高中生物高考專題12-微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用(解析版)

2020屆高考生物難點(diǎn)及易錯(cuò)題精講精練

專題12微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用

【難點(diǎn)精講】

一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和無(wú)菌技術(shù)

例題：（2018?全國(guó)II,37）在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污

染?；卮鹣铝袉栴}：

⑴在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅

菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。

⑵牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)

點(diǎn)是

（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能

在照射前，適量噴灑,可強(qiáng)化消毒效果。

（4）水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過_______（填“氯氣"乙醇”或“高缽酸鉀”）消毒的。

⑸某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，

最可能的原因是。

【答案】（1）可以（2）在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少（3）破壞DNA結(jié)構(gòu)消

毒液（4）氯氣（5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡

【解析】⑴干熱滅菌是指將物品放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160?170c條件下加熱1?2ho

耐高溫、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可采用干熱滅菌

的方法。（2）巴氏消毒法是在70?75℃條件下煮30min或在80℃條件下煮15min,可以殺

死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。（3）接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在

使用削，可以用紫外線照射30mm,紫外線能破壞微生物的DNA結(jié)構(gòu)，以殺死物體表面或

空氣中的微生物。在照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以強(qiáng)化消毒效果。

（4）自來(lái)水通常是用氯氣進(jìn)行消毒的。（5）在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，

而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是鍋內(nèi)原有的冷空氣沒有排盡。

【難點(diǎn)突破】

無(wú)菌技術(shù)

(1)含義：在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。

(2)常用方法

區(qū)別：能否殺死

大腸桿菌的純化培養(yǎng)

(1)制備牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基

|W|->[W-HiW

(2)純化大腸桿菌的方法

①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋

分散到培養(yǎng)基的表面。

②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊

脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

(3)菌種的保存方法

①對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法“

②對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。

變式訓(xùn)練：(2018?河北衡△中學(xué)七調(diào))下列表格是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大物桿菌的培養(yǎng)基

配方，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列相關(guān)問題。

成分含量

蛋白陳10.0g

乳糖5.0g

蔗糖5.0g

K2HPO42.0g

顯色劑(伊紅美藍(lán))0.2g

瓊脂12.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸儲(chǔ)水定容到1000mL

巷

m根據(jù)用途劃分,該培養(yǎng)基屬于_______培養(yǎng)基,若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需對(duì)培

養(yǎng)基做出的最關(guān)鍵的調(diào)整是,若還需鑒定分解尿素的細(xì)菌.需做M的調(diào)整

是o

（2）從培養(yǎng)基的成分上看，大腸桿菌的同化類型為。該培養(yǎng)基能否用于分離

篩選出大腸桿菌？為什么？o

（3）在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是,紫外線可對(duì)空

氣進(jìn)行滅菌的原因是O

（4）某同學(xué)嘗試純化大腸桿菌，其中一個(gè)平板的菌落分布如上圖，推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能

的操作失誤是O

【解析】（1）伊紅美藍(lán)是鑒定大腸桿菌的試劑，因此該培養(yǎng)基從用途上分屬于鑒別培養(yǎng)

基；若要分離能分解尿素的細(xì)菌，則需要保證培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，即將蛋白陳換成

尿素；鑒定分解尿素的細(xì)菌，需要使用酚紅指示劑。（2）大腸桿菌需要從培養(yǎng)基中獲得碳源，

因此其同化作用類型是異養(yǎng)型；由于表格中的培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生

存，因此該培養(yǎng)基不能用于分離篩選出大腸桿菌。（3）微生物培養(yǎng)時(shí)，關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌

的感染；空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能讓蛋白質(zhì)變性，同時(shí)還能破壞

DNA的結(jié)構(gòu)。

（4）由題圖可知，接種時(shí)該同學(xué)采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒有很好地

分散開來(lái)，可能是涂布不均勻?qū)е碌摹?/p>

【答案】（1）鑒別將蛋白陳換成尿素將伊紅美藍(lán)換成酚紅指示劑（2）異養(yǎng)型不

能，原因是培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生存（3）防止外來(lái)雜菌的感染紫

外線能使蛋白質(zhì)變性，還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)（4）涂布不均勻

二、目標(biāo)微生物的篩選與鑒定

例題：（2017?全國(guó)卷I,37）某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NHs，供植物吸收和利用。

回答下列問題：

（1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生o能分

解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是

，但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主

要作用是（答出兩點(diǎn)即可）。

（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇（填“尿素”“NH4NO3”

或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是

（3）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH,PCh和Na,HPCU,其作用有

____________________________________________________（答出兩點(diǎn)即可）。

【答案】（1）胭酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物為細(xì)胞

生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料（2）尿素其他兩組都含有NH4NO3,

能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用（3）為

細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽離子，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中pH穩(wěn)定

【解析】（1〉只有能合成胭酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素的

細(xì)菌是一種分解者，屬于異養(yǎng)型生物，不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源。能分解尿素

