高考生物5年高考3年模擬總復(fù)習(xí)細(xì)胞工程（真題冊(cè)）

專(zhuān)題21細(xì)胞工程

考點(diǎn)1植物細(xì)胞工程

1.（2023山東，14,2分）利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對(duì)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)

使其增殖,可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說(shuō)法正確的是（）

A.利用該技術(shù)可獲得某些無(wú)法通過(guò)化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物

B.植物細(xì)胞體積小,故不能通過(guò)該技術(shù)進(jìn)行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)

C.次生代謝物是植物所必需的,但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)

D.該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量

答案A某些次生代謝物合成過(guò)程很復(fù)雜,難以通過(guò)化學(xué)合成途徑得到，而利用植物細(xì)胞培

養(yǎng)技術(shù)可獲得,A正確；可以利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大規(guī)模培養(yǎng)植物細(xì)胞,來(lái)大量獲取次生代

謝物,B錯(cuò)誤;次生代謝物不是植物生長(zhǎng)所必需的，含量很低,C錯(cuò)誤；該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)

胞增殖增加細(xì)胞數(shù)量,來(lái)提高次生代謝物的產(chǎn)量,D錯(cuò)誤。

2.（2023廣東，12,2分）人參皂昔是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜

根產(chǎn)生愈傷組織并進(jìn)行細(xì)胞融合，以提高人參層昔的產(chǎn)率。卜列敘述恃送的是（）

A.細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁

B.高C『一高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合

C.融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞

D.雜交細(xì)胞可能具有生長(zhǎng)快速的優(yōu)勢(shì)

答案C植物細(xì)胞的細(xì)胞壁會(huì)阻礙細(xì)胞的融合，故植物細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁,A正確；

誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法有物理法、化學(xué)法，化學(xué)法包括PEG融合法、高Ca2‘一高

pH融合法等,B正確;細(xì)胞融合時(shí)既有同種細(xì)胞的融合，也有不同種細(xì)胞的融合，后者才是所

需要的雜交細(xì)胞,C錯(cuò)誤;雜交細(xì)胞具有雙方的遺傳物質(zhì)，可能具有胡蘿卜細(xì)胞生長(zhǎng)快速的優(yōu)

勢(shì),D正確。

3.（2023河北，13,2分）植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是將單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行液體培養(yǎng)增殖的技術(shù)。

下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基須經(jīng)無(wú)菌處理

B.經(jīng)纖維素酶和果膠酶充分處理后,植物細(xì)胞團(tuán)分散為單個(gè)完整的懸浮細(xì)胞

C.為使懸浮細(xì)胞正常生長(zhǎng)，培養(yǎng)基須保持適當(dāng)?shù)臏囟取H和滲透壓

D.利用懸浮培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)次生代謝物,可減少植物資源的消耗

答案B為防止雜菌污染，植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中的外植體需要消毒，培養(yǎng)基及培養(yǎng)器具需要

滅菌處理,A正確;纖維素酶和果膠酶處理后，植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體,B錯(cuò)誤；由

于植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低，從植物組織中提取會(huì)大量破壞植物資源，利用植物細(xì)胞

懸浮培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)次生代謝物,可減少對(duì)植物資源的消耗,D正確。

4.（2023江蘇，13,2分）研究者通過(guò)體細(xì)胞雜交技術(shù)，探索利用條斑紫菜和擬線紫菜培育雜種

紫菜。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.從食用紫菜的動(dòng)物消化道內(nèi)提取蛋白酶,用于去除細(xì)胞壁

B.原生質(zhì)體需在低滲溶液中長(zhǎng)期保存，以防止過(guò)度失水而死亡

C.檢測(cè)原生質(zhì)體活力時(shí)可用茶酚品紅或甲紫溶液處理,活的原生質(zhì)體被染色

D.聚乙二醇促進(jìn)原生質(zhì)體融合后，以葉綠體顏色等差異為標(biāo)志可識(shí)別雜種細(xì)胞

答案D紫菜細(xì)胞壁的主要成分為多糖（纖維素、果膠），蛋白酶不能用于去除細(xì)胞壁,A錯(cuò)誤；

原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁,獲得的原生質(zhì)體若處在低滲溶液中，會(huì)吸水漲破,B錯(cuò)誤;茶酚品紅或

甲紫溶液主要用于染色體的染色，檢測(cè)原生質(zhì)體活力時(shí)常用分盼藍(lán)染色,活的原生質(zhì)體不能

被染色,C錯(cuò)誤;兩種紫菜細(xì)胞的葉綠體顏色不同，聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑可促進(jìn)原生質(zhì)體融合,

對(duì)于雜種細(xì)胞可以葉綠體顏色等差異為標(biāo)志來(lái)進(jìn)行識(shí)別,D正確。

.易混易錯(cuò)題中所述兩種紫菜的葉綠體因色素的含量不同而呈現(xiàn)不同的顏色，故可在顯

微鏡下觀察葉綠體的顏色來(lái)識(shí)別雜種細(xì)胞。

5.（2022浙江1月選考,7,2分）農(nóng)作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后

作為食用菌的栽培基質(zhì)。碎化桔稈中纖維所起的作用，相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的

（）

A.瓊脂+蔗糖E.蔗糖+激素

C.激素+無(wú)機(jī)鹽E.無(wú)機(jī)鹽+瓊脂

答案A碎化秸稈作為食用的栽培基質(zhì)時(shí)，其富含的纖維一方面可用于維持基質(zhì)的基本形

態(tài)，另一方而在食用菌菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中被大量降解并提供碳源,故其作用相當(dāng)于植物組織培

