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文檔簡介
植物學(xué)實驗指導(dǎo)
姚發(fā)興陳國慶主編
2008年2月
目錄
緒論...............................................................................1
第一部分植物學(xué)實驗基本技術(shù)
一、顯微鏡........................................................................3
二、臨時裝片法....................................................................8
三、徒手切片法....................................................................8
四、簡單的顯微化學(xué)測定............................................................9
五、滑走切片法...................................................................10
六、組織離析法...................................................................10
七、壓片法........................................................................11
八、涂布法........................................................................II
九、永久性玻片標本的制作.........................................................12
十、生物繪圖的要求與方法.........................................................13
十一、實驗材料的準備與保存.......................................................15
十二、浸制標本的制作.............................................................15
十三、種子植物標本的采集、制作和保存............................................16
十四、葉脈標本的制作.............................................................17
第二部分植物形態(tài)解剖學(xué)實驗
實驗一顯微鏡的構(gòu)造和使用.......................................................18
實驗二植物細胞的結(jié)構(gòu)與代謝產(chǎn)物...............................................19
實驗三植物細胞的有絲分裂和分生組織............................................24
實驗四植物的成熟組織...........................................................26
實驗五根的形態(tài)與結(jié)構(gòu)...........................................................32
實驗六莖的形態(tài)與結(jié)構(gòu)...........................................................37
實驗七葉的結(jié)構(gòu).................................................................43
實驗八花的形態(tài)結(jié)構(gòu)、花藥和胚囊的發(fā)育..........................................47
實驗九胚的發(fā)育、種子的形成和結(jié)構(gòu)..............................................52
實驗十果實的結(jié)構(gòu)與類型........................................................56
第三部分植物系統(tǒng)分類學(xué)實驗
實驗十一原核藻類(ProkaryoticAlgae)...................................................................................60
實驗十二真核藻類(EukaryoticAlgae).....................................................................................61
實驗十三真菌門(Eumycophyta).....................................................................................................64
實驗十四地衣門(Lichens)、苔群植物門(Bryophyta)..........................................................66
實驗十五蕨類植物門(Pteridophyta)...........................................................................................68
實驗十六裸子植物門(Gymnospermae)......................................................................................71
實驗十七木蘭亞綱(Magnoliidae)、金縷梅亞綱(Hamamelidae).........................................73
實驗十八石竹亞綱(Caryophyllidae)、五梗果亞綱(Dilleniidae).........................................75
實驗十九薔薇亞綱(Rosidae).......................................................................................................77
