廣東省河源市連平縣附城中學2025屆高三第二次診斷性檢測生物試卷含解析

廣東省河源市連平縣附城中學2025屆高三第二次診斷性檢測生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．研究表明，決定細胞“命運”的內(nèi)因是基因的選擇性表達，而外因則取決于細胞對細胞外信號的特異性組合所進行的程序性反應。圖為部分信號決定細胞“命運”的示意圖，圖中字母分別代表不同的胞外信號，則下列有關細胞外信號的說法正確的是()A．只要有胞外信號D和E，細胞就一定會進行分裂B．只有細胞外信號F和G能誘導細胞內(nèi)的基因選擇性表達C．對于癌細胞而言，細胞外信號A~E可能會持續(xù)起作用D．由于細胞凋亡無胞外信號作用，可證明細胞凋亡與基因無關2．有關農(nóng)作物生產(chǎn)措施的敘述，不正確的是（）A．農(nóng)田及時除草，可防止因競爭加劇導致減產(chǎn)B．大棚栽培適當通風，能提高農(nóng)作物光合作用暗反應速率C．套種使農(nóng)田群落結構簡化，并減少生產(chǎn)者呼吸作用消耗量D．輪作能提高農(nóng)作物對礦質(zhì)元素利用率，并改變原有的食物鏈3．基因型為小鼠僅因為減數(shù)分裂過程中染色體未正常分離，而產(chǎn)生一個不含性染色體的ＡＡ型配子。等位基因Ａ、ａ位于２號染色體。下列關于染色體未分離時期的分析，正確的是①2號染色體一定在減數(shù)第二次分裂時未分離②2號染色體可能在減數(shù)第一次分裂時未分離③性染色體可能在減數(shù)第二次分裂時未分離④性染色體一定在減數(shù)第一次分裂時未分離A．①③ B．①④ C．②③ D．②④4．2019年11月，我圍原創(chuàng)的治療“老年癡呆癥”新藥甘露寡糖二酸（GV-971）獲準上市。CV-971是從海藻中提取的糖類分子經(jīng)化學修飾而成的，其作用機理是通過重塑腸道菌群平衡，問接改善“老年癡呆癥”患者的癥狀。下列相關說法正確的是（）A．海藻體內(nèi)的糖類分子，都能為其生命活動提供能量B．GV-971藥物分子不需要進入人體內(nèi)環(huán)境，就能發(fā)揮作用C．從海藻中獲得藥用原料，體現(xiàn)的是生物多樣性的間接價值D．不同腸道菌之間關系錯綜復雜，共同組成復雜的營養(yǎng)結構5．2019新型冠狀病毒（2019-nCoV），因2019年武漢病毒性肺炎病例而被發(fā)現(xiàn)，2020年1月12日被世界衛(wèi)生組織命名。冠狀病毒是一個大型病毒家族，已知可引起感冒以及中東呼吸綜合征（MERS）和嚴重急性呼吸綜合征（SARS）等較嚴重疾病。新冠病毒不僅損害了肺，還包括免疫系統(tǒng)及其他器官；新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒的工作原理是通過提取病人樣本中的RNA，進行反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（RT-PCR），通過擴增反應將樣本中微量的病毒信息進行放大，最后以熒光的方式讀取信號。如果PCR之后信號為陽性，那么就可以認為樣本中存在病毒（已經(jīng)感染），反之表明樣本中沒有病毒（未感染）。下列說法正確的是（）A．2019-nCoV和SARS病毒都對肺部產(chǎn)生嚴重傷害，因為它們都只侵染肺部細胞B．2019-nCoV增殖過程需人體細胞提供四種脫氧核苷酸和ATPC．新冠病毒基因組簡單、遺傳過程又不穩(wěn)定，容易發(fā)生基因突變，給制備疫苗帶來困難D．用核酸檢測試劑盒檢測信號為陽性意味著我們得到了DNA--RNA雜合雙鏈6．下列有關種群和群落的說法，正確的是（）A．群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征B．種群的數(shù)量變化就是“J”型和“S”型增長C．群落演替總是由低等到高等，由簡單到復雜方向發(fā)展D．噴灑農(nóng)藥來防治害蟲，可以達到從根本上消滅害蟲的目的二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）下圖為基因工程操作步驟示意圖。請回答下列問題：（1）從基因文庫中提取的目的基因通過_____________技術進行擴增。與細胞內(nèi)同類酶相比，該技術所利用的DNA聚合酶所具有的特點是____________。（2）在過程①中，需______________酶將已切開的載體DNA與目的基因結合成基因表達載體。載體DNA上必須要有標記基因，標記基因的作用是_______________________。過程②中若選用的受體細胞為大腸桿菌，一般需用Ca2+進行處理，其目的是_______________________。（3）若將病毒外殼蛋白基因?qū)虢湍妇虿溉閯游锛毎?，使之表達出病毒外殼蛋白（抗原），經(jīng)純化后而制得的疫苗可用于生產(chǎn)基因工程疫苗，接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更安全，從疫苗的結構組成來看，其原因是_______________________________________________。8．（10分）圖甲表示在不同溫度條件下C02濃度對某植物凈光合速率的影響；圖乙表示將該種植物葉片置于適宜的光照和溫度條件下，葉肉細胞中C5的相對含量隨細胞間隙C02濃度的變化曲線。請回答下列問題：（1）據(jù)圖甲可知，當C02濃度分別為600μmol·L-1和1200μmol·L-1時，更有利于該植物生長的溫度分別是________________。當C02濃度為200μmol·L-1時，28℃條件下該植物凈光合速率明顯低于20℃和15℃，原因可能是______________________________。