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文檔簡介

2025屆濰坊第一中學高三最后一卷生物試卷請考生注意:1.請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上,請用0.5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2.答題前,認真閱讀答題紙上的《注意事項》,按規(guī)定答題。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.有關真核細胞的DNA復制和轉(zhuǎn)錄這兩種過程的敘述,錯誤的是A.兩種過程都可在細胞核中發(fā)生 B.兩種過程都有酶參與反應C.兩種過程都以脫氧核糖核苷酸為原料 D.兩種過程都以DNA為模板2.下列是有關著名科學家通過研究取得重要理論成果的敘述,正確的是A.虎克(R.Hooke)在顯微鏡下觀察木栓組織發(fā)現(xiàn)蜂窩狀“細胞”,建立了細胞學說B.坎農(nóng)(W.B.Cannon)通過研究細胞內(nèi)基因表達的過程,提出了內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)概念C.摩爾根(T.H.Morgan)對雄果蠅白眼性狀的遺傳分析,證明了基因位于染色體上D.韋爾穆特(I.Wilmut)等在體外條件下將羊體細胞培養(yǎng)成了成熟個體,證明了哺乳動物體細胞具有全能性3.下列有關人體內(nèi)環(huán)境及穩(wěn)態(tài)的敘述,正確的是()A.人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)依靠激素作用于神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)來維持B.組織液和血漿之間存在物質(zhì)交換,二者的滲透壓變化會互相影響C.劇烈運動時血漿中乳酸含量升高,主要通過血細胞吸收乳酸來保持血漿pH相對穩(wěn)定D.分級調(diào)節(jié)和反饋調(diào)節(jié)共同維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),甲狀腺激素分泌的調(diào)節(jié)僅體現(xiàn)了分級調(diào)節(jié)4.將某種離體神經(jīng)纖維分別置于海水①、②中,同時給予一次適宜刺激并檢測其膜電位變化,結(jié)果如圖曲線①、②。下列有關敘述正確的是()A.產(chǎn)生A點電位的主要原因是神經(jīng)元細胞膜對通透性增加B.產(chǎn)生B點電位的主要原因是神經(jīng)元細胞膜對通透性增加C.導致曲線②與曲線①存在差異的原因主要是海水②中濃度較低D.導致曲線②與曲線①存在差異的原因主要是海水②中濃度較低5.下列有關種群和群落的敘述,正確的是()A.標志重捕法適合調(diào)查田鼠、家兔和蚜蟲等動物的種群密度B.種群數(shù)量增多會導致種內(nèi)斗爭加劇,環(huán)境容納量不斷下降C.由于地形起伏,不同地段分布著不同的植被屬于群落的垂直結(jié)構(gòu)D.初生演替的一般趨勢是群落豐富度增大,抵抗力穩(wěn)定性逐步提高6.結(jié)核分枝桿菌俗稱結(jié)核桿菌,屬胞內(nèi)寄生菌,是引起結(jié)核病的病原菌,下列有關結(jié)核桿菌所引起的免疫調(diào)節(jié)的說法中不正確的是()A.結(jié)核桿菌能夠引發(fā)機體產(chǎn)生體液免疫和細胞免疫B.T細胞可增殖分化形成效應T細胞直接清除結(jié)核桿菌C.吞噬細胞可對結(jié)核桿菌的抗原進行非特異性識別和處理D.過量使用免疫抑制劑會使結(jié)核病的發(fā)病率出現(xiàn)上升趨勢二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)截止2020年3月,新冠病毒(COVID-19)在全世界范圍內(nèi)迅速傳播,中國在抗擊疫情的過程中做出了巨大的犧牲和努力,為世界樹立了狙擊流行病的旗幟和標桿;某科研隊伍提出了利用基因工程技術(shù)手段研制兩種新冠病毒疫苗的思路,主要研制流程如下圖,請回答以下問題:(1)圖中①的名稱是______________。(2)進行PCR技術(shù)需要的條件有______________。(3)兩種疫苗的研制過程中均涉及了基因工程的相關操作,其核心步驟是______________。進行②過程需要用到的工具酶有______________。(4)將重組質(zhì)粒導入受體細胞可采用______________法。