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文檔簡介
2024屆金科大聯(lián)考高三下學(xué)期聯(lián)合考試生物試題注意事項1.考生要認真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結(jié)束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.醫(yī)學(xué)上把LDL稱為低密度脂蛋白,是一類富含膽固醇的蛋白質(zhì)(膽固醇包裹于蛋白質(zhì)內(nèi)部),體內(nèi)多余的LDL易沉積在動脈的管壁上,會引起嚴重的動脈粥樣硬化病變。進一步研究表明:人體內(nèi)有2/3的LDL可借助LDL受體途徑進行代謝,完成對LDL的降解(如下圖所示),據(jù)圖分析正確的是()A.溶酶體是單層膜構(gòu)成的細胞器,其內(nèi)的水解酶能降解LDLB.膽固醇從溶酶體中釋放出去,需要載體蛋白協(xié)助C.LDL進入細胞內(nèi)與線粒體無關(guān),僅與膜上的受體有關(guān)D.LDL受體空間結(jié)構(gòu)的形成與溶酶體有關(guān)2.下列關(guān)于細胞分化和全能性的說法,正確的是A.正常情況下,細胞分化是不可逆的B.細胞分化的程度越高,遺傳物質(zhì)的變化越大C.高度分化的植物體細胞不具有全能性D.胚胎干細胞能被誘導(dǎo)分化為機體幾乎所有的細胞類型,這是細胞全能性的體現(xiàn)3.胃癌是我國發(fā)病率很高的一種惡性疾病,制備抑制癌細胞增殖的單克隆抗體對治療胃癌具有重要意義??刮赴﹩慰寺】贵w的制備過程如圖所示,以下說法正確的是()A.單克隆抗體的制備過程中需加入血清或血漿B.將人的胃癌細胞反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體C.在乙、丙及骨髓瘤細胞中,乙、丙經(jīng)培養(yǎng)后,均可獲得大量的抗胃癌單克隆抗體D.誘導(dǎo)骨髓瘤細胞與甲融合,可用的誘導(dǎo)因素是只有滅活的病毒4.下列關(guān)于細胞內(nèi)化合物的敘述,正確的()A.核苷酸與氨基酸的元素組成相同B.多糖、核酸和膽固醇等生物大分子都以碳鏈為基本骨架C.脂質(zhì)存在于所有細胞中,是組成細胞的重要化合物D.蛋白質(zhì)發(fā)生熱變性后不利于人體消化吸收5.某科研小組研究某池塘內(nèi)草魚種群增長速率的變化規(guī)律(如圖1,其中T2之前的數(shù)據(jù)丟失)和該草魚種群同化量的分配及流向(如圖2),下列敘述正確的是()A.T2--T4時間段內(nèi),種群數(shù)量呈“S”型增長;T4—T5時間段內(nèi),種群數(shù)量逐漸下降B.當種群增長速率為m時,該草魚的年齡組成為穩(wěn)定型C.圖2中“?”代表的是草魚種群產(chǎn)生的糞便中的能量D.圖2中兩個營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為D/(A+B+C+D)6.若用同一顯微鏡觀察同一標本4次,每次僅調(diào)整目鏡或物鏡和細準焦螺旋,結(jié)果得到下面各圖。其中視野最暗的是A. B.C. D.7.已知吲哚乙酸(IAA)在幼嫩的組織器官中運輸為極性運輸,在成熟的組織器官中為非極性運輸,而脫落酸(ABA)的運輸只為非極性運輸?,F(xiàn)用放射性同位素14C標記IAA和ABA開展如下圖所示的實驗。若圖中AB為莖尖切段,則出現(xiàn)較強放射性的是()A.瓊脂塊①、②和③ B.瓊脂塊①、②和④C.瓊脂塊①、③和④ D.瓊脂塊②、③和④8.(10分)人類的參與使受到影響的環(huán)境得到改善,不同地區(qū)采取不同的措施,如修復(fù)鹽堿化的草地、植樹造林、生態(tài)農(nóng)業(yè)的發(fā)展、將工廠廢棄地改造為公園等。下列敘述錯誤的是A.生態(tài)農(nóng)業(yè)實現(xiàn)了物質(zhì)和能量在系統(tǒng)中的多級循環(huán)利用B.植樹造林提高了生物多樣性,提高了生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性C.修復(fù)鹽堿化草地的過程中生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)逐漸變得復(fù)雜D.工廠廢棄地植被重建與維持過程屬于群落的次生演替二、非選擇題9.(10分)研究小組探究不同濃度的IAA、乙烯利及二者的混合溶液對大豆下胚軸不定根形成的影響,結(jié)果如下。組別A組B組C組A0A1A2A3B0B1B2B3C0C1C2C3IAA010501000105010001050100乙烯利00001010101050505050不定根平均數(shù)量(條)12213228101928357161936請回答:(1)對大豆的下胚軸進行激素處理時常用浸泡法,這種處理方法對激素濃度和處理時間的要求是____________。