微生物知識及潔凈區(qū)操作常識6312220555

微生物知識及潔凈區(qū)操作常識

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品保部過程檢查第一章：微生物基礎(chǔ)知識微生物的概念微生物是一個龐大微觀世界生物群體的總稱體形微小，結(jié)構(gòu)簡單，數(shù)量多，分布廣。微生物的特點(diǎn)分布廣，種類多生長旺，繁殖快適應(yīng)性強(qiáng)，易變異代謝強(qiáng)，轉(zhuǎn)化快微生物的分類按細(xì)胞結(jié)構(gòu)的有無，可分為兩大類群非細(xì)胞生物（如病毒）細(xì)胞生物（細(xì)菌、真菌等）乙型肝炎病毒酵母菌細(xì)菌形態(tài)構(gòu)造

細(xì)菌形態(tài)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)與生長

細(xì)胞壁細(xì)胞膜核糖體核質(zhì)體特殊結(jié)構(gòu)——芽孢細(xì)菌生長繁殖條件

充足的營養(yǎng)

合適的PH值：7.2-7.6

適宜的溫度：嗜溫菌為20-40

C

必要的氣體：CO2和氧氣

第二章：消毒與滅菌消毒與滅菌消毒（disinfection)殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物。用以消毒的藥品稱為消毒劑(disinfectant)。滅菌（sterilization）殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。

熱力滅菌法一、物理消毒滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法干烤----加熱干熱滅菌法常用烘箱：用于耐高溫的物料、金屬、玻璃制品，滅芽孢效果好。

135~145℃3~5小時160~170℃2~4小時180~200℃0.5~1小時250℃0.5小時或200以上45mim(熱原)遭破壞濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~30分鐘煮沸消毒法水煮100℃5分鐘(繁殖體)~2小時(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61℃30分鐘）殺滅致病菌是指再常壓條件下，采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時間通常為30-60分鐘。濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱輻射殺菌法紫外線殺菌機(jī)理：干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱不耐熱物品的表面消毒特點(diǎn)：應(yīng)用范圍：空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室用波長200～300nm（253.7nm處殺菌力最強(qiáng)）的紫外線進(jìn)行滅菌，紫外滅菌燈平均壽命為2000小時，設(shè)計(jì)為0.4w/m2以上，被滅菌物品離光源不超過1.5米，一般滅菌30min~1h。應(yīng)用范圍：電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線如Co60一次性醫(yī)用塑料制品的消毒不破壞其營養(yǎng)成分的滅菌空氣的消毒環(huán)氧乙烷滅菌，利用其強(qiáng)氧化性，對微生物繁殖體、芽孢有強(qiáng)的滅菌作用。臭氧滅菌：臭氧在常溫下不穩(wěn)定，很快自行分解成氧氣（O2）及氧原子（O），氧原子對微生物具有的氧化作用。環(huán)氧乙烷、臭氧滅菌濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的濾菌器含有微細(xì)小孔<0.22微米,只允許液體或氣體通過,

而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌二、化學(xué)消毒滅菌法類別作用機(jī)制常用種類酚類蛋白變性，細(xì)胞膜損傷石炭酸醇類蛋白變性乙醇氧化劑氧化、蛋白沉淀高錳酸鉀重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞氧化劑氧化、蛋白沉淀過氧乙酸、碘酒表面活性劑蛋白變性，細(xì)胞膜損傷新潔而滅染料干擾氧化、抑制繁殖龍膽紫常用消毒劑種類各種消毒劑的應(yīng)用種類使用濃度用途石炭酸3%~5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇75%

直接接觸藥物的容器、用具、設(shè)備表面、天花、墻面及人手部的消毒（48小時用完）

高錳酸甲3%~5%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞3%~5%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞3%~5%皮膚消毒、手術(shù)部位消毒過氧乙酸3%~5%塑料、玻璃器材消毒碘酒3%~5%皮膚消毒新潔而滅0.1%