的細(xì)菌可以以葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解為

細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，另一方面其代謝中間產(chǎn)物可為多種有機(jī)物的合成提供原料。

（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培

養(yǎng)基，而其他兩組都含有含氮物質(zhì)NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能

利用NH4NO3不能起到篩選作用。

（3）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KHhPOj和NazHPCh，其作用：KH2Po4和Na2HpCh

構(gòu)成緩沖液，可維持培養(yǎng)基的pH相對(duì)穩(wěn)定；KH2P04和NazHPO』能為微生物生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)

鹽離子。

【難點(diǎn)突破】

分離微生物的原理與措施

(1)原理：自然環(huán)境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養(yǎng)物應(yīng)首先采用的方

法是將單個(gè)的微生物與其他微生物分離，再給該微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和條件，使其生長(zhǎng)成

為可見的群體。

(2)常用措施

①接種過程中盡量使微生物分散開來(lái)，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。

②運(yùn)用選擇培養(yǎng)基的作用特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中添加某種特定的物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生

長(zhǎng)，促進(jìn)所需微生物的生長(zhǎng)。

選擇培養(yǎng)基四種常見制備方法或?qū)嵗?/p>

變式訓(xùn)練：(2018.山東、湖北部分重點(diǎn)中學(xué)高考沖刺模擬)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素

分解菌，具有下列類似的操作過程：

⑴在過程④的選擇培養(yǎng)基是培養(yǎng)基（填“固體”或“液體”），過程⑧的選擇培養(yǎng)基是

培養(yǎng)基（填“固體”或“液體”）。④的具體操作是:⑧的具體操作是

（2）在過程③樣品梯度稀釋后，一般只將稀釋度為104?IO。倍的菌液分別接種到3個(gè)平板培

養(yǎng)基上。接種的常用方法為。

（3）過程⑩采用的鑒別方法較簡(jiǎn)單。周圍出現(xiàn)透明圈但不能100%確

定為纖維素分解菌的菌落，原因是o

【答案】（1）固體液體以尿素為唯一氮源以纖維素為唯一碳源（2）稀移涂布平板（或

平板劃線）法⑶倒平板時(shí)加入剛果紅染液不分解纖維素（如分解剛果紅）的微生物菌落也

可能出現(xiàn)透明圈

【解析】（1）將微生物接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，才能形成菌落，可見，過程④的選擇培

養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。進(jìn)行梯度稀釋并接種前要進(jìn)行過程⑧所示的選擇培養(yǎng)，因此過程⑧的選

擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。④選擇培養(yǎng)的目的是篩選尿素分解菌，所以具體的操作是以尿素為

唯一氮源；⑧選擇培養(yǎng)的目的是篩選纖維素分解菌，所以⑧的具體操作是以纖維素為唯一碳

源。（2）常采用稀釋涂布平板（或平板劃線）法，將稀釋度為10」?U倍的菌液分別接種到3個(gè)

平板培養(yǎng)基上。（3）剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖

和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成,

培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈?？梢?，過程⑩采用倒平板時(shí)加入剛果紅染

液的鑒別方法較簡(jiǎn)單。由于不分解纖維素（如分解剛果紅）的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈，

所以周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，不能100%確定為纖維素分解菌的菌落。

【真題回顧】

一、單選題

1.（2019?北京高考真題）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，

若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實(shí)驗(yàn)

結(jié)果見下表。

誘明圈

菌種菌落宜徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C

細(xì)菌I5.111.22.2

細(xì)菌II8.113.01.6

有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)?誤?的是

A.培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

B.篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布

C.以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外

D.H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異

【答案】C

【解析】

培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時(shí),

需要對(duì)菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培

養(yǎng)，B正確：由題意可知，以上兩種菌均會(huì)產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分

泌到細(xì)胞外分解淀粉，C錯(cuò)誤；淀粉分解菌的H/C越大.說明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉

相對(duì)越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強(qiáng)，D正確。因此，本題答案選C。

2.（2019?江蘇省高考真題）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不合理的是

A.篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)

B.可從富含腐殖質(zhì)的林式土壤中篩選產(chǎn)纖維素的菌

C.在分離平板上長(zhǎng)出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酸的能力

D.用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值

【答案】A

【解析】

應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，只有纖維素分解菌能夠存活，A錯(cuò)

誤：木材、秸稈中富含纖維素?，故可以從富含腐脂質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素陋菌，BiE

確;用以纖維索為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，為了確定得到的是纖維素分解菌,

還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，C正確：用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，“J以把

纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價(jià)值，D正確。故選A,

3.（2019?江蘇省高考真題）下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，塔堡的是

A.培養(yǎng)微生物的試劑和宿具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒

C,接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染

D.菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基

【答案】A

【解析】

接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理，接種環(huán)等常月灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等

常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基及多種器材用高壓蒸汽滅菌法處理，A錯(cuò)誤；為了防止雜菌污

染，每次接種前后，接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒滅菌，B正確；接種后，培養(yǎng)皿需要倒置，以防皿

蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染，C正確；分離菌種可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，后

者還可以用于微生物的計(jì)數(shù)，所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，D正確。故選A.

