02第二章-顯微鏡

第二章顯微鏡醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院臨床檢驗(yàn)儀器教研室張軼zhangyi@主要內(nèi)容第一節(jié)光學(xué)顯微鏡成像原理第二節(jié)光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)第六節(jié)光學(xué)顯微鏡相關(guān)檢驗(yàn)儀器

第七節(jié)顯微鏡的應(yīng)用進(jìn)展第四節(jié)常用的光學(xué)顯微鏡第五節(jié)顯微鏡的維護(hù)與常見故障處理

第三節(jié)光學(xué)顯微鏡的基本參數(shù)自1665年虎克（Hooke）利用復(fù)合式顯微鏡觀察植物上的微小細(xì)胞以來，顯微鏡發(fā)明至今已有300多年的歷史。顯微鏡按其發(fā)展歷程大致可分為三代，第一代為光學(xué)顯微鏡，第二代為電子顯微鏡，第三代為掃描隧道顯微鏡。本節(jié)簡要介紹光學(xué)顯微鏡和顯微鏡相關(guān)的檢驗(yàn)儀器及電子顯微鏡。第一節(jié)光學(xué)顯微鏡成像原理返回目錄一、顯微鏡的分類返回目錄一、顯微鏡的分類光學(xué)顯微鏡按目鏡數(shù)目可分為單目和雙目顯微鏡；按圖像是否有立體感可分為立體視覺和非立體視覺顯微鏡；按觀察對象可分為生物和金相顯微鏡；按光學(xué)原理可分為偏光、位相和微差干涉對比顯微鏡；按光源類型可分為普通光、熒光、紫外光、紅外光和激光顯微鏡；按接收器類型可分為目視、數(shù)碼（攝像）顯微鏡。常用的顯微鏡有雙目體視顯微鏡、熒光顯微鏡等。返回目錄光學(xué)顯微鏡是由兩組會聚透鏡組成的光學(xué)折射成像系統(tǒng)。通過物鏡和目鏡，在照明和聚光器的輔助下放大觀察物體。被觀察物體位于物鏡焦點(diǎn)的前方靠近焦點(diǎn)處，被物鏡作第一級放大后成一倒立的實(shí)像，然后此實(shí)像再被目鏡作第二級放大，得到放大的倒立虛像，位于人眼的明視距離處，通過人眼觀察到物體放大的像。10標(biāo)本AB經(jīng)兩級放大，在眼的明視范圍內(nèi)看到放大的A``B``像。

要獲得清晰的像，被觀察標(biāo)本AB應(yīng)位于物鏡前焦點(diǎn)外至兩倍焦距之間二、光學(xué)顯微鏡成像原理返回目錄目鏡物鏡粗準(zhǔn)焦螺旋細(xì)準(zhǔn)焦螺旋鏡筒鏡座轉(zhuǎn)換器通光孔載物臺遮光器壓片夾反光鏡鏡臂第二節(jié)光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)返回目錄光學(xué)系統(tǒng)機(jī)械系統(tǒng)13顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)光學(xué)系統(tǒng)機(jī)械系統(tǒng)物鏡目鏡照明裝置支持部件運(yùn)動部件底座鏡臂鏡筒物鏡轉(zhuǎn)換器載物臺調(diào)焦裝置顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)（組成）

第二節(jié)光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)返回目錄14物鏡目鏡照明裝置目鏡物鏡聚光鏡光源一、光學(xué)系統(tǒng)返回目錄（一）物鏡返回目錄物鏡是顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)最核心的部件，其性能直接關(guān)系到顯微鏡的性能和成像質(zhì)量。

1.物鏡的放大倍數(shù)與使用根據(jù)放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑不同分為低倍鏡、中倍鏡、高倍鏡和浸液物鏡，根據(jù)使用方法的差異，物鏡可分浸液系物鏡和干燥系物鏡兩大類。它們的折射率不同。（一）物鏡物鏡名稱放大倍數(shù)數(shù)值孔徑使用方法低倍鏡3～6×0.04～0.15干燥系物鏡中倍鏡5～25×0.15～0.40干燥系物鏡高倍鏡25～65×0.35～0.95干燥系物鏡浸液物鏡90～100×1.25～1.40浸液物鏡