(5)疫苗最重要的目的是對新冠病毒引起的肺炎進行免疫______________(“治療”或“預防”);對該疑似患者確診時,可以對疑似患者進行核酸檢測,即采集其咽拭子,與已知病毒進行______________比較。(6)接種基因工程疫苗比接種滅活獲減毒的病毒疫苗更安全,試從疫苗的結(jié)構(gòu)特點解釋原因:__________________________________________。8.(10分)甜菜堿存在于多種植物中,能減輕低溫對光合作用的抑制,從而提高植物對低溫環(huán)境的適應性?;卮鹣铝袉栴}。(1)低溫會破壞葉綠體的類囊體薄膜,導致光反應合成的___________減少,直接影響暗反應中___________的還原,從而對光合作用產(chǎn)生抑制作用。(2)研究發(fā)現(xiàn)野生型番茄不含甜菜堿,施加甜菜堿后,低溫對其光合作用仍具抑制作用,但抑制程度較輕。設計實驗驗證以上結(jié)論。要求寫出實驗思路和預期結(jié)果___________。9.(10分)鱗翅目昆蟲家蠶的性別決定方式為ZW型。家蠶體表有斑紋和無斑紋由位于常染色體上的基因A、a控制。斑紋的顏色深淺受基因B、b影響。在育種實驗中,以純合無斑紋品種甲為母本,純合深斑紋品種乙為父本進行雜交,F(xiàn)1全為無斑紋。F1雌雄交配,F(xiàn)2性狀分離比情況如下表:無斑紋深斑紋淺斑紋雌性611雄性620請分析回答以下問題:(1)在有斑紋和無斑紋的性狀中,_______為顯性。已知斑紋由色素分子堆積產(chǎn)生,可推測A基因控制合成的酶能夠催化色素分子_______(填“合成”或“分解”)。(2)B、b基因位于_______染色體上。F1雄性個體的基因型為_______。F2中無斑紋家蠶基因型共有___________種。(3)雄蠶產(chǎn)絲量高、絲質(zhì)好。生產(chǎn)實踐中利用A、a和B、b兩對基因設計雜交組合,可以根據(jù)子代體表斑紋特征把雌性和雄性區(qū)分開。選擇基因型為______的雌蠶與基因型為____________的雄蠶雜交,子代中性狀為_______的個體即為雄蠶。10.(10分)稻瘟病是水稻最重要的病害之一,為達到防治目的,科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?;卮鹣铝袉栴}:(1)通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴增出cDNA。在PCR過程中,兩個引物是_____酶的結(jié)合位點;用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進行分子雜交,可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū),其原因是_____。(2)利用RT-PCR技術(shù)擴增基因時,設計兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____,為了便于擴增后的X基因與質(zhì)粒連接,常在兩條引物上設計加入不同的限制酶酶切位點,主要目的是_____。(3)基因工程中,將重組質(zhì)粒導入植物細胞采用最多的方法是_____,導入動物受精卵采用的方法是_____。(4)若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應蛋白質(zhì),可采用的分子水平的檢測方法是_____。11.(15分)甘露聚糖酶是分解纖維素的重要酶。該酶大量存在于土壤纖維素分解菌中?,F(xiàn)采用基因工程方法將甘露聚糖酶基因?qū)雱游锬c道酵母菌中,以幫助動物消化纖維素。請回答:(1)從土壤纖維素分解菌中獲得甘露聚糖酶,通過分析該酶的__________序列,優(yōu)先選擇酵母菌偏愛的密碼子,找到相對應的__________序列,通過__________(填方法名稱)法合成甘露聚糖酶基因。(2)甘露聚糖酶基因與質(zhì)粒進行連接構(gòu)建表達載體,表達載體中甘露聚糖酶基因應位于_________之間才能表達,表達載體還需加入一些調(diào)控元件,將該工程的表達載體構(gòu)建為分泌型表達載體而非胞內(nèi)型表達載體,目的是__________。(3)通過電擊方法將表達載體轉(zhuǎn)化到處于_______的酵母細胞,經(jīng)檢測轉(zhuǎn)化成功的酵母細胞不存在環(huán)狀DNA,可初步推測導入的表達載體已整合到酵母細胞的__________上。(4)獲得的甘露聚糖酶需要與天然的甘露聚糖酶進行__________比較。