手部消毒（48小時用完）

0.2%

墻壁、地面、地漏、門窗、臺面、桌、椅等消毒

龍膽紫3%~5%淺表創(chuàng)傷消毒戊二醛

2%

直接接觸藥物的容器、用具、設(shè)備表面、天花、墻面及人手部的消毒（24小時用完）噴灑

甲醛

40%

適用于空間的消毒

雙氧水3%~5%容器、用具、設(shè)備表面、天花、墻面消毒劑殺菌原理

酒精能使菌體蛋白質(zhì)脫水變性，常用酒精殺菌濃度為70-75%。氯的消毒作用，即是HCLO作用，HCLO是中性分子，可以擴(kuò)散至帶負(fù)電的細(xì)菌表面，并穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，由于氯原子的氧化作用，破壞某些酶系統(tǒng)，最終致細(xì)菌死亡。

表面活性劑作用：破壞細(xì)胞膜，使蛋白質(zhì)變性。

影響消毒劑作用的因素消毒劑細(xì)菌

環(huán)境種類濃度作用時間菌齡種類有機(jī)物溫度酸堿度低毒價廉低破壞易貯藏方便有效選擇適當(dāng)?shù)南緞┑谌拢何廴镜耐緩郊翱刂拼胧┪廴井a(chǎn)品的主要途徑及應(yīng)對措施一、污染的概念在詞典中的定義為：當(dāng)某物與不潔凈的或腐壞物接觸或混合在一起從而使該物變得不純凈或不適用時，它即受到污染。簡單定義為：當(dāng)一個產(chǎn)品中存在不需要的物質(zhì)時，它即受到污染。

美國藥品法中許多條款，都一再強(qiáng)調(diào)防止產(chǎn)品受到污染的重要意義，藥品法中明確規(guī)定，受到污染的藥品應(yīng)被看做是摻假藥。二、污染的形式、特點(diǎn)、危害◆兩種最常見的污染形式：塵粒污染和微生物污染★塵粒污染及其三個特點(diǎn)：▲塵粒的普遍存在：幾乎任何物料都能轉(zhuǎn)變成塵粒形式并通過空氣流傳播到整個藥廠。典型塵粒有：泥土、塵埃、沙、棉絨、頭發(fā)、皮膚、煙霧、金屬、噴嚏和咳嗽排出物

▲制藥企業(yè)中大量存在塵粒：每立方英尺（1英尺=0.3048米）的空氣中可能含有20萬至1千萬塵粒。（99%）

▲塵粒大小區(qū)別很大：大部分塵粒肉眼不能看到，必須用靈敏的測量儀器才能檢出，所以容易被忽視。

★微生物（主要是細(xì)菌）污染：細(xì)菌得到了必要的養(yǎng)料、水分及合適的溫度，一個細(xì)菌24小時后可生產(chǎn)出281兆個細(xì)菌。污染的危害：醫(yī)療用品被污染對人體的危害可歸納為微粒和微生物兩方面，一般的講微粒造成的危害是慢性的，微生物引起的危害上急性反應(yīng)。（一）微粒對人體的危害

根據(jù)大量的研究資料記載微粒物質(zhì)進(jìn)入人體后可引起如下反映1、可直接造成血管內(nèi)壁損傷過血管的閉塞，引起局部缺血或水腫。2、微粒侵入組織（肺、腦腎等）在巨噬細(xì)胞的包圍和繁殖下，引起肉芽腫。3、紅細(xì)胞集聚在異物上，會形成血栓，導(dǎo)致血管栓塞和靜脈炎。4、引起過敏反應(yīng)和血小板減少癥狀，甚至潛在致癌的危險

（二）微生物的危害

微生物對人體的危害作用，活菌和死菌均可引起1、活菌對人體的影響如醫(yī)療器械消毒不徹底，即有活菌存在（如化膿性球菌），當(dāng)這些醫(yī)療器械使用于人體時，細(xì)菌即可進(jìn)入血液或無菌組織中生長繁殖，造成繼發(fā)性感染引起局部膿腫或全身性感染。如菌血癥和敗血癥等。使病人發(fā)生高熱以及系列中毒癥狀，甚至危及病人生命。所以無菌器械標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了無菌，即指經(jīng)消毒滅菌處理后無任何活的微生物存在，無菌檢查應(yīng)為無菌生長2、死菌對人體的影響污染微生物的醫(yī)療器械，雖然用各種方法均可殺死，但它的尸體、碎片以及新陳代謝產(chǎn)物（毒素等）仍存在（細(xì)菌的內(nèi)毒素只有死后才能釋放出來）且一般的消毒方法對內(nèi)毒素沒有破壞作用。所以一旦使用此類醫(yī)療器械，內(nèi)毒素首先作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起血管收縮，汗腺停止排汗。使散熱減少，同時分解加強(qiáng)，產(chǎn)熱升高，體溫上升?；颊咴跓嵩催M(jìn)入體內(nèi)數(shù)分鐘到一小時內(nèi)，突然發(fā)冷，寒戰(zhàn)，面色蒼白，隨后高燒，嚴(yán)重者昏迷甚至死亡。熱原反應(yīng)。傳播污染的四大媒介及應(yīng)對措施★空氣：是侵襲產(chǎn)品的污染物的主要媒介。