（2）C02在RuBP羧化酶作用下與C5結合生成C3，據(jù)圖乙分析，A→B的變化是由于葉肉細胞吸收C02速率_________，在此階段暗反應消耗ATP的速率_________；B→C保持穩(wěn)定的內(nèi)因是受到___________限制。（3）研究發(fā)現(xiàn)，綠色植物中RuBP羧化酶具有雙重活性，催化如下圖所示的兩個方向的反應，反應的相對速度取決于02和C02的相對濃度。在葉綠體中，在RuBP羧化酶催化下C5與___________反應，形成的___________進入線粒體放出C02，稱之為光呼吸。光合產(chǎn)物1/3以上要消耗在光呼吸底物上，據(jù)此推測，C02濃度倍增可以使光合產(chǎn)物的積累增加，原因是___________。9．（10分）抑郁癥是一種情感性精神障礙疾病，患者某些腦神經(jīng)元興奮性下降。近年來醫(yī)學研究表明，抑郁癥與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)傳遞興奮的功能下降相關。下圖表示正在傳遞興奮的突觸結構局部放大示意圖，請據(jù)圖回答問題。（1）①表示_________，細胞X釋放神經(jīng)遞質(zhì)的方式是_________。（2）蛋白M是Y細胞膜上的一種_________，若圖中的神經(jīng)遞質(zhì)與蛋白M結合，會導致細胞Y興奮，比較結合前后細胞Y的膜內(nèi)Na+濃度變化和電位的變化：_________。（3）單胺氧化酶是單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的降解酶。單胺氧化酶抑制劑（MAOID）是目前一種常用抗抑郁藥。據(jù)圖分析，該藥物能改善抑郁癥狀的原因是：_________。（4）根據(jù)上述資料及突觸的相關知識，下列藥物開發(fā)思路中，也能改善抑郁癥狀的有_________。A．促進突觸小泡釋放神經(jīng)遞質(zhì)B．阻止神經(jīng)遞質(zhì)與蛋白M結合C．促進興奮傳導到脊髓產(chǎn)生愉悅感D．降低突觸后神經(jīng)元的靜息膜電位絕對值10．（10分）自然界里有多種微生物，將其進行合理的篩選、培養(yǎng)和應用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領域帶來巨大經(jīng)濟效益。回答下列問題。（1）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取____________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用____________法，若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒____________次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的____________開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線____________。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____________培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了____________。長期保存菌種時，應將培養(yǎng)的菌液與____________充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。（3）甲、乙兩組同學用稀釋涂布平板法測定某種微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下每隔一段時間記錄數(shù)據(jù)（統(tǒng)計時間內(nèi)微生物總數(shù)小于環(huán)境容納量），得到以下結果：培養(yǎng)時間(小時)24487296甲組菌落均值(個)18253632乙組菌落均值(個)20283832計數(shù)時最好取培養(yǎng)____________小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結果，一方面是由于培養(yǎng)時間較短，會遺漏菌落數(shù)目，另一方面是由于____________。11．（15分）某一森林在遭受大火完全燒毀前后，草本植物、灌木和喬木的生物量變化如圖所示(b點為發(fā)生火災的時間)。請回答下列問題。（1）a~b段，三類植物在群落中會呈現(xiàn)出鑲嵌分布，從而形成了群落的______。三類植物在b~f段的增長方式近似于_______型曲線。（2）b~f段，顯示火災后植物群落的演替情況，其演替過程往往從圖2中的______階段開始，結果是生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性增強。生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性是指________________________。（3）欲調(diào)查該生態(tài)系統(tǒng)植物豐富度宜采用________法。（4）該森林中田鼠和鼬都是恒溫動物，同化的能量中只有3%-5%用于______，其余在呼吸作用中以熱能形式散失。（5）鼬能夠依據(jù)田鼠留下的氣味去獵捕后者，田鼠同樣也能夠依據(jù)鼬的氣味或行為躲避獵捕?？梢?，信息能夠__________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

