2026高考生物一輪基礎(chǔ)知識練：第22章 發(fā)酵工程（含答案）

2026全國版高考生物一輪

第5部分生物技術(shù)與工程

第22章發(fā)酵工程

第1節(jié)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

五年高考

（2024湖北,1,2分）制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核

生物，常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）

A.食用醋的酸味主要來源于乙酸

B.醋酸菌不適宜在無氧條件下生存

C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶

D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)

2八★（2024江蘇,14,2分）關(guān)于“利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜”的實驗，下列敘述正確的

是（）

A.制作泡菜的菜料不宜完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中

B.制作酸奶的牛奶須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再接種乳酸菌

C.發(fā)酵裝置需加滿菜料或牛奶并封裝，以抑制乳酸菌的無氧呼吸

D.控制好發(fā)酵時間，以避免過量乳酸影響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)

3次*（2022湖北,11,2分）關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯誤的是（）

A.在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣

B.白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程

C.葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體

D.生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的都是酵母菌

三年模擬

4.★★（2025屆福建名校聯(lián)盟質(zhì)檢,8）生物技術(shù)與人們的生活息息相關(guān)，在食品制造方面廣

泛應(yīng)用。下列有關(guān)說法錯誤的是（）

A.在泡菜的腌制過程中，為縮短制作時間，可在鹽水中加入少量陳泡菜液

B.與葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作過程需要消耗氧氣，且發(fā)酵溫度更低

C.利用玉米進行酒精發(fā)酵時，添加纖維素酶可以提高酒精的含量

D.制作腐乳時,酵母、曲霉和毛霉均參與了發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉

5達★（2025屆遼寧七校協(xié)作體開學(xué)考,10）早在《詩經(jīng)?鄴風(fēng)?谷風(fēng)》中就有“我有旨蓄，亦以

御冬”的記載?！爸夹睢本褪莾Σ氐拿牢妒称罚簿褪请缰频呐莶说?。下列有關(guān)敘述錯誤的是

A.制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來進行發(fā)酵的

B.制作泡菜過程中,食鹽用量過高容易造成亞硝酸鹽含量增加

C.常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌，它們都是好氧細菌

D.腌制泡菜時可通過向壇蓋邊沿的水槽注水保持發(fā)酵所需環(huán)境

6.★★★（2025屆湖南長沙一中階段檢測,9）霉豆腐渣的原料是加工豆腐或豆?jié){后剩下的

“副”產(chǎn)品——豆腐渣。采用傳統(tǒng)發(fā)酵的辦法，利用毛霉糖化淀粉和分解大豆蛋白的能力對

豆腐渣進行加工,大致過程如圖所示。下列說法正確的是（）

原料處理——將豆腐渣烘干至含有一定水分后冷卻

拌霉-----將干凈的稻草覆蓋在豆腐渣上面

發(fā)酵-----?

保存

A.將豆腐渣烘干的主要目的是滅菌

B.拌霉即接種，與家庭釀制葡萄酒一樣，都采用自然接種的方法

C.圖中“?”處的條件是密封無氧

D.在發(fā)酵過程中，豆腐渣中的蛋白質(zhì)被分解成甘油和氨基酸

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用通

?考法微生物的分離和鑒定3、4、7、8、11、13

五年高考

^★★（2024湖南,6,2分）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是

（）

①灼燒接種環(huán)②冷卻接種環(huán)，拔出試管棉塞

A.①②⑤⑥B.③④⑥⑦

C.①②⑦⑧D.①③④⑤

2.★★（2023遼寧,9,2分）細菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細菌形成的,

利用空氣微生物采樣器對某市人員密集型公共場所采樣并檢測細菌氣溶膠的濃度（菌落

數(shù)/m3）。下列敘述錯誤的是（）

A.采樣前需對空氣微生物采樣器進行無菌處理

B.細菌氣溶膠樣品恒溫培養(yǎng)時需將平板倒置

C.同一稀釋度下至少對3個平板計數(shù)并取平均值

D.稀釋涂布平板法檢測的細菌氣溶膠濃度比實際值高

3.★★（2023河北」2,2分）為篩選能平衡腸道菌群和降解膽固醇的乳酸菌，下列相關(guān)實驗設(shè)

計錯誤的是（）

A.從酸奶和泡菜中采樣分離乳酸菌

B.平板倒置培養(yǎng)為篩選乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境

C.對目的菌株進行膽固醇降解能力的測定

D.檢測目的菌株對消化道環(huán)境的耐受力

4★★（2023山東,15,2分）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)

B.平板涂布時涂布器使用前必須進行消毒

C接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄

D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成月尿酶的微生物

5次山（2022湖北,5,2分）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正

確的是（）

A.動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行

B.微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用高壓蒸汽滅菌法對牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進行滅菌

D.可用高壓蒸汽滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌

6>**（2023重慶,9,3分）垃圾分類有利于變廢為寶，減少環(huán)境污染。如圖為分類后餐廚垃

圾資源化處理的流程設(shè)計。下列敘述錯誤的是（）

一添加木屑堆肥體一年

餐廚垃圾破碎、壓等冗渣〈一（好氧）質(zhì)