建立密閉的潔凈廠房：這是最有效的戰(zhàn)略措施；

過濾：是控制空氣質(zhì)量的最有效方法。最常見的空氣過濾系統(tǒng)之一是層流裝置。能達(dá)到

10，000級和100級潔凈度。在層流系統(tǒng)中，HEPA可達(dá)到高于99.97%的除塵效果。一個主持生產(chǎn)工作的中層干部，對過濾原理、濾器等級各能力以及比較各類濾器性能的方法等，應(yīng)具備基本的理解。傳播污染的四大媒介及應(yīng)對措施★水：水是生命物質(zhì)的組成部分，水中含有微生物賴以生存和繁殖所必需的養(yǎng)料。

水可以分為生水、標(biāo)準(zhǔn)飲用水、純化水（通過蒸餾、離子交換、反滲透制得）、注射用水。

在生產(chǎn)過程中，水是應(yīng)用最廣泛的原料，并且要用來清洗我們的設(shè)備、容器、工具。

最好的措施是對水進(jìn)行凈化：現(xiàn)在最常用的是用二級反滲透法制備純化水，再通過蒸餾制備注射用水。傳播污染的四大媒介及應(yīng)對措施★表面：（包括包裝材料、建筑、設(shè)備、原料、容器工具）由于空氣中的濕度、所有表面都被包上了一層含水的薄膜、這層薄膜由于靜電吸引而飽含塵埃，許多時候，表面還覆蓋一層油狀物，此油膜易受到塵粒污染。

清洗：從表面除去泥土和其它微粒，從而阻止污染物聚積和生長的過程。

消毒滅菌：消滅清洗后常常留在表面的致病菌的過程。

對于地板、墻壁、設(shè)備和容器的有效清洗和消毒滅菌來說是至關(guān)重要的。傳播污染的四大媒介及應(yīng)對措施★人：人是藥廠中最不清潔的成份，是最常見的、永不休止的污染源。

每分鐘從人類皮膚中要散發(fā)約10，000個微生物。一小粒糖大的頭發(fā)中能裝載4億個微生物。

一次咳嗽或噴嚏將把千百萬個微生物引入工作環(huán)境。

衣物、發(fā)膠、香水、脂粉、耳環(huán)、戒指是極好的污染源。

所有的生產(chǎn)操作及清潔操作都要由人來完成。實(shí)施各項(xiàng)關(guān)于人員的衛(wèi)生措施，包括體檢及個人衛(wèi)生第四章：潔凈區(qū)控制2007.02.12潔凈生產(chǎn)區(qū)人員進(jìn)出程序圖進(jìn)：換鞋脫外衣洗手穿連體工作服手消毒風(fēng)淋室潔凈生產(chǎn)區(qū)穿無菌衣戴無菌手套出：旁通門穿外衣脫工作服換鞋潔凈生產(chǎn)區(qū)六步洗手法示意圖

