DB22T 3635-2024番茄晚疫病診斷與防治技術(shù)規(guī)程

22TechnicalcodeofpracticefordiagnosisandintegratedmanagenmentoftomatolateblightI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。喆、屈亞飛、張丹、孫西琳、馬馨悅、龔镕烈、王1番茄晚疫病診斷與防治技術(shù)規(guī)程GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用DB22/T3495—2023露地辣椒疫病診斷與防治技術(shù)由致病疫霉菌[Phytophthorainfestans（Mont.）deBar聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreacti4診斷與防治流程21.1癥狀識(shí)別(見(jiàn)5.1)1.2病原鑒定(見(jiàn)5.2)2.1防治原則(見(jiàn)6.1)2.2防治方法(見(jiàn)6.2)1病害診斷(見(jiàn)第5章)圖1番茄晚疫病診斷與防治流程5病害診斷5.1癥狀識(shí)別5.1.1樣本采集采集具有典型癥狀的發(fā)病植株，用于癥狀識(shí)別與病原菌鑒定。5.1.2病害癥狀整個(gè)生育期均可發(fā)病，主要危害成株期的葉、莖和果實(shí)。具體如下：a)葉部癥狀：葉片感病多從葉緣開(kāi)始發(fā)生，發(fā)病初期呈暗綠色不規(guī)則的水漬狀病斑，后逐漸變成褐色，邊緣不明顯。濕度大時(shí)迅速擴(kuò)大，葉片背面病、健交界處產(chǎn)生白色霉?fàn)钗铮瑖?yán)重時(shí)整個(gè)葉片腐爛，并蔓延至葉柄和主莖。典型癥狀見(jiàn)圖A.1;b)莖部癥狀：莖部感病病斑呈暗褐色，形狀不規(guī)則，稍凹陷，后期變成黑色。濕度大時(shí)，邊緣有明顯的白色霉?fàn)钗铮o稈腐爛易折斷。典型癥狀見(jiàn)圖A.2;3DB22/T3635—2b)用潔凈解剖針直接挑取病部或培養(yǎng)基上的霉?fàn)钗铮盟沃?，并使病原物分散開(kāi)；c)加蓋蓋玻片，使蓋玻片的一側(cè)邊緣與水滴邊緣接觸，并慢慢放下蓋玻片，待顯微觀察。囊梗3根~5根成束由葉背氣孔伸出，單軸分枝，具2個(gè)以上分枝，且分枝略呈節(jié)狀。形態(tài)見(jiàn)圖B.1。形態(tài)見(jiàn)圖B.2。5.2.2.1.1在超凈工作臺(tái)上，將采集的病葉浸于75%酒精中，表面消毒30s,再用3%次氯酸鈉滅菌2min~3min,用無(wú)菌水漂洗3次，吸水紙吸干水后將病、健交界處剪成5mm2~10mm2小塊。5.2.2.1.2取4小塊病葉置于馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上，在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d~行。經(jīng)檢測(cè)得到ITS序列長(zhǎng)度為750bp~760bp。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖C.1。定為番茄致病疫霉菌，其ITS序列長(zhǎng)度為754bp。詳細(xì)序列見(jiàn)附錄C.3。46.2.1選擇抗病品種6.2.2加強(qiáng)栽培管理6.2.2.1合理輪作6.2.2.2清潔田園6.2.2.3土壤消毒6.2.2.4田間管理6.2.3設(shè)施生態(tài)防控6.2.3.1降低濕度6.2.3.2調(diào)控溫度6.2.4化學(xué)防治6.2.4.1農(nóng)藥選用與管理6.2.4.2施藥方法6.2.4.2.1煙霧法56(資料性)7DB22/T3635—(資料性)顯微形態(tài)見(jiàn)圖B.1和圖B.2。圖A.4病原菌游動(dòng)孢子囊梗(顯微鏡倍數(shù)40×10)圖A.5病原菌游動(dòng)孢子囊(顯微鏡倍數(shù)40×10)圖A.6PDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)(左：正面右：反面)8(規(guī)范性)C.1.2.194℃預(yù)變性3min;94℃變性30s,55℃退火50s,72℃延伸1min,共35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min;4℃保存。C.1.2.2PCR產(chǎn)物檢測(cè)使用1%的瓊脂糖凝膠，用0.5×TBE電泳緩沖液，100V電泳30min~40C.1.2.3在凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行電泳結(jié)果觀察，判斷是否為預(yù)擴(kuò)增長(zhǎng)度的條帶，無(wú)非特異性條帶，且濃度大于50ng/μL。凝膠成像檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，經(jīng)檢測(cè)得到病原菌ITS序列長(zhǎng)度為750bp~760bp。樣本9將PCR產(chǎn)物純化后測(cè)序，測(cè)試結(jié)果顯示番茄晚疫病疫霉菌ITS序列片段長(zhǎng)度為1AACCGTTTCAACCCAATAGTACTTGGCGGCATTTTAAACCACTGTGGGGAACGCTGCGAAAGTGAGTCATAACGCATATTAAACTTGGCTACTAAACTGTACTTCTCTTTATGGAGAAATATGGACTGGTATCCATTTGG1234567