油水混合物~>X—沼氣

A.壓榨出的油水混合物可再加工，生產(chǎn)出多種產(chǎn)品

B.添加的木屑有利于堆肥體通氣,還可作為某些微生物的碳源

C.X中需要添加合適的菌種,才能產(chǎn)生沼氣

D.為保證堆肥體中微生物的活性，不宜對堆肥體進行翻動

7八★★新思維.水解圈不能作為判斷產(chǎn)酶能力唯一依據(jù)的原因（2024江西,17,12分）聚對

苯二甲酸乙二醇醋（PET）是一種聚酯塑料，會造成環(huán)境污染。磷脂酶可催化PET降解。為

獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗了2種方法?；卮鹣铝袉栴}：

⑴方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一種磷脂類物

質(zhì)）為唯一碳源制備培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外,該培養(yǎng)基中至

少還應(yīng)該有、、等營養(yǎng)物質(zhì)。

⑵方法2采用技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼

磷脂酶的基因外,該技術(shù)還需要、、等“分子工具”。

⑶除了上述2種方法之外，還可以通過技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能

夠高產(chǎn)磷脂酶的微生物。

⑷將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白腺液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂

粉和適量的卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物

產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板

制作的角度分析，其原因可能

是

8次★★（2022廣東,21,12分）研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。

近期在“科學(xué)號”考察船對南中國?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附

近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學(xué)特性。

7

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一)

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思

時間（天）

回答下列問題：

⑴研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品,28℃

厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物。為了獲得純種培養(yǎng)，除了稀釋涂布平

板法，還可采用法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以為碳源時生長狀況最

好。

⑵研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，

推測其原因可能是。（答一點即可）

⑶藻類細胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)

組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能

是。

⑷深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的

一般共性外，其特性可能還

有_______________________________________________________________

三年模擬

^★★（2025屆貴州部分學(xué)校聯(lián)考,15）圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，圖丙是接種

后培養(yǎng)的效果圖解，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

丙

A.甲、乙都可用于微生物的計數(shù),且計數(shù)結(jié)果比實際結(jié)果偏小

B.甲、乙都需要將菌種接種在固體培養(yǎng)基上,并可能觀察到單菌落

C.甲、乙培養(yǎng)使用后的培養(yǎng)基在丟棄前均需要進行滅菌處理,以免污染環(huán)境

D.丙所示結(jié)果只能由乙接種方法所得

^.★★★（2025屆湖南部分學(xué)校聯(lián)考,10）巴氏芽抱桿菌是一類具有較高月尿酶活性，能夠分

解尿素的細菌，能改善土壤肥力。研究人員從土壤樣品中分離該細菌的流程如圖所

示，①~⑤表示操作步驟。下列說法錯誤的是（）

適量富集培養(yǎng)9mL9mL9mL

土樣無菌水無菌水無菌水

①②③④

A.步驟②富集培養(yǎng)時以尿素為唯一氮源

B.步驟③④采用了稀釋涂布平板法

C.步驟⑤接種時，接種環(huán)至少要灼燒5次

D.若可用于計數(shù)的平板菌落數(shù)平均為163個,則錐形瓶中菌液細菌數(shù)約為1.6x105個.mL"

!1.★★★（2025屆安徽多校聯(lián)考,14）兔子的盲腸發(fā)達,其中含有大量的微生物幫助兔子消

化,這可能是兔子能從富含纖維素的食物中獲得營養(yǎng)物質(zhì)的關(guān)鍵。為了分離出兔子盲腸中

分解纖維素能力最強的菌種，下列相關(guān)操作正確的是（）

A.為縮小選擇范圍可用只含纖維素粉的溶液淘汰部分菌種

B.在營養(yǎng)物質(zhì)充足的有氧環(huán)境中更有利于分離得到目標(biāo)菌種

C.相同條件下可用無菌水模擬接種操作來判斷培養(yǎng)基是否符合無菌要求

D.在含有土豆汁的培養(yǎng)基中加入纖維素粉和剛果紅可制備鑒別培養(yǎng)基

12>★★★新思維?通過分析不同處理下ZEN降解率對選項進行推理分析（2025屆廣東多

校聯(lián)考,15）玉米赤霉烯酮（ZEN）是禾谷鐮刀菌的次生代謝物，感染禾谷鐮刀菌的飼料表現(xiàn)

發(fā)霉的特征。實驗小組篩選獲得了一株ZEN降解菌XJ-140,并檢測了菌株XJ-140的不同

組分及細胞上清液經(jīng)不同失活處理后對ZEN的降解率,實驗結(jié)果如表所示。下列敘述錯

誤的是（）

位置及處理方式ZEN降解率/%

未處理65

上清液

蛋白酶處理36

細胞內(nèi)容物38

活菌體37

滅活菌體22

A.篩選ZEN降解菌應(yīng)從新鮮禾谷飼料中取樣

B.根據(jù)結(jié)果推測ZEN降解酶是一種分泌蛋白

C.該實驗的因變量是ZEN的降解率

D.活菌體細胞對ZEN降解酶具有黏附作用

”.★★★（2025屆江西重點高中聯(lián)考,17）煤化工企業(yè)產(chǎn)生的焦化廢水中的毗陡（C5H5N）具

有明顯的致癌、致畸和致突變作用，易在生物體內(nèi)富集，會對人體健康及生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生危害。