養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的瓊脂和蔗糖,故選A。

6.（2022遼寧，14,2分）藍(lán)莓細(xì)胞富含花青素等多酚類(lèi)化合物。在藍(lán)莓組織培養(yǎng)過(guò)程中，外植

體切口處細(xì)胞被破壞，多酚類(lèi)化合物被氧化成褐色醍類(lèi)化合物，這一過(guò)程稱(chēng)為褐變。褐變會(huì)引

起細(xì)胞生長(zhǎng)停滯甚至死亡，導(dǎo)致藍(lán)益組織培養(yǎng)失敗。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.花青素通常存在于藍(lán)莓細(xì)胞的液泡中

B.適當(dāng)增加培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基的頻率以減少禍變

C.在培養(yǎng)基中添加合適的抗氧化劑以減少相變

D.宜選用藍(lán)萄成熟葉片為材料制備外植體

答案D花青素等多酚類(lèi)化合物通常存在于植物細(xì)胞的液泡中，在不同pH條件下使花和果

實(shí)呈現(xiàn)不同的顏色,A正確;在組織培養(yǎng)過(guò)程中，適當(dāng)增加培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基的頻率，

可以剔除易褐變的細(xì)胞，減輕多酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)培養(yǎng)物的毒害作用,B正確;培養(yǎng)基中添加合適的

抗氧化劑可以抑制多酚類(lèi)化合物被氧化成褐色醍類(lèi)化合物，從而減少褐變,C正確；藍(lán)莓成熟

葉片中央液泡中富含多酚類(lèi)化合物，易發(fā)生褐變,D錯(cuò)誤。

7.（2022浙江6月選考,23,2分）下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A.用自然生長(zhǎng)的莖進(jìn)行組培（組織培養(yǎng)）須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒

B.培養(yǎng)瓶用專(zhuān)用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶?jī)?nèi)外的氣體交換

C.組培苗鍛煉時(shí)采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是蛭石帶菌量低且營(yíng)養(yǎng)豐富

D.不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過(guò)器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株

答案D植物組織培養(yǎng)中對(duì)自然生長(zhǎng)的莖進(jìn)行消毒的步驟為“洗滌靈稀釋液浸泡2min-

流水沖凈一75%酒精消毒30s一流水沖洗一10%次氯酸鈉溶液消毒10min或0.1%氯化汞溶液

消毒5~7min一無(wú)菌水多次沖洗”，A錯(cuò)誤;用專(zhuān)用封口膜封口的目的是防止外界雜菌侵入，

且保證瓶?jī)?nèi)外的氣體交換,B錯(cuò)誤;組培苗鍛煉時(shí)采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是其具有透

氣性和保水性,C錯(cuò)誤。

易錯(cuò)辨析器官發(fā)生途徑和體細(xì)胞胚發(fā)生途徑

器官發(fā)生途徑為外植體一意傷組織一激素誘導(dǎo)出組織器官（可以先誘導(dǎo)出芽，再誘導(dǎo)出根）一

完整植株;體細(xì)胞胚發(fā)生途徑為外植體一愈傷組織一激素誘導(dǎo)出胚狀體~完整植株。

8.（2021北京,7,2分）研究者擬通過(guò)有性雜交的方法將簇毛麥（2n=14）的優(yōu)良性狀導(dǎo)入普通

小麥（2n=42）中。用簇毛麥花粉給數(shù)以千計(jì)的小麥小花授粉，10天后只發(fā)現(xiàn)兩個(gè)雜種幼胚，將

其離體培養(yǎng)，產(chǎn)牛.愈傷組織,進(jìn)而獲得含28條染色體的大量雜種植株。以下表述箱族的是

（）

A.簇毛麥與小麥之間存在生殖隔離

B.培養(yǎng)過(guò)程中幼胚細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化和再分化

C.雜種植株減數(shù)分裂時(shí)染色體能正常聯(lián)會(huì)

D.雜種植株的染色體加倍后能產(chǎn)生可育植株

答案C簇毛麥與普通小麥?zhǔn)莾蓚€(gè)物種，存在生殖隔離,A正確;在將雜種幼胚離體培養(yǎng)時(shí)，

幼胚先脫分化形成愈傷組織，繼而再分化出根、莖和葉，長(zhǎng)成新植株,B正確;形成的新植株含

28條染色體,其中有7條染色體來(lái)自簇毛麥,有21條染色體來(lái)自普通小麥,在減數(shù)分裂過(guò)程

中，染色體不能正常聯(lián)會(huì),C錯(cuò)誤;雜種植株的染色體加倍后,每一條染色體都有與其相同的

染色體,在減數(shù)分裂過(guò)程中，染色體可以正常聯(lián)會(huì),進(jìn)而產(chǎn)生可育后代,D正確。

9.（2020山東，13,2分）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)

細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被仝部

排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該

原理,將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種,過(guò)程如

圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

省

普小

小

麥

迅

通

雜

雜

耐

泮

麥

原質(zhì)

胞

體

細(xì)

生

笳

培

種

種

鹽

一

選

植

細(xì)

小

養(yǎng)

中候

畫(huà)

響

株

胞

1)麥

一

麥

細(xì)胞

草

窗

盤(pán)

不劑

同

的

照

紫線

外

射

A.過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞

B.過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂

C.過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段

答案C分析題圖可知，①過(guò)程是去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，該過(guò)程需要使用纖維素能和果膠

前處理細(xì)胞,A正確;結(jié)合題干信息分析，過(guò)程②的目的是使中間偃麥草原生質(zhì)體中的染色體

發(fā)生斷裂,斷裂后的染色體片段可能能保留在雜種植株中，從而可能培養(yǎng)出耐鹽小麥,B正確;

過(guò)程③是原生質(zhì)體融合的過(guò)程,該過(guò)程必須借助一定的技術(shù)手段進(jìn)行人工誘導(dǎo)，而人工誘導(dǎo)