不同物鏡的放大倍數(shù)與使用方法返回目錄物鏡名稱標(biāo)識色差球差場曲使用消色差物鏡ACH紅、藍(lán)波區(qū)校正黃、綠波區(qū)校正存在多與惠更斯目鏡共用復(fù)消色差物鏡APO紅、綠、藍(lán)波區(qū)校正紅、藍(lán)波區(qū)校正存在需要與補(bǔ)償型目鏡配合使用半復(fù)消色差物鏡FL紅、藍(lán)波區(qū)校正紅、藍(lán)波區(qū)校正存在接近于復(fù)消色差物鏡，多用于熒光觀察，使用時(shí)最好與補(bǔ)償型目鏡相配合平場物鏡PLAN存在存在已校正平場物鏡的視場平坦，更適于鏡檢和顯微照相平場消色差物鏡PC紅、藍(lán)波區(qū)校正黃、綠波區(qū)校正已校正更適于鏡檢和顯微照相及攝像平場復(fù)消色差物鏡PF紅、綠、藍(lán)波區(qū)校正紅、藍(lán)波區(qū)校正已校正更適于鏡檢和顯微照相及攝像不同成像質(zhì)量物鏡的像差校正程度與使用2.物鏡的成像質(zhì)量根據(jù)消除色差和像差的能力不同，物鏡可分為消色差物鏡、復(fù)消色差物鏡、半復(fù)消色差物鏡、平場物鏡、平場消色差物鏡和平場復(fù)消色差物鏡（一）物鏡返回目錄3.物鏡的技術(shù)參數(shù)放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑、鏡筒長度、蓋片厚度，浸液物鏡還注明使用的浸液。4.物鏡的齊焦合軸(1)

齊焦即在鏡檢時(shí)，當(dāng)使用某一倍率的物鏡觀察圖像清晰后，在轉(zhuǎn)換另一倍率的物鏡時(shí)，其成像亦應(yīng)基本清晰。(2)合軸即在上述操作中，像的中心偏離也應(yīng)該在一定的范圍內(nèi)。（一）物鏡返回目錄19目鏡也稱接目鏡，實(shí)質(zhì)上是放大鏡，其作用是把物鏡分辨和放大的實(shí)像再放大并映入觀察者眼中。目鏡結(jié)構(gòu)相對簡單,以組成及光學(xué)特點(diǎn)分類。

