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PAGE3-大板塊練生物技術(shù)實踐1.下面是關(guān)于微生物的培育和探討的一些問題,請回答:(1)視察這些微生物的菌落所用的培育基類型是____________。培育基中不加入____________可以選擇培育自養(yǎng)型微生物。(2)微生物接種最常用的方法有_______________________________________________。其中即可分別又可計數(shù)活菌的接種方法是____________,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)分別分解尿素的細(xì)菌時,培育基中需加入__________指示劑。而分別分解纖維素的細(xì)菌時,在培育基中需加入____________染料來篩選。解析:(1)菌落是指單個微生物在固體培育基上經(jīng)過繁殖形成的肉眼可見的子細(xì)胞群體;自養(yǎng)微生物可以利用CO2合成有機物,所以在培育時不須要添加碳源。(2)常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法;利用稀釋涂布平板法可以進行計數(shù);緣由是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培育基表面的一個菌落就來源于稀釋液中的一個活菌。(3)鑒別分解尿素的微生物須要加入酚紅指示劑;分解纖維素的微生物用剛果紅染料染色。答案:(1)固體培育基有機碳源(2)平板劃線法、稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培育基表面的一個菌落就來源于稀釋液中的一個活菌(3)酚紅剛果紅2.釀酒酵母普遍應(yīng)用于白酒、紅酒、啤酒和果汁飲料的生產(chǎn),其生物合成過程會形成多種多樣的代謝產(chǎn)物,從而對食品風(fēng)味產(chǎn)生重要影響。以下是從酒曲樣品中分別出酵母菌的過程:處理酒曲樣品→過濾→系列稀釋至10-2~10-7→選擇相宜稀釋度→涂布固體培育基→28℃下培育48h→挑取典型菌落→鏡檢→菌種鑒定→菌種保藏。請回答下列有關(guān)問題:(1)制備固體培育基時,采納________________法滅菌15~20min。(2)通過稀釋涂布平板法可以統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。為保證結(jié)果精確,一般選擇的稀釋濃度要保證涂布后在培育基表面形成____________。涂布平板操作時應(yīng)在____________旁邊進行。(3)菌種鑒定后要進行菌種保藏,詳細(xì)方法是將菌種接種于固體斜面培育基上,28℃培育后,將試管于4℃的冰箱保存。這種方法保存的時間不長,菌種簡單____________。若想長期保藏,可以采納____________的方法,放在____________的冷凍箱中保存。(4)酵母菌常用于制作葡萄酒,酒精發(fā)酵時一般將溫度限制在____________,常用____________檢測發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生。解析:(1)對培育基一般采納高壓蒸汽滅菌法滅菌。(2)通過稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目時,為保證結(jié)果精確,一般選擇的稀釋濃度要保證涂布后在培育基表面形成單菌落。涂布平板操作時為防止雜菌污染,應(yīng)在酒精燈火焰旁邊進行。(3)將菌種接種于固體斜面培育基上,28℃培育后,將試管于4℃的冰箱保存。這種方法是臨時保藏法,其保存的時間不長,菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異。若想長期保藏,可以采納甘油管藏的方法,放在-20℃的冷凍箱中保存。(4)酵母菌常用于制作葡萄酒,酒精發(fā)酵時一般將溫度限制在18~25℃,常用酸性重鉻酸鉀溶液檢測發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生。答案:(1)高壓蒸汽滅菌(2)單個菌落酒精燈火焰(3)被污染或產(chǎn)生變異甘油管藏-20℃(4)18~25℃酸性重鉻酸鉀3.回答下列有關(guān)果膠酶生產(chǎn)及固定化應(yīng)用的問題:(1)菌種篩選:為了獲得高產(chǎn)果膠酶的菌株,用射線處理一些霉菌后,稀釋并接種在以低濃度果膠為唯一碳源的培育基中培育,此培育基的pH要求____________。(2)菌種鑒定:通過在固體培育基上視察______________________,實現(xiàn)菌種的鑒定。(3)果膠酶的固定化:取磁性殼聚糖微球固體顆粒,加入果膠酶溶液,30℃條件下振蕩1h后裝柱,反應(yīng)柱運用后要用蒸餾水洗滌,然后放置于4℃冰箱中保存。