專題10 生物技術(shù)與工程（分層練）解析版

專題10生物技術(shù)與工程1．我國制作泡菜歷史悠久?！吨叙佷洝分杏涊d：“泡鹽菜法，定要覆水壇。此壇有一外沿如暖帽式，四周內(nèi)可盛水；壇口覆一蓋，浸于水中，……則所泡之菜不得壞矣。泡菜之水，用花椒和鹽煮沸，加燒酒少許?！?。如有霉花，加燒酒少許。壇沿外水須隔日一換，勿令其干?！毕铝姓f法正確的是（

）A．“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的是徹底滅菌B．“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜C．“壇沿外水須隔日一換，勿令其干”以保證壇內(nèi)適宜濕度D．對泡菜汁中的乳酸菌計(jì)數(shù)，可用稀釋涂布平板法和平板劃線法【答案】B【解析】A、“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的包括提升泡菜味道、減少水中的溶氧量和消毒殺菌防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、“霉花”指的是泡菜壇內(nèi)表面的白膜，主要由酵母菌繁殖形成，而酵母菌往往來自蔬菜，B正確；C、“壇沿外水須隔日一換，勿令其干”以保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境，C錯(cuò)誤；D、分離泡菜汁中的乳酸菌，可用稀釋涂布平板法，不可用平板劃線法，D錯(cuò)誤。故選B2．有一些細(xì)菌能分泌脲酶將尿素水解為NH?和CO?，吸收后可作為自身含氮物質(zhì)合成的原料，該過程在生態(tài)系統(tǒng)的氮平衡中起到重要作用，通過配制尿素固體培養(yǎng)基可篩選出這類細(xì)菌。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．尿素是這類細(xì)菌利用的直接氮源B．分泌脲酶的細(xì)菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于次級生產(chǎn)者C．配制尿素固體培養(yǎng)基時(shí)要用無菌水，不能用蒸餾水D．以尿素為唯一氮源的液體培養(yǎng)基也能篩選出分泌脲酶的細(xì)菌【答案】B【解析】A、細(xì)菌能分泌的脲酶將尿素水解為NH3和CO2，吸收后可作為自身含氮物質(zhì)合成的原料，說明這類細(xì)菌利用的直接氮源是NH3，A錯(cuò)誤；B、分泌脲酶的細(xì)菌屬于分解者，消費(fèi)者和分解者都是次級生產(chǎn)者，B正確；C、配制尿素固體培養(yǎng)基后需要滅菌處理，配制尿素固體培養(yǎng)基時(shí)可以用蒸餾水，C錯(cuò)誤；D、使用固體培養(yǎng)基的原因是固體培養(yǎng)基上細(xì)菌分裂產(chǎn)生的子代個(gè)體不易分散，從而形成菌落，D錯(cuò)誤。故選B。3．目前七葉一枝花屬瀕危名貴中藥材，科學(xué)家嘗試應(yīng)用生物技術(shù)繁殖和保存七葉一枝花資源，并利用植物細(xì)胞工程獲取其有效成分。下列敘述正確的是（

）A．七葉一枝花不同細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的新個(gè)體基因型都相同B．將七葉一枝花莖尖或根尖組織經(jīng)滅菌、脫分化、再分化可獲得脫毒苗C．利用植物細(xì)胞工程獲取其有效成分過程中使用的是液體培養(yǎng)基D．保護(hù)野生七葉一枝花最佳的選擇是將其遷移到植物園【答案】C【解析】A、同一植株的花粉細(xì)胞與體細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的新個(gè)體基因型不同，A錯(cuò)誤；B、莖尖或根尖病毒少或無病毒，因而作為外植體經(jīng)過脫分化、再分化可獲得脫毒苗，但不能對植物材料進(jìn)行滅菌處理，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞產(chǎn)物的工口化生產(chǎn)是從人工培養(yǎng)的愈傷組織細(xì)胞中提取某種成分，該過程使用的是液體培養(yǎng)基，C正確；D、保護(hù)野生七葉一枝花最佳的選擇是就地保護(hù)，而將七葉一枝花遷移到植物園屬于遷地保護(hù)，D錯(cuò)誤。故選C。4．某些病毒感染會嚴(yán)重影響葡萄的產(chǎn)量和品質(zhì)。某科研團(tuán)隊(duì)采用脫毒技術(shù)快速繁殖“陽光玫瑰”葡萄品種，具體流程如下圖所示，其中①、②為植物組織培養(yǎng)過程。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．圖中的X可指試管苗的莖尖B．推測熱處理的基本原理是植物細(xì)胞比病毒更耐高溫C．過程①、②所用的MS培養(yǎng)基無需另外添加植物激素D．可通過PCR、抗原-抗體雜交等方法對再生植株進(jìn)行病毒檢測【答案】C【解析】A、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，A正確；B、推測熱處理的基本原理是植物細(xì)胞比病毒更耐高溫，處理后植物細(xì)胞處于生活狀態(tài)，B正確；C、過程①、②所用的MS培養(yǎng)基需要添加生長素、細(xì)胞分裂素等植物激素，C錯(cuò)誤；D、可通過PCR技術(shù)檢測病毒的核酸，利用抗原-抗體雜交等方法檢測病毒的蛋白質(zhì)，進(jìn)而對再生植株進(jìn)行病毒檢測，D正確。故選C。5．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需在培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，還需添加瓊脂以便于細(xì)胞貼壁生長C．植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞都可以懸浮在培養(yǎng)液中生長D．植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得植物在生長和生存過程中必需的次生代謝物【答案】C【解析】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需在培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，不需要添加瓊脂，需要用液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞大多貼壁，但癌細(xì)胞可以懸浮生長，C正確；D、植物在生長和生存過程中必需的是初生代謝物，植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是通過大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)，以獲得人類所需的細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物，D錯(cuò)誤。故選C。6．為了更好的研究新冠病毒感染機(jī)制，我國科學(xué)家構(gòu)建了能表達(dá)新冠病毒受體ACE2的轉(zhuǎn)基因模型小鼠，具體過程如下圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是（

）A．ACE2基因需要與相應(yīng)載體連接才能成功導(dǎo)入到小鼠細(xì)胞中B．吸附于基質(zhì)表面進(jìn)行增殖的小鼠細(xì)胞只能形成單層細(xì)胞C．對小鼠體內(nèi)早期胚胎發(fā)育過程及特點(diǎn)進(jìn)行研究有助于確定移植時(shí)期D．為獲得更多轉(zhuǎn)基因小鼠需要對代孕雌鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理【答案】D【解析】A、基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟。ACE2基因需要與相應(yīng)載體連接才能成功導(dǎo)入到小鼠細(xì)胞中，A正確；B、由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞，因此吸附于基質(zhì)表面進(jìn)行增殖的小鼠細(xì)胞只能形成單層細(xì)胞，B正確；C、對小鼠體內(nèi)早期胚胎發(fā)育過程及特點(diǎn)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)桑椹胚和囊胚期的細(xì)胞具備發(fā)育成完整個(gè)體的能力，該時(shí)期是胚胎移植的最佳時(shí)期，C正確；D、為獲得更多轉(zhuǎn)基因小鼠需要對供體雌鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理，而不是代孕雌鼠，D錯(cuò)誤。故選D。7．如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．制備單克隆抗體時(shí)可采用PEG融合法、電融合法和離心法誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原C．同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞D．利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞【答案】C【解析】A、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒），A正確；B、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測，雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合，B正確；C、同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，一種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，D正確。故選C。8．我國科學(xué)家將體外培養(yǎng)的獼猴胎兒成纖維細(xì)胞注入到去核卵母細(xì)胞中，誘導(dǎo)細(xì)胞融合，然后將激活形成的重組胚胎移植到受體猴體內(nèi)，發(fā)育產(chǎn)生了克隆猴“中中”和“華華”?？茖W(xué)家在克隆猴的過程中注射了組蛋白去甲基化酶KDM4d，并同時(shí)使用了此前科學(xué)家在其它哺乳動(dòng)物中使用的組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA，大大優(yōu)化了克隆方法，最終獲得靈長類動(dòng)物克隆的首次成功。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．融合細(xì)胞中的線粒體來自兩個(gè)不同親本B．去除染色體―紡錘體復(fù)合物可獲得去核卵母細(xì)胞C．表觀遺傳限制了獼猴成纖維細(xì)胞核全能性的表達(dá)D．克隆猴技術(shù)可用于發(fā)展生殖性克隆人【答案】D【解析】A、融合細(xì)胞是由成纖維細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞誘導(dǎo)形成，則融合細(xì)胞中的線粒體來自兩個(gè)不同親本，A正確；B、將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到中期Ⅱ后進(jìn)行去核操作，“去核”就是去除卵母細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；C、科學(xué)家在重組胚胎中注射了組蛋白去甲基化酶KDM4d和組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA，抑制了表觀遺傳，從而獲得了克隆猴，由此可見，表觀遺傳限制了獼猴成纖維細(xì)胞核全能性的表達(dá)，C正確；D、在克隆人的問題上，中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），D錯(cuò)誤。故選D。9．2017年世界上首例體細(xì)胞克隆猴在我國誕生，分別叫“中中”和“華華”，這一成功轟動(dòng)了全世界。下圖是克隆“中中”的相關(guān)示意圖。下列敘述正確的是（