的方法有物理法和化學(xué)法，滅活的病毒用于動(dòng)物細(xì)胞融合,C錯(cuò)誤;結(jié)合題干信息和題圖中②

的處理，可推斷耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥苒的染色體片段,D正確。

10.（2019北京理綜,4,6分）甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得

抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株，再將二者雜交后得到件,結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時(shí)抗甲、乙

的植物新品種。以卜.對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述，惜送的是（；

A.將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞

B.通過(guò)接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定

C.調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得E花粉再生植株

D.經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體

答案D本題借助育種相關(guān)知識(shí)，考查考生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，分析某些生物學(xué)問(wèn)題、作出合理

判斷的能力;試題通過(guò)抗甲、乙病害的植物新品種的培育,體現(xiàn)了科學(xué)思維素養(yǎng)中的演繹與推

理要素?；蚬こ讨行鑼⒑心康幕蚝蜆?biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,A正確;通過(guò)接種病

原體,可在個(gè)體生物學(xué)水平上對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定,B正確;在花粉離體培養(yǎng)過(guò)程

中，生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例影響脫分化與再分化過(guò)程,調(diào)整培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂

素比例有利于獲得R花粉再生植株,C正確;經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為單倍

體,D錯(cuò)誤”

11.（2018天津理綜,2,6分）蘆笄是雌雄異株植物,雄株性染色體為XY,雌株為XX;其幼莖可食

用，雄株產(chǎn)量高。以下為兩種培育雄株的技術(shù)路線。有關(guān)敘述苗族的是（）

r、廣麗~心―:-----^^1-------

：：：幼唯^倍T植株小

':麗/?好株丁

4幼一一染色體加儕.他株過(guò)/

A.形成愈傷組織可通過(guò)添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行誘導(dǎo)

B.幼苗乙和內(nèi)的形成均經(jīng)過(guò)脫分化和IU?分化過(guò)程

C.雄株丁的親本的性染色體組成分別為XY、XX

D.與雄株甲不同，雄株］.培育過(guò)程中發(fā)生了基因重組

答案C木題以考查育種的相關(guān)知識(shí)為背景，考查學(xué)生獲得信息、解決問(wèn)題的能力，體現(xiàn)了

對(duì)科學(xué)思維素養(yǎng)中歸納與概括、模型與建模等方法解決生命現(xiàn)象及規(guī)律的考查。植物組織培

養(yǎng)過(guò)程中，可利用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)愈傷組織的形成與分化,A正確；由花粉形成單倍體幼

苗乙、丙的過(guò)程包括脫分化、再分化兩個(gè)階段,B正確；雄株丁的親本乙、丙由雄株的花粉經(jīng)

單倍體育種培育而來(lái)，只有植物乙、丙的性染色體組成為XX、YY時(shí)，雄株丁的性染色體組成

才為XY,C錯(cuò)誤;雄株丁的培育過(guò)程中經(jīng)歷了減數(shù)分裂產(chǎn)生花粉的過(guò)程，該過(guò)程中發(fā)生了基因

重組,D正確。

知識(shí)拓展植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用

植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，生氏素和細(xì)胞分裂素兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的分化方向。

生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量比值高吐有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于

芽的分化、抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。

12.（2018江蘇單科,8,2分）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。如圖是某二倍體植物花藥育種

過(guò)程的示意圖，下列敘述正確的是（）

A.為了防止微生物污染,過(guò)程①所用的花藥需在70%乙靜中浸泡30min

B.過(guò)程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化

C.過(guò)程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體

D.過(guò)程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上

答案C本題主要考查花藥離體培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。為了防止微生物污染，過(guò)程①所用的花藥

需在70%乙醇中浸泡約30s,A錯(cuò)誤;過(guò)程②的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值適中，且

生長(zhǎng)素含量高于細(xì)胞分裂素時(shí)，有利于根的分化,B錯(cuò)誤;進(jìn)行過(guò)程③的愈傷組織經(jīng)過(guò)了秋水

仙素的處理，故其分化后的植株中可篩選獲得純合的二倍體,C正確;經(jīng)煉苗后的幼苗是能進(jìn)

行光合作用且能獨(dú)立進(jìn)行代謝的植株，故幼苗的生長(zhǎng)基質(zhì)中不用添加蔗糖和多種植物激素,D

錯(cuò)誤。

13.（2013江蘇單科，11,2分）某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快

推廣種植,可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是（）

A.利用莖段桿插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗

B.采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗

C.采集幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上

D.采用幼葉?、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)

答案B本題考查對(duì)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗的生物性狀不

發(fā)生性狀分離，可采用莖段桿插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗，也可采用將幼芽嫁接到合適的其他

種類(lèi)植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗;花粉

粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物,利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗,其高度不育,且會(huì)發(fā)生性狀分

離，因此B項(xiàng)方案不能選用。

14.（2023浙江1月選考,24,15分）甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽就效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具

有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究，基本過(guò)程包括獲

取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產(chǎn)耐鹽

堿再生植株。回答下列問(wèn)題：

（1）根據(jù)研究目標(biāo)，在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，應(yīng)檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是

否具備的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況,通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行

融合,若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體,則乙植物可用幼苗的為外植體。

（2）植物細(xì)胞壁的主要成分為和果膠,在獲取原生質(zhì)體時(shí)，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去壁

處理。在原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的

失活。對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用計(jì)數(shù),確定原生質(zhì)體密度。兩種原