實驗二十菊亞綱(Asteridae)......................................................................................................81
實驗二H—單子葉植物綱(Monocotyledoneae)..........................................................................83
第四部分野外實習
第四部分野外實習...............................................................85
一、抱子植物野外實習.............................................................85
二、種子植物分類學(xué)野外實習.......................................................90
附錄............................................................................112
一、實驗藥劑的配制方法..........................................................112
二、參考文獻....................................................................114
2
-1.2-—1-
刖5
隨著生命科學(xué)的發(fā)展,植物學(xué)被作為主干基礎(chǔ)課列入了高等院校生命科學(xué)
各專業(yè)的教學(xué)計劃中,并且實驗課單獨作為一門課程開出。在傳統(tǒng)學(xué)科學(xué)時普
遍減少、實驗課時壓縮的背景下,為了提高教學(xué)水平,編寫反映出本學(xué)科更具
科學(xué)性、系統(tǒng)性、基礎(chǔ)性和實用性的實驗教材,是擺在每個高校植物學(xué)教師面
前的一項艱巨而又緊迫的任務(wù)。根據(jù)教學(xué)大綱的要求和課程設(shè)置,同時根據(jù)本
校實驗教學(xué)條件、實驗植物取材條件,在參閱相關(guān)文獻,學(xué)習兄弟院校的教學(xué)
經(jīng)驗和資料的基礎(chǔ)上,我們編寫了本實驗講義。教材建設(shè)是一項長期的工作,
由于編者水平有限,講義中錯漏之處在所難免,敬請有關(guān)專家、同行不吝賜教,
提出寶貴意見,以便修訂。
本書為我校生命科學(xué)學(xué)院生物科學(xué)專業(yè)植物學(xué)實驗指導(dǎo)書,同時可供其他
相關(guān)專業(yè)學(xué)生參考。書中引用了其他作者部分內(nèi)容,在此致以誠摯的謝意。
編者2008.2
3
緒論
一、實驗課的教學(xué)目的與意義
植物學(xué)實驗是生物科學(xué)專業(yè)學(xué)生首先要學(xué)習的實驗類專業(yè)必修課。學(xué)生應(yīng)掌握植物學(xué)(一)實驗的基本
理論、基本知識以及研究植物的一些基本方法和基本技能,如:普通光學(xué)顯微鏡的正確使用、植物制片、
徒手切片、顯微結(jié)構(gòu)觀察和記錄、生物繪圖等;并能綜合運用這些基本知識、方法和技能,去研究植物各
種器官的結(jié)構(gòu)、器官之間的聯(lián)系以及植物個體發(fā)育過程中器官的形態(tài)建成過程。
在植物學(xué)(二)的實驗教學(xué)中,學(xué)生應(yīng)掌握植物界各大類群的主要特征,了解它們在植物界中的地位
和演化規(guī)律,識別一些常見的與人類生產(chǎn)生活密切相關(guān)的抱子植物,并了解其形態(tài)結(jié)構(gòu)、生活習性、發(fā)育
過程。掌握種子植物分類演化方面重點科、屬、種的主要特征,熟悉植物檢索表的使用和編制,識別校園
植物,并能進行植物標本的采集、壓制和制作。
通過實驗,使學(xué)生加深對植物學(xué)(一)、植物學(xué)(二)課程理論知識的理解,建立結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)
的觀點、植物與環(huán)境相統(tǒng)一的觀點、系統(tǒng)與演化的觀點;提高實驗意識,培養(yǎng)科學(xué)興趣和探索精神,學(xué)會
采集、培養(yǎng)實驗材料和進行設(shè)計實驗。理論聯(lián)系實際,調(diào)查校園或某一地區(qū)的植物資源,培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新
精神和實踐能力。
二、實驗的進行程序和要求
1.預(yù)習學(xué)生在課前應(yīng)認真預(yù)習實驗指導(dǎo)以及教材有關(guān)章節(jié),必須對該次實驗的目的要求、實驗內(nèi)容、基
本原理和操作方法有一定的了解。
2.講解教師對該實驗內(nèi)容的安排及注意事項進行講解,讓學(xué)生有充分的時間按實驗指導(dǎo)的要求進行獨立
操作與觀察。
3.獨立操作與觀察除個別實驗分組進行外,一般由學(xué)生個人獨立進行操作和觀察。在實驗中要按實驗指
導(dǎo)認真操作,仔細觀察,作好記錄。
4.示教每次的實驗都備有示教內(nèi)容,其目的是幫助學(xué)生了解某些實驗中的難點,擴大在實驗課有限時間
內(nèi)獲得更多感性知識的機會。
5.作業(yè)實驗報告必須強調(diào)科學(xué)性,實事求是地記錄、分析、綜合。在實驗結(jié)束時呈交。學(xué)生應(yīng)認真閱讀
教師批改后的實驗報告,不斷提高實驗質(zhì)量。
6.小結(jié)實驗結(jié)束后,由師生共同小結(jié)本次實驗的主要收獲及今后應(yīng)注意的問題。
三、實驗規(guī)則和注意事項
1.實驗課應(yīng)遵守時間。
2.實驗前必須認真閱讀實驗指導(dǎo),明確本次實驗的目的要求、實驗原理和注意事項,熟悉實驗內(nèi)容、方
法和步驟。
3.上實驗課時必須攜帶實驗指導(dǎo)、實驗報告紙及繪圖文具等,按規(guī)定座位入坐。
4.實驗前,要認真檢查所用儀器、藥品是否完好、齊備,如有缺損應(yīng)及時向教師報告,自己不得隨意調(diào)
換標本、儀器等。沒有得到教師的允許,不能動用實驗室其它非本次實驗所用的儀器設(shè)備。
5.實驗時要遵守紀律。有問題舉手提問,嚴禁彼此談笑喧嘩,不準在實驗室吃食和會客。
6.實驗時要遵守實驗操作規(guī)程,嚴格按照教師的安排和實驗指導(dǎo)的要求進行。使用顯微鏡檢查非永久片
時,要特別小心。防止染料或試劑沾污鏡頭和鏡臺,不要用高級顯微鏡觀察非永久片。操作要正規(guī),觀察
要認真仔細,及時完成實驗報告。
7.要愛護儀器、標本和器材設(shè)備,注意節(jié)約實驗材料、藥品和水電。如有損壞器材應(yīng)立即報告,并主動
登記、說明情況。凡是有化學(xué)藥品的試劑和溶液瓶上,必須貼上標簽,注明名稱、成份、濃度、配制日期。