）A．卵子b去核通常是用顯微操作法去除核膜包圍的細(xì)胞核B．重組細(xì)胞c需要物理或化學(xué)方法激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程C．代孕猴d對早期胚胎不發(fā)生免疫排斥，為胚胎收集提供了可能D．克隆猴“中中”e的培育采用了胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)【答案】B【解析】A、卵子b為減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細(xì)胞，去核通常是用顯微操作法去除紡錘體--染色體復(fù)合物，包括第一極體，A錯(cuò)誤；B、去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞融合成重組細(xì)胞c，需要物理或化學(xué)方法激活，才能使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程，B正確；C、受體對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體的存活提供了可能，是胚胎移植的理論基礎(chǔ)，即代孕猴d對早期胚胎不發(fā)生免疫排斥，因而可以代孕，C錯(cuò)誤；D、克隆猴“中中”e的培育采用了體細(xì)胞核移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選B。10．隨著生物技術(shù)的進(jìn)步，相關(guān)成果不斷涌現(xiàn)，人們對它的安全性、與倫理道德碰撞而帶來的困惑和挑戰(zhàn)也與日俱增，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)可減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期B．試管嬰兒技術(shù)和“設(shè)計(jì)試管嬰兒”都需要對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷C．我國禁止生殖性克隆，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)D．生物武器致病能力強(qiáng)，我國反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備擴(kuò)散【答案】B【解析】A、轉(zhuǎn)基因技術(shù)已被用來減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期，屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用，A正確；B、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”需要對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，試管嬰兒技術(shù)不需要，B錯(cuò)誤；C、我國禁止生殖性克隆，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，C正確；D、生物武器致病能力強(qiáng)，我國反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備擴(kuò)散，D正確。故選B。11．生長激素是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)及生物實(shí)驗(yàn)中常用的重要物質(zhì)，最初生長激素是從牛和豬腦垂體中提取出來的，但副作用過多。而化學(xué)合成的方法效率較低，沒有實(shí)用價(jià)值，因此，采用基因工程方法大規(guī)模生產(chǎn)人生長激素是滿足臨床大量需求的重要手段。該過程所用的質(zhì)粒A與含生長激素基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）（限制性核酸內(nèi)切酶BamHl、BclI、Sau3AI、HindⅢ，它們識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT）A．圖1的質(zhì)粒與目的基因結(jié)合后不可直接導(dǎo)入受體細(xì)胞B．BamHI酶和BclI酶切的DNA末端連接，連接部位用酶Sau3AI一定能用切開C．用Sau3AI切圖1所示的質(zhì)粒A得到DNA片段對RNA聚合酶有一定的親和力D．生長激素基因也可以嵌入羊基因組的任何位置，以得到轉(zhuǎn)基因羊并對生長激素進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)【答案】D【解析】A、圖1的質(zhì)粒與目的基因結(jié)合后不可直接導(dǎo)入受體細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選，A正確；B、BamHl的酶切位點(diǎn)是G↓GATCC，BclⅠ的酶切位點(diǎn)是T↓GATCA，Sau3AI的酶切位點(diǎn)是↓GATC，BamHI酶和BclI酶切的DNA末端連接后，一定含有↓GATC切點(diǎn)，連接部位用酶Sau3AI一定能用切開，B正確；C、用Sau3AI切圖1所示的質(zhì)粒A得到DNA片段中可能含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)，對RNA聚合酶有一定的親和力，C正確；D、基因表達(dá)具有選擇性，如將生長激素基因嵌入羊基因組的任何位置，不一定在哪些細(xì)胞能表達(dá)，也不利于生長激素的收集，D錯(cuò)誤。故選D。12．鐮刀形細(xì)胞貧血癥是一種單基因遺傳病，由正常血紅蛋白基因(HbA)

突變?yōu)殓牭缎渭?xì)胞貧血癥基因(Hbs)

引起，HbA和Hbs的某片段如圖甲。對胎兒基因檢測的主要原理是：MstⅡ限制酶處理擴(kuò)增后的DNA;

加熱使酶切片段解旋，用熒光標(biāo)記的CTGACTCCT序列與其雜交；凝膠電泳分離。圖乙是凝膠電泳后熒光出現(xiàn)的三種可能性下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．提取胎兒DNA樣品后，擴(kuò)增DNA

需要添加特定的引物B．用MstⅡI限制酶處理DNA不充分，可能把正常人誤判為攜帶者C．熒光標(biāo)記序列越長，圖乙-c中兩個(gè)DNA條帶間的距離越大D．若某胎兒檢測結(jié)果為圖乙-b，則該胎兒為鐮刀形細(xì)胞貧血癥患者【答案】C【解析】A、引物的作用是作為DNA復(fù)制開始時(shí)DNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，在細(xì)胞外的條件下，只有通過引物，DNA才可以開始進(jìn)行復(fù)制，因此提取胎兒DNA樣品后，擴(kuò)增DNA需要添加特定的引物，A正確；B、據(jù)圖可知，正常血紅蛋白基因(HbA)中含有MstⅡI限制酶的酶切位點(diǎn)，而貧血癥基因(Hbs)中沒有，用MstⅡI限制酶處理DNA不充分，正常血紅蛋白基因(HbA)中中間位置可能沒有被切割，結(jié)果可能與貧血癥基因(Hbs)結(jié)果一樣，因此可能把正常人誤判為攜帶者，B正確；C、凝膠電泳中，DNA分子量越大跑得越慢，因此圖乙-c中兩個(gè)DNA條帶間的距離與切割后DNA分子量的大小有關(guān)，與熒光標(biāo)記序列長短無關(guān)，C錯(cuò)誤；D、據(jù)圖可知，出現(xiàn)圖乙-aDNA條帶表示含有正常血紅蛋白基因(HbA)

，出現(xiàn)圖乙-bDNA條帶表示含有貧血癥基因(Hbs)

，出現(xiàn)圖乙-cDNA條帶表示含有貧血癥基因(Hbs)

和正常血紅蛋白基因(HbA)

，因此若某胎兒檢測結(jié)果為圖乙-b，則該胎兒為鐮刀形細(xì)胞貧血癥患者，D正確。故選C。13.下列關(guān)于物質(zhì)提取、純化原理的敘述，不正確的是（