單目目鏡(10×已經(jīng)拆開)10倍雙目目鏡（二）目鏡返回目錄目鏡名稱結(jié)構(gòu)用途惠更斯目鏡由兩塊平凸透鏡組成，平面朝向眼睛一方組成。焦點(diǎn)位于兩透鏡之間使用最廣泛，是生物顯微鏡最主要的目鏡，一般用于低倍顯微鏡的目鏡冉斯登目鏡由兩塊平凸透鏡組成，凸面相對顯微測量時(shí)常使用此種目鏡補(bǔ)償目鏡在惠更斯目鏡基礎(chǔ)上把接目鏡的單塊平凸透鏡改為三膠合透鏡除了有放大作用外，還能將物鏡造像過程中產(chǎn)生的殘余像差予以校正；它與復(fù)消色差物鏡配合使用、補(bǔ)償校正垂軸色差平場目鏡其結(jié)構(gòu)自身可以消場曲，開涅爾目鏡(一個(gè)雙膠合和一個(gè)單片構(gòu)成)或者對稱目鏡(兩個(gè)雙膠合)都可以消場曲，因此像質(zhì)較好，為平場目鏡其像散和場曲校正較好，具有較大的視場和平坦的視野。常與平場物鏡和消色差物鏡配合使用，可以用于高倍的顯微系統(tǒng)攝影目鏡它與普通目鏡最大的不同點(diǎn)是裝配有一個(gè)把虛像轉(zhuǎn)變?yōu)閷?shí)像的負(fù)透鏡，同時(shí)保證更好的平坦視場。普通顯微鏡所成的像是倒立放大的虛像，虛像不能使感光材料感光，只有將虛像轉(zhuǎn)為實(shí)像后才能進(jìn)行攝影此目鏡專門用于攝影或近距離投影，不能用作顯微觀察或單獨(dú)放大。其像差校正與補(bǔ)償目鏡基本相同，宜與平面復(fù)消色差物鏡或半復(fù)消色差物鏡配用，使其在規(guī)定放大倍數(shù)下具有足夠平坦的映像不同目鏡的結(jié)構(gòu)與用途（二）目鏡返回目錄1.常用目鏡返回目錄（二）目鏡惠更斯（Huygoens)目鏡是由兩片平凸透鏡組成,平面朝向眼睛一方，凸面均朝下的目鏡。這是生物顯微鏡使用最廣泛的目鏡；靠近眼睛的一片稱為目透鏡，起放大作用；另一片稱為場透鏡，它的作用使映像亮度均勻。返回目錄（二）目鏡冉斯登目鏡：由兩個(gè)焦距相等的平凸透鏡組成，兩個(gè)凸面相對，兩者的間距d等于焦距的2／3。冉斯登目鏡的球差、軸向色差和畸變等均小于惠更斯目鏡，但垂軸色差較大。顯微鏡測量時(shí)常使用這種目鏡。（三）顯微鏡的照明方式返回目錄反射照明:凹面鏡對自然光反射，影響因素多，穩(wěn)定相差臨界照明:電光源，聚光鏡焦點(diǎn)與標(biāo)本重合，照明不均勻柯拉照明：照射標(biāo)本的光接近平行，保證光的均勻落射照明：光來自標(biāo)本上方，對不透明的物體，熒光顯微鏡24

反射照明

臨界照明

柯拉照明（三）顯微鏡的照明方式返回目錄252次光源3次光源返回目錄（三）顯微鏡的照明方式26光源濾光片聚光鏡聚光鏡光源(燈在底座內(nèi))（四）顯微鏡照明裝置的主要部件返回目錄27聚光鏡孔徑光闌（四）顯微鏡照明裝置的主要部件返回目錄2829二、機(jī)械系統(tǒng)返回目錄1．鏡座２．鏡筒３．物鏡轉(zhuǎn)換器４．載物臺５．調(diào)焦裝置30物鏡轉(zhuǎn)換器載物臺調(diào)節(jié)手輪單目鏡鏡筒物鏡轉(zhuǎn)換器返回目錄二、機(jī)械系統(tǒng)31調(diào)焦螺旋調(diào)焦螺旋鎖聚光器升降螺旋玻片夾返回目錄二、機(jī)械系統(tǒng)第三節(jié)光學(xué)顯微鏡的基本參數(shù)返回目錄本節(jié)要點(diǎn)1.顯微鏡的性能參數(shù)2.顯微鏡透鏡的像差33一、顯微鏡的性能參數(shù)數(shù)值孔徑、放大率、分辨率、工作距離、視野、景深、鏡像亮度和清晰度。返回目錄34

數(shù)值孔徑

NA＝nsinβ最高數(shù)值孔徑油浸物鏡較高數(shù)值孔徑干物鏡低數(shù)值孔徑干物鏡（一）數(shù)值孔徑返回目錄35數(shù)值孔徑又稱鏡口率，是物體與物鏡間媒質(zhì)的折射率n與物鏡孔徑角的一半（β）正弦值的乘積，用NA表示。即：