8.實驗結(jié)束后,應(yīng)清理實驗臺面,所有液體廢物、酸類、染料等,應(yīng)倒在廢物缸內(nèi),不能倒在水槽中。
認真清理好儀器、藥品及其他用品,放回原處。值日生要負責清掃地面,收拾實驗用品,處理垃圾,關(guān)好
水、電、門窗后再離開。
2
第一部分植物學(xué)實驗基本技術(shù)
一、顯微鏡
在一般的教學(xué)及科研工作中,廣為應(yīng)用的是光學(xué)顯微鏡,其中的復(fù)式顯微鏡,是研究植物細胞結(jié)構(gòu)、
組織特征和器官構(gòu)造的常用重要工具。因此,為了正確操作、妥善保管和維護顯微鏡,每個學(xué)生都必須了
解和掌握復(fù)式顯微鏡的結(jié)構(gòu)、使用和維護方法。
(-)顯微鏡的類型
1.光學(xué)顯微鏡
利用可見光作光源,用玻璃透鏡作為成像系統(tǒng)的顯微鏡稱為光學(xué)顯微鏡,可分為單式和復(fù)式顯微鏡兩
類。單式顯微鏡結(jié)構(gòu)簡單,由一個透鏡組成,如放大鏡,放大倍數(shù)在10倍以下。構(gòu)造稍復(fù)雜的單式顯微
鏡為解剖顯微鏡,也稱體視顯微鏡,是由幾個透鏡組成的,其放大倍數(shù)在200倍以下。放大鏡和解剖顯微
鏡放大的物像都是與實物方向一致的虛像,即直立的虛像。復(fù)式顯微鏡結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,至少由兩組以上透
鏡組成,放大倍數(shù)較高,其有效放大倍數(shù)可達1250倍,最高分辨力為0.2um。除一般實驗使用的普通顯
微鏡外,還有供研究用的暗視野顯微鏡、相差顯微鏡和熒光顯微鏡等。
2.電子顯微鏡
使用電子束作光源,以特殊的電極和磁極作透鏡來代替玻璃透鏡的一類顯微鏡。電子顯微鏡能分辨相
距0.2nm左右的物體,放大倍數(shù)可達80~120萬倍,其分辨力比光鏡大1000倍,是了解超微結(jié)構(gòu)的重要
精密儀器。
(-)復(fù)式顯微鏡的結(jié)構(gòu)
復(fù)式顯微鏡有單筒目鏡和雙筒目鏡(圖1-1)兩種類型。這兩種顯微鏡的基本構(gòu)造相同,都是山光學(xué)
部分和機械部分組成。
1.機械部分
⑴鏡座顯微鏡的底座,支持整個鏡體,使顯微鏡放置平穩(wěn)。
⑵鏡柱鏡座上面直立的短柱,支持鏡體上部的各部分。
⑶鏡臂彎曲如臂,連接鏡柱和目鏡筒,為取、放顯微鏡時執(zhí)手的部位。
(4)鏡筒顯微鏡上部圓形中空的長筒,其上端放置目鏡,下端連接物鏡轉(zhuǎn)換器,鏡筒的長度一般是160mm,
有的是170mm。鏡筒的作用是保護成像的光路和亮度。
⑸物鏡轉(zhuǎn)換器接于鏡筒下端的圓盤,盤上有3?4個螺旋圓孔,為安裝物鏡的部位。當旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器
時,物鏡即可固定在使用的位置上。
(6)載物臺放置玻片標本的平臺,中央有一圓孔,以通過光線。載物臺上裝有玻片推動器,當裝片用標
本片夾固定好后,調(diào)節(jié)縱、橫向移動手輪,裝片能向前后、左右移動。
⑺調(diào)焦裝置為了得到清晰的物像,必須利用調(diào)焦裝置調(diào)節(jié)物鏡與標本之間的距離,使其與物鏡的工作
距離相等,這種操作稱為調(diào)焦。調(diào)焦裝置位于鏡柱兩側(cè),有兩對齒輪,大的一對叫粗調(diào)焦螺旋,轉(zhuǎn)動時可
使載物臺上下升降,轉(zhuǎn)動一圈升降10mm。小的一對為細調(diào)焦螺旋,旋轉(zhuǎn)一圈可使載物臺升降0.1mm。
(8)聚光器調(diào)節(jié)螺旋位于鏡柱的左側(cè),旋轉(zhuǎn)它可使聚光器(或聚光鏡)上、下移動,借以調(diào)節(jié)光線。
3
圖1一1雙目復(fù)式顯微鏡的構(gòu)造
1目鏡2止緊螺釘3物鏡轉(zhuǎn)換器4物鏡5載物臺6聚光器7聚光器調(diào)節(jié)螺旋8調(diào)焦
螺旋9鏡座10亮度調(diào)節(jié)開關(guān)
插入圖片:賀學(xué)禮P3
2.光學(xué)部分
山成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成。前者包括物鏡和目鏡,后者包括電光源和聚光器。
(1)物鏡是決定顯微鏡質(zhì)量的最重要部件,安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上。每臺顯微鏡一般有3?4個放大倍數(shù)不
同的物鏡,即低倍物鏡(4X和10X)、高倍物鏡(40X)和油鏡(100X),鏡檢時可根據(jù)需要選擇。物鏡
可將被檢物體作第一次放大,其上一般標有放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑(N.A),即鏡口率。
顯微鏡的工作距離是指物鏡最下面透鏡的表面與蓋玻片(厚度為0.17?0.18mm)上表面之間的距離。
物鏡的放大倍數(shù)越高,它的工作距離越?。ū?T)。一般油鏡的工作距離僅為0.2mm,所以使用時要倍加
注意。
表1-1不同放大倍數(shù)物鏡的數(shù)值孔徑和工作距離
物鏡倍數(shù)10X20X40X100X
數(shù)值孔徑(N.A)0.250.500.651.25
工作距離(mm)6.52.00.60.2
⑵目鏡安裝在鏡筒上端,也叫接目鏡,通常由兩個透鏡組成。它的作用是將物鏡所成的像進一步放大。
目鏡上刻有放大倍數(shù),常用的目鏡有5X、10X、16X等,可根據(jù)需要選擇使用。
⑶光源早期的顯微鏡使用反光鏡將光線反射到聚光器上…現(xiàn)在生產(chǎn)的新型顯微鏡多采用電光源,為6V
10W的碘鴇燈。
⑷聚光器裝在載物臺下,由聚光鏡(幾個凸透鏡)和虹彩光圈(可變光欄)等組成,它可將平行光線
4
匯聚成束,集中在一點,以增強被檢物體的照明。使用高倍鏡時,視野范圍小,需上升聚光器,使用低倍
鏡時則相反。
⑸虹彩光圈裝在聚光器內(nèi),撥動光欄調(diào)節(jié)桿,可使光圈擴大或縮小,借以調(diào)節(jié)通光量。
(三)顯微鏡的成像原理
顯微鏡的目鏡和物鏡各由若干個透鏡組成,但可看成是一個凸透鏡。根據(jù)凸透鏡的成像原理,來自電
光源(或反光鏡)的平行光線向上進入聚光器,通過聚光器的光線會聚成束,穿過生物制片(制片要薄,
一般為8?lOum),進入物鏡,然后在目鏡的焦點平面形成了一個經(jīng)過第一次放大的倒置的實像,這一實
像經(jīng)過目鏡的二次放大,最后進入人的視野成像。因此,當我們觀察實驗標本時,所看到的最后的物像,
是經(jīng)過二次放大的、方向相反的倒置的虛像。
從成像的原理看,物鏡在成像過程中起主要作用。因此,物鏡質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度,
目鏡只不過是放大物鏡所成的像,而不能增加成像的清晰度。
(四)使用顯微鏡的主要方法和步驟
1.取鏡和放置
按固定編號從鏡盒(柜)中取出顯微鏡。取鏡時應(yīng)右手握住鏡臂,左手平托鏡座,保持鏡體直立,防