）A．凝膠色譜法分離果膠酶的原理是蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量不同，在色譜柱中的移動(dòng)速度不同B．使用透析法可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)C．電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及樣品分子大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離D．離心法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是密度不同的物質(zhì)離心時(shí)沉降速度不同【答案】B【解析】A、凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動(dòng)的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離，A正確；B、使用透析法可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)和數(shù)量以及樣品分子大小不同，產(chǎn)生的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離，還可以對待測樣品進(jìn)行鑒定，C正確；D、離心法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是不同密度的分子離心時(shí)沉降速度不同，密度越大，沉降速度越大，越容易沉降到試管底部，從而能分離不同物質(zhì)，D正確。故選B。綜合題14．如圖A所示，質(zhì)粒上含有X抗生素抗性基因（）和Y抗生素抗性基因（），其中內(nèi)部含有限制酶KasI的識別序列，內(nèi)部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV的識別序列，五種酶的識別序列如表格所示（表示切割位點(diǎn)），且這些識別序列在整個(gè)質(zhì)粒上均僅有一處，目的基因內(nèi)部不存在這些識別序列。(1)若要將圖B所示的目的基因直接插入到內(nèi)形成重組質(zhì)粒，則質(zhì)粒需用限制酶___________切開。將切開的質(zhì)粒溶液與目的基因溶液混合后連接，一般先用___________處理大腸桿菌后，再對其進(jìn)行導(dǎo)入操作。名稱說別序列及切期位點(diǎn)名稱識別序列及規(guī)割位點(diǎn)FseIHpaIIKasINaeINgoMIV(2)取導(dǎo)入處理過的大腸桿菌接種到含有抗生素___________（填“X”或“Y”）的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基___________（填“需要”或“不需要”）加入瓊脂。從獲得的純培養(yǎng)物中取部分菌體接種到含有抗生素___________（填“X”或“Y”）的培養(yǎng)基中，若無菌落生長，可初步確定獲得的培養(yǎng)物符合要求；若有菌落生長，原因是___________。(3)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插人目的基因的重組質(zhì)粒（圖C所示），擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖C所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，若選擇引物___________進(jìn)行PCR，且擴(kuò)增出了450bp片段，則說明實(shí)驗(yàn)成功；若選擇引物甲、乙進(jìn)行PCR，且擴(kuò)增出了400bp片段，原因是___________?！敬鸢浮?1)NgoMIV(2)X需要Y質(zhì)粒重新環(huán)化或質(zhì)粒間發(fā)生自身環(huán)化，使得大腸桿菌同時(shí)具備基因XR和YR(3)甲和丙目的基因反向連接【解析】（1）由目的基因形成的黏性末端可知，只有NgoMIV酶切后的黏性末端為5'-GGCC，可以與目的基因形成的黏性末端互補(bǔ)配對，因此若要將圖B所示的目的基因直接插入到Y(jié)R內(nèi)形成重組質(zhì)粒，則質(zhì)粒需用限制酶NgoMIV切開，將切開的質(zhì)粒溶液與目的基因溶液混合后連接，一般先用Ca2+處理大腸桿菌后，使其處于感受態(tài)，再對其進(jìn)行導(dǎo)入操作。（2）質(zhì)粒中的X抗生素抗性基因未破壞，Y抗生素抗性基因（YR）由于插入目的基因而破壞，因此取導(dǎo)入處理過的大腸桿菌接種到含有抗生素X的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，為獲得純種，應(yīng)在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，因此培養(yǎng)基需要加入瓊脂。Y抗生素抗性基因（YR）由于插入目的基因而破壞，因此取部分菌體接種到含有抗生素Y的培養(yǎng)基中，若無菌落生長，可初步確定獲得的培養(yǎng)物符合要求；若有菌落生長，說明質(zhì)粒重新環(huán)化或質(zhì)粒間發(fā)生自身環(huán)化，使得大腸桿菌同時(shí)具備基因XR和YR。（3）由圖C可知，若要擴(kuò)增出450bp片段，且含有目的基因，只能選擇引物甲和丙進(jìn)行PCR。由“擴(kuò)增出了400bp片段”，即引物甲右側(cè)部分+目的基因，可能是目的基因反向連接，如下圖：1．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）營養(yǎng)缺陷型菌株是突變后某些酶被破壞，導(dǎo)致代謝過程中某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。下圖是科研人員利用影印法（用無菌絨布輕蓋在已長好菌落的原培養(yǎng)基上，然后不轉(zhuǎn)動(dòng)任何角度，“復(fù)印”至新的培養(yǎng)基上）初檢某種氨基酸缺陷型菌株的過程。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．①過程接種方法為稀釋涂布平板法，接種后的培養(yǎng)皿不能立即進(jìn)行倒置培養(yǎng)B．進(jìn)行②過程的順序是先將絲絨布“復(fù)印”至完全培養(yǎng)基上，再“復(fù)印”至基本培養(yǎng)基上C．氨基酸缺陷型菌株應(yīng)從基本培養(yǎng)基上沒有、完全培養(yǎng)基上對應(yīng)位置有的菌落中挑選D．可用接種環(huán)從斜面中取出菌種，振蕩培養(yǎng)并誘變處理【答案】B【解析】A、據(jù)圖分析，接種后的菌落均勻分布，據(jù)此推測該過程接種的方法為稀釋涂布平板法，接種后的培養(yǎng)皿不能立即進(jìn)行倒置培養(yǎng)，A正確；B、進(jìn)行②過程培養(yǎng)時(shí)，為了防止將完全培養(yǎng)基中特定營養(yǎng)成分帶入基本培養(yǎng)基，應(yīng)先將絲絨布先轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上再“復(fù)印”至完全培養(yǎng)基上，B錯(cuò)誤；C、在基本培養(yǎng)基中氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，比較基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落可知氨基酸缺陷型菌株應(yīng)從基本培養(yǎng)基上沒有、完全培養(yǎng)基上對應(yīng)位置有的菌落中挑選，C正確；D、可用接種環(huán)從斜面中取出菌種，放在搖床上振蕩培養(yǎng)并進(jìn)行誘變處理，獲得營養(yǎng)缺陷型菌株，D正確。故選B。2．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（

）A．某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板，該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會比實(shí)際活菌數(shù)目少B．3號試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C．5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個(gè)D．該實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作對照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用【答案】C【解析】A、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，故某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要低，A正確；B、據(jù)圖可知，將10g土樣加到90mL無菌水中定容至100mL后，此時(shí)土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍，B正確；C、5號試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個(gè)，C錯(cuò)誤；D、要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用，需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基在相同培養(yǎng)條件下作對照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說明選擇培養(yǎng)基起到了選擇作用，D正確。故選C。3．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和發(fā)酵工程的相關(guān)敘述正確的是（）A．減少菌種的傳代次數(shù)能減小菌種發(fā)生自發(fā)突變的概率B．在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一定要通入無菌空氣C．監(jiān)控發(fā)酵過程的營養(yǎng)供給、氧氣、溫度、pH等是發(fā)酵工程的前提條件D．將單菌落接種到培養(yǎng)基上形成的菌落均是由一個(gè)細(xì)胞分裂形成的細(xì)胞集團(tuán)【答案】A【解析】A、減少菌種的傳代次數(shù)，可減少菌種發(fā)生自發(fā)突變的概率，防止菌種退化，有利于保持菌種優(yōu)良性狀，A正確；B、是否往培養(yǎng)基通入無菌空氣要看培養(yǎng)的微生物是否為好氧菌，例如培養(yǎng)乳酸菌，就無需通入無菌空氣，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵過程中要嚴(yán)格控制營養(yǎng)供給、溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件，需要隨時(shí)檢測影響發(fā)酵過程的各種環(huán)境條件并予以控制，這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，C錯(cuò)誤；D、將單菌落接種到培養(yǎng)基上形成的菌落一般是由一個(gè)細(xì)胞分裂形成的細(xì)胞集團(tuán)，若培養(yǎng)基、接種環(huán)受到污染，就不是由一個(gè)細(xì)胞分裂形成的細(xì)胞集團(tuán)，D錯(cuò)誤。故選A。4．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）草莓是無性繁殖的作物，它感染的病毒很容易傳播給后代。病毒在草莓體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差。下圖是育種工作者選育高品質(zhì)草莓的流程圖。有關(guān)說法正確的是（）A．通常采用95%的酒精和5%次氯酸鈉溶液對甲進(jìn)行滅菌處理B．甲常采用莖尖為外植體，原因是其幾乎未感染病毒C．①、③兩個(gè)過程都不需要光照，但需要生長素和細(xì)胞分裂素D．判斷兩種選育方法的效果時(shí)，都需要通過病毒接種實(shí)驗(yàn)【答案】B【解析】A、對外植體的消毒通常采用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和5%次氯酸鈉溶液，消毒后需用無菌水進(jìn)行沖洗，A錯(cuò)誤；B、方法一為植物組織培養(yǎng)，選擇莖尖作為組織培養(yǎng)材料的原因是該部位細(xì)胞的病毒含量少，甚至不帶病毒，誘導(dǎo)更容易獲得脫毒苗，B正確；C、①、③兩個(gè)過程均含有再分化過程，再分化過程都需要光照，這是因?yàn)樵俜只纬傻呐郀铙w要合成葉綠體就必需進(jìn)行光照處理，C錯(cuò)誤；D、方法二為用基因工程選育高品質(zhì)的抗病毒的草莓，其選育方法的效果需要通過病毒接種實(shí)驗(yàn)；方法一培育的是脫毒苗而非抗病毒苗，不需要接種病毒，D錯(cuò)誤。故選B。5．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）某研究人員設(shè)計(jì)了下圖所示技術(shù)路線，以期獲得甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株。下列說法正確的是（