參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解析】

本題考查復制轉(zhuǎn)錄的知識,DNA主要分布在細胞核?!驹斀狻緼.DNA主要分布在細胞核,DNA的復制和轉(zhuǎn)錄主要發(fā)生在細胞核,A正確;B.DNA復制需要解旋酶和DNA聚合酶,DNA轉(zhuǎn)錄需要RNA聚合酶,B正確;C.DNA復制以脫氧核糖核苷酸為原料,轉(zhuǎn)錄以核糖核苷酸為原料,C錯誤;D.DNA復制以DNA兩條鏈為模板,轉(zhuǎn)錄以DNA其中一條鏈為模板,D正確;答案選C.2、C【解析】

本題比較簡單考查了學生對生物學史的了解情況,在生物學發(fā)展的歷史上有很多科學家做出了重要貢獻,大家熟悉的牛頓、施萊登、摩爾根等,在學習過程中要了解、知道這些著名科學家的重要貢獻,是解答類似問題的關鍵?!驹斀狻緼、虎克只是在顯微鏡下觀察到了木栓組織,發(fā)現(xiàn)“細胞”,細胞學說是施萊登和施旺提出的,A錯誤;

B、坎農(nóng)提出了內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的概念,但不是通過研究細胞內(nèi)基因的表達提出的,細胞內(nèi)基因的表達是眾多科學家研究的結(jié)果,B錯誤;

C、摩爾根對雄果蠅白眼性狀的遺傳分析,證明了控制果蠅眼色的基因位于x染色體上,C正確;

D、韋爾穆特在體外條件下將羊體細胞培養(yǎng)成了成熟個體,只能說明哺乳動物體細胞的細胞核具有全能性,不能說明哺乳動物體細胞具有全能性,D錯誤。

故選C。3、B【解析】

內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)主要包括溫度、pH和滲透壓:(1)人體細胞外液的溫度一般維持在37℃左右;(2)正常人的血漿接近中性,pH為7.35~7.45,血漿的pH之所以能夠保持穩(wěn)定,與它含有的緩沖物質(zhì)有關;(3)血漿滲透壓的大小主要與無機鹽、蛋白質(zhì)的含量有關.在組成細胞外液的各種無機鹽離子中,含量上占有明顯優(yōu)勢的是Na+和Cl-,細胞外液滲透壓的90%來源于Na+和Cl-?!驹斀狻緼、人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)依靠神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)共同維持,神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用不一定需要激素的作用,A錯誤;B、組織液和血漿之間可以進行物質(zhì)交換,二者的滲透壓發(fā)生變化時會互相影響,B正確;B、血漿pH的調(diào)節(jié)主要依靠血漿中存在的一些緩沖物質(zhì),C錯誤;D、甲狀腺激素分泌的調(diào)節(jié)體現(xiàn)了分級調(diào)節(jié)和反饋調(diào)節(jié),D錯誤。故選B。【點睛】本題考查內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的相關知識,識記激素的調(diào)節(jié)過程和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持機制和過程是解題的關鍵。4、D【解析】

該題主要考查了興奮在神經(jīng)纖維上傳導時所產(chǎn)生的電位變化過程,當神經(jīng)纖維處于靜息狀態(tài)時,此時神經(jīng)元對鉀離子的通透性增加,鉀離子外流,產(chǎn)生外正內(nèi)負的電位變化。當神經(jīng)纖維上有興奮傳遞而來,神經(jīng)元對鈉離子的通透性增加,鈉離子內(nèi)流,產(chǎn)生外負內(nèi)正的電位變化,形成動作電位。【詳解】A、由圖可知A點神經(jīng)元未興奮,此時神經(jīng)元處于靜息電位,形成原因是神經(jīng)元細胞膜對鉀離子通透性增加,A錯誤;B、B點時細胞接受刺激已經(jīng)興奮,此時神經(jīng)元細胞膜對鈉離子通透性增加,B錯誤;C、曲線②和曲線①相比,靜息電位沒有明顯變化,因此海水中鉀離子濃度沒有變化,C錯誤;D、曲線②和曲線①相比,雖然曲線上升但并未形成動作電位,可能與海水中鈉離子濃度較低有關,D正確;故選D。5、D【解析】