NA＝n×sinβ

數(shù)值孔徑是評價(jià)顯微鏡性能的重要參數(shù)。常用媒介物的折射率≤1.515（香柏油），β＜90°，sinβ＜1，因此數(shù)值孔徑范圍在0.05～1.40之間。（一）數(shù)值孔徑返回目錄36光線通過幾種介質(zhì)的折射率（n）比較：介質(zhì)空氣水石蠟油香柏油玻璃折射率1.01.331.471.5151.5237顯微鏡的放大率常稱為放大倍數(shù)，指顯微鏡經(jīng)多次成像后最終所觀察到的物像大小相對于原物體大小的比值，常記作M。

M＝maqM是總放大倍數(shù)；m是物鏡的放大倍數(shù)；a為目鏡的放大倍率；q是在雙目顯微鏡中所增設(shè)的棱鏡產(chǎn)生的放大倍數(shù)。（二）放大率返回目錄38在實(shí)際應(yīng)用中，放大率多用位置放大率估算，公式如下：

M＝（250Lq）／（f1f2）Ｌ為鏡筒長度，f1為物鏡焦距，f2為目鏡焦距．物鏡和目鏡的焦距越短，越有利提高顯微鏡的放大率，但減少工作距離不方便使用。實(shí)際觀察時(shí)，常用目鏡放大率與物鏡放大率的乘積表示M。（二）放大率返回目錄39ABF1F1′O1F2F2′B′A′A〞B〞250mm（明視距離）物鏡目鏡顯微鏡成像原理圖Lm≈L/f1a≈250/f2M＝（250Lq）／（f1f2）（二）放大率返回目錄明視距離就是在合適的照明條件下，眼睛最方便、最習(xí)慣的工作距離。最適合正常人眼觀察近處較小物體的距離，約25厘米。這時(shí)人眼的調(diào)節(jié)功能不太緊張，可以長時(shí)間觀察而不易疲勞。40分辨率是指分辨物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的能力，用顯微鏡所能分辨的兩個(gè)物點(diǎn)間的最小距離表示。分辨率與光波波長和數(shù)值孔徑有關(guān)，計(jì)算公式如下：

δ＝0.61λ／NAδ數(shù)值越小，顯微鏡分辨本領(lǐng)越強(qiáng)。因此，用短波長的光λ(400-760nm)，增大NA(0.05-1.40)

可提高顯微鏡的分辨能力。優(yōu)質(zhì)光學(xué)顯微鏡的分辨接近0.2μm。（三）分辨率返回目錄41提高顯微鏡分辨率的方法

（1）增大物鏡的數(shù)值孔徑在物鏡和蓋玻片之間充以n較大的油，如香柏油n=1.515,不僅使n增大，而且孔徑角也增大。（2）用短波長的光照射

（三）分辨率返回目錄43分辨率與放大率當(dāng)選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大、分辨率不夠高時(shí)，顯微鏡不能分清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)，此時(shí)過度增加放大倍數(shù)，得到的只是一個(gè)大輪廓但模糊的圖像。此時(shí)的放大率稱為無效放大。反之，若分辨率較高而放大倍數(shù)不夠時(shí)，雖然圖像清晰但因太小也可能不被人眼清晰地觀察。要觀察到清晰的物像，應(yīng)合理匹配顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑與顯微鏡的放大倍數(shù)，才能保證放大率是有效的。放大率和分辨率哪個(gè)更重要？（三）分辨率返回目錄44工作距離是指顯微鏡正常觀察物像時(shí)物鏡表面到被觀察標(biāo)本間的距離。它與物鏡的數(shù)值孔徑和放大率成反比顯微鏡使用過程中習(xí)慣所說的“調(diào)焦”指的就是調(diào)整物鏡的工作距離。（四）工作距離返回目錄45一般情況下，物鏡的數(shù)值孔徑越大，其工作距離越小。（四）工作距離返回目錄46