二、綜合題

4.（2019?全國(guó)高考真題）已知一種有機(jī)物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會(huì)造成

環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌（目標(biāo)菌）。

I號(hào)培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。

H號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g；L）,硝酸鏤（3g/L）,其他無(wú)機(jī)鹽（適量），X（15g/L）o

HI號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g；L）,硝酸銹（3g/L）,其他無(wú)機(jī)鹽（適量）。X（45g/L）o

回答下列問題。

(1)在I號(hào)培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________on、HI號(hào)培養(yǎng)基為微生物提供

碳源的有機(jī)物是O

(2)若將土壤懸浮液種在II號(hào)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)

?其原因是_。

(3)11號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對(duì)菌

落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是______________，

(4)假設(shè)從小號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在

有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長(zhǎng)提供和o

【答案】牛肉膏、蛋白陳X下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能

降解X的細(xì)菌能夠增殖稀釋涂布平板法能量合成其他物質(zhì)的原料

【解析】

(1)氮源是微生物生長(zhǎng)需要的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長(zhǎng)提供氮元

素，牛肉膏、蛋白陳來(lái)源于動(dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號(hào)培

養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白陳。碳源也是微生物生長(zhǎng)所需要的一類營(yíng)養(yǎng)

物質(zhì)，可為微生物的生長(zhǎng)遑供碳元索，而有機(jī)物均含碳元素，IHI號(hào)培養(yǎng)基均含有有機(jī)物

X,因此，0、III號(hào)培養(yǎng)基為微生物的生長(zhǎng)提供碳源的均為有機(jī)物X。

(2)由于n號(hào)培養(yǎng)基含有的碳源只有有機(jī)物x,因此若將土壤懸浮液接種在n號(hào)液體培養(yǎng)

基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解x的細(xì)菌由于無(wú)法獲得碳源而無(wú)法增殖導(dǎo)致其比例減少。

(3)微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平

板法中，稀釋度足夠高的函液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個(gè)菌落是由菌液中的一

個(gè)活菌繁殖而來(lái)，所以常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。

(4)丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且內(nèi)酮酸可作為許多物質(zhì)合成

的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長(zhǎng)提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。

5.(2018?全國(guó)高考真題)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸?定時(shí)間，過濾得到馬鈴薯浸出液。

在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。

回答下列問題：

(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長(zhǎng)，

加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。

（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源

外還有（答出兩點(diǎn)即可）。氮源進(jìn)入細(xì)菌后，可參與合成的生物大分子有

（答出兩點(diǎn)即可）。

（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長(zhǎng)出菌落后可通過加

入顯色劑篩選出能產(chǎn)牛淀粉隨的微牛物，加入的顯色劑是,該方法能篩選出產(chǎn)

生淀粉酶微生物的原理___________o

（4）甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍

數(shù)下得到以下結(jié)果：

甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133。

乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。

有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原囚是:。

【答案】細(xì)菌選擇碳源、無(wú)機(jī)鹽蛋白質(zhì)、DNA、RNA碘液淀粉遇碘

顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)

與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差

【解析】

（DM培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長(zhǎng)，而能抑制其它微生物

的生長(zhǎng)，鏈霉素是?種抗生素,可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，

該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，

（2）微生物生長(zhǎng)需要多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無(wú)機(jī)鹽、水以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的

生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸（DNA、RNA）。

（3）淀粉與碘液會(huì)變成藍(lán)色，篩選產(chǎn)淀粉酹的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶

的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來(lái)篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。

（4）乙同學(xué)結(jié)果不合理，因?yàn)?個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊較大，結(jié)果的重復(fù)性

差，不能簡(jiǎn)單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。

6.（2018?全國(guó)高考真題）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：

（1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用（填“牛肉膏蛋白陳‘",MS”或“麥芽汁瓊脂”）培

養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用滅菌法滅菌。若將酵母函劃線接種在平板上，培養(yǎng)?段時(shí)間

后會(huì)觀察到菌落，菌落的含義是________________。

（2）酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，可促進(jìn)______________（填"菌體快速增殖”、“乙醇

產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)_________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”

或“乳酸產(chǎn)生”工

（3）制作而包時(shí)，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起而包松

軟的原因是。

【答案】麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體菌

體快速增殖乙醇產(chǎn)生酵母菌分解前萄糖會(huì)產(chǎn)生C02,CO2使面包松軟

【解析】

（1）麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高

壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板，，培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到由一個(gè)細(xì)胞繁

殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。

（2）酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H20和CO?,釋放能量多，細(xì)胞

增殖快；若進(jìn)行無(wú)氧培養(yǎng)，進(jìn)行無(wú)氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CCh,釋放能量少，增殖慢。

（3）制作面包時(shí)，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酹母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)