）A．可用無菌水洗滌去除圖中所用的酶來純化原生質(zhì)體B．原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B誘導(dǎo)融合前需要調(diào)整密度比例C．誘導(dǎo)融合體出芽通常使用兩類植物激素，其中生長素起主要作用D．取材選用植株生長點(diǎn)附近細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)將增大再生植株品質(zhì)退化的概率【答案】B【解析】A、由于原生質(zhì)體沒有了細(xì)胞壁的保護(hù)作用，因此應(yīng)該用等滲溶液洗滌去除圖中所用的酶來純化原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；B、收集了原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B后，在誘導(dǎo)融合前需要調(diào)整密度比例，B正確；C、誘導(dǎo)融合體出芽通常使用兩類植物激素，即生長素和細(xì)胞分裂素，其中細(xì)胞分裂素促進(jìn)芽的分化起主要作用，C錯(cuò)誤；D、感染病毒后，該植物會發(fā)生退化，取生長點(diǎn)附近組織進(jìn)行培養(yǎng)獲得脫毒苗可降低再生植物感染病毒后品質(zhì)退化的概率，D錯(cuò)誤。故選B。6．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）成體組織細(xì)胞能夠被用于兩種不同意義的“克隆”，具體流程如圖所示。下列有關(guān)克隆的敘述錯(cuò)誤的是（

）A．圖中含“紡錘體”的細(xì)胞為MⅡ期卵母細(xì)胞B．經(jīng)“細(xì)胞融合”形成的重組細(xì)胞中，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自成年母體的卵母細(xì)胞和另一成體組織細(xì)胞C．圖中“早期胚胎”內(nèi)部的空腔為囊胚腔，此時(shí)期胚胎可進(jìn)行孵化過程D．圖中兩種“克隆”均需要經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等過程【答案】D【解析】A、應(yīng)將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ期，再通過顯微操作去核，因此圖中含有“紡錘體”的細(xì)胞是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞，A正確；B、由圖可知，重組細(xì)胞是由成體組織細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞形成的，因此經(jīng)“細(xì)胞融合”形成的重組細(xì)胞中，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自成年母體的卵母細(xì)胞和另一成體組織細(xì)胞，B正確；C、圖中“早期胚胎”是囊胚期胚胎，其內(nèi)部的空腔為囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫作囊胚，囊胚可進(jìn)行孵化過程，即囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，C正確；D、由圖可知，治療性克隆最終只獲得細(xì)胞或組織，不需要經(jīng)過胚胎移植過程獲得個(gè)體，D錯(cuò)誤。故選D。7．（科學(xué)思維）據(jù)統(tǒng)計(jì)，不孕不育患病率目前已經(jīng)高達(dá)18%。體外受精技術(shù)是胚胎工程的技術(shù)之一，下列有關(guān)胚胎工程的說法錯(cuò)誤的是（

）A．試管嬰兒技術(shù)繁殖后代屬于無性繁殖，為某些不孕夫婦提供生育機(jī)會B．判斷培養(yǎng)液中卵子是否受精通常以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為標(biāo)志C．胚胎移植實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移D．胚胎移植時(shí)可選取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳病基因檢測【答案】A【解析】A、試管嬰兒是指用人工的方法使精子與卵細(xì)胞在體外的試管中結(jié)合形成受精卵并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，然后把胚胎移植進(jìn)母體的子宮內(nèi)，胚胎和胎兒的發(fā)育在子宮中進(jìn)行，直至發(fā)育成熟，分娩產(chǎn)出，屬于有性生殖，A錯(cuò)誤；B、多數(shù)哺乳動(dòng)物的第一極體不進(jìn)行減數(shù)分裂Ⅱ，因而不會形成兩個(gè)第二極體，在實(shí)際胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體或者雄、雄原核作為受精的標(biāo)志，B正確；C、胚胎移植是將胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，C正確；D、在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則影響胚胎的發(fā)育，可以對滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析、遺傳病基因檢測等，D正確。故選A。8．（生命觀念、科學(xué)思維）蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)是生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)內(nèi)容。某科研團(tuán)隊(duì)利用人工智能AI開發(fā)的AlphaFold2程序?qū)Υ蟛糠值鞍踪|(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測極為精準(zhǔn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．依據(jù)新蛋白質(zhì)的氨基酸序列能推出唯一的基因序列B．蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預(yù)測其空間結(jié)構(gòu)的重要基礎(chǔ)C．預(yù)測、設(shè)計(jì)并制造新蛋白質(zhì)的技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程D．結(jié)構(gòu)預(yù)測能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機(jī)制【答案】A【解析】A、由于一種氨基酸可能有多種密碼子，因此新蛋白質(zhì)的氨基酸序列推出的基因序列不止一種，A錯(cuò)誤；B、氨基酸脫水縮合形成多肽，多肽盤曲折疊形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。因此蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預(yù)測其空間結(jié)構(gòu)的重要基礎(chǔ)，B正確；C、蛋白質(zhì)工程能通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，因此預(yù)測、設(shè)計(jì)并制造新蛋白質(zhì)的技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，C正確；D、人工智能程序AlphaFold2對大部分蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測極為精準(zhǔn)，接近真實(shí)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，因此結(jié)構(gòu)預(yù)測能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機(jī)制，D正確。故選A。9．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）我國科學(xué)家利用鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）構(gòu)建基因表達(dá)載體（如下圖），通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入白玫瑰細(xì)胞中，獲得藍(lán)玫瑰。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．表達(dá)載體中sfp和idgS具有各自的啟動(dòng)子，表達(dá)相互獨(dú)立B．可以從鏈霉菌的基因文庫中獲取sfp和idgS基因C．在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)所需的限制酶是PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠD．若受體白玫瑰細(xì)胞不變藍(lán)，則可說明sfp和idgS未導(dǎo)入或?qū)牒笪闯晒Ρ磉_(dá)【答案】C【解析】A、分析題圖可知，表達(dá)載體中sfp的啟動(dòng)子為啟動(dòng)子1，idgS的啟動(dòng)子為啟動(dòng)子2，兩者表達(dá)相互獨(dú)立，A正確；B、獲取目的基因的方法有利用DNA雜交技術(shù)從鏈霉菌的基因文庫中獲取sfp和idgS，B正確；C、分析題圖可知，根據(jù)基因插入位置，在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)所需的限制酶是BamHI、SpeI、SacI，C錯(cuò)誤；D、若受體白玫瑰細(xì)胞不變藍(lán)，可能sfp和idgS未成功導(dǎo)入或表達(dá)不成功，D正確。故選C。10．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）研究人員將雪花蓮凝集素（GNA）基因和尾穗莧凝集素（ACA）基因連接成融合基因后再與pBI121質(zhì)粒載體結(jié)合并導(dǎo)入玉米細(xì)胞，最終獲得了抗蚜蟲玉米新品種，部分操作過程如圖所示。下列敘述正確的是（）A．過程①和過程②分別需要使用DNA聚合酶和DNA連接酶B．可將含有重組載體的溶液滴加到玉米受粉后形成的花粉管通道內(nèi)，獲得抗蚜蟲玉米新品種C．在加入了卡那霉素的培養(yǎng)基上存活下來的玉米細(xì)胞均成功導(dǎo)入了重組載體D．若用PCR技術(shù)檢測出玉米細(xì)胞含有融合基因，則該玉米為抗蚜蟲玉米【答案】B【解析】A、過程①為獲得融合基因，過程②為構(gòu)建基因表達(dá)載體，兩過程均需要使用DNA連接酶，A錯(cuò)誤；B、將含有重組載體的溶液滴加到玉米受粉后形成的花粉管通道內(nèi)，重組載體可通過花粉管通道進(jìn)入卵細(xì)胞、合子或早期胚胎細(xì)胞中，這是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法之一，B正確；C、在加入了卡那霉素的培養(yǎng)基上存活下來的玉米細(xì)胞，可能是成功導(dǎo)入重組載體的細(xì)胞，也可能是導(dǎo)入含有卡那霉素抗性基因的非重組載體的細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、用PCR技術(shù)檢測出玉米細(xì)胞含有融合基因，不能說明該玉米為抗蚜蟲玉米，因?yàn)槿诤匣蚩赡懿荒苷１磉_(dá)，D錯(cuò)誤。故選B。11．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計(jì)了引物1和引物2用于PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。