據(jù)圖分析可知，細胞分裂必需具備的信號組合有A、B、C、D、E，細胞分化需要的信號組合是A、B、C、F、G，細胞存活所需要的信號有A、B、C，無信號刺激則細胞發(fā)生凋亡?！驹斀狻緼.細胞分裂是在胞外信號A、B、C讓細胞存活的前提下，再在細胞外信號D、E刺激下才能分裂，A錯誤；B.細胞分裂和細胞分化都需要合成特定的蛋白質(zhì)即基因進行選擇性表達，據(jù)圖可知細胞外信號F和G、D和E分別是細胞分裂和分化所必需的信號，都能誘導細胞內(nèi)的基因選擇性表達，B錯誤；C.癌細胞有無限增殖的特點，結合圖示信息，細胞分裂需要A、B、C、D、E五方面的信號，C正確；D.細胞凋亡又稱編程性死亡，受細胞中遺傳物質(zhì)的控制，無胞外信號不能證明細胞凋亡與基因無關，D錯誤。2、C【解析】

農(nóng)田及時除草、除蟲等措施是為了調(diào)整能量流動方向，使能量流向?qū)θ擞欣牟糠帧４笈镌耘噙m當通風可以增加CO2濃度，有利于提高農(nóng)作物光合作用暗反應速率。套種是指在前季作物生長后期的株行間播種或移栽后季作物的種植方式。輪作指在同一田塊上有順序地在季節(jié)間和年度間輪換種植不同作物或復種組合的種植方式?！驹斀狻緼、田間雜草與農(nóng)作物是競爭關系，農(nóng)田及時除草，可防止因競爭加劇導致減產(chǎn)，A正確；B、大棚栽培適當通風可以增加CO2濃度，有利于提高農(nóng)作物光合作用暗反應速率，B正確；C、套種使農(nóng)田群落中生物種類增多，營養(yǎng)結構變復雜，C錯誤；D、輪作不僅有利于均衡利用土壤養(yǎng)分，提高農(nóng)作物對礦質(zhì)元素利用率，還能改變原有的食物鏈，防治病、蟲、草害，D正確。故選C。【點睛】解題關鍵是理解套種和輪種的含義：套種是一種集約利用時間的種植方式，一般把幾種作物同時期播種的叫間作，不同時期播種的叫套種。輪作指在同一田塊上有順序地在季節(jié)間和年度間輪換種植不同作物或復種組合的種植方式，如一年一熟的大豆→小麥→玉米三年輪作。3、A【解析】

本題考查的是減數(shù)分裂的有關內(nèi)容。減數(shù)第一次分裂后期同源染色體分離，減數(shù)第二次分裂后期著絲點分裂，姐妹染色單體分開?！驹斀狻咳绻匀旧w減數(shù)第一次分裂未分離，會產(chǎn)生一個不含性染色體和一個含有兩個性染色體的次級性母細胞；再經(jīng)過減數(shù)第二次分裂，就會產(chǎn)生兩個不含性染色體的配子和兩個有兩條性染色體的配子；如果減數(shù)第一次分裂正常，在減數(shù)第二次分裂時姐妹單體沒分開，也可以產(chǎn)生沒有性染色體的配子，故③正確④錯誤；2號染色體在減數(shù)第一次分裂時正常分裂，在減數(shù)第二次分裂時姐妹單體沒分開，產(chǎn)生ＡＡ型配子。故①正確②錯誤；答案選A。4、B【解析】

1、糖類的功能：為生命活動提供能量；構成細胞的結構。2、生物多樣性的價值：直接價值、間接價值、潛在價值。3、生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結構由生產(chǎn)者和消費者通過捕食和競爭關系構成?！驹斀狻緼、生物體內(nèi)的糖類大多數(shù)都能為生命活動提供能量，但有些糖類不能為生命活動提供能量，而是構成細胞的結構，如纖維素、核糖等糖不能提供能量，A錯誤；B、從題目信息可知GV-971藥物在腸道發(fā)揮作用，沒有進入人體內(nèi)環(huán)境，B正確；C、從海藻中獲得藥用原料，體現(xiàn)的是生物多樣性的直接價值，C錯誤；D、腸道微生物基本都屬于分解者，不進入食物鏈和食物網(wǎng)即不構成營養(yǎng)結構，D錯誤。故選B。5、C【解析】