生質(zhì)體1：1混合后，通過(guò)添加適宜濃度的PEG進(jìn)行融合;一定時(shí)間后，加入過(guò)量的培養(yǎng)基進(jìn)行

稀釋,稀釋的目的是0

（3）將融合原生質(zhì)體懸浮液和海態(tài)的瓊脂糖混合,在凝固前倒入涪養(yǎng)皿,融合原生質(zhì)體分散固

定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源

于。下列各項(xiàng)中能說(shuō)明這些愈傷組織只能來(lái)自雜種細(xì)胞的理由是哪幾

項(xiàng)?（A.甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活,無(wú)法正常生長(zhǎng)、分裂B.同種融合的原生質(zhì)

體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長(zhǎng)、分裂C.培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正

常生長(zhǎng)、分裂D.雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長(zhǎng)、分裂）

（4）愈傷組織經(jīng)可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出,直接發(fā)育形成再生植

株。

（5）用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性DKA序列a,乙植物細(xì)胞質(zhì)具有

特異性DNA序列b;Ml、M2為序列a的特異性引物,Nl、N2為序列b的特異性引物。完善實(shí)

驗(yàn)思路：

I.提取純化再生植株的總DNA,作為PCR擴(kuò)增的。

II.將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系,為特異性引物,擴(kuò)增序列a;用同樣的方法擴(kuò)

增序列b0

HL得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的

個(gè)條帶,則可初步確定再生植株來(lái)自雜種細(xì)胞。

答案（1）再生植株葉片（2）纖維素細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核血細(xì)胞計(jì)數(shù)板終止原生質(zhì)體融

合（3）一個(gè)融合原生質(zhì)體ABD（4）再分化根和芽（5）模板Ml,M2電泳1

解析（1）根據(jù)研究目標(biāo)需要得到再生植株，故進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交操作前，應(yīng)先檢驗(yàn)兩種植

物的原生質(zhì)體是否具備再生植株的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況,通常用不同顏色的

原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體,則乙植物可采用球色幼苗的

葉片為外植體。（2）植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠。為使獲得的雜種細(xì)胞具有耐鹽

堿效應(yīng)（甲植物的細(xì)胞核基因）和高產(chǎn)效應(yīng)（乙植物的細(xì)胞質(zhì)基因），在原生質(zhì)體融合前要分別

使甲原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)和乙原生質(zhì)體的細(xì)胞核失活。融合后的原生質(zhì)體密度可在顯微鏡下用

血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法測(cè)定。用適宜濃度的PEG促進(jìn)融合后，需加入過(guò)量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋?zhuān)?/p>

通過(guò)降低PEG濃度,終止原生質(zhì)體融合。（3）由于甲、乙原生質(zhì)體分別破壞了細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，

未融合的原生質(zhì)體和同種融合的原生質(zhì)體都不能正常生長(zhǎng)、分裂，只有雜種細(xì)胞具有完整的

核質(zhì)結(jié)構(gòu)，可以正常生長(zhǎng)、分裂，因此這些愈傷組織只能來(lái)自雜種細(xì)胞。（4）愈傷組織經(jīng)再分

化可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出根和芽，直接發(fā)育形成再生植株。（5）PCR技術(shù)鑒定再生

植株時(shí)，再生植株的總DNA作為PCR擴(kuò)增的模板，使用特異性引物皿和M2獲得擴(kuò)增序列a,

使用特異性引物N1和N2獲得擴(kuò)增序列b,若兩個(gè)擴(kuò)增序列在凝膠中均只有一個(gè)條帶,則可初

步確定再生植株只含甲的細(xì)胞核基因和乙的細(xì)胞質(zhì)基因，即來(lái)E雜種細(xì)胞。

15.（2023新課標(biāo),35,12分）根痛菌與豆科植物之間是互利共生關(guān)系，根痛菌侵入豆科植物根

內(nèi)可引起根痛的形成,根痛中的根瘤菌具有固氮能力。為了尋找抗逆性強(qiáng)的根瘤菌,某研究小

組做了如下實(shí)驗(yàn)：從鹽堿地生長(zhǎng)的野生草本豆科植物中分離根瘠菌：選取該植物的莖尖為材

料，通過(guò)組織培養(yǎng)獲得試管苗:生根試管苗）；在實(shí)驗(yàn)室中探究試管苗根瘤中所含根瘤菌的固

氮能力?；卮鹣铝袉?wèn)題。

⑴從豆科植物的根瘤中分離根瘤菌進(jìn)行培養(yǎng)，可以獲得純培養(yǎng)物，此實(shí)驗(yàn)中的純培養(yǎng)物

是。

（2）取豆科植物的莖尖作為外植體，通過(guò)植物組織培養(yǎng)可以獲得豆科植物的試管苗。外植體經(jīng)

①②

誘導(dǎo)形成試管苗的流程是：外植體一^愈傷組織一~^試管苗。其中①表示的過(guò)程

是,②表示的過(guò)程是。由外植體最終獲得完整的植株,這一過(guò)程說(shuō)明植物細(xì)

胞具有全能性.細(xì)胞的全能性是指o

⑶研究小組用上述獲得的純培養(yǎng)物和試管苗為材料,研究接種到試管苗上的根瘤菌是否具

有固氮能力，其做法是將生長(zhǎng)在培養(yǎng)液中的試管苗分成甲、乙兩組，甲組中滴加根瘤菌菌液，

讓試管苗長(zhǎng)出根瘤。然后將甲、乙兩組的試管苗分別轉(zhuǎn)入的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，觀

察兩組試管苗的生長(zhǎng)狀況，若甲組的生長(zhǎng)狀況好于乙組，則說(shuō)

明O

⑷若實(shí)驗(yàn)獲得一種具有良好固氮能力的根瘤菌,可通過(guò)發(fā)酵工程獲得大量根瘤菌,用于生產(chǎn)

根瘤菌肥。根瘤菌肥是一種微生物肥料，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用微生物肥料的作用是