(2)A組實驗中IAA對大豆下胚軸生根的作用____________(表現(xiàn)/未表現(xiàn))出兩重性,判斷的理由是__________。(3)本實驗表明不同濃度的IAA和乙烯利混合溶液共同作用時乙烯對植物不定根形成過程中有促進和抑制兩種相反的調(diào)控作用。①支持乙烯對不定根形成有抑制作用的證據(jù)是___________;②支持乙烯對不定根形成有促進作用的證據(jù)是_____________。(4)進一步研究發(fā)現(xiàn)生長素能調(diào)控不定根發(fā)育的相關(guān)基因的表達,說明激素在植物體內(nèi)起作用的方式是_______________________。10.(14分)桑基魚塘分布在我國長江三角洲、珠江三角洲一帶的水鄉(xiāng),是一種典型的水陸物質(zhì)和能量交換型生態(tài)工程(如圖);表格數(shù)據(jù)表示有機物從桑樹傳到蠶的能量流動情況,試分析?;~塘的物質(zhì)和能量流動途徑,回答下列問題:項目能量(kJ)蠶吃掉的桑葉所含能量419蠶沙(糞便)含有的能量219蠶呼吸作用散失的能量146①54(1)圖中生態(tài)系統(tǒng)的食物網(wǎng)簡單,與森林生態(tài)系統(tǒng)相比,它的___________能力較弱,其___________穩(wěn)定性也相應(yīng)較低。(2)將蠶沙(糞便)投入魚塘供給魚食用,蠶沙中所含的能量屬于第___________營養(yǎng)級所含的能量,蠶沙中的碳元素主要以___________形式流向魚,魚體內(nèi)的碳元素主要以___________形式流向桑樹。(3)根據(jù)表格數(shù)據(jù)可知,蠶同化的總能量為___________kJ,表中①部分的能量用于蠶的___________,儲存在蠶的有機物中。11.(14分)黃瓜花葉病毒(CMV)是能侵染多種植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn)。研究人員通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將該病毒外殼蛋白的cDNA導(dǎo)入番茄植株中,成功獲得抗CMV的番茄植株。(1)獲得CMV的RNA后,在__________的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。(2)獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的__________片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細胞的轉(zhuǎn)化。(3)將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間,只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA,你認為他們做出以上判斷的理由是_________________。(4)要想確定轉(zhuǎn)基因番茄已經(jīng)成功表達出CMV外殼蛋白,需要進行____________實驗。(5)若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力,請寫出實驗設(shè)計思路__________。轉(zhuǎn)基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,由此可以得出的結(jié)論是_________(答出兩點)。12.在適宜的溫度和光照條件下,將A、B兩種綠色植物分別置于相同的密閉容器中,測量容器中CO2濃度的變化情況,結(jié)果如圖所示。回答下列問題:(1)A、B兩種植物細胞固定CO2的場所是____________。當CO2濃度約為0.8mmol/L時,有人認為此時A、B兩種植物的光合作用強度一定相等,你是否認同該說法,并說明理由:____________________。(2)在0~15min內(nèi),A、B兩種植物的光合速率均逐漸下降,其原因是___________。(3)在25~40min內(nèi),A、B兩種植物所在玻璃容器中CO2含量均沒有發(fā)生變化的原因是___________。(4)若將A、B兩種植物置于同一密閉玻璃容器中,在光照等其他條件適宜的情況下,一段時間內(nèi),生長首先受影響的植物是______________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
