DB21-T3169-2019-柞蠶蛹蟲(chóng)草生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-遼寧省

ICS65.020.20DB21B05遼寧省地方標(biāo)準(zhǔn)DB21/T3169—2019柞蠶蛹蟲(chóng)草生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程TechnicalspecificationforproductionofcordycepsMilitarisinTussahsilkworm遼寧省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB21/T3169—2019前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李亞潔，孟楠，溫志新，都興范，李學(xué)軍，米銳，孫永欣，馬淑慧，李樹(shù)英。本標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個(gè)人如有問(wèn)題和意見(jiàn)建議，均可以通過(guò)來(lái)電和來(lái)函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時(shí)答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評(píng)估及復(fù)審。遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳通訊地址：沈陽(yáng)市和平區(qū)太原北街2號(hào)，024—23447862。遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院通訊地址：大連市沙河口區(qū)黑石礁街50號(hào)IDB21/T3169—2019柞蠶蛹蟲(chóng)草生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程12范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了柞蠶蛹蟲(chóng)草生產(chǎn)的術(shù)語(yǔ)和定義，產(chǎn)地環(huán)境，生產(chǎn)設(shè)施，技術(shù)要求，采收，包裝及儲(chǔ)存。本標(biāo)準(zhǔn)適用于柞蠶蛹蟲(chóng)草生產(chǎn)。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T23509食品包裝容器及材料分類GB/T33320GB/T8321GB/T12728食品包裝材料和容器用膠粘劑農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則食用菌術(shù)語(yǔ)NY/T391綠色食品產(chǎn)地環(huán)境技術(shù)條件食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程食用菌菌種通用技術(shù)要求食用菌菌種檢驗(yàn)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義柞蠶幼蟲(chóng)吐絲結(jié)繭后形成的與成蟲(chóng)之間的過(guò)渡形態(tài)，初化的蛹表皮柔軟、體色也淺，之后表皮逐漸僵蛹Muscardinepupa1DB21/T3169—20194產(chǎn)地環(huán)境應(yīng)選擇生態(tài)條件良好，遠(yuǎn)離污染源的生產(chǎn)區(qū)域，符合NY/T391的要求。5生產(chǎn)設(shè)施5.1生產(chǎn)車間應(yīng)設(shè)原料準(zhǔn)備室、洗刷室、滅菌室、菌種制備室、接種室、發(fā)菌室、培養(yǎng)室、烘干室、包裝室、儲(chǔ)存室。培養(yǎng)室有專用的通風(fēng)口，通風(fēng)口處需安裝過(guò)濾風(fēng)裝置，四周及過(guò)道安裝40W的日光燈。5.2生產(chǎn)設(shè)備天平、高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)或接種箱、恒溫振蕩器及培養(yǎng)箱、顯微鏡、空調(diào)等。培養(yǎng)架5.3層架要求金屬結(jié)構(gòu),架子高矮、大小、長(zhǎng)寬根據(jù)生產(chǎn)場(chǎng)地條件決定,通常一個(gè)架子設(shè)六層,層距0.4m，每層擺放4個(gè)塑料盤(pán)子,貨架間距人行道0.8m～1.0m。5.4培養(yǎng)盤(pán)應(yīng)符合GB/T23509和GB/T33320的要求，通常采用耐高溫硬質(zhì)塑料盤(pán)，規(guī)格為（30cm～60cm）×（30cm～35cm）×（6cm～10cm）。