（答出2點(diǎn)即可）。

答案（1）根瘤菌（2）脫分化再分化細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或

分化成其他各種細(xì)胞的潛能（3）不含氮根瘤菌具有固氮能力（4）增進(jìn)土壤肥力，改良土

壤結(jié)構(gòu),促進(jìn)植物生長(zhǎng)

解析（1）根據(jù)題干信息“分離根痛菌進(jìn)行培養(yǎng),可以獲得純培養(yǎng)物”可知,純培養(yǎng)物是根瘤

菌。（2）已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過(guò)脫分化,即失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，

進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊，即愈傷組織。愈傷組織經(jīng)再分化形成芽、根等器官，發(fā)育成

試管苗。細(xì)胞全能性的概念見(jiàn)答案。（3）具有固氮能力的固氮菌可以固定空氣中的氮?dú)?，為?/p>

物的生長(zhǎng)提供氮元素，故應(yīng)將甲、乙兩組的試管苗分別轉(zhuǎn)入不含氮的培養(yǎng)液中培養(yǎng),若甲組生

長(zhǎng)狀況更好，則說(shuō)明甲組中滴加的根瘤菌具有固氮能力。（4）見(jiàn)答案。

16.[2022浙江6月選考,29（二），8分]回答與植物轉(zhuǎn)基因和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題：

（1）在用農(nóng)桿菌侵染的方法進(jìn)行植物轉(zhuǎn)基因過(guò)程中,通常要使用抗生素，其目的一是抑制—

生長(zhǎng),二是篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)選擇培養(yǎng)基中抗生素濃度時(shí),通常會(huì)出現(xiàn)較多假陽(yáng)性植

株,因此在轉(zhuǎn)基因前需要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的檢測(cè)。

（2）為提高培育轉(zhuǎn)基因植株的戊功率,植物轉(zhuǎn)基因受體需具有較強(qiáng)的能力和遺傳穩(wěn)

定性。對(duì)培養(yǎng)的受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測(cè),可通過(guò)觀察細(xì)胞內(nèi)形態(tài)是否改變

進(jìn)行判斷，也可通過(guò)觀察分裂期染色體的,分析染色體組型是否改變進(jìn)行

判斷。

（3）植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達(dá)程度的高低主要與受體的基因型、培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)和—

長(zhǎng)短等有關(guān)。同時(shí)也與受體的取材有關(guān)，其中受體為時(shí)全能性表達(dá)能力最高。

答案（每空1分）（1）農(nóng)桿菌過(guò)低敏感性（2）再生細(xì)胞咳形態(tài)特征和數(shù)量（3）培

養(yǎng)時(shí)間受精卵

解析（1）農(nóng)桿菌一般不攜帶抗生素抗性基因，基因工程操作中，常將目的基因插入Ti質(zhì)粒

（經(jīng)人工改造，含抗生素抗性基因）的T-DNA中，再將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入衣桿菌中，這樣使用含相應(yīng)

抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)可以抑制不含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)，從而篩選出攜帶術(shù)組質(zhì)粒的農(nóng)

桿菌。當(dāng)選擇培養(yǎng)基中抗生素濃度過(guò)低時(shí)，會(huì)導(dǎo)致抗生素不足以抑制不含抗性基因的細(xì)胞的

生長(zhǎng)繁殖,從而出現(xiàn)較多的假陽(yáng)性植株，因此在轉(zhuǎn)基因前需要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的敏感性檢

測(cè)。（2）植物轉(zhuǎn)基因受體獲得目的基因后需培養(yǎng)成完整植株并可使目的基因穩(wěn)定存在并遺傳

給下一代等，因此轉(zhuǎn)基因受體需具有較強(qiáng)的再生能力和遺傳穩(wěn)定性。受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主

要分布在細(xì)胞核中,通過(guò)觀察細(xì)胞核的形態(tài)是否改變,可對(duì)受體細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行早期

檢測(cè)；染色體是遺傳物質(zhì)的主要載體,通過(guò)觀察分裂期染色體的形態(tài)特征和數(shù)量,分析染色體

組型是否改變也可對(duì)受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行早期檢測(cè)。（3）植物轉(zhuǎn)基因受體全能性的表達(dá)

程度受多種因素的影響，如培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短、受體的取材部位和基因型

等。一般來(lái)說(shuō),選取的受體分化程度越低,全能性表達(dá)能力越高，選擇受精卵作為受體時(shí)全能

性表達(dá)能力最高。

17.[2021浙江1月選考,29（二），8分]三葉青為愛(ài)生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青

對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求非?？量蹋约吧鷳B(tài)環(huán)境的破壞和過(guò)度的采挖，目前我國(guó)野生三葉青已十分

珍稀。

（1）為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理,利用,

技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉寺的林下種植。

（2）依據(jù)基因工程原理,利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片\葉片產(chǎn)生酚類(lèi)化合物，誘

導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等,進(jìn)而從

質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體

上,T-DNA上rol系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素,促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形

成,再分化形成毛狀根。

（3）剪取毛狀根,轉(zhuǎn)入含頭抱類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng),培養(yǎng)基中添加

抗生素的主要目的是o最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸

浮培養(yǎng),通過(guò)控制搖床的和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中

的,獲得大量毛狀根,用于泥取藥用成分。

答案（1）遺傳間種（2）DNA聚合酶愈傷組織（3）繼代殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)速營(yíng)

養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和濃度

解析（1）三葉寺具有遺傳多樣性。在林下種植三葉青，利用了間種技術(shù)。（2）利用發(fā)根農(nóng)桿

菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生的酚類(lèi)化合物可誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)檢上vir系列基因

的表達(dá),進(jìn)而能從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA片段），因此推測(cè)vir系

列基因表達(dá)形成了DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶等。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體

上后，其上的rol系列基因表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞先脫分化形成愈傷組織，

然后再分化形成毛狀根。（3）將剪取的毛狀根轉(zhuǎn)入含頭抱類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次

繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌。將毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、

置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng),通過(guò)控制搖床的轉(zhuǎn)速和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的營(yíng)養(yǎng)元素和植

物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和濃度,可獲得大量毛狀根,用于提取藥用成分。

18.（2020天津，15,10分）某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),

參照品種B的最佳激素配比（見(jiàn)下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。

品種B組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素濃度（口mol/L）生長(zhǎng)素濃度（umol/L）

I誘導(dǎo)形成愈傷組織miMi

II誘導(dǎo)形成幼芽m2Hi!