分析圖解:表示LDL的降解過程,圖中可以看出,LDL與相應(yīng)受體結(jié)合后通過胞吞的方式進入細胞,然后通過溶酶體中的水解酶將蛋白質(zhì)降解,釋放出膽固醇?!驹斀狻緼、溶酶體是細胞內(nèi)的酶倉庫,由單層膜包被,富含蛋白酶等各種酶,圖中信息表明,溶酶體內(nèi)的水解酶能降解LDL,A正確;B、膽固醇屬于脂質(zhì)類物質(zhì),它和細胞膜的基本支架磷脂雙分子層具有相似相溶性,因此可以通過自由擴散從溶酶體中釋放出去,因此不需要載體蛋白協(xié)助,B錯誤;C、LDL是大分子物質(zhì),進入細胞內(nèi)屬于胞吞,胞吞過程需要線粒體供能,C錯誤;D、LDL受體為蛋白質(zhì)分子,其空間結(jié)構(gòu)的形成與溶酶體無關(guān),D錯誤。故選A?!军c睛】本題結(jié)合圖解,考查細胞的結(jié)構(gòu)和功能,重點考查細胞器的相關(guān)知識,要求考生識記細胞中各種細胞器的結(jié)構(gòu)、分布和功能,能結(jié)合圖中信息準確判斷各選項。2、A【解析】
細胞的全能性是指已經(jīng)分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能,這是由于細胞中含有控制該生物生長、發(fā)育、繁殖的全套的遺傳信息;細胞分化是指在個體發(fā)育中,由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程,細胞分化使細胞的種類增多,功能趨于專門化?!驹斀狻緼.正常情況下,細胞分化是不可逆的,一旦沿著一定方向分化,便不會脫分化到原來的狀態(tài),A正確;B.細胞分化過程中遺傳物質(zhì)不改變,B錯誤;C.大量的科學(xué)事實證明,高度分化的植物體細胞仍具有全能性,C錯誤;D.胚胎干細胞能誘導(dǎo)分化為幾乎所有的細胞類型,不能體現(xiàn)全能性,全能性是以個體的實現(xiàn)為標志,D錯誤。3、A【解析】
1、單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。2、據(jù)圖分析,甲表示B淋巴細胞,乙為雜種細胞,表示雜交瘤細胞,丙表示能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞?!驹斀狻緼、單克隆抗體的制備過程中需加入血清或血漿,A正確;B、將人的胃癌細胞反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體不是單克隆抗體,B錯誤;C、在乙、丙及骨髓瘤細胞中,乙、丙經(jīng)培養(yǎng)后,由于基因的選擇性表達,不一定獲得大量的抗胃癌單克隆抗體,C錯誤;D、誘導(dǎo)骨髓瘤細胞與甲B淋巴細胞融合,可用的誘導(dǎo)因素處理滅活的病毒,還有聚乙二醇等,D錯誤。故選A。4、C【解析】
生物大分子(糖類、脂質(zhì)、核酸、蛋白質(zhì))是由小分子聚合而成,這些小分子稱為結(jié)構(gòu)單元。糖類的結(jié)構(gòu)單元是單糖,如多糖的結(jié)構(gòu)單元是葡萄糖,核酸的基本單位為核苷酸,蛋白質(zhì)的基本單位為氨基酸。糖類的主要功能是作為能源物質(zhì),如淀粉是植物的能源物質(zhì),而糖原是動物的貯能物質(zhì)。蛋白質(zhì)由于氨基酸的種類、數(shù)量、排列順序以及多肽鏈的空間結(jié)構(gòu)的不同,而具有多種功能,如催化、免疫、運輸、識別等。核酸包括DNA和RNA,DNA是細胞中的遺傳物質(zhì),RNA與基因的表達有關(guān)。脂質(zhì)包括磷脂(細胞膜的成分)、油脂(貯能物質(zhì))、植物蠟(保護細胞)、膽固醇、性激素等?!驹斀狻緼、核苷酸的元素組成為C、H、O、N、P,氨基酸的元素組成為C、H、O、N,有些還含有S、P、Fe等,A錯誤;B、多糖、核酸等生物大分子都以碳鏈為基本骨架,膽固醇是小分子,B錯誤;C、脂質(zhì)存在于所有細胞中,是組成細胞的重要化合物,如磷脂是細胞膜的主要成分,C正確;D、蛋白質(zhì)發(fā)生熱變性后空間結(jié)構(gòu)被破壞,有利于蛋白質(zhì)的水解,有利于人體消化吸收,D錯誤。故選C。5、D【解析】
分析圖1:該曲線表示S型曲線的種群增長速率,其中T3對應(yīng)的種群數(shù)量為K/2,T5對應(yīng)的種群數(shù)量為K值。分析圖2:圖2是該生態(tài)系統(tǒng)中魚攝食后能量的流向示意圖,其中A表示呼吸作用消耗的能量;BCD表示魚生長、發(fā)育和繁殖;C表示被分解者利用?!驹斀狻緼、0-T5時間段內(nèi),種群數(shù)量呈“S”型增長,T4-T5時間段內(nèi),種群增長速率雖然下降,但種群數(shù)量逐漸上升,A錯誤;B、當種群增長速率為m時,該草魚的年齡組成為增長型,B錯誤;C、圖2中的同化的總能量,除圖中所示去路外,還有一部分是未被利用,即“?”表示,C錯誤;D、圖2中兩個營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為D/(A+B+C+D),D正確。故選D。6、C【解析】
1、高倍鏡與低倍鏡觀察情況比較物像大小看到細胞數(shù)目視野亮度物像與裝片的距離視野范圍高倍鏡大少暗近小低倍鏡小多亮遠大2、低倍鏡換高倍鏡的步驟:低倍鏡下調(diào)清晰,并移動物像到視野中央→轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,換上高倍物鏡→緩緩調(diào)節(jié)細準焦螺旋,使物像清晰?!驹斀狻坑煞治隹芍阂曇白畎档氖歉弑剁R下的視野,其細胞特征是細胞體積大、數(shù)目少,故C符合題意,C正確。故選C。7、C【解析】