實驗人員從焦化廢水處理系統(tǒng)中分離出甲、乙兩種毗咤降解菌，采用平板培養(yǎng)法比較二者

降解此咤的能力?；卮鹣铝袉栴}：

⑴配制液體培養(yǎng)基I進行擴大培養(yǎng)，成分如表所示，將甲菌株、乙菌株分別接種在兩瓶液體

培養(yǎng)基I中培養(yǎng)。培養(yǎng)基中能為菌株的生長提供碳源的物質(zhì)是，為菌株的生

長提供氮源的物質(zhì)是。配制好的培養(yǎng)基要進行滅菌，對培養(yǎng)基滅菌常用的方

法是。

MgSO4NH4NO3吐陡水

5g10g10g定容至1000mL

⑵配制不含NH4NO3（其他條件不變）的液體培養(yǎng)基n,然后在培養(yǎng)基I和培養(yǎng)基n中加入

一定量的，分別制成平板I、II,并在兩平板上打A、B兩孔（大小相同），如圖1所示。

在無菌條件下，將等量、等濃度的甲菌株菌液和乙菌株菌液分別接種到平板I的A和B

兩孔處，平板II也進行同樣的操作。在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，兩個平板的兩孔

處的降解圈大小如圖2所示。

AB

據(jù)圖分析能夠得出的結(jié)論：

（答出2點）。根據(jù)圖中所示實驗結(jié)果可知，治理焦化廢水中吐咤造成的污染應(yīng)選用的菌株

是。

⑶實驗人員采用顯微鏡直接計數(shù)法和稀釋涂布平板法分別對取自平板n中的甲細菌的數(shù)

量進行計數(shù)，發(fā)現(xiàn)測得的細菌數(shù)量前者大于后者，其原因

是。

14.（2025屆重慶南開中學(xué)期中,18）噬菌體生物擴增法是一種檢測樣本中有害菌數(shù)量的方

法，其原理是噬菌體能專一感染宿主細胞，進入宿主細胞的噬菌體DNA將不受殺病毒劑的

滅活,在裂解宿主細胞后繼續(xù)在相關(guān)平板上增殖形成噬菌斑?，F(xiàn)以該方法檢測某重度污染

水樣中大腸桿菌的數(shù)量，操作步驟如下：

①將一定濃度的T2噬菌體懸液0.1mL與0.1mL待測水樣混合，保溫約5min后,向懸液

中加入0.2mL殺病毒劑；

②隨后立即加入大量（L6mL）無菌培養(yǎng)液；

③將步驟②所得培養(yǎng)液全部接種到長滿大腸桿菌的平板上,培養(yǎng)約24h;

④觀察并計數(shù)平板上出現(xiàn)的透明噬菌斑數(shù)量。

保溫7加殺病毒劑,

接種到平板

II隨后立即加,培養(yǎng)24h

入大量無菌

出現(xiàn)噬菌斑

培養(yǎng)液

（1）T2噬菌體在增殖過程中，需要大腸桿菌提供的原料有0

⑵步驟①中所有的T2噬菌體會略微過量，其目的是

殺病毒劑的處理時間對檢測結(jié)果會產(chǎn)生很大影響，如果處理時間過短，會使檢測結(jié)果

（選填“偏大”“偏小”或“不受影響”），為確定處理時間是否合理，可設(shè)置對照組,對照組的處理

為。

⑶上述實驗進行3次重復(fù)后，在3個平板中發(fā)現(xiàn)噬菌斑的數(shù)量分別為58、55、55個，由此

推斷原待測樣品中的大腸桿菌濃度為。若步驟①中保溫時間過長，檢測結(jié)果

將（選填“偏大”“偏小”或“不受影響”）。

第3節(jié)發(fā)酵工程及其應(yīng)用

五年高考

1.★★（2022山東,14,2分）青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時，會通過分泌青霉素殺死

細菌,以保證自身生存所需的能量供應(yīng)。目前已實現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn)，關(guān)于該生產(chǎn)過程,

下列說法錯誤的是（）

A.發(fā)酵液中的碳源不宜使用葡萄糖

B.可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量

C.選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中

D.青霉素具有殺菌作用，因此發(fā)酵罐不需嚴(yán)格滅菌

2次★★新情境.井岡霉素的發(fā)酵生產(chǎn)分析（2024江西,11,2分）井岡霉素是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)

的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs,一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發(fā)

酵而來，在水稻病害防治等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。下列關(guān)于JGs發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素的敘述,

正確的是（）

A.JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因為它含有能夠編碼井岡霉素的基因

B.JGs接入發(fā)酵罐前需要擴大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量

C.提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量

D.稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細胞數(shù)量的變化

3八★★（2024山東,14,2分）在發(fā)酵過程中，多個黑曲霉菌體常聚集成團形成菌球體，菌球體

大小僅由菌體數(shù)量決定。黑曲霉利用糖類發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸時需要充足的氧。菌體內(nèi)鏤離