生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔。

7.（2019?全國(guó)高考真題）回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。

（I）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白陳葡

萄糖”或“NaNOI'）。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其

原因是________。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上______（填“能夠”或“不能”）生長(zhǎng)，原因

是____________

（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。

（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征

來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是。

（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過____________處理，這種處理可以殺死丟棄物

中所有的微牛.物。

【答案】蛋白陳不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利

用空氣中的C02作為碳源倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)

定的菌落特征滅菌

【解析】

（1）葡萄糖只能為細(xì)菌提供碳源，硝酸鈉為細(xì)菌提供無(wú)機(jī)鹽，而蛋白陳既可以為細(xì)菌碳源，

也可以為細(xì)菌提供氮源；由于不同的細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基

時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH：硝化細(xì)菌屬于化能自養(yǎng)型微牛物，其可

以利用氨氧化釋放的能量將空氣中的二氧化碳固定為有機(jī)物，因此硝化細(xì)菌可以在無(wú)碳培養(yǎng)

基中生長(zhǎng)。

（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，-?般需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造

成污染。

（3）由于每一大類微生物都有其獨(dú)特的細(xì)胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)

菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生.物。

（4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。

三、實(shí)驗(yàn)題

8.（2019?全國(guó)高考真題）物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定

量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明，某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌（目標(biāo)菌）。回答

下列問題。

（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是。

（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落

（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇_______菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、

乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，?qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即o

（4）該小組將人工合成的?段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。

為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃

度天然酶的緩沖液，C處滴加,三處滴加量相同。

②一段時(shí)間后，測(cè)量透明到的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明；若A、B

處形成的透明圈直徑大小相近，說明0

【答案】W乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W將甲、乙菌分別接

種在無(wú)氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長(zhǎng)，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈淳彌_

液緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近

【解析】

（1）該研究小組的H標(biāo)菌是能夠降解物質(zhì)w的細(xì)菌，而物質(zhì)w是一種含氮有機(jī)物，故可

作篩選培養(yǎng)基中的氮源。

（2）研究小組的目標(biāo)菌，是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，

說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W,故乙菌落為該小組的目標(biāo)細(xì)菌。

（3）目標(biāo)菌能夠利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無(wú)

氮源的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌便是目的細(xì)菌，故實(shí)驗(yàn)操作為：將甲、乙菌分別接種在無(wú)氮源培

養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長(zhǎng)，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础?/p>

（4）①C處作為空白對(duì)照，要排除作為溶劑的緩沖液對(duì)實(shí)驗(yàn)可能造成的影響，故需要在C

處滴加緩沖液，且保持滴加量相同：②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C

處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，

說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。

9.（2018?全國(guó)高考真題）在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的

污染。回答下列問題：

（1）在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具（填“可以”或“不可以”）放入干熱

滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。

（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的

優(yōu)點(diǎn)是________O

（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能,在照射前，

適量噴灑,可強(qiáng)化消毒效果。

（4）水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過________（填“氯氣…乙醇''或"高錦酸鉀消毒的。

（5）某同學(xué)在使川高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，

最可能的原因是___________________________。

【答案】可以在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒

液氯氣未將鍋內(nèi)冷空氣排盡

【解析】

（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以

放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。

（2）煮沸消毒法即在IOOC煮沸5?6min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽胞；巴氏消毒法

即在7（）?75℃煮30min或在8（）℃煮I5min,可以殺死微生物，并且保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。

囚此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法的優(yōu)點(diǎn)是在達(dá)到

消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。

（3）因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射

前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。

（4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來(lái)水；高鎰酸鉀本身

有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無(wú)法使用；因此水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。

（5）采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋

密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會(huì)出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度

的現(xiàn)象。

10.（2018.江蘇省高考真題）酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來(lái)

源。有些酵母可以利用工業(yè)廢中醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這擇既可減少污染乂可降低生產(chǎn)成本。

研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大最培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請(qǐng)回答下

列問題：

（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的

,及時(shí)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行滅菌。

（2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約

（在25C、50?；?0C中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。

（3）挑取分離平板中長(zhǎng)出的單菌落，按步驟④進(jìn)行劃線.下列敘述合理的有。（多

選）

a.為保證無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌

b.劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落

c.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測(cè)定酵母細(xì)胞中甲醇的含量

d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株

（4）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用（填“牛肉膏蛋白陳、MS”或凄芽汁瓊脂”）培養(yǎng)

基，步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和供應(yīng)。

為監(jiān)測(cè)酹母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酎液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺(tái)盼藍(lán)染液染色，用25乂16

型（ImmxImmxO.Imm）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上_________色細(xì)胞

的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于,才能達(dá)到每亳升3xlO,）個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。

【答案】pH高壓蒸汽50℃a、b、d麥芽汁瓊脂氧氣無(wú)30

【解析】

（1）配制培養(yǎng)基的操作步驟為稱量一溶化一定容一調(diào)PH-培養(yǎng)基的分裝一包扎一滅菌，因

此微生物的培養(yǎng)基配制好后應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH,再分裝。常見的火菌方法有：十熱火菌、高壓