群落的結(jié)構(gòu)特征分垂直結(jié)構(gòu)與水平結(jié)構(gòu),①垂直結(jié)構(gòu):在垂直方向上,大多數(shù)群落(陸生群落、水生群落)具有明顯的分層現(xiàn)象,植物主要受光照、溫度等的影響,動物主要受食物的影響;②水平結(jié)構(gòu):由于不同地區(qū)的環(huán)境條件不同,即空間的非均一性,使不同地段往往分布著不同的種群,同一地段上種群密度也有差異,形成了生物在水平方向上的配置狀況?!驹斀狻緼、標志重捕法是指的是在一定范圍內(nèi),對活動能力強,活動范圍較大的動物種群進行粗略估算的一種生物統(tǒng)計方法,蚜蟲個體小且活動范圍小不適合標記重捕法,A錯誤;B、種群數(shù)量增加,會導致種內(nèi)斗爭加劇,從而影響種群數(shù)量,不會使環(huán)境容納量下降,環(huán)境容納量的大小取決于環(huán)境條件,B錯誤;C、由于地形起伏,不同地段分布不同的植被屬于群落的水平結(jié)構(gòu),C錯誤;D、初生演替是在原生裸地或者原生荒原上進行的演替行為,演替趨勢是群落豐富度增大,抵抗力穩(wěn)定性逐步提高,D正確;故選D。6、B【解析】

對于胞內(nèi)寄生生物,體液免疫先起作用,阻止寄生生物的傳播感染,當寄生生物進入細胞后,細胞免疫將抗原釋放,再由體液免疫最后清除?!驹斀狻緼、結(jié)核桿菌屬于胞內(nèi)寄生菌,在侵染的過程中首先通過體液免疫阻止其擴散,當進入細胞內(nèi)時,會引起T細胞的增殖分化,從而引發(fā)細胞免疫,A正確;B、效應T細胞的作用是和靶細胞結(jié)合,導致靶細胞裂解死亡,效應T細胞不能直接清除病原體,B錯誤;C、吞噬細胞能對病原體進行非特異性識別,并處理和暴露抗原,將信息呈遞給T細胞,C正確;D、使用免疫抑制劑會導致機體的免疫功能降低,使結(jié)核病的發(fā)病率上升,D正確。故選B。【點睛】本題考查疫苗、特異性免疫的相關知識,有一定的綜合性,意在考查學生識記和理解能力,在此基礎上可將注射抗原和注射疫苗相互進行比較,注射抗體,抗體可以直接清除病毒,發(fā)揮作用快,可起到治療的作用,一般使用于緊急治療,此法缺點是抗體存活時間比較短,沒有長期預防的作用。二、綜合題:本大題共4小題7、cDNA目的基因片段、游離的四種脫氧核苷酸、一對引物、Taq酶構(gòu)建表達載體限制酶、DNA連接酶顯微注射預防核酸序列(或RNA.序列或核糖核苷酸序列)該疫苗不具有遺傳物質(zhì),不會出現(xiàn)病毒增殖和感染【解析】

1.基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2.基因工程的工具:(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)運載體:常用的運載體:質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒?!驹斀狻浚?)圖中①是新冠病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物,因此為cDNA。(2)圖中進行PCR技術(shù)必備的條件有目的基因片段、游離的四種脫氧核苷酸、一對引物、Taq酶等。(3)基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。圖中②過程就是基因表達載體構(gòu)建的過程,該步驟中需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶,限制酶能識別雙鏈DNA中特定的核苷酸序列,并在該部位把單鏈中的磷酸二酯鍵切開,DNA連接酶能夠?qū)NA片段連接起來。(4)將重組質(zhì)粒導入受體細胞的方法很多,具體用哪一種要看受體細胞的種類,這里的受體細胞是動物細胞,因此這里用顯微注射法將重組質(zhì)粒導入受體細胞。(5)疫苗能夠激起人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應的抗體和記憶細胞,據(jù)此可知疫苗的最重要的目的是對新冠病毒引起的肺炎進行免疫預防,對疑似患者確診時,可以對疑似患者進行核酸檢測,即采集其咽拭子,與已知病毒進行核酸序列(或RNA.序列或核糖核苷酸序列)比較,以此來確定病原體的種類。(6)由圖示可知基因工程疫苗是蛋白質(zhì)疫苗,而滅活獲減毒的病毒疫苗依然含有核酸成分,也就是說基因工程疫苗不具有遺傳物質(zhì),不會出現(xiàn)病毒增殖和感染,因此該疫苗更安全?!军c睛】熟知基因工程的原理以及操作步驟是解答本題的關鍵,認真讀題是解答本題的首要條件,辨別基因工程疫苗和減毒疫苗的不同是本題的易錯點。8、[H]和ATPC3實驗思路:將野生型番茄分為甲、乙兩組,甲組先后在常溫和低溫條件下測定光合速率,分別記錄為v1、v2,乙組施加甜菜堿后在低溫條件下測定光合速率,記錄為V3預期結(jié)果:v1>V3>V2【解析】