III誘導(dǎo)生根m：＜n；1

據(jù)表回答：

（1）I階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體,原因是0

（2）在I、II、IH階段中發(fā)生甚因選擇性表達(dá)的是階段.

（3）為確定品種A的I階段的最適細(xì)胞分裂素濃度,參照品種B的激素配比（m）2.0）,以0.5

umol/L為梯度,設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn),細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為u

mol/Lo

（4）HI階段時(shí),科研人員分別選用濃度低于或高于mumol/L的生長(zhǎng)素處理品種A幼芽都能

達(dá)到最佳生根效果，原因是處理幼芽時(shí),選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為,選

用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為。

⑸在階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。

答案（1）細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織（2）1、II、HI（3）mi+1.0（4）浸泡

法（長(zhǎng)時(shí)間處理）沾蘸法（短時(shí)間處理）（5）I

解析（1）在植物組織培養(yǎng)時(shí)，一般選莖尖、幼葉等作為外植體的原因是這些部位的細(xì)胞分化

程度低,容易誘導(dǎo)其脫分化形戊愈傷組織。（2）細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),在形成

愈傷組織、幼芽、根的過(guò)程中都有細(xì)胞分化，所以I、II、HI階段都發(fā)生了基因的選擇性表

達(dá)。（3）為了確定品種A的I階段細(xì)胞分裂素的最適濃度，以品種B的激素配比為參照,

以0.5口mol/L為梯度設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平實(shí)驗(yàn)，即m「L0、m「0.5、mi、叫+0.5、nn+l.O,所

以最高濃度為加+1.0。⑷生長(zhǎng)素處理幼芽生根的方法有很多，比較簡(jiǎn)單的兩類(lèi)方法是浸泡法

和沾蘸法,前者是把幼芽浸泡在配好的生長(zhǎng)素溶液中，要求生長(zhǎng)素溶液的濃度較低;后者是要

求幼芽在濃度較高的生長(zhǎng)素溶液中蘸一下，處理時(shí)間較短。（5）秋水仙素誘導(dǎo)多倍體的原理主

要是抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向兩極，從而引起染色體數(shù)目加倍,形成多倍體。

I階段形成愈傷組織的過(guò)程中細(xì)胞發(fā)生了脫分化,分裂能力較強(qiáng)，所以更易獲得多倍體。

19.[2020浙江7月選考,29（二），9分]回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題：

（1）天然農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在著一段DNA片段（T-DNA）,該片段可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞染

色體匕為便于轉(zhuǎn)基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選,設(shè)計(jì)重組Ti質(zhì)粒時(shí),應(yīng)考慮T-DNA中要

有可表達(dá)的目的基因,還需要有可表達(dá)的0

（2）結(jié)合植物克隆技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)，為獲得轉(zhuǎn)基因植株，農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用具

有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、及易被農(nóng)阡菌侵染等特點(diǎn)的植物材料。

若植物材料對(duì)農(nóng)桿菌不敏感，則可用的轉(zhuǎn)基因方法。

（3）利用帶側(cè)芽的莖段獲得從狀苗的過(guò)程與利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織再獲得從狀苗的過(guò)程

相比,前者總培養(yǎng)時(shí)間，且不經(jīng)歷過(guò)程,因而其遺傳性狀穩(wěn)定,是大多數(shù)植物

快速繁殖的常用方法。

（力與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉(zhuǎn)基因從狀苗生根培養(yǎng)基時(shí)，可根據(jù).文際情況適當(dāng)添加.

促進(jìn)從狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成,最終形成根。還可

通過(guò)改變MS培養(yǎng)基促進(jìn)生根，如（A.提高蔗糖濃度B.降低培養(yǎng)基濃度C.提高大量

元素濃度D.不添加瓊脂）。

答案（1）抗性基因（2）全能性表達(dá)充分顯微注射（3）短脫分化（4）生長(zhǎng)素根的

分生組織B

解析（1）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，為便于檢測(cè)Ti質(zhì)粒中的T-DNA片段是否成

功導(dǎo)入植物細(xì)胞,T-DNA中既要有可表達(dá)的目的基因，也要有可表達(dá)的抗性基因。（2）為獲得

轉(zhuǎn)基因植株,農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用易被農(nóng)桿菌侵染，同時(shí)性狀優(yōu)良、具有較高的遺傳

穩(wěn)定性和全能性表達(dá)充分的植物材料。轉(zhuǎn)基因植株培育中，還可采用顯微注射的方法導(dǎo)入目

的基因。（3）利用帶側(cè)芽的莖段獲得從狀苗的過(guò)程不經(jīng)歷愈傷組織階段,因此不經(jīng)歷脫分化的

過(guò)程，其總培養(yǎng)時(shí)間較短。（4）與發(fā)芽培養(yǎng)基相比,生根培養(yǎng)基中可適當(dāng)添加生長(zhǎng)素,從而促進(jìn)

從狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成根的分生組織,最終形成根。還可通過(guò)