止目鏡從鏡筒中滑出。放鏡時動作要輕,一般應(yīng)放在座位的左側(cè),距桌邊約5?6cm處,以便觀察和防止
顯微鏡掉落。
2.對光
旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,先把低倍物鏡轉(zhuǎn)到中央,對準載物價上的通光孔,然后用左眼或雙眼從目鏡向下注
視,同時用手轉(zhuǎn)動反光鏡,使鏡面向著光源,此時在鏡筒內(nèi)就可以看到一個圓形的明亮視野。如果使用電
光源,應(yīng)接通電源,打開顯微鏡開關(guān),調(diào)節(jié)電位器手柄(亮度調(diào)節(jié)開關(guān)),使光亮合適并充滿整個視場。
此外,還可利用聚光器或虹彩光圈調(diào)節(jié)光強度,使視野內(nèi)的光線既均勻明亮又不刺眼。
3.雙目鏡筒間距的調(diào)節(jié)
用雙筒目鏡觀察時,有時會看到重像,有時只能用一個目鏡觀察,這是由于雙筒目鏡間距與觀察者的
瞳孔距不一致造成的。調(diào)節(jié)雙目鏡筒間距時,用10X物鏡觀察,先水平方向向外拉動目鏡筒,使兩目鏡的
中心距離與觀察者的瞳孔距一致,然后調(diào)節(jié)目鏡筒刻度值,使之和刻度盤示值相同。
如果使用轉(zhuǎn)軸雙目顯微鏡,則直接轉(zhuǎn)動目鏡筒,使兩目鏡的中心距離與觀察者的瞳孔距一致。以右眼
觀察到清晰的物像為準,調(diào)節(jié)左眼目鏡筒的視度圈,使之左右成像清晰一致。
4.低倍物鏡的使用
觀察任何標本,都必須先用低倍鏡,因為低倍鏡視野范圍大,容易發(fā)現(xiàn)目標和確定要觀察的部位。
(1)放置切片轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦螺旋,使載物臺降至最低位置,向外撥動標本片夾手柄,將玻片標本放在載
物臺匕用標本片夾固定,旋轉(zhuǎn)縱、橫向移動手輪,使玻片標本正對通光孔的中心。
(2)調(diào)整焦點將10X物鏡轉(zhuǎn)入光路,通過目鏡?邊觀察標本,一邊旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦螺旋,使載物臺緩慢上
升,直到看清物像為止,再稍微轉(zhuǎn)動細調(diào)焦螺旋,使物像更加清晰。有的顯微鏡帶有4X物鏡,使用時其
焦距與10X和40X物鏡不同,因此當由4X物鏡轉(zhuǎn)換為10X物鏡觀察制片時,需要重新聚焦。
(3)觀察焦點調(diào)好后,可根據(jù)需要移動玻片,把要觀察的部分移到視野正中心,找到物像后,還可根
5
據(jù)材料的厚薄、顏色、成像的反差強弱是否合適等再進行調(diào)節(jié)。如果視野太亮,可降低聚光器或縮小光圈
或減小亮度(亮度開關(guān)),反之則升高聚光器或開大光圈或提高亮度。
5.高倍物鏡的使用
在觀察較小的物體或微細結(jié)構(gòu)時,可以使用40X高倍物鏡。
(1)選好目標由于高倍物鏡只能把低倍視野中心的一小部分加以放大,因此,使用高倍物鏡前,應(yīng)先
在低倍鏡下選好目標,將其移至視野中央,然后轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,移開低倍鏡,小心換上高倍鏡。
(2)調(diào)整焦點正常情況下,當換上高倍物鏡后,只要略微調(diào)節(jié)細調(diào)焦螺旋(禁用粗調(diào)焦螺旋),就可
獲得清晰的物像。
(3)調(diào)節(jié)亮度換用高倍物鏡后,視野變小變暗,所以需要通過升高聚光器或開大光圈來調(diào)節(jié)視野亮度。
6.顯微鏡使用后的整理
觀察結(jié)束后,調(diào)節(jié)亮度開關(guān)(電位器手柄)回到最小值,關(guān)掉電源,拔下插頭。旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦螺旋,使
載物臺下降到最低位置,取下玻片,擦凈鏡體,罩上防塵罩,然后右手握住鏡臂,左手平托鏡座,按號放
回鏡箱(柜)中。
(五)放大率、鏡口率和視野寬度
L放大率的計算
顯微鏡的總放大率是由目鏡和物鏡原有放大倍數(shù)的乘積來表示的,例如目鏡為10X,物鏡為40X,
則顯微鏡的總放大率=10X40=400倍。如果目鏡的放大倍數(shù)過大,得到的放大虛像會很不清晰,所以一般
目鏡不宜過大。
2.鏡口率(數(shù)值孔徑)
被檢物體細微結(jié)構(gòu)的分辨率并不完全取決于放大倍數(shù),而主要是由鏡口率決定的。N.A表示鏡口率,
在物鏡鏡頭上常標有N.A數(shù)值,N.A的值越大,分辨能力越高。所謂分辨率是指分辨被檢物體細微結(jié)構(gòu)的
能力,即判別標本兩點之間最短距離的本領(lǐng)。因此,鏡口率越大,物鏡的價值越大,它是衡量顯微鏡質(zhì)量
的最主要依據(jù)。高級物鏡只有和優(yōu)良的聚光器配合使用,才能充分發(fā)揮顯微鏡的能力,因為物鏡分辨率受
聚光器鏡口率影響。物鏡有效鏡口率的計算公式如下:
物鏡的有效鏡口率=(物鏡鏡口率+聚光器鏡口率)/2
例如,鏡口率為0.65的物鏡,與鏡口率為0.45的聚光器配合使用,則物鏡的有效鏡口率就降低為0.55。
因此,在使用時要注意調(diào)節(jié),使兩者鏡口率相等。
3.視野寬度
目鏡光欄所圍繞的圓即視野寬度。視野寬度越大,觀察破片標本的面積就越大,則顯微鏡放大倍數(shù)越
小。所以,視野寬度與放大率成反比。因此從低倍物鏡轉(zhuǎn)換到高倍物鏡時,必須先把標本移到視野正中央,
否則標本的影像就會落到縮小的視野外面。
(六)解剖顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法
1.解剖顯微鏡的結(jié)構(gòu)
解剖顯微鏡的機械部分由底盤、載物臺、鏡柱、鏡臂、調(diào)焦手輪、物鏡變倍調(diào)節(jié)手輪等組成(圖1-2):
光學(xué)部分由變倍物鏡、半五角棱鏡、直角棱鏡和目鏡組成。被觀察物體經(jīng)變倍物鏡第一次放大后,成像于
6
視場光欄處,再由目鏡作第二次放大,半五角棱鏡可使光軸偏轉(zhuǎn)45°(便于觀察),直角棱鏡則使物像正
轉(zhuǎn),使目鏡焦平面上觀察到與物體方位一致的正像,這有利于在解剖鏡下的實際操作。直角棱鏡組可轉(zhuǎn)動,
以便調(diào)節(jié)瞳孔間距離,變焦系統(tǒng)為機械補償式結(jié)構(gòu),通過物鏡變倍手輪旋轉(zhuǎn),可選擇物鏡的放大倍率,并
能獲得穩(wěn)定的像面。
2.解剖顯微鏡的操作步驟
1.接通電源,根據(jù)需要選擇透射或反射照明系統(tǒng)。
2.將被觀察物體放在載物臺中心位置,并用片夾壓穩(wěn)。
3.扳動左右目鏡筒,使之與觀察者雙眼瞳距致。把物鏡調(diào)節(jié)到最低倍率(0.7X),然后慢慢轉(zhuǎn)動調(diào)焦
手輪,先使右目鏡看清物像,再調(diào)節(jié)左目鏡視度圈,即可得到與右目鏡同樣清晰的物像。
4.根據(jù)需要,可通過變倍調(diào)節(jié)手輪調(diào)節(jié)放大倍率。
