chǎn)業(yè)中的作用。6.P96練習與應用一、概念檢測1.蛋白質(zhì)工程可以說是基因工程的延伸。判斷下列相關表述是否正確。
(1)基因工程需要在分子水平對基因進行操作,蛋白質(zhì)工程不需要對基因進行操作。(
)(2)蛋白質(zhì)工程需要改變蛋白質(zhì)分子的所有()
(3)蛋白質(zhì)工程可以改造酶,提高酶的熱穩(wěn)定性。()
2.蛋白質(zhì)工程是在深人了解蛋白質(zhì)分子的結構與功能關系的基礎上進行的,它最終要達到的目的是()
A.分析蛋白質(zhì)的三維結構B.研究蛋白質(zhì)的氨基酸組成
C.獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息D.改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì),滿足人類的需求
3.水蛭素是一種蛋白質(zhì),可用于預防和治療血栓。研究人員發(fā)現(xiàn),用賴氨酸替換水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。在這項替換研究中,目前可行的直接操作對象是()A.基因B.氨基酸C.多肽鏈D.蛋白質(zhì)
二、拓展應用
T4溶菌酶是一種重要的工業(yè)用酶,但是它在溫度較高時容易失去活性。為了提高T4溶菌酶的耐熱性,科學家首先對影響T4溶菌酶耐熱性的一些重要結構進行了研究。然后以此為依據(jù)對相關基因進行改造,使T4溶菌酶的第3位異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼帷S谑?,在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵,T4溶菌酶的耐熱性得到了提高。這項工作屬于什么工程的范疇?在該實例中引起T4溶菌酶空間結構發(fā)生改變的根本原因是什么?如果要將該研究成果應用到生產(chǎn)實踐,還需要做哪些方面的工作?6.P98復習與提高1.某動物體內(nèi)含有研究者感興趣的日的基因,研究者欲將該基因?qū)舜竽c桿菌的質(zhì)粒中保存。該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因(AmpR).LacZ基因及-些酶切位點,其結構和簡單的操作步驟如下圖所示。請根據(jù)以上信息回答下列問題。
(1)在第②步中,應怎樣選擇限制酶?
(2)在第③步中,為了使質(zhì)粒DNA與目的基因能連接,還需要在混合物中加入哪種物質(zhì)?(3)選用含有AmpR和LacZ基因的質(zhì)粒進行實驗有
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