下列敘述正確的是（）A．Gata3基因的啟動(dòng)子無法控制GFP基因的表達(dá)B．翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C．2號條帶的小鼠是野生型，4號條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子D．若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分雜合子和純合子【答案】B【解析】A、分析圖中可知，啟動(dòng)子在左側(cè)，GFP基因整合Gata3基因的右側(cè)，啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄后，可以使GEP基因轉(zhuǎn)錄，Gata3基因的啟動(dòng)子能控制GFP基因的表達(dá)，A錯(cuò)誤；B、因啟動(dòng)子在左側(cè)，轉(zhuǎn)錄的方向向右，合成的mRNA從左向右為5′→3′，剛好是翻譯的方向，所以翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正確；C、整合GFP基因后，核酸片段變長，2號個(gè)體只有大片段，所以是Gata3-GFP基因純合子，4號個(gè)體只有小片段，是野生型，C錯(cuò)誤；D、用引物1和引物3進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出的片段大小差異較小，無法較好的區(qū)分片段，D錯(cuò)誤。故選B。12．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）研究者欲將目的基因?qū)氪竽c桿菌中，現(xiàn)有質(zhì)粒（圖甲）和含目的基因的DNA片段（圖乙），如圖2所示。AmpR是氨芐青霉素抗性基因；LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色；XmaI、NheI、EcoRI、BclI是4種限制酶，它們切割產(chǎn)生的黏性末端均不相同。能篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒（含目的基因）的大腸桿菌的最佳組合是（）

組別限制酶組合培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)菌落的顏色AEcoRI、BclI氨芐青霉素藍(lán)色BEcoRI、BclIX-gal藍(lán)色CXmaI、NheIX-gal白色DXmaI、NheI氨芐青霉素和X-gal白色A．A B．B C．C D．D【答案】D【解析】A、若用EcoRI、BclⅠ進(jìn)行切割，則氨芐青霉素抗性基因被破壞，含重組質(zhì)粒的大腸桿菌無法在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長，A錯(cuò)誤；B、若用EcoRI、BclI進(jìn)行切割，在含X-gal的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)藍(lán)色的菌落也可能是導(dǎo)入了空質(zhì)粒的大腸桿菌，B錯(cuò)誤；CD、若用Xmal、NheⅠ進(jìn)行切割，在含X-gal的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)白色的菌落也可能是未導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌，故還需要加入氨芐青霉素進(jìn)一步篩選，C錯(cuò)誤，D正確。故選D。綜合題13．（科學(xué)思維、科學(xué)探究）GFP是水母體內(nèi)存在的能發(fā)綠色熒光的一種蛋白?？蒲腥藛T以GFP基因?yàn)椴牧?，利用基因工程技術(shù)獲得了能發(fā)其他顏色熒光的蛋白，豐富了熒光蛋白的顏色種類?；卮鹣铝袉栴}。(1)構(gòu)建突變基因文庫，科研人員將GFP基因的不同突變基因分別插入載體，并轉(zhuǎn)入大腸桿菌制備出GFP基因的突變基因文庫。通常，基因文庫是指_______。(2)構(gòu)建目的基因表達(dá)載體?？蒲腥藛T從構(gòu)建的GFP突變基因文庫中提取目的基因（均為突變基因）構(gòu)建表達(dá)載體，其模式圖如下所示（箭頭為GFP突變基因的轉(zhuǎn)錄方向）。圖中①為_______；②為_______，其作用是_______；圖中氨芐青霉素抗性基因是一種標(biāo)記基因，其作用是_______。(3)目的基因的表達(dá)?？蒲腥藛T將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，發(fā)現(xiàn)大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光，有的發(fā)黃色熒光，有的不發(fā)熒光。請從密碼子特點(diǎn)的角度分析，發(fā)綠色熒光的可能原因是_______（答出1點(diǎn)即可）。(4)新蛋白與突變基因的關(guān)聯(lián)性分析。將上述發(fā)黃色熒光的大腸桿菌分離純化后，對其所含的GFP突變基因進(jìn)行測序，發(fā)現(xiàn)其堿基序列與GFP基因的不同，將該GFP突變基因命名為YFP基因（黃色熒光蛋白基因）。若要通過基因工程的方法探究YFP基因能否在真核細(xì)胞中表達(dá)，實(shí)驗(yàn)思路是_______?！敬鸢浮?1)將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因(2)終止子啟動(dòng)子RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(3)密碼子具有簡并性(4)將構(gòu)建好的表達(dá)載體（含有目的基因YFP基因）導(dǎo)入酵母菌中進(jìn)行表達(dá)【解析】（1）將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。（2）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子，終止子以及標(biāo)記基因等，且基因的轉(zhuǎn)錄方向?yàn)閺膯?dòng)子到終止子，故圖中①為終止子，②為啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來，如抗生素基因就可以作為這種基因。（3）正常情況下，GFP突變基因應(yīng)該不發(fā)綠色熒光，而大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光，從密碼子特點(diǎn)的角度分析，原因是密碼子具有簡并性，即一種氨基酸可能由一種或多種密碼子決定。（4）基因工程研究中常用的真核表達(dá)系統(tǒng)有酵母表達(dá)系統(tǒng)、昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。要通過基因工程的方法探究YFP基因能否在真核細(xì)胞中表達(dá)，可將構(gòu)建好的表達(dá)載體（含有目的基因YFP基因）導(dǎo)入酵母菌中進(jìn)行表達(dá)，如果酵母菌發(fā)出黃色熒光，說明YFP基因能在真核細(xì)胞中表達(dá)，反之則不能在真核細(xì)胞中表達(dá)。1．（2023·山東·高考真題）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（

）A．不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B．平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒C．接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄D．利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物【答案】D【解析】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、平板涂布時(shí)涂布器使用前必須浸在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，這種操作屬于滅菌，不屬于消毒，B錯(cuò)誤；C、使用后的培養(yǎng)基即使未長出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染環(huán)境，C錯(cuò)誤；D、脲酶可以催化尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素獲得氮源而進(jìn)行生長繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而無法生長，因此以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物，D正確。故選D。2．（2023·山東·高考真題）以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時(shí)的4個(gè)處理：①沸鹽水冷卻后再倒入壇中；②鹽水需要浸沒全部菜料；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法正確的是（