賀學(xué)禮解剖顯微鏡的構(gòu)造P7
圖1-2解剖顯微鏡的構(gòu)造
1棱鏡照殼2目鏡3物鏡4壓簧片5載物臺6物鏡變倍調(diào)焦螺旋7調(diào)焦螺旋8反射照明
器9底盤10雙向開關(guān)
(七)使用顯微鏡的注意事項
L使用顯微鏡時;必須嚴格按照操作規(guī)程進行。
2.取鏡、放鏡動作要輕,防止震動,以免造成光學(xué)系統(tǒng)光軸的偏斜而影響觀察。
3.不得自行拆開顯微鏡零件,不要把目鏡從鏡筒中取出,否則會使灰塵落入鏡筒內(nèi),不易清除。
4.用高倍物鏡觀察標本時,必須先在低倍物鏡下看清物像并將其移至視野中心,換匕高倍物鏡后,只能調(diào)
節(jié)細調(diào)焦螺旋。
5.任何旋鈕轉(zhuǎn)動有困難時,絕不能用力過大,而應(yīng)查明原因,排除障礙。如果自己不能解決時,要向指導(dǎo)
教師說明,幫助解決。
6.用雙筒目鏡的光學(xué)顯微鏡觀察時,必須睜開雙眼,切勿緊閉一眼。
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7.標本必須加蓋蓋玻片,制作帶水或藥液的玻片標本時,必須兩面擦干再放載物臺上觀察。
8.保持顯微鏡的清潔,盡量避免灰塵落到鏡頭上,否則容易磨損鏡頭。防止試劑或溶液玷污顯微鏡,特別
是高倍物鏡很容易被染料或試劑玷污,如被玷污時,應(yīng)立即用擦鏡紙擦拭干凈。顯微鏡用過后,應(yīng)用清潔
棉布輕輕擦拭(不包括物鏡和目鏡鏡頭)。
9.要保護物鏡、目鏡和聚光器中的透鏡。光學(xué)玻璃比一-般玻璃的硬度小,易于損傷。擦拭光學(xué)透鏡時,只
能用專用的擦鏡紙,將擦鏡紙折疊為幾折(不少于四折),從一個方向輕輕擦拭鏡頭,每擦一次,擦鏡紙
就要折疊一次。然后繞著物鏡或目鏡的軸旋轉(zhuǎn)地輕輕擦拭。
二、臨時裝片法
臨時裝片法是用少量的新鮮植物材料?,放在載玻片上的水滴中,蓋上蓋玻片,做成臨時裝片進行顯微
鏡觀察。具體操作方法如下(圖1—3):
1.擦凈載玻片和蓋玻片用左手的拇指和食指夾住載玻片的邊緣,右手將紗布包住載玻片的上下兩面,反
復(fù)輕輕地擦拭。擦蓋玻片時,應(yīng)十分小心。先把紗布鋪在右手掌上,用左手拇指和食指夾住蓋玻片的邊緣,
將其放在紗布上,然后用右手拇指和食指從上下兩面隔著紗布,慢慢地輕擦。
2.載玻片上滴水用滴管在潔凈載玻片的中央滴一滴清水,挑選小而薄的材料,放在載玻片上的水滴中,
用解剖針或鐐子將材料展開。
3.加蓋玻片右手持鑲子,輕輕夾住蓋玻片,讓蓋玻片邊緣與材料左邊水滴的邊緣接觸,然后慢慢放下蓋
玻片。這樣,蓋玻片下的空氣被水擠掉,可以避免產(chǎn)生氣泡。如果水分過多,則材料和蓋玻片容易浮動,
影響觀察,可用吸水紙吸去多余水分。
如果所做的臨時切片需要染色,可在蓋玻片一側(cè)加一滴染色劑,另一側(cè)用吸水紙吸水,使染色劑擴散。
也可在加蓋玻片前加染色劑。
三、徒手切片法
徒手切片法,狹義上是指用刀把新鮮材料切成薄片的方法。廣義來講,只要不經(jīng)過任何處理而直接用
刀或徒手切片器切新鮮材料,統(tǒng)稱徒手切片法。
(一)材料的選擇
一般應(yīng)選取發(fā)育正常、有代表性、軟硬適度和便于手指夾持的材料,軟而薄的材料(有些葉片),可
用硬泡沫塑料(包裝用的聚苯乙烯)、胡蘿卜根或馬鈴薯塊莖等,夾住材料一起切片。有些葉片可卷成筒
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狀再切。
(-)徒手切片的方法和步驟
1.切片前,在小培養(yǎng)皿中盛以清水,準備毛筆、滴管、刀片和植物材料。
2.用解剖刀或硬刀片將植物材料截成適當?shù)亩螇K,斷面一般以不超過3?5mm)小段長度約2?3cm為宜。
3.切片時,用左手拇指、食指和中指夾住材料,拇指略低于食指,且材料要稍突出在手指之上,以免刀口
割傷手指,右手執(zhí)刀片,平放在左手的食指上,刀口向內(nèi),以均勻的動作,自左前方向右后方連續(xù)拉切。
注意是手臂用力而非手腕用力,材料要一次切下,整個切片過程中應(yīng)用清水濕潤材料和刀片;使之滑潤。
切下許多薄片后,用濕毛筆將它們移入盛水的培養(yǎng)皿中(圖1—4)。
圖1一4徒手切片法力口圖:葉創(chuàng)興P22
4.從培養(yǎng)皿中挑選薄的切片,放在載玻片上,制成臨時裝片觀察。
5.簡單染色根據(jù)需要和觀察目的不同,選擇不同的染劑進行染色。
(1)0.1%番紅水溶液染細胞核和木質(zhì)化、栓質(zhì)化的細胞壁,用以區(qū)分細胞核與質(zhì),木質(zhì)部與韌皮部。
(2)釘紅(1:10000)水溶液染胞間層,顯示厚角組織的特點。
(3)0.25%硫堇水溶液染細胞核和核仁,區(qū)分含木質(zhì)素和纖維素的細胞壁,但要用KNaHCOs水溶液封片。
四、簡單的顯微化學(xué)測定
顯微化學(xué)方法是應(yīng)用化學(xué)藥劑處理植物的組織細胞,使其中某些微量的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,從而產(chǎn)生
特殊的顏色反應(yīng),并通過顯微鏡來鑒定這些物質(zhì)的性質(zhì)及分布狀態(tài)的方法。
1.淀粉的鑒定淀粉是植物體中主要的貯藏物質(zhì),不同植物淀粉粒的形狀不同,用稀釋的碘-碘化鉀溶液
與淀粉作用,呈特殊的藍色反應(yīng)。所以常用碘液(見實驗藥劑配制)測定淀粉的存在,注意使用時濃度不
宜過高,否則難以看清淀粉粒輪紋及臍點。
2.蛋白質(zhì)(糊粉粒)的鑒定糊粉粒是植物細胞中貯藏蛋白質(zhì)的主要形式。測定蛋白質(zhì)常用的方法也是用
碘-碘化鉀溶液,當?shù)庖号c蛋白質(zhì)作用時,呈黃色反應(yīng)。
3.脂肪和油滴的鑒定測定脂肪的方法是利用蘇丹ni的酒精溶液或蘇丹w的丙酮溶液(見實驗藥劑配制),
染色后,呈橘紅色。但這不是專一的反應(yīng),蘇丹HI、蘇丹IV均能使樹脂、揮發(fā)油、角質(zhì)和栓質(zhì)染色。在鑒
定過程中,可稍加熱以促進反應(yīng)。
4.木質(zhì)素的測定用鹽酸和間苯三酚先后處理材料,是細胞壁木質(zhì)素成分的鑒別方法,根據(jù)顏色反應(yīng)的深
淺能顯示細胞壁中木質(zhì)化的程度。
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取新鮮植物材料的切片放在載玻片上,加40%鹽酸1?2滴,3?5min后,再加5%間苯三酚的酒精溶液
(見實驗藥劑配制),即發(fā)生櫻紅色或紫紅色的反應(yīng)。導(dǎo)管、纖維和石細胞含豐富的木質(zhì)素,所以顏色反應(yīng)
典型。
五、滑走切片法
滑走切片法是用滑走切片機對植物材料直接進行切片的方法,它適合于對一些較硬的材料,如木本莖、
根和枝條等的切片。
(-)材料處理
1.固定與排氣植物材料一般要用F.A.A.固定液固定兩天,因材料中常含有空氣,固定時往往漂浮,影響
藥液的滲入,所以可用抽氣機或簡易抽氣方法除去材料內(nèi)部的氣體。也可用水煮法,即先將材料煮沸20?