上述固定化果膠酶的方法屬于_________________________________________________________________。(4)果膠酶活力測定:以1g果膠酶單位時間催化產(chǎn)生的主要產(chǎn)物______________的量計算酶的活性。已知3,5-二硝基水楊酸與果膠水解主要產(chǎn)物共熱,能產(chǎn)生棕紅色的氨基化合物,在肯定范圍內(nèi)產(chǎn)物的量和反應(yīng)液顏色深淺成正比,可用________法測定產(chǎn)物的量。(5)由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中運用量較大的酶制劑之一,若通過固定化霉菌細(xì)胞生產(chǎn)果膠酶,在配制海藻酸鈉溶液時,要留意____________________,否則可能出現(xiàn)焦糊。固定化細(xì)胞技術(shù)一般采納包埋法固定化,緣由是____________________________________________________________________________________________________。某果膠酶高產(chǎn)菌株產(chǎn)生的果膠酶為分子量不同的多種酶復(fù)合物,可以實行________法將這些酶在保持活性下進行有效分別。解析:(1)結(jié)合分析可知,為了從霉菌中獲得高產(chǎn)果膠酶的菌株,對霉菌用射線處理后,須要將其稀釋并接種在以低濃度果膠為唯一碳源的培育基中培育,由于霉菌須要在酸性條件下繁殖,所以試驗中須要將該培育基的pH調(diào)為酸性。(2)鑒定菌種須要依據(jù)菌落的固有特征來鑒定。所以通常將微生物接種在固體培育基上待其長出菌落后再視察菌落的形態(tài)特征進行鑒定。(3)果膠酶的固定化:取磁性殼聚糖微球固體顆粒,加入果膠酶溶液,30℃條件下振蕩1h后裝柱,反應(yīng)柱運用后要用蒸餾水洗滌,然后放置于4℃冰箱中保存。該方法利用磁性微球固體顆粒的強吸附性實現(xiàn)了對果膠酶的固定,因此該固定化果膠酶的方法屬于吸附法。(4)結(jié)合纖維素酶的活性測定原理可知,果膠酶活性測定通常以1g果膠酶單位時間催化產(chǎn)生的主要產(chǎn)物半乳糖醛酸的量計算酶的活性。依據(jù)3,5-二硝基水楊酸與果膠水解主要產(chǎn)物半乳糖醛酸共熱,能產(chǎn)生棕紅色的氨基化合物,并且在肯定范圍內(nèi)產(chǎn)物的量和反應(yīng)液顏色深淺成正比的原理,可用比色法測定產(chǎn)物的量。(5)固定化霉菌細(xì)胞生產(chǎn)果膠酶須要用固定化細(xì)胞技術(shù),在配制海藻酸鈉溶液時,為了避開出現(xiàn)焦糊,須要在加熱時用小火或間斷加熱。因為細(xì)胞體積大,不易從包埋材料中漏出,因此可用包埋法固定細(xì)胞。由于果膠酶包含分子量不同的多種酶復(fù)合物,因此可依據(jù)分子量的不同,實行凝膠色譜法將這些分子量不同的酶在保持活性下進行有效分別。答案:(1)酸性(2)菌落的形態(tài)特征(3)吸附法(4)半乳糖醛酸比色(5)加熱時用小火或間斷加熱細(xì)胞體積大,不易從包埋材料中漏出凝膠色譜4.中國茶文化源遠(yuǎn)流長,茶的種類以色澤(或制作工藝)分為綠茶、紅茶、烏龍茶、白茶等不同品種。請回答:(1)綠茶是不經(jīng)發(fā)酵制成的茶。在制作綠茶的工藝中,有一道工序是快速將溫度提高到70℃左右,目的是________________________,從而保證茶葉鮮綠的顏色。(2)從茶籽中提取用于食用的茶油一般最好采納____________法,茶飲料所用的胡蘿卜素通常采納__________法從胡蘿卜中提取,以下最適合用于作為胡蘿卜素提取溶劑的是____________,理由是_________________________________________________________________________________________________________________________________。提取劑石油醚乙酸乙酯乙醚苯沸點90~120℃77℃35℃80℃(3)茶飲料所用的茉莉油的提取流程如下:苿莉花+水→過程A→油水混合物→油層分別與粗提取→加無水硫酸鈉→過濾→茉莉油。過程A表示__________________________,為了提高水油分層效果,可向水油混合物中加入________,向粗提精油中加入無水硫酸鈉的目的是_______________________________________________________________________。解析:(1)高溫條件下可以使酶變性失去活性,從而防止色素被分解,保證茶葉鮮綠的顏色。(2)提取茶油類似于從菜籽中提取食用油,所以最好采納壓榨法;而胡蘿卜素的提取通常用萃取法;萃取時較高的溫度可以提高胡蘿卜素在萃取劑
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