視野又稱視場，是指通過顯微鏡所能看到的標(biāo)本范圍。視野成圓形。視野大小決定于物鏡的倍數(shù)及目鏡光闌的大小，小的放大倍數(shù)和大光闌可獲得較大的視野，反之則視野較小。因?yàn)橐曇暗木窒?，一般均要通過機(jī)械裝置移動、分區(qū)觀察標(biāo)本。圓形視野（五）視野返回目錄47景深又稱焦點(diǎn)深度，是指在成一幅清晰物像的前提下，像平面不變，景物沿光軸前后移動的距離。顯微鏡觀察時(shí)，不僅位于聚焦平面上的點(diǎn)是清楚的，而且在景深范圍內(nèi)的各點(diǎn)也是清楚的。景深與總放大倍數(shù)及物鏡的分辨率成反比。工作距離、景深（六）景深返回目錄49鏡像亮度即顯微鏡的圖像亮度的簡稱，它與照明及物鏡的性能參數(shù)相關(guān)。鏡像亮度以觀察時(shí)眼睛舒適為佳。高倍率條件下工作的暗場、偏光、攝影顯微鏡等都需要足夠的亮度。鏡像清晰度是指圖像輪廓清晰、襯度適中的程度。是顯微鏡成像質(zhì)量的綜合指標(biāo)，其影響因素較多，如鏡片質(zhì)量、鏡筒內(nèi)壁質(zhì)量、光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和制造精度等有關(guān)，也與使用方法有關(guān)。（七）鏡像亮度與清晰度返回目錄50像差是指在光學(xué)系統(tǒng)中，由于透鏡材料的特性、折射或反射表面的幾何形狀引起的實(shí)際像與理想像的偏差。即透鏡所成的像與理想像在形狀等方面存在差異。像差是指光學(xué)儀器不可能使物點(diǎn)發(fā)出的而進(jìn)入系統(tǒng)的所有光線都是沿著高斯光學(xué)的理想光路成像，從而導(dǎo)致成像在形狀方面的缺陷。像差一般分兩大類：單色像差和復(fù)色像差。返回目錄二、顯微鏡透鏡的像差像差名稱像差表現(xiàn)球差是物像中間亮而邊緣成逐漸模糊的彌散斑，透鏡邊緣的光線折射角更大，在成像時(shí)兩部分的光線不能交于一點(diǎn)。球差使物點(diǎn)像成一個(gè)“彌散斑”慧差物像在成像平面上面形成一個(gè)頂端小而亮，遠(yuǎn)離光軸方向形成逐漸增寬且亮度減弱、模糊的尾部呈彗星樣的像差。光軸外物點(diǎn)產(chǎn)生的光束經(jīng)過透鏡的中央和邊緣后形成多個(gè)像點(diǎn)，散落在垂直于光軸的平面上，離光軸近的像點(diǎn)亮，其他像點(diǎn)逐漸變暗而成彗星狀光斑，（一）單色像差返回目錄像差名稱像差表現(xiàn)像散主光軸以外的物點(diǎn)發(fā)出的光與主光軸有夾角，它經(jīng)透鏡折射后在不同面上成像，形成彌散斑或與光軸平行、垂直的亮線等場曲平面物體成像后形成一個(gè)彎曲的面稱為場曲。平面物體各物點(diǎn)都可形成清晰的像，但其與光軸的距離不同，使整個(gè)像不在同一平面上，如此像差稱為場曲。場曲對顯微攝影成像質(zhì)量影響較大。

畸變由于像平面上各處放大率不同而形成的物體成像缺陷稱為畸變?；儾挥绊懴竦那逦鹊贡挥^察物形狀失真，離光軸越遠(yuǎn)處放大率越大，形成了枕形畸變，稱為正畸變。反之邊緣放大率小而近軸放大率大的桶形畸變，稱為負(fù)畸變

53返回目錄（一）單色像差55球差象散慧差場曲正畸變負(fù)畸變56由于復(fù)色光中各種光的折射率不同、光程差異所導(dǎo)致的成像缺陷又稱為色差。色差分為軸向色差和垂軸色差。返回目錄（二）復(fù)色像差57垂軸色差