30min,取Hl投入冷水中30~40min后再煮沸,反復(fù)多次。
2.軟化滑走切片的材料比較堅硬,必須設(shè)法將其軟化。
(1)水煮法水煮既可以排除氣體,還可以軟化材料,木材一般要直接煮3?5h。
(2)甘油-酒精法將已排除空氣的材料,浸入比例為1:1的純甘油和70%酒精的軟化劑中,軟化時間視
不同材料而定,一至數(shù)周不等。
(3)氫氟酸法材料先煮2?3h,間歇反復(fù)進行,或者連續(xù)煮沸24h,冷卻后放入市.售氫氟酸(37%?40%)
與水各半的混合液中。盛裝氫氟酸必須用特制蠟質(zhì)或塑料容器。軟化操作最好在通風櫥內(nèi),-個月左右可
以軟化完全。要檢查材料是否軟化合適,必須先用流水充分洗滌后才可進行切割,并且要帶上橡皮手套。
(二)切片方法
1.把材料固定在夾物部的軟木塞中,材料上端應(yīng)露出軟木塞外0.5cm。利用厚度調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)好切片的厚度。
2.將夾刀部推到頂端,放松刀片夾螺旋,使切片刀平面向下,斜面向上,固定在刀架上。
3.把夾刀部拉向夾物裝置,使刀口接近材料,調(diào)節(jié)升降器,使材料切面稍接觸刀刃。
4.右手用均勻的力量拉動夾刀部,切片刀沿著滑行軌道由前端向后移動,經(jīng)過材料時就切下一塊,并粘在
刀口上。此忖用毛筆蘸水把切片取下放入有水的培養(yǎng)皿中,每切?片,都需用毛筆蘸水濕潤刀口和材料。
然后推回夾刀部,轉(zhuǎn)動厚度推進器,再拉動刀架。如此來回推拉,便可獲得許多厚度均勻的完整切片。
切片結(jié)束后,注意清理切片刀和切片機,以免生銹或布滿灰塵。
六、組織離析法
離析法的原理是用一些化學(xué)藥品配成離析液,使胞間層溶解,從而獲得分散的、單個的完整細胞,以
便觀察不同組織的細胞形態(tài)和特征。
(-)硬組織離析法
1.杰弗賴(Jeffrey)離析法即硝酸-鋸酸法。取枝條等硬組織,用刀切成1?2cm的小塊或小條,投入
試管中,加水煮沸數(shù)min,排除材料中的空氣,直至材料沉入管底。然后加入杰弗賴離析液(10%硝酸與
10%格酸等量混合),置于35匕溫箱中2?3d。在離析過程中,離析液由紅黃色漸變?yōu)榫G色,以至黑綠色,
離析作用逐漸減弱。如果材料仍未松軟,可以更換離析液。離析完畢,倒去離析液,用水沖洗4~5次,
每次5?lOmin,最后保存于70%酒精中備用。
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2.舒爾澤(Schultze)法即濃硝酸法。將堅硬的木材劈成碎塊,投入盛有濃硝酸(市售濃硝酸加1份蒸
儲水配制成)的試管中,材料需完全浸沒在硝酸溶液中,再加入少量氯化鉀晶體,在酒精燈上加熱以至沸
騰,直至材料變白為止。倒去離析液,清水沖洗4?5次,最后保存于70%酒精中。
(二)軟組織離析法
1.鹽酸法將植物莖段沿縱軸切成若干小片,浸入95%酒精和鹽酸(4:1)的混合液中1?2d,經(jīng)水洗,
換4?5次,移入10%氨水10?15min,再水洗,分離后的材料保存于70%酒精中。
2.氨水離析法將剛發(fā)芽的蠶豆或其它植物幼根,縱切成薄片,在濃氨水中浸泡24h,再移入10%氫氧化
鈉的50%酒精溶液中浸24h,然后用水清洗。為了清楚地觀察分生細胞形態(tài),制片時可進行染色。
染色方法:用1%碘液滴在材料上,然后再加一滴66.5%硫酸,材料變成深藍色。
染液配制:①取1.5g碘化鉀溶于100ml的蒸儲水中,全部溶解后,再加入Ig碘。②7份濃硫酸加上
3份蒸儲水。配制時將濃硫酸緩慢加入蒸饋水中,并用玻棒不斷攪動。
七、壓片法
壓片法是將植物的幼嫩器官如根尖、莖尖和幼葉壓碎在載玻片上的一種非切片制片法。這種方法比較
簡便,在觀察植物細胞的有絲分裂、植物細胞遺傳學(xué)等方面的研究中應(yīng)用非常普遍。
壓片法的基本步驟:取材一前處理一水解離析、固定染色一壓片。
制作植物根尖細胞有絲分裂的壓片,可取洋蔥或大蒜的鱗莖為實驗材料-,方法如下:
1.根尖的培養(yǎng)將洋蔥或3-5蒜瓣(竹托穿好)架在燒杯口上,杯中盛滿清水,使洋蔥頭或蒜瓣的下部
浸入水中,置溫暖處,注意每天換水,3?5d后即可長出嫩根。
2.材料的固定和離析用等量的濃鹽酸和95%酒精配成固定離析液。當洋蔥或蒜瓣嫩根長到2?5cm時一,即
可進行固定和離析細胞的處理。取根時間一般在上午10?11點,剪下根端的3mm左右,立即投入上述固
定離析液中,經(jīng)5?20min,取出放入清水中漂洗lOmin左右即可制片。也可經(jīng)過30樂50%酒精后將其保
存在70%酒精中。
3.壓片的制作取經(jīng)過處理的根尖一個,放在潔凈的載玻片上,用鎰子壓裂根尖,加2滴改良苯酚品紅液
(見實驗藥劑的配制方法)染色,放置幾分鐘后蓋上蓋玻片,為壓薄材料,可用鉛筆的橡皮頭在蓋片上輕
輕敲打。吸去多余的藥液后,即可鏡檢。如果染色效果不明顯,可將載玻片置酒精燈上微微加熱,以促進
染色。
除用改良苯酚品紅液染色外,還可用醫(yī)用紫藥水滴染(1滴紫藥水加5滴水稀釋),使用方便,效果很
好,能獲得染色清晰的染色體。
八、涂布法
涂布法是將花粉和花粉母細胞等疏松組織,均勻地涂布在載玻片上的一種制片法,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于花