蒸汽滅菌、灼燒滅菌。培養(yǎng)基適宜用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。

（2）在步驟③中，待培養(yǎng)基冷卻至5O'C左右時(shí)進(jìn)行倒平板。

（3）在劃線過程中，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，以防止雜菌污染，a正確；劃線

時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，否則將不能形成正常菌落，b正確；該實(shí)驗(yàn)的目的是獲得利用工

業(yè)廢甲醉作為碳源的酵母菌，不需要測(cè)定酵母菌中的甲醇含量，c錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中的甲醇濃

度越高，此種培養(yǎng)基中得以生存的酵母菌利用甲靜的能力越強(qiáng)，因此可以通過逐步提高培養(yǎng)

基中甲醉的濃度，獲得甲醇高耐受株，d正確。

（4）酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖，因此為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足

的營(yíng)養(yǎng)和氧氣供應(yīng)；臺(tái)盼就是大分子物質(zhì)，不能將活細(xì)胞染色，再根據(jù)25x16型的血球計(jì)

數(shù)板：1亳升懸液中待測(cè)標(biāo)本（菌體）總數(shù)=80小方格內(nèi)菌體數(shù)/80x400xl（）4x稀釋倍數(shù)。而

臺(tái)盼赭與菌液等體積加入，因此要土到每亳升3x109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度,理論上無(wú)便細(xì)胞

數(shù)應(yīng)該不少于（3x109）4-（1000X2X104X400^80）=30個(gè)。

【新題精練】

一、單選題

1.（2020?山東省濟(jì)南外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高三其他）用紙片擴(kuò)散法測(cè)定某病原菌對(duì)各種抗生素敏感

性的實(shí)驗(yàn)，是在某病原菌均勻分布的平板，，鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖

示為培養(yǎng)的結(jié)果，其中抑菌圈是在紙片周圍出現(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是

:抑菌圈

含抗生素的紙片

A.在圖示固體培養(yǎng)基上可用平板劃線法或涂布法接種病原菌

B.未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異

C.形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感

D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響

【答案】D

【解析】

A、在圖示固體培養(yǎng)基上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種病原菌，A錯(cuò)誤;

B、病原菌發(fā)生抗性變異在接觸之前，B錯(cuò)誤；

C、微生物對(duì)藥物較敏感形成的抑菌圈應(yīng)較大，C錯(cuò)誤；

D、紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)散，不同抗生素在平

板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，D正確。

故選Do

2.（2020?山東省高三二模）尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更

好地被植物利用。下列有關(guān)土壤中尿素分解菌的分離和培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A.培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基

B.測(cè)定土壤中分解尿素的細(xì)菌數(shù)最和測(cè)定土壤中其他細(xì)菌的數(shù)最可采用相同的稀釋度

C.細(xì)菌合成的服酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高

D.利用稀釋涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離計(jì)數(shù)和純化鑒定

【答案】C

【解析】

A、培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；

B、因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量不同，故為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)

進(jìn)行分離，B錯(cuò)誤；

C、細(xì)菌合成的喔陋能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，可加入酚紅

指示劑進(jìn)行檢測(cè)，C正確：

D、鑒定分解尿素的細(xì)菌應(yīng)該用加酚紅的鑒別培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。

故選C。

3.（2020?江蘇省高三一模）下圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟。有關(guān)敘述正確的

是（）

A.步驟①操作時(shí)，倒好平板后應(yīng)立即將其倒置，防止冷凝水落在培養(yǎng)基上造成污案

B.步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒，接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液

C.步驟③沿多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后可根據(jù)出現(xiàn)的單個(gè)菌落計(jì)數(shù)

D.步驟④將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一段時(shí)間后所得到的都是X細(xì)菌菌落

【答案】B

【解析】

A、倒好平板后需待培養(yǎng)基凝固再倒置，A錯(cuò)誤；

B、接種環(huán)和試管口的灼燒都屬于無(wú)菌操作，接種環(huán)冷罰后才能沾取菌液，B正確;

C、計(jì)數(shù)一般使用稀釋涂布平板法，平板劃線法不適合，C錯(cuò)誤；

D、步驟④培養(yǎng)后得到的菌落可能還有雜菌，需要進(jìn)一步純化，D錯(cuò)誤。

故選B..