降低MS培養(yǎng)基的濃度促進(jìn)生根,植物通過(guò)根的生長(zhǎng)從外界獲取更多養(yǎng)分。

20.（2019課標(biāo)全國(guó)川,38,15分）培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過(guò)程如圖所

zF?o

回答下列問(wèn)題。

（1）利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植

株,這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有。

（2）步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,原因是,

（3）從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基,其原因是，在新的

培養(yǎng)基上愈傷組織通過(guò)細(xì)胞的過(guò)程,最終可形成試管苗。

（4）步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是

⑸經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株,一般可保持原品種的,這種繁殖方式屬于繁

殖。

答案（1）全能性（或答:形成完整植株所需的全部基因）（2）形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織

（3）誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不

同分化（或答:再分化）（4）誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用（5）遺傳特

性無(wú)性

解析本題借助胡蘿卜根組織塊的組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，考查考生理論聯(lián)系實(shí)際、綜合運(yùn)用

所學(xué)知識(shí)解決生物學(xué)問(wèn)題的能力;試題通過(guò)對(duì)組織培養(yǎng)流程的分析考查了科學(xué)思維素養(yǎng)。（1）

植物細(xì)胞具有全能性,利用已分化的植物細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)成完整植株。（2）

形成層細(xì)胞分化程度低,全能性較高,更容易誘導(dǎo)形成愈傷組織,進(jìn)而獲得完整植株。（3）愈傷

組織的形成和試管苗的分化需要不同的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例，因此誘導(dǎo)愈傷組織的形成

階段到分化階段需要不同的培養(yǎng)基。愈傷組織通過(guò)再分化過(guò)程,最終可形成試管苗。（4）葉綠

素的形成需要光，試管苗的發(fā)育也需要光,因此試管苗的誘導(dǎo)階段需要光照。（5）通過(guò)植物組

織培養(yǎng)獲得植株的方式是無(wú)性繁殖的一種，可以保持原品種的遺傳特性。

知識(shí)拓展組織培養(yǎng)得到植株的兩種常見(jiàn)途徑

（1）愈傷組織形成后經(jīng)誘導(dǎo)發(fā)芽形成從狀苗，再生根形成植株；（2）愈傷組織形成后經(jīng)液

體懸浮培養(yǎng)得到單個(gè)細(xì)胞，誘導(dǎo)形成胚狀體再形成植株。

21.（2017海南單科,31,15分）甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花泡為材料,

利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉?wèn)題：

⑴以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在一定條件卜進(jìn)行組織培養(yǎng),均能獲得試管

苗,其原理是，

（2）甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得

到。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗，該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是—

（填”具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基町'）。

⑶圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由培養(yǎng)基中兩種激素用

量的不同造成的,這兩種激素是-A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)

形成的。

（4）若該種植物是一種雜合體的名貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該

種花卉,可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時(shí),（填“能”或“不能”）采用經(jīng)減數(shù)分裂

得到的花粉粒作為外植體,原因是o

答案（1）綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性,在一定條件下能發(fā)育成完整的植株（2）

葡荀糖、果糖具有完整的細(xì)咆核（3）細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素脫分化（4）不能對(duì)雜合體

的植株來(lái)說(shuō),其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)

行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株

解析（1）植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。（2）蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。

若用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗,細(xì)胞必須具有完整的細(xì)胞核,才具有發(fā)育為完整個(gè)體

的一整套遺傳信息。（3）影響植物組織培養(yǎng)的兩種主要激素是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。愈傷組

織是葉肉細(xì)胞經(jīng)脫分化形成的。（4）對(duì)雜合體而言,花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，

故組織培養(yǎng)得到的植株基因型不同于原植株,不能保留親本性狀。

22.（2015天津理綜,7,15分）CHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)行至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本,

利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。

親本藻優(yōu)勢(shì)代謝類(lèi)型生長(zhǎng)速率［g/（L?天）］固體培養(yǎng)基上藻落直徑DHA含量(%)

A廉自養(yǎng)0.06小0.7

B廉異養(yǎng)0.14大無(wú)

據(jù)表回答:

（1）選方的融合藻應(yīng)具有A藻與B藻的優(yōu)點(diǎn)。

（2）誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是獲得°

（3）通過(guò)以下三步篩選融合藻,步驟可淘汰B藻,步驟可淘汰生長(zhǎng)速率較慢

的藻落,再通過(guò)步驟獲取生產(chǎn)所需的融合藻。

步驟a:觀察藻落的大小

步驟b:用不含有機(jī)碳源（碳源一一生物生長(zhǎng)的碳素來(lái)源）的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)

步驟c:測(cè)定DHA含量

（4）以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn)，結(jié)果如圖.

□生長(zhǎng)速率?DHA含發(fā)

生

o.25--1.0

長(zhǎng)

o.a20-

柒15-0.8

容a10

I-0.6

?05

?

一

丘o.

)

.

故冷組甲乙內(nèi)

是否光敏光JM光MJSBft

焙界M碳源無(wú)機(jī)物???