粉粒的發(fā)育、染色體計數(shù)等的教學(xué)和科研中。方法步驟如下:
(-)取材與固定
制作花粉母細胞減數(shù)分裂全過程的玻片標本,必須采集幼嫩的呈綠色的花藥(淺綠色而透明者太嫩,
黃綠色或黃色者則已過時)。不同植物的花期不同,采集的時間也不一樣。大蔥的花期較長,掌握大蔥開
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花的時間規(guī)律,采集花序長度在1.5?3cm的幼嫩花序,根據(jù)經(jīng)驗,取大蔥花蕾長度在3?4mm的花藥材料,
均可用于實驗觀察。山于植物減數(shù)分裂也有晝夜的節(jié)律性,所以一般在清晨6?7時和下午4?5時取材為
宜。
一般說來,小型花朵采集后,可將小花甚至整個花序固定于卡諾固定液中(見實驗藥劑配制),大型
花朵可以只固定雄蕊的花藥,經(jīng)過2?24h后,逐級換入95%酒精和85蛤酉精浸洗,再轉(zhuǎn)入70%酒精中保存。
(二)染色與涂布
取已經(jīng)固定好的材料轉(zhuǎn)入50%酒精,經(jīng)蒸儲水清洗后,取出個花藥放在干凈的載玻片上,加?滴改
良苯酚品紅液,切去花藥的一端,并用小鏡子夾著花藥,將其切面放在載玻片上涂抹,再加一滴45%醋酸
使之軟化與分色,蓋上蓋玻片,用橡皮頭輕壓蓋片,使花粉母細胞均勻散開,即可觀察。
(三)永久封片的制作
選擇染色清晰而分散又好的涂片標本,放干凈處或加蓋的大培養(yǎng)皿中4?6h后,再用下列方法制成永
久封片。
制作過程:準備5套(編號①?⑤)直徑約12cm的培養(yǎng)皿,每套培養(yǎng)皿中放一根短玻棒,按順序倒
入①50%乙醇一②95%乙醇f③100%乙醇一④1/2無水乙醇+1/2叔丁醇一⑤叔丁醇。將蓋玻片朝下放入①
培養(yǎng)皿中,一端擱在玻棒上,使蓋玻片自然脫落,然后將蓋玻片或載玻片(看材料粘在哪個玻片上)依次
移入②?⑤,順序脫水、透明各2?3min,最后用濾紙吸去多余的叔丁醇,滴上加拿大樹膠封片。
九、永久性玻片標本的制作
植物材料除了制成臨時裝片進行觀察外,還可以根據(jù)需要制作成永久性玻片標本。
(一)簡易制作
在顯微鏡下挑選合適的徒手切片、滑行切片、離析材料以及表皮組織等,按下列步驟操作。
1.固定在盛有F.A.A.或F.P.A.固定液的染色皿中,將材料固定處理30min?24h,使其盡可能地保持原
有結(jié)構(gòu)和狀態(tài)。
2.染色任選下列種染色液(見實驗藥劑配制),對材料進行染色。
(1)0.5%?現(xiàn)番紅的50畀酒精,染色2?24h至材料染成深紅色,再用50%酒精洗去多余的浮色,如果顏
色太深,可用50%酸酒分色幾秒鐘,再用50%酒精浸洗。
(2)代氏蘇木精液染色1?3h,取出材料用清水浸洗多次直至呈藍色,再移入30%和50%酒精中。
3.脫水70%和85%酒精分別浸泡標本各1?3min,逐步減少標本中的水分。
4.復(fù)染有些材料需要復(fù)染,用0.1%固綠的95%酒精復(fù)染10?30s,注意晃動染色皿,促使染色均勻。
5.再脫水用無水乙醇(純酒精)浸洗兩次,每次1?2min。
6.透明材料在無水乙醇和二甲苯各半的混合液中浸泡1?2min,然后移入純二甲苯中3?5min。
7.封固用有二甲苯標記的專用毛筆(切忌有水),將鏡檢合格的材料轉(zhuǎn)到載玻片的中央,立即加?滴加
拿大樹膠,封上蓋玻片。在載玻片的右側(cè)貼上標簽,平置瓷盤中,放在30?40°C恒溫箱中烘干。
(-)石蠟切片法
以營養(yǎng)器官為例,簡介其操作過程如下:
1.取材與分割應(yīng)該選擇新鮮、老嫩適宜的有代表性的材料,切割成3?5mm長的小段(塊)。
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2.固定與排氣將切割好的材料,投入盛有F.A.A.或F.P.A.固定液的瓶中,固定液的用量,一般最少為
所固定材料總體積的20倍。蓋好瓶塞,用注射器針頭抽去組織中的空氣,或?qū)⒀b有材料和固定液的玻璃
瓶放在過濾瓶中進行抽氣,使固定劑迅速浸入材料。固定24h后即可轉(zhuǎn)入下一步驟或長期保存。
3.沖洗與脫水用50%或70%酒精浸泡即沖洗,其濃度應(yīng)與固定液相近,然后逐漸用高濃度的酒精替換,
即脫水:一70%酒精一85%酒精一95%酒精一無水乙靜。每次處理約1?3h。
4.透明用1/2二甲苯利1/2無水乙醇混合液處理2?3h,此時可加入少許番紅干粉,使材料著色,便于
包埋在石蠟中后容易看見材料。再轉(zhuǎn)入純二甲苯中,每次1?2h,共處理兩次。
5.浸蠟將已透明的材料和二甲苯一起倒入小杯中,然后輕輕地逐步倒入已熔化的石蠟,放置在35?37tt
的熔蠟箱中逐漸升溫至50°C,使石蠟飽和為止,約需1?2d。
6.包埋將浸蠟材料的小杯轉(zhuǎn)移到50?60°C的恒溫包埋箱中,倒掉含有二甲苯的石蠟(可回收利用),換
用已熔化的新鮮純蠟,使留在組織內(nèi)的二甲苯全部被石蠟替代。然后將材料和石蠟一起倒入小紙盒中,根
據(jù)需要把材料按一定間距調(diào)整好位置,使之凝固(夏天可放入涼水盆中),形成蠟塊。
7.修塊準備一些長方形硬木塊,將木塊一端先浸漬融化的廢蠟,然后將包埋好的蠟塊粘在木塊上(注意