4.（2020?江蘇省高三其他）穿刺接種是用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向

管底作直線穿刺，如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng)，則在穿刺線周圍能夠生長(zhǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的

A.與平板劃線法所用的培養(yǎng)基相比，穿刺接種所需的培養(yǎng)基添加的瓊脂較少

B.穿刺接種可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)

C.穿刺接種可用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動(dòng)

D.穿刺接種可用于鑒定微生物的呼吸作用類型

【答案】B

【解析】

A、由于是半固體培養(yǎng)基，因此與平板劃線法所川的培養(yǎng)基相比，穿刺接種的培養(yǎng)基添加的

瓊脂較少，A正確；

B、穿刺接種不可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)，因?yàn)榻臃N是不定量的，B錯(cuò)誤；

C、由于是半固體培養(yǎng)基，圻以穿刺接種可用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動(dòng)，C正確；

D、由于穿刺接種后微生物口〔以分布于?培養(yǎng)基的各個(gè)部位，因此可用于鑒定微生物的呼吸作

用類型，D正確。

故選B。

二、綜合題

（2020.上海高三二模）人類歷史發(fā)展至今，已經(jīng)歷過數(shù)次微生物傳染病的爆發(fā)流行，遠(yuǎn)者

如1347?1353年間席卷歐洲的黑死?。ㄊ笠撸呷?020新年伊始由新型冠狀病毒

SARS-COV2引發(fā)的COVID-I9o

圖1

［鼠疫的傳播及鼠疫桿菌］

5.圖I所示為鼠疫的傳播過程。由圖可知，鼠疫的傳播途徑是

A.空氣傳播B.接觸傳播

C.媒介物傳播D.病媒傳播

6.鼠疫桿菌的研究中常用到龍膽紫血液瓊脂培養(yǎng)基，其配方如表所示：

成分蛋白陳牛肉粉氯化鈉龍膽紫瓊脂

濃度（g/L）10.03.05.00.0115.0

注：（1）調(diào)節(jié)pH至70-7.2使用；（2）滅菌冷卻后每1000mL培養(yǎng)基應(yīng)加入1mL脫纖維兔

血。

脫纖維兔血可刺激鼠疫桿菌的生長(zhǎng)，而龍膽紫則抑制其他雜菌的生長(zhǎng)。關(guān)于該培養(yǎng)基的說法,

正確的是。

A.此為液體培養(yǎng)基R.此為通用培養(yǎng)基

C.調(diào)節(jié)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行D.滅菌的條件應(yīng)設(shè)定為100C,30min

7.在18?22℃條件下鼠疫噬菌體只裂解鼠疫桿菌而不裂解其他菌。某實(shí)驗(yàn)室擬用鼠疫噬菌

體裂解試驗(yàn)對(duì)其分離到的疑似鼠疫桿菌菌株進(jìn)行鑒定，所得結(jié)果如圖2所示并由此確定該菌

株為鼠疫桿菌。據(jù)此推測(cè)，鼠疫噬菌體裂解試驗(yàn)的步驟為：

（1）在酒精燈火焰附近使用（選填“平板劃線法”或“涂布平板法“）接種待鑒定

的菌株;

（2）在圖2所示平板上（選填“A點(diǎn)”或“B點(diǎn)”）位置滴加含鼠疫噬菌體的溶液：

（3）將平板（選填“倒置”或“直立”）放置，置于20℃條件下培養(yǎng)24h。

（說明：“倒置”指平板與水平面平行，接種面朝下；"直立''指平板與水平面垂直）

[COVID-19和SARS-CoV2]

2020年3月4日，國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》在原有

確診標(biāo)準(zhǔn)（病毒核酸檢測(cè)）卜新增了血清SARS-CoV2特異性IgM和IgG抗體作為病原學(xué)診

斷標(biāo)準(zhǔn)。

8.關(guān)于IgM和IgG,下列說法正確的是o

A.二者均存在于內(nèi)環(huán)境中

B.漿細(xì)胞和記憶B細(xì)胞均可分泌

C.高爾基體是二者的合成場(chǎng)所

D.二者參與的特異性免授稱細(xì)胞免疫

不發(fā)?。U(xiǎn)性感染者）

A.COVID-I9易感人群的血清中檢測(cè)不到SARS-CoV2特異性IgM和IgG

B.患者感染SARS-CoV2后體內(nèi)產(chǎn)生IgM和IgG屬于先天免疫

C.隱性感染者體內(nèi)也會(huì)產(chǎn)生SARS-COV2特異性IgM和IgG

D.IgG抗體的產(chǎn)生晚于IgM抗體，但在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間長(zhǎng)于IgM抗體

E.IgG抗體陽(yáng)性可提示近期感染，而IgM抗體陽(yáng)性可提示感染時(shí)間較長(zhǎng)的既往感染

【答案】

5.D

6.C

7.平板劃線法A點(diǎn)直立

8.A

9.ACD

【解析】

1、一些生物能攜帶病原體，并將其直接或間接地傳播給人，使人得傳染病，這類生物被稱

作病媒生物，這種傳播傳染病的途徑被稱為病媒傳播。常見的可以被病媒生物傳播的傳染病

很多，如鼠疫、流行性出血熱、流行性乙型腦炎(乙腦)、人粒細(xì)胞無(wú)形體病等。

2、常用的微生物接種方法為：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

5.由圖可知，鼠疫的傳播是由于跳蚤叮咬鼠時(shí)攜帶了鼠疫桿菌，并在叮咬人的過程中將鼠

疫桿菌傳播給人，所以鼠疫的傳播途徑是病媒傳播，即D正確，ABC錯(cuò)誤。

故選D。

6.A、此培養(yǎng)基含有瓊脂，為回體培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；

B、此培養(yǎng)基中的脫纖維兔血可刺激鼠疫桿菌的生長(zhǎng)，而龍膽紫則抑制其他雜菌的生長(zhǎng)，故

此培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，不是通用培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、培養(yǎng)基制備過程中調(diào)節(jié)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，C正確；