軸向色差

返回目錄（二）復(fù)色像差不同波長的光將以不同的程度色散。白光被色散為紫外波段、可見波段和紅外波段范圍的各種波長的光，通過透鏡時(shí)所成的像便帶有彩色邊緣，即為色差。色差會造成物像的顏色不同、位置不重合、大小不一等缺陷。光學(xué)顯微鏡的不足之處1.放大倍數(shù)的極限：

20002.分辨率的極限：

0.2m（可見光照明）3.景深的極限：

0.1m4.不能分析化學(xué)成分本節(jié)要點(diǎn)1.普通生物顯微鏡2.暗視野顯微鏡3.倒置顯微鏡4.熒光顯微鏡5.相襯顯微鏡6.偏光顯微鏡第四節(jié)常用的光學(xué)顯微鏡返回目錄60普通生物顯微鏡具有不同規(guī)格的物鏡、目鏡、聚光鏡和光源等光學(xué)構(gòu)件，它們通過鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、鏡座、載物臺和調(diào)焦裝置等連接、固定和調(diào)節(jié)，放大物體，觀察物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。根據(jù)目鏡結(jié)構(gòu)的不同，有單目和雙目之分。一、普通生物顯微鏡

返回目錄61雙目顯微鏡單目顯微鏡一、普通生物顯微鏡

返回目錄62一、普通生物顯微鏡

返回目錄將主開關(guān)打開，調(diào)節(jié)亮度將樣品置于載物臺，移入光路以轉(zhuǎn)換器使10×物鏡入光路轉(zhuǎn)動調(diào)焦旋鈕，對樣本聚焦調(diào)節(jié)目鏡瞳間距和屈光度調(diào)節(jié)孔徑光闌和視場光闌將觀察物鏡轉(zhuǎn)入光路，再聚焦再次調(diào)節(jié)亮度，開始觀察普通光學(xué)顯微鏡的基本觀察步驟63三、倒置顯微鏡返回目錄

倒置顯微鏡(InvertedMicroscope)的組成和普通顯微鏡一樣，只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒，前者在載物臺之下，后者在載物臺之上，用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞。64三、倒置顯微鏡返回目錄倒置顯微鏡

熒光顯微鏡(fluorescencemicroscopy)是以紫外線為光源來激發(fā)生物標(biāo)本中的熒光物質(zhì)，產(chǎn)生能觀察到各種顏色熒光的一種光學(xué)顯微鏡。利用它可研究熒光物質(zhì)在組織和細(xì)胞內(nèi)的分布。

為防止紫外線進(jìn)入物鏡，可以采用暗視場照明。四、熒光顯微鏡返回目錄熒光顯微鏡應(yīng)具備的條件：一、使用能產(chǎn)生短波長光的光源，如高壓汞燈、高壓氙燈二、使用激發(fā)慮光片選擇激發(fā)光波長范圍，慮光片安裝于光源和聚光鏡之間。三、聚光鏡、載玻片、蓋玻片、物鏡應(yīng)盡可能減少吸收短波長光四、吸收濾光片置于標(biāo)本與目鏡之間五、熒光顯微鏡應(yīng)在暗室內(nèi)觀察，或者目鏡上裝有遮光罩阻擋干擾光四、熒光顯微鏡返回目錄熒光顯微鏡的種類A透射式

B

落射式四、熒光顯微鏡返回目錄熒光顯微鏡的主要部件透射式汞燈光源激發(fā)濾色鏡暗場聚光鏡吸收濾色鏡

落射式汞燈光源激發(fā)濾色鏡分色鏡吸收濾色鏡四、熒光顯微鏡返回目錄吸收濾色鏡暗場聚光鏡激發(fā)濾色鏡汞燈箱透射熒光顯微鏡的構(gòu)造四、熒光顯微鏡返回目錄