）A．①主要是為了防止菜料表面的醋酸桿菌被殺死B．②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌C．③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進(jìn)入D．④可檢測到完整發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量逐漸降低【答案】C【解析】A、鹽水煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響，A錯(cuò)誤；B、②鹽水需要浸沒全部菜料，造成無氧環(huán)境，有利于乳酸菌無氧呼吸，B錯(cuò)誤；C、③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，是排氣減壓、隔絕空氣、防止雜菌污染等，C正確；D、④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量，腌制泡菜過程中亞硝酸鹽的含量先增多后減少，D錯(cuò)誤。故選C。3．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線（如圖）和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是（

）A．a(chǎn)點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B．b點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C．b點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D．c點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基【答案】D【解析】研究目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，因此既要耐高溫，又要能夠高效降解角蛋白，所以在c點(diǎn)取樣，并且用角蛋白氮源培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，所以D正確，ABC錯(cuò)誤。故選D。4．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：取泡菜汁樣品，劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)基pH需偏堿性B．泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C．需在無氧條件下培養(yǎng)D．分離得到的微生物均為乳酸菌【答案】C【解析】A、因?yàn)槿樗峋?jīng)過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，故其生活的環(huán)境是酸性，培養(yǎng)基pH需偏酸性，A錯(cuò)誤；B、平板劃線接種時(shí)不需要稀釋，B錯(cuò)誤；C、乳酸菌是厭氧型微生物，所以需在無氧條件下培養(yǎng)，C正確；D、參與泡菜發(fā)酵的微生物有乳桿菌、短乳桿菌和明串珠菌等，所以分離得到的微生物除了乳酸菌，還會有其他耐高鹽的微生物，D錯(cuò)誤。故選C。5．（2023·山東·高考真題）利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（

）A．利用該技術(shù)可獲得某些無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物B．植物細(xì)胞體積小，故不能通過該技術(shù)進(jìn)行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)D．該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞生長的培養(yǎng)條件提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量【答案】A【解析】A、有些產(chǎn)物不能或難以通過化學(xué)合成途徑得到，故可利用該技術(shù)可獲得某些無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物，A正確；B、利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物，故可通過該技術(shù)進(jìn)行植物細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，B錯(cuò)誤；C、次生代謝物不是植物生長所必需的，其含量少，可以通過增加細(xì)胞的數(shù)量來增加次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進(jìn)細(xì)胞分裂的培養(yǎng)條件，提高了多個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量，不能提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量，D錯(cuò)誤。故選A。6．（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關(guān)制備過程的敘述不正確的是（）A．需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B．需要制備用PTH免疫的小鼠C．利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D．篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞【答案】D【解析】A、單克隆抗體制備過程中需要對骨髓瘤細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng)，即需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，A正確；B、該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，故應(yīng)用PTH刺激小鼠，使其產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞，B正確；C、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，可利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、由于一種B細(xì)胞經(jīng)分化形成漿細(xì)胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體，故篩選出的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞無法分泌多種抗體，D錯(cuò)誤。故選D。7．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）栽培稻甲產(chǎn)量高、品質(zhì)好，但每年只能收獲一次。野生稻乙種植一次可連續(xù)收獲多年，但產(chǎn)量低。中國科學(xué)家利用栽培稻甲和野生稻乙雜交，培育出兼具兩者優(yōu)點(diǎn)的品系丙，為全球作物育種提供了中國智慧。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．該成果體現(xiàn)了生物多樣性的間接價(jià)值B．利用體細(xì)胞雜交技術(shù)也可培育出品系丙C．該育種技術(shù)為全球農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新思路D．品系丙的成功培育提示我們要注重野生種質(zhì)資源的保護(hù)【答案】A【解析】A、生物多樣性的直接價(jià)值提現(xiàn)在食用、藥用、文學(xué)藝術(shù)創(chuàng)作等，間接價(jià)值體現(xiàn)在調(diào)節(jié)生態(tài)系統(tǒng)的功能上，培育新品系不屬于間接價(jià)值，A錯(cuò)誤；B、植物體細(xì)胞雜交是以原生質(zhì)體培養(yǎng)為基礎(chǔ)，人工誘導(dǎo)使不同親本原生質(zhì)體融合，并通過對異核體的培養(yǎng)產(chǎn)生體細(xì)胞雜種的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交使遠(yuǎn)緣雜交不親和的植物有可能實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)重組，創(chuàng)造和培養(yǎng)植物新品種乃至新物種，尤其在多基因控制農(nóng)藝性狀的改良上具有較大優(yōu)勢。因此可以利用該方法培育品系丙，B正確；C、該育種技術(shù)把栽培稻和野生稻雜交，為全球農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新思路，C正確；D、品系丙的成功培育需要依靠野生稻的參與，提示我們要注重野生種質(zhì)資源的保護(hù)，D正確。故選A。8．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中常添加蔗糖，植物細(xì)胞利用蔗糖的方式如圖所示。下列敘述正確的是（）A．轉(zhuǎn)運(yùn)蔗糖時(shí)，共轉(zhuǎn)運(yùn)體的構(gòu)型不發(fā)生變化B．使用ATP合成抑制劑，會使蔗糖運(yùn)輸速率下降C．植物組培過程中蔗糖是植物細(xì)胞吸收的唯一碳源D．培養(yǎng)基的pH值高于細(xì)胞內(nèi)，有利于蔗糖的吸收【答案】B【解析】A、轉(zhuǎn)運(yùn)蔗糖時(shí)，共轉(zhuǎn)運(yùn)體的構(gòu)型會發(fā)生變化，但該過程是可逆的，A錯(cuò)誤；BD、據(jù)圖分析可知，H＋向細(xì)胞外運(yùn)輸是需要消耗ATP的過程，說明該過程是逆濃度梯度的主動(dòng)運(yùn)輸，細(xì)胞內(nèi)的H＋＜細(xì)胞外H＋，蔗糖運(yùn)輸時(shí)通過共轉(zhuǎn)運(yùn)體依賴于膜兩側(cè)的H＋濃度差建立的勢能，故使用ATP合成抑制劑，會通過影響H＋的運(yùn)輸而使蔗糖運(yùn)輸速率下降，而培養(yǎng)基的pH值低（H＋多）于細(xì)胞內(nèi)，有利于蔗糖的吸收，B正確，D錯(cuò)誤；C、植物組織培養(yǎng)過程中，蔗糖可作為碳源并有助于維持滲透壓，但蔗糖并非唯一碳源，C錯(cuò)誤。故選B。9．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）人參皂苷是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生愈傷組織并進(jìn)行細(xì)胞融合，以提高人參皂苷的產(chǎn)率。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁B．高Ca2+—高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合C．融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞D．雜交細(xì)胞可能具有生長快速的優(yōu)勢【答案】C【解析】A、在細(xì)胞融合前，必須先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，A正確；B、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合有物理法和化學(xué)法，用高Ca2+—高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合，B正確；C、融合的細(xì)胞中有人參根-人參根細(xì)胞、人參根-胡蘿卜根細(xì)胞、胡蘿卜根-胡蘿卜根細(xì)胞，只有人參根-胡蘿卜根細(xì)胞才是雜交細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、雜交細(xì)胞含兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，可能具有生長快速的優(yōu)勢，D正確。故選C。10．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）科學(xué)家采用體外受精技術(shù)獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長角羚羊體內(nèi)，使后者成功妊娠并產(chǎn)仔，該工作有助于恢復(fù)瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過程不涉及的操作是（