D、該培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)為高壓蒸汽滅菌，滅菌的條件應(yīng)設(shè)定為121℃,15min,D錯(cuò)誤。

故選C。

7.(1)根據(jù)圖2可知，微生物的接種方法為平板劃線法。

(2)(3)根據(jù)在18?22c條件下鼠疫噬菌體只裂解鼠疫桿菌而不裂解其他菌可知，在圖2

所示平板上A點(diǎn)位置滴加含鼠疫噬菌體的溶液；將平板直立放置，使含鼠疫噬菌體的溶液

沿著垂直方向向下滲透，置于20c條件下培養(yǎng)24h,可出現(xiàn)圖示中的平板中間不含鼠疫桿菌

的結(jié)果。

8.A、抗體主要存在于血漿、組織液等內(nèi)環(huán)境中，A正確；

B、只有漿細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，記憶B細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，B錯(cuò)誤；

C、抗體的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，合成場(chǎng)所是核糖體，C錯(cuò)誤；

D、抗體參與的特異性免疫稱體液免疫，D錯(cuò)誤。

故選Ao

9.A、由圖可知，潛伏期的2周內(nèi)血清中沒有抗體，所以COVID-I9易感人群的血清中可

能檢測(cè)不到SARS-CoV2特異性IgM和IgG,A正確；

B、患者感染SARS-CoV2后體內(nèi)產(chǎn)生IgM和IgG屬于后天產(chǎn)生的特異性免疫，B錯(cuò)誤；

C、由圖可知，隱性感染者體內(nèi)也會(huì)產(chǎn)生SARS-C0V2特異性IgM和IgG,C正確；

D、由圖可知，IgG抗體的產(chǎn)生晚于IgM抗體，但在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間長(zhǎng)于IgM抗體，D

正確；

E、根據(jù)IgG抗體的產(chǎn)生晚于IgM抗體，但在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間長(zhǎng)于IgM抗體，可知IgM