1.光合作用的具體的過程:

①光反應階段:場所是類囊體薄膜

a.水的光解:2H2O4[H]+O2b.ATP的生成:ADP+PiATP

②暗反應階段:場所是葉綠體基質(zhì)

a.CO2的固定:CO2+C52C3b.三碳化合物的還原:2C3(CH2O)+C5+H2O【詳解】(1)葉綠體的類囊體薄膜是光合作用光反應的場所,光合作用的色素就分布其上,低溫會破壞葉綠體的類囊體薄膜,導致光反應合成的[H]和ATP減少,進而直接影響暗反應中C3的還原,從而對光合作用產(chǎn)生抑制作用。(2)實驗設計要遵循單一變量和對照原則,實驗的目的是為了驗證甜菜堿能緩解低溫對光合作用的抑制作用,因此單一的變量就是是否使用甜菜堿與溫度的高低。故主要的實驗思路如下:將長勢相同的野生型番茄隨機均分為甲、乙兩組,甲組先后在常溫和低溫條件下測定光合速率,分別記錄為v1、v2。乙組施加甜菜堿后在低溫條件下測定光合速率。記錄為V3,預期實驗結(jié)果為v1>V3>V2?!军c睛】熟知光合作用的過程是解答本題的關鍵,光合作用影響因素的相關實驗設計也是本題的考查重點。關注實驗設計的原則是解答本題的另一關鍵!9、無斑紋分解Z或性AaZBZb8aaZBWaaZbZb深斑紋【解析】

鳥類、鱗翅目昆蟲、部分兩棲類和爬行類的性別決定方式屬于ZW型,此類性別決定的特點是雌性個體細胞內(nèi)有兩條異型的性染色體ZW,雄性個體細胞內(nèi)有兩條同型的性染色體ZZ?!驹斀狻浚?)由純合無斑紋甲為母本,純合深斑紋乙為父本進行雜交,F(xiàn)1全為無斑紋,可推出無斑紋為顯性;已知色素分子堆積產(chǎn)生斑紋,可推測A基因控制合成的酶能夠催化色素分子分解,導致含A基因的個體無斑紋。(2)分析F2的性狀分離比可知,F(xiàn)2中雌、雄個體表現(xiàn)型不同,說明該性狀與性別相關聯(lián),而A、a位于常染色體上,則B、b基因位于Z或性染色體上;結(jié)合題干分析可知,當A基因存在時,所有個體表現(xiàn)為無斑紋,aaZB_表現(xiàn)為深斑紋,aaZb_表現(xiàn)為淺斑紋。由此可推出,母本甲的基因型為AAZbW、父本乙的基因型為aaZBZB,F(xiàn)1雄性個體的基因型為AaZBZb,F(xiàn)1雌性個體的基因型為AaZBW,F(xiàn)2中無斑紋家蠶基因型為A_ZBW(2種)、A_ZbW(2種)、A_ZBZ_(4種),共有8種基因型。(3)若要根據(jù)子代體表斑紋特征把雌性和雄性區(qū)分開,可設計深斑紋雌性個體與淺斑紋雄性個體雜交,即基因型為aaZBW的雌蠶與基因型為aaZbZb的雄蠶雜交,子代基因型為aaZBZb(深斑紋)、aaZbW(淺斑紋),性狀為深斑紋的個體即為雄蠶?!军c睛】本題著重考查了ZW型性別決定方式的伴性遺傳,意在考查考生能識記并理解所學知識的要點,把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,并且具有一定的分析能力和理解能力,能應用所學知識分析解題。10、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列,mRNA分子中沒有相應互補的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達載體,減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】

1、有關PCR技術(shù)的相關知識:(1)概念:PCR全稱為聚合酶鏈式反應,是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)。(2)原理:DNA復制。(3)前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。(4)過程:①高溫變性:DNA解旋過程;②低溫復性:引物結(jié)合到互補鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開。2、基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)在PCR過程中,兩個引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶的結(jié)合位點;用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進行分子雜交,由于DNA分子含有內(nèi)含子、非編碼區(qū)等序列,mRNA分子中沒有相應互補的堿基序列,因此逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中缺少該序列,所以出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)。(2)

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