生長素的運輸方向有三種:極性運輸、非極性運輸和橫向運輸。其中極性運輸是一種主動運輸;非極性運輸可以發(fā)生在成熟組織的韌皮部;橫向運輸發(fā)生在尖端,且需要在單一方向的刺激下發(fā)生?!驹斀狻坑捎谶胚嵋宜幔↖AA)在幼嫩的組織器官中具有極性運輸特點,即在莖尖切段只能由形態(tài)學(xué)上端向形態(tài)學(xué)下端運輸,瓊脂塊①和②中出現(xiàn)較強放射性的是①,脫落酸(ABA)的運輸只為非極性運輸,若圖中AB為莖尖切段,瓊脂塊③和④中均出現(xiàn)了較強放射性,C正確。故選C。8、A【解析】
構(gòu)建生態(tài)農(nóng)所依據(jù)的生物學(xué)原理是物質(zhì)的循環(huán)和能量的流動,構(gòu)建農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的目的是實現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級利用,減少環(huán)境的污染,該生態(tài)系統(tǒng)中充分利用了廢棄物中的能量,提高了能量的利用率,實現(xiàn)了良性循環(huán),自我調(diào)節(jié)能力強弱取決于生態(tài)系統(tǒng)中的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)和營養(yǎng)成分。【詳解】A、物質(zhì)可以循環(huán)利用,但能量只能多級利用,不能循環(huán),A錯誤;B、植樹造林使群落結(jié)構(gòu)更加負載,提高了生物多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,B正確;C、改造鹽堿化草地的過程中,群落的空間結(jié)構(gòu)也會發(fā)生變化,群落結(jié)構(gòu)變得復(fù)雜,C正確;D、工廠廢棄地植被重建與維持過程是在保留了土壤條件的基礎(chǔ)上發(fā)生的演替過程,屬于次生演替,D正確。故選A?!军c睛】本題重點考查了生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性的知識,群落結(jié)構(gòu)越復(fù)雜,穩(wěn)定性越高。二、非選擇題9、配制較低濃度的激素溶液,處理時間需幾小時至一天未表現(xiàn)A1、A2、A3組的不定根均數(shù)量大于A0組,說明實驗組的IAA對大豆下胚軸的生根都有促進作用,沒有體現(xiàn)抑制作用B1、C1組的不定根平均數(shù)量小于A1組(或:B2、C2組的不定根平均數(shù)量小于A2組或:當IAA濃度為10或50時,隨著乙烯利濃度的增加,不定根平均數(shù)量減少)B3、C3組的不定根平均數(shù)量大于A3組(或:當IAA濃度為100時,隨著乙烯利濃度的增加,不定根平均數(shù)增加)為信息分子,調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育(或:給細胞傳達一種調(diào)節(jié)代謝的信息)【解析】
激素調(diào)節(jié)與植物生命活動的關(guān)系:激素調(diào)節(jié)在植物的生長發(fā)育和對環(huán)境的適應(yīng)過程中發(fā)揮著重要作用,但是,激素調(diào)節(jié)只是植物生命活動調(diào)節(jié)的一部分。植物的生長發(fā)育過程,在根本上是基因組在一定時間和空間上程序性表達的結(jié)果。光照、溫度等環(huán)境因子的變化,會引起植物體內(nèi)產(chǎn)生包括植物激素合成在內(nèi)的多種變化,進而對基因組的表達進行調(diào)節(jié)?!驹斀狻浚?)用激素處理大豆下胚軸可以用沾蘸法或浸泡法,前者通常使用高濃度的激素處理很短的時間,如3~5s;后者需要的激素濃度低,通常是處理幾小時至一天,本實驗中用浸泡法處理,具體做法是配制較低濃度的激素溶液,對大豆的下胚軸處理幾小時至一天。(2)A組實驗中A1、A2、A3組的不定根數(shù)量均大于A0組,說明實驗組的IAA對大豆下胚軸的生根都有促進作用,沒有體現(xiàn)抑制作用,故此可知實驗中IAA對大豆下胚軸生根的作用未表現(xiàn)出兩重性。(3)①實驗中B1、C1組的不定根平均數(shù)量小于A1組(或:B2、C2組的不定根平均數(shù)量小于A2組或:當IAA濃度為10或50時,隨著乙烯利濃度的增加,不定根平均數(shù)量減少),由此實驗結(jié)果可得出乙烯對不定根形成有抑制作用的結(jié)論;②根據(jù)實驗結(jié)果中B3、C3組的不定根半均數(shù)量大于A3組,可以得出乙烯對不定根形成有促進作用的的結(jié)論。(4)進一步研究發(fā)現(xiàn)生長素能調(diào)控不定根發(fā)育的相關(guān)基因的表達,據(jù)此可知激素作為信息分子,傳遞了一種調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育的信息?!军c睛】運用單一變量原則對題目中的實驗結(jié)果進行合理的分析、比較是正確解題的關(guān)鍵!10、自我調(diào)節(jié)抵抗力—有機物CO2200(自身)生長、發(fā)育和繁殖(等生命活動)【解析】