子濃度升高時，可解除檸檬酸對其合成途徑的反饋抑制。下列說法錯誤的是（）

A.相同菌體密度下，菌球體越大檸檬酸產(chǎn)生速率越慢

B.發(fā)酵中期添加一定量的硫酸鏤可提高檸檬酸產(chǎn)量

C.發(fā)酵過程中pH下降可抑制大部分細菌的生長

D.發(fā)酵結(jié)束后，將過濾所得的固體物質(zhì)進行干燥即可獲得檸檬酸產(chǎn)品

4y★★（2024貴州,14,3分）酵母菌W是一種產(chǎn)果膠酶工程菌。為探究酵母菌W的果膠

酶產(chǎn)量與甲醇濃度（i<n<in）的關(guān)系。將酵母菌W以相同的初始接種量接種到發(fā)酵罐,

在適宜條件下培養(yǎng)，結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）

M果膠酶（要、

320[

2一

024487296120

培養(yǎng)時間（h）

A.發(fā)酵罐中接種量越高，酵母菌W的K值越大

B.甲醇濃度為HI時,酵母菌W的果膠酶合成量最高

C.72h前，三組實驗中，甲醇濃度為II時，產(chǎn)果膠酶速率最高

D.96h后，是酵母菌W用于工業(yè)生產(chǎn)中收集果膠酶的最佳時期

5>★★（2023遼寧,13,2分）利用某種微生物發(fā)酵生產(chǎn)DHA油脂,可獲取DHA（一種不飽和

脂肪酸）。如圖為發(fā)酵過程中物質(zhì)含量變化曲線。下列敘述錯誤的是（）

7

1

i-

s

發(fā)酵時間（h）

注：生物量為每升發(fā)酵液中的細胞干重（g?L-）

A.DHA油脂的產(chǎn)量與生物量呈正相關(guān)

B.溫度和溶解氧的變化能影響DHA油脂的產(chǎn)量

C.葡萄糖代謝可為DHA油脂的合成提供能量

D.12-60h,DHA油脂的合成對氮源的需求比碳源高

6>**（2022湖北,14,2分）廢水、廢料經(jīng)加工可變廢為寶。某工廠利用果糖生產(chǎn)廢水和

沼氣池廢料生產(chǎn)蛋白質(zhì)的技術(shù)路線如圖所示。下列敘述正確的是（）

釀酒酵母

A.該生產(chǎn)過程中，一定有氣體生成

B.微生物生長所需碳源主要來源于沼氣池廢料

C.該生產(chǎn)工藝?yán)梦⑸飬捬醢l(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)

D.沼氣池廢料和果糖生產(chǎn)廢水在加入反應(yīng)器之前需要滅菌處理

三年模擬

7」（2025屆四川成都外國語期中,6）啤酒生產(chǎn)包括發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵

等工序。其中，糖化是指淀粉酶分解淀粉得到糖漿。下列敘述錯誤的是（）

A.發(fā)芽使大麥種子釋放淀粉酶

B.焙烤殺死種子胚但淀粉酶未失活

C.加入淀粉酶抑制劑可加速糖化過程

D.蒸煮后需冷卻再進行發(fā)酵

8>*（2025屆湖北宜昌等四地開學(xué)考,15）啤酒、味精和胰島素的工業(yè)化生產(chǎn)比傳統(tǒng)發(fā)酵

生產(chǎn)要復(fù)雜得多,需要通過發(fā)酵工程來實現(xiàn)。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.利用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)的單細胞蛋白，可作為食品添加劑

B.以大豆為主要原料，利用黑曲霉水解其中的蛋白質(zhì),經(jīng)淋洗、調(diào)制成醬油

C.青貯飼料中添加酵母菌,可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力

D.傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，發(fā)酵工程則以單一菌種的液體發(fā)

酵為主

9次★（2025屆湖北名校聯(lián)盟聯(lián)考,15）湖北宜昌是臍橙之鄉(xiāng)，臍橙具有較高的營養(yǎng)價值和藥

用價值。采用液體發(fā)酵法可釀制出醋香濃郁、酸味純正的橙醋，提高了臍橙的經(jīng)濟價值。

臍橙醋的釀造工藝流程如圖所示，下列相關(guān)敘述正確的是（）

臍

臍

臍

黑L

橙

橙

臍清洗、破碎橙后熟、調(diào)配成

菌

醋

汁

橙糖度調(diào)整酒殺菌、分裝品

A.釀制臍橙酒和臍橙醋過程中，都應(yīng)不斷通氣培養(yǎng)