6應(yīng)符合NY/T1742的要求，引進(jìn)有菌種生產(chǎn)資質(zhì)的單位的母種或自行分離獲得的母種，經(jīng)培育繁殖秋季柞蠶蛹作為培養(yǎng)基應(yīng)符合NY/T5099的規(guī)定。柞蠶繭健蛹率>90％，將柞蠶繭環(huán)割，選擇無(wú)破水1馬鈴薯200.0g，蔗糖20.0g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，維生素B10.02g，水1000ml，pH值6.0～7.0。2葡萄糖25.0g，蛋白胨10.0g，酵母膏1.0g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，維生素B10.02g，水1000ml，pH值6.0～7.0。2DB21/T3169—2019配方1土豆去皮200g，切成1cm3小塊，放入鍋中加水文火煮沸30min后4層紗布過(guò)濾。在濾液中加入蔗糖20g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，VB10.02g加水至1000mL，pH值6.0～7.0，用三角瓶分裝(固體培養(yǎng)基加瓊脂18g)，在121℃下滅菌40min，備用。配方2稱取各組成成分依次溶于1000mL水中，按配方1方法分裝滅菌。6.4.3菌種的制備母種在10℃～15℃、相對(duì)濕度60%的環(huán)境下可存放一個(gè)月，4℃條件下可保存一年左右。用接種鏟從母種斜面中切取1cm2菌面(可稍帶培養(yǎng)基)放入液體菌種培養(yǎng)瓶中，迅速用聚丙烯塑料薄膜和乳膠圈封扎瓶口，接種后在18℃～22℃溫度條件下，培養(yǎng)5d～7d，培養(yǎng)4d取樣對(duì)菌種進(jìn)行分析檢測(cè),按照NY/T1846進(jìn)行，均符合要求的為合格菌種。將液體菌種用無(wú)菌水按1:5比例稀釋成接種用菌液。6.5接種6.5.1接種前準(zhǔn)備接種室、培養(yǎng)室和相關(guān)容器必須提前徹底消毒，使用藥劑符合GB/T8321要求，選用高效、低毒、低殘留藥劑，嚴(yán)格按照說(shuō)明使用，也可以使用紫外燈、臭氧進(jìn)行室內(nèi)消毒。將柞蠶蛹用清水沖洗干凈，再經(jīng)70％濃度的酒精浸泡2min進(jìn)行消毒，置于無(wú)菌托盤(pán)中淋干后立即接種。6.5.2接種方法用微量注射器每個(gè)柞蠶蛹接種200μL～400μL菌液，在蠶蛹翅下或腹部節(jié)間膜處，與蛹體平行進(jìn)針(向頭部方向)，均勻放入培養(yǎng)盤(pán)中。接種后的柞蠶蛹送入培養(yǎng)室黑暗培養(yǎng)，溫度控制在17℃～20℃，室內(nèi)濕度60%～65%，通風(fēng)換氣保持空氣新鮮，5d后每天2次觀察清理病壞的柞蠶蛹，7d后相對(duì)濕度調(diào)整到65%～70%，隨機(jī)檢查蛹體，確認(rèn)菌絲布滿整個(gè)蛹體，12d～15d后全部硬化成僵蛹。用無(wú)菌水沖洗僵蛹數(shù)遍，放置在備好的無(wú)菌培養(yǎng)盤(pán)中，用聚乙烯薄膜將培養(yǎng)盤(pán)封口，薄膜留有透氣接種20d左右當(dāng)蛹體表面長(zhǎng)出白色菌絲，進(jìn)行見(jiàn)光培養(yǎng)，白天以自然散射光為主，傍晚用日光燈補(bǔ)助照明3h～4h，白天溫度控制在18℃～22℃，夜間降到15℃～17℃，相對(duì)濕度保持在75％，每天上午通風(fēng)1次，時(shí)間為30min，再經(jīng)過(guò)3d～5d的培養(yǎng)，長(zhǎng)出黃色的小突起即形成了子實(shí)體原基。25d后進(jìn)入子實(shí)體培養(yǎng)階段，溫度應(yīng)為16℃～20℃，濕度75%～80%，打開(kāi)光照設(shè)備，光照強(qiáng)度在500lx～800lx,光照時(shí)間每天14h～18h，逐漸加大室內(nèi)空氣的流通和交換，每天通風(fēng)換氣2次，每次30min。73DB21/T3169—20197.17.2采收標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)子實(shí)體長(zhǎng)到5cm～8cm時(shí)，子實(shí)體頭部膨大飽滿，及時(shí)采收。采收與干燥方法采收時(shí)用鑷子連蛹帶草一起從盤(pán)中提出,經(jīng)過(guò)整理,放入不銹鋼盤(pán)中,采取50℃～60℃烘干或冷凍干燥等方法處理。8包裝與儲(chǔ)存8.1包裝將干燥后的柞蠶蛹蟲(chóng)草擺放在塑料盒中為宜，以免擠壓，用薄膜袋密封后，稱重包好。8.2儲(chǔ)存包裝好的柞蠶蛹蟲(chóng)草應(yīng)置于冷柜或冷庫(kù)低溫儲(chǔ)存，溫度適于0℃～4℃。9生產(chǎn)記錄應(yīng)對(duì)每批生產(chǎn)建立獨(dú)立、完整的生產(chǎn)記錄檔案，保留生產(chǎn)過(guò)程中各個(gè)環(huán)節(jié)的有效記錄，以證實(shí)所有的農(nóng)事操作遵循本指導(dǎo)性技術(shù)文件規(guī)定。記錄應(yīng)當(dāng)保留兩年以上。具體參見(jiàn)附錄A。4DB21/T