分析:生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈(網(wǎng))中,每個營養(yǎng)級固定的能量有四個去向:流向下一營養(yǎng)級(最高營養(yǎng)級除外)、分解者分解利用、呼吸作用、未被利用,所以能量流動的特點是逐級遞減;能量的傳遞效率在10%~20%之間。表格中蠶吃掉的桑葉所含能量為蠶的攝入量,蠶沙(糞便)含有的能量為蠶未同化的能量,屬于桑樹同化的能量,則蠶同化的能量=攝入量-糞便兩=419-219=200KJ;蠶的同化量(200KJ)=蠶呼吸作用散失的能量(146KJ)+蠶用于生長、發(fā)育和繁殖的能量(54KJ),因此表格中的①表示蠶用于生長、發(fā)育和繁殖的能量。詳解:(1)根據(jù)題意分析,圖中生態(tài)系統(tǒng)的食物網(wǎng)(營養(yǎng)結(jié)構(gòu))簡單,則與森林生態(tài)系統(tǒng)相比,其自我調(diào)節(jié)能力較弱,抵抗力穩(wěn)定性也較低。(2)根據(jù)以上分析已知,蠶沙含有的能量是蠶未同化的能量,屬于上一營養(yǎng)級(第一營養(yǎng)級)同化的能量;蠶沙中的碳元素主要以含碳有機物形式流向魚,魚體內(nèi)的碳元素主要以二氧化碳形式流向桑樹。(3)根據(jù)以上分析已知,蠶同化的能量為200KJ,表格中的①表示蠶用于生長、發(fā)育和繁殖的能量。點睛:解答本題的關(guān)鍵是了解能量流動的過程以及能量的幾個去向,掌握能量流動過程中的相關(guān)公式,進而根據(jù)表格數(shù)據(jù)進行相關(guān)計算并判斷①的含義。11、逆轉(zhuǎn)錄酶Ti質(zhì)粒的T-DNA重組表達載體同時含有卡那霉素和青霉素抗性基因,只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織抗原-抗體雜交用等量強致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄(普通番茄),在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間,觀察它們對CMV的抗性目的基因整合到受體細胞的一條染色體上,獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。2、基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不同。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。4、目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù);④個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄,該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是:農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體DNA上。因此,獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細胞的轉(zhuǎn)化。(3)重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織,據(jù)此可知生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA。(4)檢測目的基因是否表達產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì),需要進行抗原-抗體雜交實驗。(5)若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力,應(yīng)進行個體水平上的鑒定,自變量為番茄植株的種類,即用等量強致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄(普通番茄),在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間,觀察它們對CMV的抗性。轉(zhuǎn)基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,符合基因分離定律,由此可以得出的結(jié)論是目的基因整合到受體細胞的一條染色
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