目鏡吸收濾色鏡

物鏡暗場聚光鏡激發(fā)濾色鏡

汞燈透射熒光顯微鏡原理四、熒光顯微鏡返回目錄熒光顯微鏡基本使用步驟四、熒光顯微鏡返回目錄按熒光鏡系統(tǒng)順序開機(jī)將處理好的樣品置于載物臺先用普通光源對位調(diào)焦觀察依樣本要求選擇濾光片打開熒光光源并預(yù)熱打開對應(yīng)的阻斷濾光片圖像調(diào)整，拍照保存按熒光鏡系統(tǒng)順序關(guān)機(jī)一、顯微鏡的維護(hù)二、顯微鏡常見故障及排除第五節(jié)顯微鏡的維護(hù)與常見故障處理本節(jié)要點(diǎn)返回目錄使用小結(jié)：一、取鏡和安放右手握、左手托、略偏左、安目鏡二、對光（1）低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔。（2）左眼看，右眼睜。（3）調(diào)節(jié)光的強(qiáng)度，看到明亮的視野。三、觀察（1）

標(biāo)本放在載物臺上，壓住，正對通光孔。（2）

眼看物鏡，鏡筒下降，直到接近標(biāo)本。（3）

左眼注視目鏡，鏡筒緩緩上升，直到看清物像.復(fù)原放回1、觀察完畢，先提升鏡筒，取下玻片標(biāo)本2、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使兩個(gè)物鏡伸向前方，將鏡筒緩慢降至最低3、光源關(guān)至最小，關(guān)掉光源，電源4、將顯微鏡放回原處76一、顯微鏡的維護(hù)（一）保證良好的使用環(huán)境

（二）保持正確的使用方法（三）定期進(jìn)行清潔維護(hù)返回目錄771、必須遵守操作規(guī)程，嚴(yán)格認(rèn)真地按要求操作。取送顯微鏡時(shí)，應(yīng)右手握住鏡臂，左手托住鏡座，輕拿輕放。切勿用一只手斜提，前后擺動，防止目鏡滑出跌落。2、保護(hù)好鏡頭，揩試目鏡、物鏡上的灰塵或污物，必須使用專用的擦鏡紙。切勿用手指、手帕、紗布和普通紙擦。使用注意事項(xiàng)783、物鏡鏡頭的切換一定要使用轉(zhuǎn)換器，以免使鏡頭脫落和損壞。4、轉(zhuǎn)動粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，不要用力過猛，以防止機(jī)件損傷，調(diào)節(jié)失靈。5、鏡檢時(shí)，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙畫圖。兩眼須同時(shí)睜開，以減少疲勞。796、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標(biāo)本碰撞而損壞；也不能持續(xù)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡筒一直上升，這樣會使鏡筒內(nèi)的齒板和齒輪脫鉤，以致鏡筒跌出。807、載物臺要保持清潔干燥。如使用新鮮材料做臨時(shí)裝片，必須在載玻片上加蓋蓋玻片。切勿讓材料、水滴、試劑接觸物鏡和載物臺。如沾上，應(yīng)立即揩擦干凈，以免鏡頭等被污染和腐蝕。8、在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時(shí)，切勿使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓壞標(biāo)本，損壞物鏡。819、高倍鏡使用完畢，必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標(biāo)本，以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。10、絕對禁止隨意取出目鏡或拆下顯微鏡的其他部件，以免灰塵掉入鏡筒、部件失落或損壞。82常見故障原因排除方法視場模糊、視場亮度不均、不能看到完整視場1．物鏡轉(zhuǎn)換器未能正確定位（物鏡未與光路同軸）1．旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器直至選用物鏡完全對中2．聚光器位置太低2．調(diào)整（升高）聚光器位置得到良好物像3．視場光闌未對中3．調(diào)整視場光闌使其良好對中4．視場光闌開得太小4．適當(dāng)開大光闌二、顯微鏡常見故障及排除返回目錄83常見故障原因排除方法視場內(nèi)有污跡或灰塵1．目鏡、物鏡、聚光鏡等其它光學(xué)部件上有污跡和灰塵（旋動目鏡時(shí)污物轉(zhuǎn)動說明目鏡上有污物，否則污物在物鏡或聚光鏡上）1．正確擦拭顯微鏡的光學(xué)部件。擦拭目鏡和物鏡時(shí)必須使用合格的拭鏡紙、蘸取無水乙醇擦拭。要避免二次污染2．標(biāo)本片上有污跡和灰塵2．正確擦拭標(biāo)本片二、顯微鏡常見故障及排除返回目錄84常見故障原因排除方法觀察效果差、看不清細(xì)節(jié)、視場不均勻（反差過大）1．標(biāo)本片正反面錯(cuò)放1．翻轉(zhuǎn)，使蓋玻片向上2．蓋玻片太厚2．使用標(biāo)準(zhǔn)厚度（0.17mm厚）的蓋玻片3．油鏡觀察時(shí)未浸油3．使用合格浸油，油鏡浸入4．油鏡浸油內(nèi)有氣泡4．除去氣泡（加浸油時(shí)避免空氣進(jìn)入；有氣泡可用牙簽等挑破而除去）5．干型物鏡上有浸油或其他污物5．用專用擦鏡頭液擦拭6．光闌未能調(diào)整好（過大或過小）6．適當(dāng)調(diào)整光闌二、顯微鏡常見故障及排除返回目錄85欣賞顯微鏡下的世界通過光學(xué)顯微鏡看到生命的美麗和復(fù)雜性透射式電子顯微鏡觀測到的枯草芽孢桿菌圣海倫火山的火山灰微粒石墨烯90