材料的方向),冷凝后用單面刀片將材料四周多余的蠟修去,再用燒熱的解剖針燙平蠟塊與木塊的接合處,
使其連接牢固。
8.切片石蠟切片法一般使用旋轉(zhuǎn)切片機。切片時,裝上切片刀,再把蠟塊-木塊夾在固著裝置上,調(diào)整
固著裝置,使材料的切面與切片刀口平行。調(diào)整厚度標志,使所指刻度正適合需要厚度(一般8?14pm),
然后右手不停轉(zhuǎn)動切片機,左手拿毛筆輕輕托住蠟帶,便可得到連續(xù)切片。
9.粘片在干凈的載玻片上,用玻棒取一滴明膠粘貼劑(見實驗藥劑配制),使之涂勻,再在其上加幾滴
蒸鐳水。取鏡檢合格的蠟片,以光亮的一面朝下,平放于水面上,將載玻片置于35?45°C的燙板上,使蠟
片展平,用解剖針把材料擺好位置,去掉多余水分,置烘箱中4h以上。
10.染色制片高等植物根、莖、葉組織切片,常用番紅-固綠二重染色法,結(jié)果木質(zhì)化的細胞壁及細胞核
染成紅色,而具纖維素的細胞壁及細胞質(zhì)染成綠色。染色步驟如下:
(1)去蠟將粘有蠟片的載玻片放入純二甲苯中,使石蠟完全溶解,需lOmin左右。
(2)1/2二甲苯和1/2無水乙醇的混合液中過渡,約2min。
(3)下降至水一無水乙醇一95%酒精一85%酒精一70%酒精一50%酒精-3096酒精一蒸儲水。
(4)番紅染色0.5%?1%番紅水液中染色2?24h。
(5)自來水洗去多余的染液,必要時用酸酒分色。
(6)脫水f30%酒精一50%酒精f70%酒精,每步處理時間約30s。
余下步驟:一固綠復(fù)染一再脫水一透明一封固,基本同前面“簡易制作”。
十、生物繪圖的要求與方法
生物繪圖是形象描述生物(器官、組織或細胞)的外部形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)的一種重要的科學(xué)記錄方法。
它比文字記錄生動具體,可以幫助我們理解植物的結(jié)構(gòu)和特征,是學(xué)習植物學(xué)必須掌握的技能技巧。
1.科學(xué)性和準確性仔細觀察標本或切片,認真學(xué)習實驗指導(dǎo),正確理解各部特征,選擇典型部位,才能
在繪圖時保證形態(tài)結(jié)構(gòu)的準確性,并說明某一科學(xué)問題O
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2.合理布局根據(jù)實驗指導(dǎo)要求繪圖的數(shù)量和內(nèi)容,在繪圖紙上安排好各圖的位置,并留出書寫圖題與注
字的地方。
3.先繪草圖用HB鉛筆輕輕勾畫出圖形的輪廓,便于修改。
4.再繪物像用2H至3H硬鉛筆,描出與物體相吻合的線條。線條要一筆勾出,粗細均勻,光滑清晰,接
頭處無分叉和痕跡。
5.結(jié)構(gòu)的表示細胞壁用平行的雙線畫出,細胞質(zhì)、核用不同疏密的小點表示。一般用圓點襯陰,表示明
暗和顏色的深淺。點圓整齊,大小均勻,并根據(jù)明暗需要掌握點的疏密變化,不可用涂抹表示陰面。
6.使用鉛筆繪圖及注字只能用鉛筆,不要用其它筆如鋼筆或圓珠筆。
7.保持整潔用正楷書寫圖注,并用平行線引向圖的右側(cè),整齊一致。
8.注明圖題在圖的下方,寫出圖題、所用植物材料的名稱和部位。并注明放大倍數(shù),如10義40。
加圖:汪小凡P14繪圖實例
細胞壁
細胞核
一細胞質(zhì)
-液泡
2
14
細胞壁
細胞核
細胞質(zhì)
液泡
洋蔥雌葉表皮細胞圍30X10)
十一、實驗材料的準備與保存
1.風干標本用于形態(tài)觀察,如干果和各類種子、枝條和根系等,收集后貯存在玻璃瓶或帶有玻璃面的紙
盒中。有些莖、葉和花,可以壓制成臘葉標本。
2.浸制材料用于解剖觀察,各種花、果材料,應(yīng)隨采隨泡。一般用甲醛配制成5%福爾馬林溶液直接浸泡
材料,或用5(?或60%酒精浸漬。為防止材料變脆,可加入少量的甘油。
3.生活材料是最直觀、效果最好的實驗材料,除野生植物、111園種植外,還可建造溫室進行專門栽培。
十二、浸制標本的制作
浸制標本是將新鮮的植物材料,浸制保存在化學(xué)藥品配制的溶液里,使其保持原有的形態(tài)結(jié)構(gòu),可以
作為示范標本或陳列標本。浸制標本分防腐性浸漬和保色浸漬兩種。
1.普通浸制(防腐)標本的制作浸制液常用70%酒精或3%?5%的福爾馬林溶液,若浸制液濃度過大,容
易使標本皺縮變黑,而濃度過低時,則防腐效果不好。標本材料以新鮮無病、果實八分熟為宜,將材料洗
凈后再浸入藥液內(nèi)。
2.綠色標本的浸制方法保綠原理:葉綠體中主要含有葉綠素,葉綠素在酸的作用下可以失去鎂離子
(Mg"),變成黑褐色的“去鎂葉綠素”,也叫植物黑素。此時若用金屬銅離子(Ci?*)來取代鎂,則葉綠素
又可恢復(fù)綠色,這種綠色比原來的含鎂葉綠素穩(wěn)定,可以保存較長時間。
方法:在100ml的醋酸溶液(濃度50%)中,緩慢加入醋酸銅粉末10?20g,并用玻棒攪動。以此為
原液,加水稀釋3?4倍,然后加熱至70?80°C,將洗凈標本投入其中。注意不停地翻動標本,使之受熱
均勻,并全部接觸藥液。開始時,標本原有綠色逐漸褪去,但經(jīng)過10?20min后,綠色又恢復(fù),此時應(yīng)停
止加熱,取出標本,用水漂洗干凈,再放
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