抓住題干中的關鍵信息“新冠病毒不僅損害了肺，還包括免疫系統(tǒng)及其他器官”，“試劑盒的工作原理是通過提取病人樣本中的RNA，進行反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（RT-PCR），通過擴增反應將樣本中微量的病毒信息進行放大，最后以熒光的方式讀取信號。如果PCR之后信號為陽性，那么就可以認為樣本中存在病毒（已經(jīng)感染），反之表明樣本中沒有病毒（未感染）”進行答題?！驹斀狻緼、根據(jù)題干信息“新冠病毒不僅損害了肺，還包括免疫系統(tǒng)及其他器官”，A錯誤；B、2019-nCoV是RNA病毒，所以需要細胞提供4種核糖核苷酸作為原料，B錯誤；C、新冠病毒基因組簡單、遺傳過程又不穩(wěn)定，容易發(fā)生基因突變，給制備疫苗帶來困難，C正確；D、由于在檢測過程中運用了“反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）”，所以檢測信號為陽性意味著我們得到了DNA雙鏈，D錯誤。故選C。【點睛】本題信息量較大，需要考生抓住有用的信息，結合病毒的相關知識進行解答。6、A【解析】

種群是指生活在一定區(qū)域的同種生物的全部個體，種群特征包括種群的數(shù)量特征（種群密度）、年齡結構、性別比例、遷入率和遷出率、出生率和死亡率、空間特征等。群落的概念：在一定空間內(nèi)所有生物種群的集合體，它具有一定的結構、一定的種類構成和一定的種間相互關系。群落演替是指隨著時間的推移一個群落被另一個群落代替的過程?！驹斀狻緼、群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征，A正確；B、種群的數(shù)量變化是一個復雜的動態(tài)變化過程，常見的數(shù)量變化有“J”型和“S”型增長，也有其他增長形式，B錯誤；C、群落演替一般來說，由低等到高等，由簡單到復雜方向發(fā)展，但在自然災害或人為干預下，可能會朝著反方向發(fā)展，C錯誤；D、噴灑農(nóng)藥來防治害蟲，可以殺滅大部分害蟲，但仍有少部分帶抗性的個體存活，D錯誤。故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、PCR耐高溫DNA連接鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來（或篩選出含目的基因的受體細胞）使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白，不具有遺傳物質(zhì)，不會出現(xiàn)病毒增殖和感染【解析】

基因工程的基本步驟：1、目的基因的獲?。?、基因表達載體的構建；3、將目的基因?qū)胧荏w細胞；4、目的基因的檢測與鑒定。【詳解】（1）通常使用PCR技術對目的基因進行擴增。在PCR技術中應用的關鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特點是耐高溫。（2）DNA連接酶能將已切開的載體DNA與目的基因連接起來形成磷酸二酯鍵；標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來；由于未處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境DNA分子的能力較弱，所以常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)。（3）基因工程疫苗不含有遺傳物質(zhì)，可以引發(fā)機體發(fā)生特異性免疫反應形成抗體和記憶細胞，但由于其不增殖和感染人體，比常規(guī)疫苗安全性更高。【點睛】本題考查基因工程的操作步驟和應用的相關知識，旨在考查考生的理解能力。8、20℃、28℃實際光合速率都不高，而28℃時的呼吸速率很強增加增加RuBP羧化酶數(shù)量（濃度）O2二碳化合物（C2）高濃度CO2可減少光呼吸【解析】試題分析：據(jù)圖分析，圖甲中實驗的自變量是二氧化碳濃度、溫度，因變量是凈光合速率；隨著二氧化碳濃度的增加，三種溫度下的凈光合速率都在一定范圍內(nèi)逐漸增大；當二氧化碳濃度超過800時，在實驗溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，凈光合速率逐漸增加。圖乙中，隨著細胞間隙C02濃度的逐漸增加，葉肉細胞中C5的相對含量逐漸下降，最后趨于穩(wěn)定。（1）據(jù)圖分析，當C02濃度為600μmol·L-1時，20℃條件下的凈光合速率最高；當C02濃度為1200μmol·L-1時，28℃條件下的凈光合速率最高；而當C02濃度為200μmol·L-1時，28℃條件下該植物凈光合速率明顯低于20℃和15℃，可能是因為實際光合速率都不高，而28℃時的呼吸速率很強。（2）據(jù)圖乙分析，A→B之間隨著細胞間隙C02濃度的逐漸增加，細胞吸收C02速率在逐漸增加，與五碳化合物結合生成的三碳化合物增加增加，因此葉肉細胞中C5的相對含量逐漸下降，該過程需要光反應提供的ATP和[H]，因此消耗ATP的速率增加；B→C隨著細胞間隙C02濃度的逐漸增加，細胞吸收C02速率保持相對穩(wěn)定，受RuBP羧化酶數(shù)量（濃度）的限制。（3）據(jù)圖分析，RuBP羧化酶的作用是催化五碳化合物與二氧化碳結合生成三碳酸，或者催化氧氣與五碳化合物結合生成三碳酸和二碳化合物，其中后者的產(chǎn)物二碳化合物進入線粒體放出二氧化碳；高濃度CO2可減少光呼吸，導致光呼吸消耗的有機物減少，因此C02濃度倍增可以使光合產(chǎn)物的積累增加?！军c睛】解答本題的關鍵是找出圖甲中實驗的自變量和因變量，并根據(jù)對照性原則和單一變量原則判斷不同二氧化碳條件下最適宜的溫度，明確凈光合速率是光合速率與呼吸速率的差值。9、突觸前膜胞吐受體膜內(nèi)Na+濃度由低變高，膜內(nèi)電位由負變正MAOID能抑制單胺氧化酶活性，阻止腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)降解，提高了突觸后神經(jīng)元的興奮性，起抗抑郁作用AD【解析】