手消毒無菌服的穿著標(biāo)準(zhǔn)：1.穿衣順序從上到下，先穿上衣后穿褲子2.遮掩口鼻，眼睛以外其他皮膚不得暴露4.上衣應(yīng)勒在褲子里5.手套應(yīng)把衣袖包裹在內(nèi)6.進(jìn)入充填室應(yīng)穿專用鞋套潔凈室人員控制（一）人員衛(wèi)生高度潔凈環(huán)境中工作人員衛(wèi)生的重要性，是怎么強(qiáng)調(diào)也不為過的。與污染擴(kuò)散最直接相關(guān)的是材料和部件的搬運(yùn)等，因此，必須經(jīng)常洗手。特別是咳嗽、打噴嚏、上廁所、吸煙（包括使用鼻煙）之后，以及休息后返回工作之前，都要洗手。手在接觸受污染的材料和動物后，也應(yīng)徹底清洗對產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范相關(guān)人員的衛(wèi)生要求■每一個人員應(yīng)對自己個人的清潔衛(wèi)生負(fù)責(zé)?！鰬?yīng)對每一個與產(chǎn)品生產(chǎn)管理規(guī)范工作相關(guān)的人員，進(jìn)行個人衛(wèi)生的教育和培訓(xùn)?！鋈藛T是潔凈生產(chǎn)區(qū)主要的污染源之一?！鰪娜梭w脫落的表皮細(xì)胞是“死”粒子，但上面常常沾有細(xì)菌及其他微生物因此人員要避免接觸設(shè)備和產(chǎn)品?！龀ㄆ谶M(jìn)行盆浴或淋浴外，還應(yīng)定期洗頭。從衛(wèi)生觀點(diǎn)看，更提倡淋浴?！霭ê氃趦?nèi)的所有毛發(fā)，都要全部遮蓋住?！鍪质且淮笪廴驹?，手是將污染物從一處傳到另一處的罪魁禍?zhǔn)字弧Ｒ虼?，要特別注意手的衛(wèi)生，尤其是指甲、指甲根部和手上的傷處。■嘴也是一個主要污染源，因此好的口腔衛(wèi)生到頭重要。在潔凈室內(nèi)應(yīng)盡量避免喊叫或提高說話的聲音；也要盡量避免咳嗽和打噴嚏，如果實(shí)在避免不了，就避開工作區(qū)?！鲈诟叨葷崈魠^(qū)域工作的人員，應(yīng)健康狀況良好。潔凈室內(nèi)需遵守的紀(jì)律

保證產(chǎn)品不受污染，在潔凈室內(nèi)必須遵守一定的行為準(zhǔn)則。為保證空氣不會從高污染區(qū)向低污染區(qū)（例如生產(chǎn)潔凈室外）流動，應(yīng)遵守的紀(jì)律1．人員必須嚴(yán)格執(zhí)行公司的更衣和洗手程序。2．人員必須經(jīng)過風(fēng)淋室或人員緩沖間進(jìn)出潔凈室。3．門不得敞開。4．關(guān)門、開門動作要慢，否則空氣會從一個區(qū)域抽至另一個區(qū)域。5．穿過風(fēng)淋室、緩沖間的門時，應(yīng)確保在第一道門已關(guān)閉時再通過第二道門。人員行為：1．不允許有不當(dāng)行為。2．人員相對產(chǎn)品而言，應(yīng)處在正確的位置上，這樣污染物才不致落在產(chǎn)品上。3．如何移動或抓起產(chǎn)品，必須事先考慮好。4．潔凈室訂立自己的“無接觸”規(guī)則，以保證產(chǎn)品不受污染。5．人員不應(yīng)靠身體來搬運(yùn)材料。6．人員在工作時不應(yīng)說話，否則唾沫會從口罩與皮膚的縫隙處噴出而污染產(chǎn)品。7．工作人員觸摸潔凈室的表面不是一個好的動作。8．手套在使用期間要考慮對其的清洗和消毒。物料進(jìn)出潔凈區(qū)

將送入緩沖間，關(guān)閉緩沖間門，脫去外包或進(jìn)行清潔（去塵、擦凈）處理。潔凈區(qū)接料人從緩沖間取出物料，關(guān)緩沖間門，將物料運(yùn)至?xí)捍骈g或指定地點(diǎn)。

物料出潔凈區(qū)時，將物料送入緩沖間，關(guān)緩沖間門。

取料人從緩沖間取出物料，關(guān)緩沖間門，即可將物料運(yùn)至指定地點(diǎn)。物品及工具進(jìn)入潔凈區(qū)

進(jìn)入的工具、儀器、零部件、設(shè)備等均應(yīng)進(jìn)行擦洗、除塵或除去外包裝、消毒等必要的凈化處理，并按規(guī)定程序進(jìn)行清潔、消毒后方可放入。