）A．超數(shù)排卵B．精子獲能處理C．細(xì)胞核移植D．胚胎培養(yǎng)【答案】C【解析】由題干信息可知，該過程通過體外受精獲得胚胎，再通過胚胎移植，使長角羚羊成功妊娠并產(chǎn)仔，因此需要進(jìn)行超數(shù)排卵、精子獲能處理，并對獲得的受精卵進(jìn)行胚胎培養(yǎng)；由于該過程為有性生殖，因此不需要涉及細(xì)胞核移植，所以C正確、ABD錯(cuò)誤。故選C。11．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）在家畜優(yōu)良品種培育過程中常涉及胚胎工程的相關(guān)技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．經(jīng)獲能處理的精子才能用于體外受精B．受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)可獲得早期胚胎C．胚胎分割技術(shù)提高了移植胚胎的成活率D．胚胎移植前需對受體進(jìn)行選擇和處理【答案】C【解析】A、精子需要經(jīng)過獲能處理才具有受精能力，A正確；B、受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)可獲得早期胚胎，B正確；C、胚胎分割可以獲得多個(gè)胚胎，分割次數(shù)越多，分割后胚胎成活的概率越小，C錯(cuò)誤；D、胚胎移植前，需選擇健康體質(zhì)和正常繁殖能力的受體且進(jìn)行同期發(fā)情處理，D正確。故選C。12．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）以哺乳動(dòng)物為研究對象的生物技術(shù)已獲得了長足的進(jìn)步。對生物技術(shù)應(yīng)用于人類，在安全與倫理方面有不同的觀點(diǎn)，下列敘述正確的是（

）A．試管嬰兒技術(shù)應(yīng)全面禁止B．治療性克隆不需要監(jiān)控和審查C．生殖性克隆不存在倫理道德方面的風(fēng)險(xiǎn)D．我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)【答案】D【解析】A、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，但治療性克隆可在有效監(jiān)控和嚴(yán)格審查下實(shí)施，A錯(cuò)誤；B、我國政府同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題，主張對治療性克隆進(jìn)行有效監(jiān)控和嚴(yán)格審查，B錯(cuò)誤；C、生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻、家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念，C錯(cuò)誤；D、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，D正確。故選D。13．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）鹽堿脅迫下植物應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生的H2O2對細(xì)胞有毒害作用。禾本科農(nóng)作物AT1蛋白通過調(diào)節(jié)細(xì)胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影響H2O2的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．細(xì)胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促進(jìn)H2O2外排，從而減輕其對細(xì)胞的毒害C．敲除AT1基因或降低其表達(dá)可提高禾本科農(nóng)作物的耐鹽堿能力D．從特殊物種中發(fā)掘逆境脅迫相關(guān)基因是改良農(nóng)作物抗逆性的有效途徑【答案】B【解析】A、由題圖右側(cè)的信息可知，AT1蛋白缺陷，可以促進(jìn)PIP2s蛋白的磷酸化，進(jìn)而促進(jìn)H2O2排出膜外，A正確；B、據(jù)題圖左側(cè)的信息可知，AT1蛋白能夠抑制PIP2s蛋白的磷酸化，減少了H2O2從細(xì)胞內(nèi)輸出到細(xì)胞外的量，導(dǎo)致抗氧化脅迫能力弱，不能減輕其對細(xì)胞的毒害，B錯(cuò)誤；C、結(jié)合對A選項(xiàng)的分析可推測，敲除AT1基因或降低其表達(dá)，可提高禾本科農(nóng)作物抗氧化脅迫的能力，進(jìn)而提高其成活率，C正確；D、從特殊物種中發(fā)掘逆境脅迫相關(guān)基因，可通過基因工程技術(shù)改良農(nóng)作物抗逆性，D正確。故選B。14．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計(jì)了引物1和引物2用于PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）A．Gata3基因的啟動(dòng)子無法控制GFP基因的表達(dá)B．翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C．2號條帶的小鼠是野生型，4號條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子D．若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分雜合子和純合子【答案】B【解析】A、分析圖中可知，啟動(dòng)子在左側(cè)，GFP基因整合Gata3基因的右側(cè)，啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄后，可以使GEP基因轉(zhuǎn)錄，Gata3基因的啟動(dòng)子能控制GFP基因的表達(dá)，A錯(cuò)誤；B、因啟動(dòng)子在左側(cè)，轉(zhuǎn)錄的方向向右，合成的mRNA從左向右為5′→3′，剛好是翻譯的方向，所以翻譯時(shí)先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正確；C、整合GFP基因后，核酸片段變長，2號個(gè)體只有大片段，所以是Gata3-GFP基因純合子，4號個(gè)體只有小片段，是野生型，C錯(cuò)誤；D、用引物1和引物3進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出的片段大小差異較小，無法較好的區(qū)分片段，D錯(cuò)誤。故選B。15．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）紫外線引發(fā)的DNA損傷，可通過“核苷酸切除修復(fù)（NER）”方式修復(fù)，機(jī)制如圖所示。著色性干皮癥（XP）患者的NER酶系統(tǒng)存在缺陷，受陽光照射后，皮膚出現(xiàn)炎癥等癥狀?；颊哂啄臧l(fā)病，20歲后開始發(fā)展成皮膚癌。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．修復(fù)過程需要限制酶和DNA聚合酶B．填補(bǔ)缺口時(shí)，新鏈合成以5’到3’的方向進(jìn)行C．DNA有害損傷發(fā)生后，在細(xì)胞增殖后進(jìn)行修復(fù)，對細(xì)胞最有利D．隨年齡增長，XP患者幾乎都會發(fā)生皮膚癌的原因，可用突變累積解釋【答案】C【解析】A、由圖可知，修復(fù)過程中需要將損傷部位的序列切斷，因此需要限制酶的參與；同時(shí)修復(fù)過程中，單個(gè)的脫氧核苷酸需要依次連接，要借助DNA聚合酶，A正確；B、填補(bǔ)缺口時(shí)，新鏈即子鏈的延伸方向?yàn)?’到3’的方向進(jìn)行，B正確；C、DNA有害損傷發(fā)生后，在細(xì)胞增殖中進(jìn)行修復(fù)，保證DNA復(fù)制的正確進(jìn)行，對細(xì)胞最有利，C錯(cuò)誤；D、癌癥的發(fā)生是多個(gè)基因累積突變的結(jié)果，隨年齡增長，XP患者幾乎都會發(fā)生皮膚癌的原因，可用突變累積解釋，D正確。故選C。16．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）用氨芐青霉素抗性基因（AmpR）、四環(huán)素抗性基因（TetR）作為標(biāo)記基因構(gòu)建的質(zhì)粒如圖所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒），并轉(zhuǎn)化到受體菌中。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．若用HindⅢ酶切，目的基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因C．若用SphⅠ酶切，可通過DNA凝膠電泳技術(shù)鑒定重組質(zhì)粒構(gòu)建成功與否D．若用SphⅠ酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨芐青霉素）和Tet的培養(yǎng)基中能形成菌落【答案】D【解析】A、若用HindⅢ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同，A正確。B、若用PvuⅠ酶切，重組質(zhì)粒和質(zhì)粒中都有四環(huán)素抗性基因（TetR），因此在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因，B正確；C、DNA凝膠電泳技術(shù)可以分離不同大小的DNA片段，重組質(zhì)粒的大小與質(zhì)粒不同，能夠鑒定重組質(zhì)粒構(gòu)建成功與否，C正確；D、SphⅠ的酶切位點(diǎn)位于四環(huán)素抗性基因中，若用SphⅠ酶切，重組質(zhì)粒中含氨芐青霉素抗性基因（AmpR），因此攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨芐青霉素）的培養(yǎng)基中能形成菌落，在含Tet的培養(yǎng)基中不能形成菌落，D錯(cuò)誤。故選D。17．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過程是：裂解→分離→沉淀→鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．裂解：使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B．分離：可去除混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等C．沉淀：可反復(fù)多次以提高DNA的純度D．鑒定：加入二苯胺試劑后即呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】D【解析】A、裂解是加蒸餾水讓細(xì)胞吸水漲破，釋放出DNA等物質(zhì)，A正確；B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，將溶液過濾，即可將混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等與DNA分離，B正確；C、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以反復(fù)多次用酒精沉淀出DNA，提高DNA純度，C正確；D、將DNA溶解于NaCl，加入二苯胺試劑，沸水浴五分鐘，待冷卻后，能呈現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選D。18．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）中外科學(xué)家經(jīng)多年合作研究，發(fā)現(xiàn)circDNMT1（一種RNA分子）通過與抑癌基因p53表達(dá)的蛋白結(jié)合誘發(fā)乳腺癌，為解決乳腺癌這一威脅全球女性健康的重大問題提供了新思路。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．p53基因突變可能引起細(xì)胞癌變B．p53蛋白能夠調(diào)控細(xì)胞的生長和增殖C．circDNMT1高表達(dá)會使乳腺癌細(xì)胞增殖變慢D．circDNMT1的基因編輯可用于乳腺癌的基礎(chǔ)研究【答案】C【解析】A、p53基因是抑癌基因，這類基因突變可能引起細(xì)胞癌變，A正確；B、p53基因是抑癌基因，抑癌基因表達(dá)的蛋白質(zhì)能抑制細(xì)胞的生長和增殖，或促進(jìn)細(xì)胞凋亡，B正確；C、依據(jù)題意，circDNMT1通過與抑癌基因p53表達(dá)的蛋白結(jié)合誘發(fā)乳腺癌，則circDNMT1高表達(dá)會使乳腺癌細(xì)胞增殖變快，C錯(cuò)誤；D、circDNMT1的基因編輯可用于乳腺癌的基礎(chǔ)研究，D正確。故選C。19．（2023·山西·統(tǒng)考高考真題）某同學(xué)擬用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA連接酶為工具，將目的基因（兩端含相應(yīng)限制酶的識別序列和切割位點(diǎn)）和質(zhì)粒進(jìn)行切割、連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。限制酶的切割位點(diǎn)如圖所示。下列重組表達(dá)載體構(gòu)建方案合理且效率最高的是（