抗體陽(yáng)性可提示近期感染，而IgG抗體陽(yáng)性可提示感染時(shí)間較長(zhǎng)的既往感染.E錯(cuò)誤。

故選ACD,

10.（2020?湖北省高三二模）隨著人們生活質(zhì)量的提高，餐飲含油脂廢水的排放量大量增加，

合理處置油脂廢水也成為新的課題。已知芽狗桿菌中有多種分解油脂產(chǎn)酸的菌利。科研人員

欲采用下列流程篩選出能高效分解油脂的微生物。

菌種取樣一分離培養(yǎng)一菌侏的篩選一形態(tài)特征觀察和生理生化反應(yīng)鑒定何答下列問題：

（1）選取飯店附近排污渠的含油脂廢水作為樣本，采樣約10g,立即裝于試管內(nèi)，此試管

使用前需要經(jīng)過_______處理。

（2）樣品分離培養(yǎng)前，一般需要將菌液進(jìn)行處理，然后吸取0.2ml菌液涂布到

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h,記錄菌落總數(shù)。將分離出的菌株

按照菌落等表觀特征初步分類。

（3）上述步驟篩選出的菌株分別接種到含“花生油”的瓊脂培養(yǎng)基平板上，37℃恒溫培養(yǎng)箱

中培養(yǎng)24h,篩選出油脂降解菌，培養(yǎng)基中"花生油''為菌種繁殖提供o在該培養(yǎng)基

還需要加入中性紅染料（中性紅為脂溶性染料，遇酸為紅色，遇堿為黃色），挑選菌株要挑

選顯_______降解圈的菌株，并且選顏色較（填“深或淺”）的為宜。

（4）實(shí)際操作中，由于油脂易聚集成液滴，常在培養(yǎng)基中加入2-3滴乳化劑使油脂分散均

勻，鑒定效果更好，試分析原因________________，

【答案】滅菌稀釋形狀、大小、隆起程度和顏色碳源和能源紅色深

油脂乳化后均勻分散在培養(yǎng)基表面，分解油脂的微生物產(chǎn)生的降解圈更為明顯，便于快速分

離和鑒定

【解析】

（I）微生物實(shí)驗(yàn)需要無(wú)菌操作，所以試管使用前需要經(jīng)過滅菌處理。

（2）菌液一般需要先經(jīng)過稀釋處理，再進(jìn)行涂布。不同微生物菌落的形狀、大小、隆起程

度和顏色不同，所以可以根據(jù)菌落的特征初步分類。

（3）花生油的主要成分是脂肪，所以為菌種提供碳源和能源。脂肪可以被分解為甘油和脂

肪酸，使培養(yǎng)基呈酸性，所以選擇紅色降解圈的菌株，光且顏色較深的脂肪酸含量越高，說

明分解能力越強(qiáng)。

（4）油脂乳化后均勻分散在培養(yǎng)基表面，分解油脂的微生物產(chǎn)生的降解圈更為明顯，便于

快速分離和鑒定摸索與可以在培養(yǎng)基中加入2-3滴乳化劑。

11.（2020?遼寧省高三其他）大腸桿菌是人和許多動(dòng)物腸道中最主要且數(shù)量最多的一類細(xì)菌，

含有2000種以上的蛋白質(zhì)：大腸桿菌的數(shù)量是檢測(cè)自來(lái)水是否受糞便污染的最直接的指標(biāo)。

回答下列問題：

（1）利用凝膠色譜法分離提取到的部分大腸桿菌蛋白質(zhì)時(shí)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，加

入pH為7.0、濃度為20mniol/L的到適當(dāng)高度進(jìn)行洗脫，結(jié)果甲蛋白質(zhì)先洗脫

出來(lái)，乙蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)，則相對(duì)分子質(zhì)量較大的是蛋白質(zhì)。

（2）通過濾膜法可以測(cè)定自來(lái)水中大腸桿菌的數(shù)目：一定體積的自來(lái)水樣過濾后，將濾膜

放在伊紅?美藍(lán)培養(yǎng)基（主要成分包括：蛋白豚、NaCl,瓊脂、乳糖、伊紅和美藍(lán)水溶液）

上培養(yǎng)，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅-美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)

目，計(jì)算出大腸桿菌的數(shù)量。

①伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基屬于一（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基，蛋白陳的作用有o

②在微生物培養(yǎng)過程中，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和高壓蒸汽滅菌。配制伊紅

-美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，乳糖需要單獨(dú)在壓力為7（）kPa,溫度為115℃滅菌20min,原因是__________。

接種前通常需要檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否滅菌合格，檢測(cè)方法是___________。

③濾膜法是根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是_______________。

【答案】磷酸緩沖液甲鑒別提供碳源、氮源、維生素干熱滅菌乳糖在

高溫下會(huì)破壞將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌

落出現(xiàn)（當(dāng)樣品中細(xì)菌濃度低時(shí)，）培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品中的一個(gè)活

菌

【解析】

（1）利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，需要加入pH為7.0、濃度

為20mmol/L的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度進(jìn)行洗脫，若甲蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)，乙蛋白質(zhì)后洗脫

出來(lái)，說明甲蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量較大。

（2）①伊紅-美藍(lán)可以將大腸桿菌染成深紫色，因此伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，其

中蛋白陳可以為大腸桿菌提供碳源、氮源、維生素。

②微生物培養(yǎng)過程中，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。由于乳糖在

高溫下會(huì)破壞，所以在配制伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，乳糖需要單獨(dú)在壓力為70kPa,溫度為115c

滅菌20min。接種前通常需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基

上是否有菌落出現(xiàn)，以檢;則固體培養(yǎng)基是否滅菌合格。

③濾膜法是根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一

個(gè)菌落來(lái)源于樣品中的?個(gè)活菌。

12.（2020.江蘇省江浦高級(jí)中學(xué)高三二模）土壤中含有能將難溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)變成植物可以吸

收利用的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株Q。下圖1表示制備固體培養(yǎng)基過程中的某操作，圖2

是科研人員從土壤中分離出菌株Q的部分過程示意圖。

lg1mLlmLlmL

圖1圖2

請(qǐng)回答下列問題：

（I）圖I所示操作稱為,待平板冷凝后,以防止

（2）圖2所示接種方法是。在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀

釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上菌落數(shù)分別是38、42、40,則1g土壤中的活菌數(shù)約為

___________________個(gè)。

（3）圖是某同學(xué)利用不同于圖2方法分離菌株Q的示意圖。下列對(duì)其操作及結(jié)果的敘述錯(cuò)

誤的有o

1

32

a.操作前用無(wú)水乙醇對(duì)雙手進(jìn)行消毒處理

b.劃線時(shí)沾有菌種的接種環(huán)不能插入培養(yǎng)基中

c.只有在⑤區(qū)域中才能得到所需菌落

d.整個(gè)過程需要對(duì)接種式進(jìn)行6次灼燒

(4)固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在菌株Q的作用下溶解，會(huì)在菌落周圍形成透明圈(如下

圖所示),透明圈百杼(D)與菌落育杼(d)的比值(D/d)代表微牛物溶解難溶磷酸軟的

能力大小。下表是初步篩選出的三種優(yōu)良解磷菌株。

菌株透明圈直徑(D)菌落直徑(d)

M—3—0118.812.3

B3—5—620.78.0

T-^l—019.16.5

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，溶解難溶性磷酸