B.為獲得純凈的酵母菌和醋酸菌,應(yīng)先稀釋再平板劃線

C.酵母菌產(chǎn)生的蛋白質(zhì)可作為單細胞蛋白制成微生物飼料

D.臍橙的品質(zhì)及發(fā)酵時間均會影響橙醋的風(fēng)味

10>*（2025屆安徽部分學(xué)校聯(lián)考,13）生物發(fā)酵是一種產(chǎn)品制備的生化反應(yīng)過程，涉及生

活和生產(chǎn)的方方面面。在工藝流程、產(chǎn)品過程控制技術(shù)領(lǐng)域,發(fā)酵工程也是國內(nèi)長期的研

究熱點。如圖為青霉素發(fā)酵工藝的步驟，下列說法錯誤的是（）

A.將原材料配制為菌體生長所需的營養(yǎng)液，并將配制好的營養(yǎng)液滅菌處理

B.利用高壓蒸汽將整個發(fā)酵設(shè)備殺菌處理，殺滅雜菌

C.為了提高青霉素的產(chǎn)量，發(fā)酵時不同階段可設(shè)置不同的溫度、溶氧等參數(shù)

D.控制好發(fā)酵過程中的參數(shù)，最終通過提取、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品

H.★★新教材.谷氨酸在不同發(fā)酵條件下的產(chǎn)物不同（2025屆廣東一調(diào),12）味精的主要成

分是谷氨酸鈉，其生產(chǎn)工藝流程如圖所示。下列說法正確的是（）

小麥

、

大

米

等

淀

類

粉糖化加入水、無機鹽、尿素

谷

谷

物

X通氣、攪拌氨中和、谷氨

發(fā)酵液

酸

氨

谷酸嚴(yán)控pH、溫族

運擴大噓種結(jié)晶酸鈉

狀

棒

菌

桿化培養(yǎng)

A.谷氨酸棒狀桿菌的主要碳源、氮源分別是淀粉、尿素

B.谷氨酸棒狀桿菌的呼吸方式和乳酸菌相同

C.發(fā)酵過程中應(yīng)控制發(fā)酵液的pH為弱堿性或中性

D.發(fā)酵結(jié)束后的發(fā)酵液經(jīng)過濾、離心、純化、結(jié)晶可得到味精

12>★★（2025屆安徽江淮十校聯(lián)考,14）黑曲霉是一種絲狀真菌，食品工業(yè)以紅薯粉為原

料經(jīng)黑曲霉發(fā)酵獲得檸檬酸，如圖為生產(chǎn)檸檬酸的簡要流程圖。下列敘述正確的是（）

35℃,35通氣檸檬酸

A.黑曲霉與生產(chǎn)果醋時所用主要微生物細胞結(jié)構(gòu)相同，代謝類型也相同

B.將菌種接種至A培養(yǎng)基時,每次劃線前涂布器都需要灼燒滅菌

C.發(fā)酵罐C中的發(fā)酵過程是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),該環(huán)節(jié)直接影響產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量

D.由于黑曲霉發(fā)酵適宜溫度較高，因此發(fā)酵罐C需要不斷加熱將溫度維持在35℃

13>★★★（2024屆河北部分高中三模,23）廚余垃圾常見處理方式為微生物高溫堆肥處

理和干法厭氧發(fā)酵技術(shù)。圖1為高溫堆肥時翻堆頻率對廚余垃圾質(zhì)量影響的相關(guān)曲線，圖

2為干法厭氧發(fā)酵技術(shù)流程?；卮鹣?/p>

一不翻堆

-48h一次

200

424h一次

盤190。12h一次

烈

眼180

170

1234時間/d

翻堆頻率對廚余垃圾質(zhì)量的影響

（溫度為35七）

圖1

旋

干

法螺

厭

壓

氧擠振動離心自動

預(yù)處理

發(fā)

水

醉脫篩分脫水處理

廚余垃圾

干法厭氧發(fā)酵技術(shù)

圖2

(1)由圖1可推測高溫堆肥時所用主要菌種的代謝類型為，翻堆的意義在

于、。

⑵干法厭氧發(fā)酵過程中發(fā)酵罐需，以保證微生物能充分將廚余垃圾中的有機物分

解成CH4和C02,該過程產(chǎn)生的沼氣可作為能源物質(zhì)，沼渣可肥田，從能量流動的角度分析,

其意義是。

⑶與高溫堆肥相比，干法厭氧發(fā)酵技術(shù)中所用的菌種單一、性狀優(yōu)良，這些菌種可以從自然

界中篩選，也可以通過育種獲得。分析從垃圾處理站能篩選出所需目的菌的理由

是。獲得的目的菌可用平板劃線法純化，操

作劃線時要注意不要將最后一次的劃線。

⑷為檢測篩選出的目的菌的發(fā)酵效果，還需對接種目的菌后產(chǎn)生的沼渣進行C/N(碳/氮)值

的檢測，理論上，與發(fā)酵前相比，發(fā)酵后的C/N的值,原因

是。

第5部分生物技術(shù)與工程

第22章發(fā)酵工程

第1節(jié)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

五年高考

（2024湖北,1,2分）制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核

生物，常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（）

A.食用醋的酸味主要來源于乙酸

B.醋酸菌不適宜在無氧條件下生存

C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶

D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)

答案D

2八★（2024江蘇,14,2分）關(guān)于“利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜”的實驗，下列敘述正確的

