基因工程的基本操作步驟優(yōu)品

基因工程的基本操作步驟我們身邊到底有哪些轉(zhuǎn)基因食品？黃金大米彩色玉米方形辣椒關(guān)于轉(zhuǎn)基因：崔永元PK方舟子崔永元觀點：反對轉(zhuǎn)基因食品方舟子觀點：支持轉(zhuǎn)基因食品基因工程的基本操作步驟重點內(nèi)容：①獲得目的基因。②目的基因與載體連接，形成重組DNA分子。③將重組DNA分子導入受體細胞。④篩選含有目的基因的受體細胞。⑤目的基因的表達和鑒定。Step1：獲得目的基因蘇云金芽孢桿菌：Bt毒蛋白基因目的基因：人們感興趣而需要的特定基因，也叫外源基因。目的基因的序列已知①用化學方法人工合成目的基因。②利用PCR技術(shù)擴增目的基因。③逆轉(zhuǎn)錄法。模板、原料、酶、能量利用PCR技術(shù)擴增PCR擴增儀由美國科學家Mullis于1985年首創(chuàng)。檢測到受體細胞含有目的基因就標志著基因工程操作的成功（2）將目的基因?qū)雱游锛毎康幕颍喝藗兏信d趣而需要的特定基因，也叫外源基因。Step1：獲得目的基因Step2：目的基因與載體連接②利用PCR技術(shù)擴增目的基因。TaqDNA聚合酶從引物起始，進行互補鏈的合成標記基因的用途：篩選含有目的基因的受體細胞。Step4：篩選含有目的基因的受體細胞基因工程的基本操作步驟例題：基因工程是在DNA分子水平上進行設(shè)計施工的。方舟子觀點：支持轉(zhuǎn)基因食品重點內(nèi)容：①獲得目的基因。（1）將目的基因?qū)胫参锛毎F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰，下列操作正確的是（）基因工程的基本操作步驟感受態(tài)細胞法：用CaCl2處理大腸桿菌，增加細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進入宿主細胞。模板的雙鏈DNA解旋，形成單鏈DNA。引物與單鏈DNA互補序列配對結(jié)合TaqDNA聚合酶從引物起始，進行互補鏈的合成多次循環(huán)，獲得大量雙鏈DNA分子①②③PCR：聚合酶鏈式反應(yīng)①高溫變性：95℃。②低溫退火：55℃。③適溫延伸：72℃。目的基因的序列未知方法：從基因文庫中獲取目的基因?；蛭膸欤簩⒑心撤N生物不同基因的許多DNA片段，與載體連接后，導入受體菌的群體中儲存。逆轉(zhuǎn)錄基因組文庫VScDNA文庫基因組文庫基因組文庫：一種生物的全部基因（國家圖書館）。cDNA文庫：一種生物的部分基因（市圖書館）。Step2：目的基因與載體連接形成重組DNA分子①用同一種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體質(zhì)粒，產(chǎn)生相同的粘性末端。質(zhì)粒目的基因切口②用DNA連接酶將目的基因和載體連接在一起，形成重組DNA分子。形成的重組DNA分子可能有多種情況先切割后連接①目的基因-目的基因②目的基因-質(zhì)粒③質(zhì)粒-質(zhì)粒重組質(zhì)粒用同種限制酶切割載體與目的基因可獲得相同的黏性末端②用DNA連接酶將目的基因和載體連接在一起，形成重組DNA分子。方法：利用標記基因（抗生素抗性基因）進行篩選。以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同（3）將目的基因?qū)胛⑸锛毎椒ǎ簭幕蛭膸熘蝎@取目的基因。檢測到受體細胞含有目的基因就標志著基因工程操作的成功①用化學方法人工合成目的基因。基因組文庫：一種生物的全部基因（國家圖書館）。由美國科學家Mullis于1985年首創(chuàng)。二、基因工程與環(huán)境保護③將重組DNA分子導入受體細胞?；虮磉_載體的構(gòu)建插入基因抗生素抗性基因標記基因的用途：篩選含有目的基因的受體細胞。Step3：將重組DNA導入受體細胞導入(轉(zhuǎn)化）擴增大腸桿菌基因工程中常用的受體細胞有：大腸細菌、枯草桿菌、酵母菌和動植物細胞等。（1）將目的基因?qū)胫参锛毎r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細胞，并整合到其染色體的DNA上。適用于雙子葉植物和裸子植物轉(zhuǎn)BT抗蟲棉方法：將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導入植物細胞→整合到受體細胞的染色體DNA上→表達?；驑尫ê突ǚ酃芡ǖ婪ㄟm用于單子葉植物適用于被子植物（2）將目的基因?qū)雱游锛毎@微注射技術(shù)（3）將目的基因?qū)胛⑸锛毎惺軕B(tài)細胞法：用CaCl2處理大腸桿菌，增加細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進入宿主細胞。轉(zhuǎn)化繁殖感受態(tài)細胞易于吸收外源DNAStep4：篩選含有目的基因的受體細胞①②③方法：利用標記基因（抗生素抗性基因）進行篩選。Step5：目的基因的表達和鑒定分子雜交技術(shù)方法：DNA-DNA雜交，DNA-RNA雜交；抗原-抗體雜交。個體生物學水平鑒定抗蟲或抗病的接種實驗。剪切→拼接→導入→篩選→表達例題：如下圖所示，兩個核酸片段在適宜的條件下，經(jīng)X酶的催化作用，發(fā)生下述變化，則X酶是（）

A.DNA連接酶B.RNA聚合酶

C.DNA聚合酶D.限制酶例題：基因工程是在DNA分子水平上進行設(shè)計施工的。在基因操作的基本步驟中，不進行堿基互補配對的步驟是（）A.人工合成目的基因B.目的基因與運載體結(jié)合C.將目的基因?qū)胧荏w細胞D.目的基因的檢測和表達基因工程的應(yīng)用一、基因工程與遺傳育種抗蟲棉：將蘇云金芽孢桿菌的毒蛋白基因?qū)朊藁毎?。①?yōu)點：定向改造生物的遺傳性狀，克服遠緣雜交不親和的生殖障礙。②缺點：操作復雜，難度大，轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品存在安全性問題。基因工程的優(yōu)缺點用基因工程培育成功的“超級細菌”能分解石油中的多種烴類化合物，還能吞食轉(zhuǎn)化汞和鎘等重金屬，分解DDT等毒害物質(zhì)。二、基因工程與環(huán)境保護三、基因工程與疾病治療1978年科學家將合成的人胰島素基因?qū)氪竽c桿菌，每1000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素，使其價格降低了30%-50%。1g胰島素/100kg豬胰腺例題：下列有關(guān)基因工程操作的敘述中，正確的是（）A.用同種限制酶切割載體與目的基因可獲得相同的黏性末端B.以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同C.檢測到受體細胞含有目的基因就標志著基因工程操作的成功D.用含抗生素抗性基因的質(zhì)粒作為載體是因為其抗性基因便于與外源基因連接例題：（2021·浙江）天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