二氧化鈦和鱗石英在高鈷玻璃中的結(jié)晶體美國俄亥俄州獨(dú)立鋼鐵公司物理學(xué)家詹姆斯-史密斯拍攝，放大了350倍

91黃金在真空蒸發(fā)器中汽化美國俄亥俄州獨(dú)立鋼鐵公司攝影師、材料專家大衛(wèi)-格尼察克拍攝，放大了55倍。92細(xì)長的原生動物吸附在充滿細(xì)菌的綠藻表面美國羅德愛蘭州大學(xué)攝影師、生物學(xué)家保羅-約翰遜拍攝，放大了160倍。93昆蟲幼蟲在其覓食構(gòu)造中利用吸管吸收紅色的有機(jī)物美國圣巴巴拉加州大學(xué)海洋研究所生物學(xué)家詹姆斯-金拍攝，放大了20倍。94電子焊接玻璃實(shí)驗(yàn)中破碎的氣泡美國俄亥俄州獨(dú)立鋼鐵公司攝影師、材料專家大衛(wèi)-格尼察克拍攝，放大了55倍。95

銀果胡頹子的鱗狀毛美國北卡州立大學(xué)植物學(xué)家喬恩-埃森巴克拍攝，放大了400倍。96附著在紅藻上的吸管蟲美國鮑勃-霍普心血管研究所科學(xué)家艾利恩-盧克斯拍攝，放大了125倍。97

巴西瑪瑙中的鐵質(zhì)美國寶石學(xué)會攝影師約翰-科爾弗拉拍攝，放大了30倍。98

福爾馬林溶液中的螺旋形線蟲美國北卡州立大學(xué)攝影師、生化學(xué)家喬恩-埃森巴克拍攝，放大了160倍。99綠色水螅俘獲水蚤北愛爾蘭科爾蘭阿爾斯特大學(xué)生物學(xué)家史蒂芬-洛瑞拍攝，放大了10倍。100燕鷗身上提取的流感病毒神經(jīng)氨酸酶晶體澳大利亞國立大學(xué)攝影師、流行病學(xué)家朱麗-麥克林和格雷姆-拉沃爾共同拍攝，放大了14倍。101

?；邘r中的金色氣泡澳大利亞昆士蘭州攝影師、物理學(xué)家大衛(wèi)-史密斯拍攝，放大了20倍。102

編織機(jī)針的分次曝光圖比利時(shí)材料科學(xué)家馬克-范-霍夫拍攝，放大了10倍。103

硫酸鎂溶液中的結(jié)晶體美國阿爾貢國家實(shí)驗(yàn)室化學(xué)家理查德-李拍攝，放大了50倍