是（）

A.制作泡菜的菜料不宜完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中

B.制作酸奶的牛奶須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再接種乳酸菌

C.發(fā)酵裝置需加滿菜料或牛奶并封裝，以抑制乳酸菌的無氧呼吸

D.控制好發(fā)酵時間，以避免過量乳酸影響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)

答案D

3次山（2022湖北,11,2分）關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯誤的是（）

A.在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣

B.白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程

C葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體

D.生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的都是酵母菌

答案C

三年模擬

4八★（2025屆福建名校聯(lián)盟質(zhì)檢,8）生物技術(shù)與人們的生活息息相關(guān)，在食品制造方面廣

泛應(yīng)用。下列有關(guān)說法錯誤的是（）

A.在泡菜的腌制過程中，為縮短制作時間，可在鹽水中加入少量陳泡菜液

B.與葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作過程需要消耗氧氣，且發(fā)酵溫度更低

C.利用玉米進行酒精發(fā)酵時，添加纖維素酶可以提高酒精的含量

D.制作腐乳時,酵母、曲霉和毛霉均參與了發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉

答案B

5達★（2025屆遼寧七校協(xié)作體開學(xué)考,10）早在《詩經(jīng)?鄴風(fēng)?谷風(fēng)》中就有“我有旨蓄，亦以

御冬”的記載?！爸夹睢本褪莾Σ氐拿牢妒称?，也就是腌制的泡菜等。下列有關(guān)敘述錯誤的是

（）

A.制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來進行發(fā)酵的

B.制作泡菜過程中,食鹽用量過高容易造成亞硝酸鹽含量增加

C.常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌，它們都是好氧細菌

D.腌制泡菜時可通過向壇蓋邊沿的水槽注水保持發(fā)酵所需環(huán)境

答案C

6達★★（2025屆湖南長沙一中階段檢測,9）霉豆腐渣的原料是加工豆腐或豆?jié){后剩下的

“副”產(chǎn)品——豆腐渣。采用傳統(tǒng)發(fā)酵的辦法，利用毛霉糖化淀粉和分解大豆蛋白的能力對

豆腐渣進行加工,大致過程如圖所示。下列說法正確的是（）

原料處理——將豆腐渣烘干至含有一定水分后冷卻

拌霉------將干凈的稻草覆蓋在豆腐渣上面

發(fā)酵------?

保存

A.將豆腐渣烘干的主要目的是滅菌

B.拌霉即接種，與家庭釀制葡萄酒一樣，都采用自然接種的方法

C.圖中“?”處的條件是密封無氧

D.在發(fā)酵過程中，豆腐渣中的蛋白質(zhì)被分解成甘油和氨基酸

答案B

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用畫

?考法微生物的分離和鑒定3、4、7、8、11、13

五年高考

1>*（2024湖南,6,2分）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是

（）

①灼燒接種環(huán)②冷卻接種環(huán)，拔出試管棉塞

握住棉塞上部

A.①②⑤⑥B.③④⑥⑦

C.①②⑦⑧D.①③④⑤

答案D

2.★★（2023遼寧,9,2分）細菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細菌形成的,

利用空氣微生物采樣器對某市人員密集型公共場所采樣并檢測細菌氣溶膠的濃度（菌落

數(shù)/n?）。下列敘述錯誤的是（）

A.采樣前需對空氣微生物采樣器進行無菌處理

B.細菌氣溶膠樣品恒溫培養(yǎng)時需將平板倒置

C.同一稀釋度下至少對3個平板計數(shù)并取平均值

D.稀釋涂布平板法檢測的細菌氣溶膠濃度比實際值高

答案D

3>★（2023河北,12,2分）為篩選能平衡腸道菌群和降解膽固醇的乳酸菌，下列相關(guān)實驗設(shè)

計錯誤的是（）

A.從酸奶和泡菜中采樣分離乳酸菌

B.平板倒置培養(yǎng)為篩選乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境

C.對目的菌株進行膽固醇降解能力的測定

D.檢測目的菌株對消化道環(huán)境的耐受力

答案B

4.★★（2023山東,15,2分）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)

B.平板涂布時涂布器使用前必須進行消毒

C.接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄

D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成月尿酶的微生物

答案D

5達★（2022湖北,5,2分）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正

確的是（）

A.動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行

B.微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.為防止蛋白質(zhì)變性,不能用高壓蒸汽滅菌法對牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基進行滅菌

D.可用高壓蒸汽滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌

答案D

6.★★★（2023重慶,9,3分）垃圾分類有利于變廢為寶，減少環(huán)境污染。如圖為分類后餐廚垃

圾資源化處理的流程設(shè)計。下列敘述錯誤的是（）

一添加木屑堆肥體一年

餐廚垃圾破碎、壓等冗渣〈一（好氧）質(zhì)

油水混合物~>X—沼氣

A.壓榨出的油水混合物可再加工，生產(chǎn)出多種產(chǎn)品

B.添加的木屑有利于堆肥體通氣,還可作為某些微生物的碳源

C.X中需要添加合適的菌種,才能產(chǎn)生沼氣

D.為保證堆肥體中微生物的活性，不宜對堆肥體進行翻動

答案D

7$★★新思維.水解圈不能作為判斷產(chǎn)酶能力唯一依據(jù)的原因（2024江西,17,12分）聚對

苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一種聚酯塑料，會造成環(huán)境污染。磷脂酶可催化PET降解。為

獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗了2種方法。回答下列問題：

⑴方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一種磷脂類物

質(zhì)）為唯一碳源制備培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外,該培養(yǎng)基中至

少還應(yīng)該有、、等營養(yǎng)物質(zhì)。

⑵方法2采用技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼

磷脂酶的基因外,該技術(shù)還需要、、等“分子工具”。

⑶除了上述2種方法之外，還可以通過技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能

夠高產(chǎn)磷脂酶的微生物。

⑷將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白腺液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂

粉和適量的卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物

產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板

制作的角度分析，其原因可能

是_______________________________________________________________

答案（1）選擇氮源水無機鹽（2）轉(zhuǎn)基因（或重組DNA或基因工程）限制酶

DNA連接酶載體（3）誘變育種（4）涂布可能會造成菌落大小不一，則水解圈直徑的大

小不同;且水解圈直徑的大小還可能與平板的厚薄和平整度等有關(guān)

8.★★★（2022廣東,21,12分）研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。

近期在“科學(xué)號”考察船對南中國?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附

近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學(xué)特性。

7

T

U

-

<-&

一)

齡

國

W

時間（天）

回答下列問題：

⑴研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品,28℃

厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物。為了獲得純種培養(yǎng)，除了稀釋涂布平

板法，還可采用法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以為碳源時生長狀況最

好。

⑵研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，

推測其原因可能是。（答一點即可）

⑶藻類細胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)

組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能

是。

⑷深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的

一般共性外，其特性可能還

有_______________________________________________________________

答案（1）高壓蒸汽滅菌平板劃線纖維素（2）培養(yǎng)條件與深海環(huán)境差異大;微生物不

可以在培養(yǎng)基中培養(yǎng)（或生存）;微生物只能在深海環(huán)境中生存;培養(yǎng)基沒有模擬到深海環(huán)

境;某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（以上答一點即可）（3）擬桿菌作

為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，促進碳

循環(huán)的順利進行（4）耐低溫、耐高壓

三年模擬

9達★（2025屆貴州部分學(xué)校聯(lián)考,15）圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，圖丙是接種

后培養(yǎng)的效果圖解，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

丙

A.甲、乙都可用于微生物的計數(shù),且計數(shù)結(jié)果比實際結(jié)果偏小

B.甲、乙都需要將菌種接種在固體培養(yǎng)基上,并可能觀察到單菌落

C.甲、乙培養(yǎng)使用后的培養(yǎng)基在丟棄前均需要進行滅菌處理,以免污染環(huán)境

D.丙所示結(jié)果只能由乙接種方法所得

答案A

^.★★★（2025屆湖南部分學(xué)校聯(lián)考,10）巴氏芽抱桿菌是一類具有較高月尿酶活性，能夠分

解尿素的細菌，能改善土壤肥力。研究人員從土壤樣品中分離該細菌的流程如圖所

示，①~⑤表示操作步驟。下列說法錯誤的是（）

適量富集培養(yǎng)9mL9mL

土樣無菌水無菌水無菌水

①②③④

A.步驟②富集培養(yǎng)時以尿素為唯一氮源

B.步驟③④采用了稀釋涂布平板法

C.步驟⑤接種時，接種環(huán)至少要灼燒5次

D.若可用于計數(shù)的平板菌落數(shù)平均為163個,則錐形瓶中菌液細菌數(shù)約為1.6x105個.mL"

答案D

!1.★★★（2025屆安徽多校聯(lián)考,14）兔子的盲腸發(fā)達,其中含有大量的微生物幫助兔子消

化,這可能是兔子能從富含纖維素的食物中獲得營養(yǎng)物質(zhì)的關(guān)鍵。為了分離出兔子盲腸中

分解纖維素能力最強的菌種，下列相關(guān)操作正確的是（）

A.為縮小選擇范圍可用只含纖維素粉的溶液淘汰部分菌種

B.在營養(yǎng)物質(zhì)充足的有氧環(huán)境中更有利于分離得到目標(biāo)菌種

C相同條件下可用無菌水模擬接種操作來判斷培養(yǎng)基是否符合無菌要求

D.在含有土豆汁的培養(yǎng)基中加入纖維素粉和剛果紅可制備鑒別培養(yǎng)基

答案D

12>★★★新思維?通過分析不同處理下ZEN降解率對選項進行推理分析（2025屆廣東多

校聯(lián)考,15）玉米赤霉烯酮（ZEN）是禾谷鐮刀菌的次生代謝物，感染禾谷鐮刀菌的飼料表現(xiàn)