兩個神經(jīng)元之間或神經(jīng)元和肌肉細胞之間形成的結構，我們稱為突觸。突觸由突觸前膜，突觸間隙和突觸后膜形成。興奮在神經(jīng)元上以電信號的形式傳導，在突觸間轉(zhuǎn)化為化學信號。突觸前膜釋放神經(jīng)遞質(zhì)，與其對應的突觸后膜上的特異性受體結合，使得下一個神經(jīng)元興奮或抑制。【詳解】（1）①能將突觸小泡中的物質(zhì)釋放出來，①表示突觸前膜。細胞X釋放神經(jīng)遞質(zhì)的方式是胞吐。（2）蛋白M可以和神經(jīng)遞質(zhì)結合，是Y細胞膜上的一種受體。若圖中的神經(jīng)遞質(zhì)與蛋白M結合，會導致細胞Y興奮，膜外Na+內(nèi)流，細胞Y的膜內(nèi)Na+濃度增大，原來膜外為正電位膜內(nèi)為負電位，興奮后細胞Y的電位變?yōu)槟ね鉃樨撃?nèi)為正，因此膜內(nèi)的電位的變化由負變正。（3）據(jù)圖分析，MAOID能抑制單胺氧化酶活性，阻止腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)降解，提高了突觸后神經(jīng)元的興奮性，起抗抑郁作用，該藥物能改善抑郁癥狀。（4）根據(jù)上述資料及突觸的相關知識，患者某些腦神經(jīng)元興奮性下降，促進突觸小泡釋放神經(jīng)遞質(zhì)、降低突觸后神經(jīng)元的靜息膜電位絕對值的藥物都可以提高神經(jīng)細胞的興奮性，阻止神經(jīng)遞質(zhì)與蛋白M結合不利于提高興奮性，感覺中樞在大腦皮層，因此下列藥物開發(fā)思路中，也能改善抑郁癥狀的有AD?！军c睛】本題以圖形及文字信息的形式考查學生對神經(jīng)系統(tǒng)興奮性的了解，考查學生對神經(jīng)元之間興奮的傳遞的知識點的掌握情況。10、高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連（或相接、相交等意思正確）倒置作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染甘油72培養(yǎng)時間過長，兩個或多個菌落連成一個菌落【解析】

1、微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作技術，無菌操作過程中的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌。高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌。2、平板劃線操作的基本步驟是：（一）右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口通過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口通過火焰并塞上棉塞。（二）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。（三）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。（四）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！驹斀狻浚?）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取高壓蒸汽滅菌法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用灼燒滅菌法。接種環(huán)在每次接種前都要灼燒滅菌，最后一次接種完也要滅菌，所以在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒6次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的末端開始劃線，使菌體的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終獲得由單個菌體形成的單個菌落。最后一次劃的線不能與第一