盡量減少使用不易清潔的凹陷或凸出的壁架和設(shè)備。

清潔工具應(yīng)干燥，防止生霉現(xiàn)象。清潔劑、消毒劑應(yīng)替換使用，防止微生物產(chǎn)生耐藥性。設(shè)有密閉的廢棄物放置點(diǎn)，放置點(diǎn)周圍干凈、無污漬、無灑漏。并按規(guī)定在工作后將其及時清除出潔凈區(qū)。不設(shè)告示板、記事板，不得在墻壁粘貼無關(guān)布告、指示。工具、器具和容器不得隨便送出潔凈區(qū)外，所有再次進(jìn)入的物品必須經(jīng)過重新清潔、消毒，不允許物品隨便進(jìn)出。記錄用的紙、筆需經(jīng)潔凈、消毒程序后方可帶入。所有原輔料、藥用包材必須除去外包裝，同時清潔內(nèi)包裝表面，進(jìn)行消毒。

潔凈區(qū)生產(chǎn)管理所有使用物料有明顯狀態(tài)標(biāo)記，定位碼放整齊。

房間狀態(tài)、設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)標(biāo)志齊備。工作時門必須關(guān)緊，盡量減少出入次數(shù)。

潔凈區(qū)內(nèi)進(jìn)行各種操作要穩(wěn)、準(zhǔn)、輕，不做與工作無關(guān)的事情。

每天必須有足夠的時間用于清潔與消毒，更換品種要保證有足夠的時間間歇、清場、清潔與消毒。

維修人員在搶修機(jī)器設(shè)備時，應(yīng)確認(rèn)維修過程不對潔凈區(qū)造成污染。

潔凈區(qū)生產(chǎn)管理對確認(rèn)已被污染的物品或懷疑被污染的物品、容器就地消毒或包裝嚴(yán)密后送出潔凈區(qū)，重新清洗滅菌，防止污染擴(kuò)散。經(jīng)常用75%乙醇消毒手。發(fā)生緊急情況，應(yīng)沉著鎮(zhèn)靜，迅速采取措施，保證人身安全，防止在線生產(chǎn)污染。第五章、安全知識紫外燈的使用及注意事項(xiàng)臭氧對人體的危害使用電熱板的注意事項(xiàng)長菌物體為什么要滅菌滅菌鍋的使用機(jī)器的安全問題一、紫外燈使用的注意事項(xiàng)開啟紫外燈時，務(wù)必確定沒有人在房間內(nèi)！開啟紫外燈時，會產(chǎn)生臭氧，少量臭氧對人體有益，但濃度高的臭氧是有危害的！一、直接照射紫外燈的可能出現(xiàn)的后果電光性眼炎皮膚紅斑反應(yīng)光感性皮炎誘變和致癌作用二、臭氧對人體的危害臭氧主要是刺激和損害深部呼吸道，并可損害中樞系統(tǒng)，對眼睛亦輕度刺激作用。對鼻子和胸部可產(chǎn)生刺激感，有急性的灼燒感，頭痛，中樞神經(jīng)發(fā)生障礙，時間再長，則思維能力下降，可導(dǎo)致人的思維紊亂。嚴(yán)重時可導(dǎo)致肺氣腫和肺水腫。所以當(dāng)房間內(nèi)紫外燈正在開啟時，禁止進(jìn)入！如要進(jìn)入請關(guān)閉紫外燈并等待10-20分鐘，確定房間內(nèi)臭氧散盡，無臭氧的味道后再進(jìn)入房間！三、電熱板使用注意事項(xiàng)使用前確認(rèn)電源線沒有接觸到電熱板的加熱面加熱液體時，要有人看管必要時可加沸石，防止液體暴沸四、長菌物體為什么要滅菌真菌的危害:

真菌會產(chǎn)生真菌毒素，從而危害人體。真菌會引起過敏，如果人體在短時間內(nèi)吸入大量真菌孢子、菌絲，便會產(chǎn)生頭昏、嘔吐、休克等急性過敏反應(yīng)。淺部真菌病，指真菌侵犯光滑的皮膚和它附屬的指甲、毛發(fā)等，會使感染者罹患皮膚癬、灰指甲等。深部真菌病，是指通過創(chuàng)傷性皮膚接觸，真菌侵入人體皮下組織、粘膜、內(nèi)臟器官引起的疾病。這類真菌感染病是對人體危害大并且發(fā)病率日益攀升的病種之一。細(xì)菌的種類多且雜，對人體的危害也是各種各樣的。如最常見的金黃葡萄球菌了，感染不同的部位還可以導(dǎo)致不同的病癥，例如感染毛囊可以生癤，癰；感染心臟可以生急性心內(nèi)膜炎，等等。對可能有病原微生物的廢