發(fā)霉的特征。實驗小組篩選獲得了一株ZEN降解菌XJ-140,并檢測了菌株XJ-140的不同

組分及細胞上清液經(jīng)不同失活處理后對ZEN的降解率,實驗結(jié)果如表所示。下列敘述錯

誤的是（）

位置及處理方式ZEN降解率/%

未處理65

上清液

一蛋白酶處理36

細胞內(nèi)容物38

活菌體37

滅活菌體22

A.篩選ZEN降解菌應(yīng)從新鮮禾谷飼料中取樣

B.根據(jù)結(jié)果推測ZEN降解酶是一種分泌蛋白

C.該實驗的因變量是ZEN的降解率

D.活菌體細胞對ZEN降解酶具有黏附作用

答案A

”.★★★（2025屆江西重點高中聯(lián)考,17）煤化工企業(yè)產(chǎn)生的焦化廢水中的毗陡（C5H5N）具

有明顯的致癌、致畸和致突變作用，易在生物體內(nèi)富集，會對人體健康及生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生危害。

實驗人員從焦化廢水處理系統(tǒng)中分離出甲、乙兩種吐陡降解菌，采用平板培養(yǎng)法比較二者

降解此咤的能力?；卮鹣铝袉栴}：

⑴配制液體培養(yǎng)基I進行擴大培養(yǎng)，成分如表所示，將甲菌株、乙菌株分別接種在兩瓶液體

培養(yǎng)基I中培養(yǎng)。培養(yǎng)基中能為菌株的生長提供碳源的物質(zhì)是，為菌株的生

長提供氮源的物質(zhì)是。配制好的培養(yǎng)基要進行滅菌，對培養(yǎng)基滅菌常用的方

法是O

MgSO4NH4NO3此咤水

5g10g10g定容至1000mL

⑵配制不含NH4NO3（其他條件不變）的液體培養(yǎng)基n,然后在培養(yǎng)基I和培養(yǎng)基n中加入

一定量的，分別制成平板I、n,并在兩平板上打A、B兩孔（大小相同），如圖1所示。

在無菌條件下淅等量、等濃度的甲菌株菌液和乙菌株菌液分別接種到平板I的A和B

兩孔處，平板n也進行同樣的操作。在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，兩個平板的兩孔

處的降解圈大小如圖2所示。

（答出2點）。根據(jù)圖中所示實驗結(jié)果可知，治理焦化廢水中吐陡造成的污染應(yīng)選用的菌株

是。

⑶實驗人員采用顯微鏡直接計數(shù)法和稀釋涂布平板法分別對取自平板n中的甲細菌的數(shù)

量進行計數(shù)，發(fā)現(xiàn)測得的細菌數(shù)量前者大于后者，其原因

是。

答案（1）毗咤毗咤和NH4NO3濕熱滅菌法/高壓蒸汽滅菌法（2）瓊脂在添加了

NH4NO3的培養(yǎng)基中，甲菌株和乙菌株對此咤都有一定的降解能力，且甲菌株的降解能力大

于乙菌株的;在沒有添加NH4NO3的培養(yǎng)基中，甲菌株對此咤的降解能力有所下降,乙菌株

不能降解此咤甲菌株（3）顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計細菌總數(shù)，稀釋涂布平板法只統(tǒng)計活

菌數(shù)

14.（2025屆重慶南開中學(xué)期中,18）噬菌體生物擴增法是一種檢測樣本中有害菌數(shù)量的方

法，其原理是噬菌體能專一感染宿主細胞，進入宿主細胞的噬菌體DNA將不受殺病毒劑的

滅活,在裂解宿主細胞后繼續(xù)在相關(guān)平板上增殖形成噬菌斑?，F(xiàn)以該方法檢測某重度污染

水樣中大腸桿菌的數(shù)量，操作步驟如下：

①將一定濃度的T2噬菌體懸液0.1mL與0.1mL待測水樣混合，保溫約5min后,向懸液

中加入0.2mL殺病毒劑；

②隨后立即加入大量（1.6mL）無菌培養(yǎng)液；

③將步驟②所得培養(yǎng)液全部接種到長滿大腸桿菌的平板上,培養(yǎng)約24h;

④觀察并計數(shù)平板上出現(xiàn)的透明噬菌斑數(shù)量。

(EZZ)

保溫，加殺病毒劑,

接種到平板

II隨后立即培養(yǎng)24h

入大量無菌

出現(xiàn)噬菌斑

培養(yǎng)液

（1）T2噬菌體在增殖過程中，需要大腸桿菌提供的原料有

⑵步驟①中所有的T2噬菌體會略微過量，其目的是

殺病毒劑的處理時間對檢測結(jié)果會產(chǎn)生很大影響，如果處理時間過短，會使檢測結(jié)果

（選填“偏大”“偏小”或“不受影響”），為確定處理時間是否合理，可設(shè)置對照組,對照組的處理

為___________________________________________

⑶上述實驗進行3次重復(fù)后，在3個平板中發(fā)現(xiàn)噬菌斑的數(shù)量分別為58、55、55個，由此

推斷原待測樣品中的大腸桿菌濃度為。若步驟①中保溫時間過長，檢測結(jié)果

將（選填“偏大”“偏小”或“不受影響”）。

答案（1）脫氧核甘酸、氨基酸（2）保證所有大腸桿菌都被侵染偏大將待測水樣換成

無菌水，其余操作不變（3）560個/mL偏小

第3節(jié)發(fā)酵工程及其應(yīng)用

五年高考

1.*