）A．質(zhì)粒和目的基因都用酶3切割，用E.coliDNA連接酶連接B．質(zhì)粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA連接酶連接C．質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA連接酶連接D．質(zhì)粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coliDNA連接酶連接【答案】C【解析】A、酶3切割后得到的是平末端，應(yīng)該用T4DNA連接酶連接，A錯(cuò)誤；B、質(zhì)粒用酶3切割后得到平末端，目的基因用酶1切割后得到的是黏性末端，二者不能連接，B錯(cuò)誤；C、質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割后得到黏性末端，用T4DNA連接酶連接后，還能保證目的基因在質(zhì)粒上的連接方向，此重組表達(dá)載體的構(gòu)建方案最合理且高效，C正確；D、若用酶2和酶4切割質(zhì)粒和目的基因，會破壞質(zhì)粒上的抗生素抗性基因，連接形成的基因表達(dá)載體缺少標(biāo)記基因，無法進(jìn)行后續(xù)的篩選，D錯(cuò)誤。故選C。選擇題組（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）閱讀下列材料，完成下面小題。小曲白酒清香純正，以大米、大麥、小麥等為原料，以小曲為發(fā)酵劑釀造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厭氧型微生物酵母菌，還有乳酸菌、醋酸菌等細(xì)菌。釀酒的原理主要是酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精。傳統(tǒng)釀造工藝流程如圖所示。20．小曲白酒的釀造過程中，酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸和無氧呼吸。關(guān)于酵母菌的呼吸作用，下列敘述正確的是（）A．有氧呼吸產(chǎn)生的[H]與O2結(jié)合，無氧呼吸產(chǎn)生的[H]不與O2結(jié)合B．有氧呼吸在線粒體中進(jìn)行，無氧呼吸在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行C．有氧呼吸有熱能的釋放，無氧呼吸沒有熱能的釋放D．有氧呼吸需要酶催化，無氧呼吸不需要酶催化21．關(guān)于小曲白酒的釀造過程，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖B．發(fā)酵液樣品的蒸餾產(chǎn)物有無酒精，可用酸性重鉻酸鉀溶液檢測C．若釀造過程中酒變酸，則發(fā)酵壇密封不嚴(yán)D．蒸熟并攤晾的原料加入糟醅，立即密封可高效進(jìn)行酒精發(fā)酵【答案】20．A21．D【解析】6．A、有氧呼吸產(chǎn)生的[H]在第三階段與O2結(jié)合生成水，無氧呼吸產(chǎn)生的[H]不與O2結(jié)合，A正確；B、有氧呼吸的第一階段在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，第二和第三階段分別在線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜中進(jìn)行，無氧呼吸的兩個(gè)階段都在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，B錯(cuò)誤；C、酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸過程中釋放的能量均大多以熱能散失，但無氧呼吸是不徹底的氧化分解過程，大部分能量存留在酒精，C錯(cuò)誤；D、有氧呼吸和無氧呼吸過程都需要酶的催化，只是酶的種類不同，D錯(cuò)誤。故選A。7．A、由于釀酒酵母不能直接利用淀粉發(fā)酵產(chǎn)生酒精（乙醇），故糖化過程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶將淀粉分解為葡萄糖，以供發(fā)酵利用，A正確；B、發(fā)酵液樣品的蒸餾產(chǎn)物有無酒精，可用酸性重鉻酸鉀溶液檢測，若存在酒精，則酒精與酸性的重鉻酸鉀反應(yīng)呈灰綠色，B正確；C、釀造過程中應(yīng)在無氧條件下進(jìn)行，若密封不嚴(yán)，會導(dǎo)致醋酸菌在有氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生醋酸而使酒變酸，C正確；D、蒸熟并攤晾的原料需要冷卻后才可加入糟醅，以免殺死菌種，且需要在有氧條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，讓酵母菌大量繁殖，此后再密封進(jìn)行酒精發(fā)酵，D錯(cuò)誤。故選D。22．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）賴氨酸是人體不能合成的必需氨基酸，而人類主要食物中的賴氨酸含量很低，利用生物技術(shù)可提高食物中賴氨酸含量?；卮鹣铝袉栴}：(1)植物細(xì)胞合成的賴氨酸達(dá)到一定濃度時(shí)，能抑制合成過程中兩種關(guān)鍵酶的活性，導(dǎo)致賴氨酸含量維持在一定濃度水平，這種調(diào)節(jié)方式屬于______。根據(jù)這種調(diào)節(jié)方式，在培養(yǎng)基中添加______，用于篩選經(jīng)人工誘變的植物懸浮細(xì)胞，可得到抗賴氨酸類似物的細(xì)胞突變體，通過培養(yǎng)獲得再生植株。(2)隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞工程結(jié)合和發(fā)展，2011年我國首次利用轉(zhuǎn)基因和體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育了高產(chǎn)賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛。其基本流程為：①構(gòu)建乳腺專一表達(dá)載體。隨著測序技術(shù)的發(fā)展，為獲取富含賴氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通過檢索______獲取其編碼序列，用化學(xué)合成法制備得到。再將獲得的目的基因與含有乳腺特異性啟動(dòng)子的相應(yīng)載體連接，構(gòu)建出乳腺專一表達(dá)載體。②表達(dá)載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細(xì)胞（BEF）。將表達(dá)載體包裹到磷脂等構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi)，與BEF膜發(fā)生______，表達(dá)載體最終進(jìn)入細(xì)胞核，發(fā)生轉(zhuǎn)化。③核移植。將轉(zhuǎn)基因的BEF作為核供體細(xì)胞，從牛卵巢獲取卵母細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)及去核后作為______。將兩種細(xì)胞進(jìn)行電融合，電融合的作用除了促進(jìn)細(xì)胞融合，同時(shí)起到了_____重組細(xì)胞發(fā)育的作用。④重組細(xì)胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植。重組細(xì)胞體外培養(yǎng)至____，植入代孕母牛子宮角，直至小牛出生。⑤檢測。DNA水平檢測：利用PCR技術(shù)，以非轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞作為陰性對照，以______為陽性對照，檢測到轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞中存在目的基因。RNA水平檢測：從非轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞，提取總RNA，對總RNA進(jìn)行______處理，以去除DNA污染，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，并以此為______，利用特定引物擴(kuò)增目的基因片段。結(jié)果顯示目的基因在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而不在牛耳組織細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，原因是什么？______?！敬鸢浮?1)負(fù)反饋調(diào)節(jié)過量賴氨酸類似物(2)基因數(shù)據(jù)庫融合核受體細(xì)胞激活早期囊胚轉(zhuǎn)基因BEFDNA酶PCR的模板