①甲組條件下,融合藻產(chǎn)生［用的細(xì)胞器是.；丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器

是____________

②與甲、丙兩組相比，乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快，原因是在該培養(yǎng)條件下_。

甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高，但實(shí)際牛.產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件,其原因

是_________________________________________________________

答案（1）產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)特性快速生長(zhǎng)

⑵原生質(zhì)體（3）bac（4）①線粒體、葉綠體線粒體②融合藻既能光能自養(yǎng)又能異

養(yǎng)融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能牛長(zhǎng).不需添加葡萄就可降低成本,也可防止雜菌

生長(zhǎng)

解析（1）根據(jù)題干信息“利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻”及表中信息可推斷,融合

藻應(yīng)既具有A藻的“自養(yǎng)”和“產(chǎn)DHA”的特點(diǎn)，又具有B藻“快速生長(zhǎng)”的優(yōu)點(diǎn)。（2）誘導(dǎo)

融合前需利用纖維素酶去掉兩種藻的細(xì)胞壁,從而獲得原生質(zhì)體。（3）由于B藻是異養(yǎng)生.物,

只能利用有機(jī)碳源，故通過(guò)步驟b可以淘汰B藻。由于A藻生長(zhǎng)慢、藻落小而B(niǎo)藻生長(zhǎng)快、

藻落大,可以通過(guò)步驟a觀察藻落大小淘汰生.長(zhǎng)速率較慢的藻落。最后通過(guò)步驟c測(cè)定DHA

含量較高的藻落即為生產(chǎn)所需的融合藻。（4）①分析坐標(biāo)圖可知，甲組的融合藻既能進(jìn)行光合

作用又能進(jìn)行呼吸作用，因此，產(chǎn)生［II］的細(xì)胞器有葉綠體和線粒體。丙組融合藻在黑暗中產(chǎn)

生ATP的細(xì)胞器是線粒體。②乙組融合藻既能利用光能乂能利用葡萄糖,屬于既能光能自養(yǎng)

又能異養(yǎng)的生物,因此乙組培養(yǎng)條件下融合藻較甲、丙兩組生長(zhǎng)快。實(shí)際生產(chǎn)中采用甲組的

培養(yǎng)條件而不采用乙組培養(yǎng)條件的原因是：甲組融合藻在不添加葡萄糖的情況下就能利用光

能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物生長(zhǎng),因此降低了成本,也可防止雜菌生長(zhǎng)。

23.（2014江蘇單科,29,9分）為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然

后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為。

（2）在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細(xì)胞干重在12d

后下降的原因有培養(yǎng)液中蔗糖的作用

是

演?

賽)

叁?

格>

（3）多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)—

處理,會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶和—

酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞（2n）經(jīng)誘導(dǎo)處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的

解釋是、。

（4）為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細(xì)胞固

定化類(lèi)似。下列說(shuō)法正確的有（填序號(hào)）。

①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋

②必須在光照條件下培養(yǎng)

③培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣

④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢

答案（9分）（1）脫分化（2）蕉糖濃度下降,pH降低提供能源調(diào)節(jié)滲透壓（3）秋水仙

素（低溫）果膠經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂

中期⑷①?④

解析（1）外植體經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。（2）分析坐標(biāo)曲線既可見(jiàn)12d后培養(yǎng)液中的蔗

糖濃度已降至較低,加也有所下降，因此使得細(xì)胞生命活動(dòng)受阻，細(xì)胞「?重減小。培養(yǎng)液中的

蔗糖可為培養(yǎng)的細(xì)胞提供能源,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的滲透壓。（3）二倍體愈傷組織經(jīng)秋水仙素、

低溫等人工誘導(dǎo)處理,可產(chǎn)生染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞。植物細(xì)胞之間除纖維素外，還存在果膠

層，因此可利用纖維素酶和果膠酶解離愈傷組織。愈傷組織細(xì)胞（2n）經(jīng)人工誘導(dǎo)后，細(xì)胞中染

色體數(shù)目加倍成4n,染色體數(shù)為4n的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，處于有絲分裂后期的細(xì)胞中染色體

數(shù)為8n;若加倍到4n的細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后繼續(xù)加倍形成染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,這樣的細(xì)胞再進(jìn)

行有絲分裂,在中期時(shí)會(huì)看到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞。（4）通過(guò)愈傷組織獲得次生代謝產(chǎn)物時(shí),

需選擇生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞，由于植物細(xì)胞進(jìn)行需氧呼吸，培養(yǎng)過(guò)程需通入空氣。愈傷組織細(xì)胞沒(méi)

有葉綠體,不進(jìn)行光合作用，不需光照。植物細(xì)胞固定化后，與外界環(huán)境的物質(zhì)交換能力降低,

生長(zhǎng)變慢。

24.（2013天津理綜,9,15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病

的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。

再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病

雜種植株。流程如下圖。

九惠峪*

的抗病”

sa芥?zhèn)鱾?/p>

幼葉

格萊的妁

據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（D過(guò)程①所需的酶是

（2）過(guò)程②后,在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的存在,這一特征可作為初步

篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志c

（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露耨以保持一定的滲透壓,其作用

是。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。

（4）若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型，應(yīng)現(xiàn)取再生植株和植株的根尖，通

過(guò)、、染色和制片等過(guò)程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形

態(tài)和數(shù)目。

（5）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，寫(xiě)到兩親本的差異性條帶,可

用丁?雜種植株的鑒定。如圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1F進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判

斷,再生植株P(guān)4中一定是雜種植株的有。

花粽菜1234JK芥9基對(duì)

1500

I300

I000

600

300

（6）對(duì)雜種植株進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn),可篩選出具有高抗性的雜種植株。

答案（1）纖維素酶和果膠酶（2）葉綠體（3）保持原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁（4）雙親（或

花椰菜和黑芥）解離漂洗（5）1、2、4（6）黑腐病菌

解析（1）去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。（2）根細(xì)胞不含葉綠體，

葉肉細(xì)胞含有葉綠體，因此通過(guò)PEG誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體，以此作為初步篩選

雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（3）原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用，因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適

宜濃度的甘露醇，使原生質(zhì)體處于等滲溶液中，以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞

壁再生,進(jìn)而分裂和脫分化形戊愈傷組織。（4）要判斷染色體變異的類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株、

花椰菜和黑芥植株的根尖，通過(guò)解離、漂洗、染色、制片等過(guò)程制成裝片，然后進(jìn)行顯微觀察

比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。（5）根據(jù)兩親本的差異性條帶,