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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)三摘除腎上腺的影響及腎上腺皮質(zhì)素的作用一、 目的觀察和比較摘除腎上腺后小鼠某些生理機(jī)能的變化及腎上腺皮質(zhì)素的替代作用,探討腎上腺對(duì)小白鼠水鹽代謝及應(yīng)激能力等方面的作用。二、 原理腎上腺由皮質(zhì)和髓質(zhì)構(gòu)成,切除腎上腺髓質(zhì)并不危及生命,動(dòng)物可在平靜的環(huán)鏡中長期生存,腎上腺皮質(zhì)是維持生命所必需的,腎上源皮質(zhì)分泌鹽皮質(zhì)激素,糖皮質(zhì)激素和少量性激素。摘除腎上腺的動(dòng)物可迅速表現(xiàn)出皮質(zhì)功能失調(diào)的現(xiàn)象,如食欲下降,體溫降低,停止生長或體重減輕以及對(duì)有害刺激的耐力一應(yīng)激能力的下降等,一般在正常生活條件下,被摘除腎上腺的小白鼠只能存活幾天到十幾天。三、 實(shí)驗(yàn)用品成年的、性別相同、體重相近的健康小白鼠,常規(guī)小動(dòng)物手術(shù)器械2套,半導(dǎo)體點(diǎn)溫計(jì)一臺(tái),蛙板2塊、1ml注射器2只、乙醚、75%酒精、2%碘酊、青霉素小瓶2只,消毒棉球、縫針、絲線、小白鼠飼養(yǎng)盒、飲水瓶、生理鹽水、天平,平皿等。四、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(一)動(dòng)物分組每組取小白鼠9只,將其分成3組:1、 手術(shù)對(duì)照組:3只,作摘除腎上腺的手術(shù)對(duì)照。2、 給藥對(duì)照組:3只,摘除腎上腺。3、 給藥實(shí)驗(yàn)組:3只,摘除腎上腺后皮下注入皮質(zhì)素,觀察皮質(zhì)素的替代作用。觀察和喂養(yǎng)最好分盒進(jìn)行,每盒只飼養(yǎng)一只。如條件不具備亦可按動(dòng)物分組飼養(yǎng),每盒三只。(二)手術(shù)操作(腎上腺摘除術(shù))1、 將手術(shù)器械、縫針、絲線浸泡在75%中消毒待用。2、 將動(dòng)物置于干燥的容器(燒杯、棉紗缸等均可)向其內(nèi)投入一浸有乙醚的棉球,蓋上蓋,觀察動(dòng)物的呼吸和運(yùn)動(dòng),當(dāng)見動(dòng)物由興奮狀態(tài)進(jìn)人昏倒?fàn)顟B(tài)、呼吸變慢變淺時(shí),立即將動(dòng)物取出,用棉繩或膠布條將其腹臥固定于蛙板中央。3、 手術(shù)的皮膚切口在背部正中最后肋骨至骨盆之間,用毛剪將切口周圍皮毛剪凈、消毒。4、 從最后胸椎間后沿背部正中線切開皮膚l厘米,從切口處向左右做純性分離。5、 向左側(cè)推動(dòng)切口(左側(cè)手術(shù)),于肋骨后緣和背最長肌外緣間用眼科鑷分離肌肉(或用眼科剪剪一小口),然后用攝子擴(kuò)創(chuàng),可見暗紅色的腎臟,在腎臟的前內(nèi)上方即可找到由脂肪組織包裹著的粉紅色的腎上腺,大小與半個(gè)大米粒近似。6、 為了摘除完全,先用眼科鑷子夾起腎臟和腎上腺之間的脂肪組織。然后在鑷子和腎臟之間剪斷或用鑷子整個(gè)摘除,放于平皿檢驗(yàn)其是否腎上腺及完整與否。腎上腺和腎臟是腹膜外器官,注意小心保護(hù)腹膜。腹腔臟器溢出不僅造成手術(shù)上的不便且對(duì)動(dòng)物存活也極為不利。操作中還要防止造成氣胸,對(duì)腎上腺周圍的實(shí)質(zhì)性臟器如腎臟、肝臟、脾臟等也勿傷害。7、 用同樣的方法摘除右側(cè)腎上腺,右側(cè)腎臟和腎上腺的位置略高于左側(cè)。8、 二側(cè)腎上腺均摘除后,分別縫合二側(cè)肌肉,然后縫合皮膚術(shù)部碘酊消毒。9、 稱重、編號(hào)手術(shù)對(duì)照組與其它二組不同的只是找到腎上腺后不摘除,僅用鑷子觸動(dòng)一下即可。(三)、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1、觀察摘除腎上腺對(duì)小白鼠水鹽代謝等方面的影響。每只飼養(yǎng)盒配備二只飲水瓶。一只盛自來水,一只盛生理鹽水??勺杂娠嬎腿∈?,飲水和食物要定量放入。記錄其耗食量和二種不同的水之消耗量。用半導(dǎo)體點(diǎn)溫計(jì)測(cè)量小白鼠心前區(qū)的皮溫。每只動(dòng)物要建立一張卡片記錄上述變化。例如:卡片號(hào)手術(shù)對(duì)照組/動(dòng)物第 號(hào)體重(g)體溫(°C)耗食量(g)耗水量(ml)行為自來水鹽水術(shù)前術(shù)后第一天術(shù)后第二天術(shù)后第三天術(shù)后第四天術(shù)后第五天結(jié)論備注2、 給藥實(shí)驗(yàn)組的動(dòng)物在術(shù)后每日皮下注入250ug的可的松;給藥對(duì)照組注入等量的生理鹽水。連續(xù)觀察五日后,將各組每項(xiàng)指標(biāo)的平均變化量記入下表:3、 觀察摘除腎上腺對(duì)小白鼠應(yīng)激能力的影響游泳實(shí)驗(yàn)手術(shù)后第五日晚將各級(jí)動(dòng)物之食物全部撤掉。進(jìn)行禁食,次日將三組動(dòng)物分別投入4的冷水中.記錄各自的游泳時(shí)間,待其溺水下沉后,將其取出。觀察其恢復(fù)情況。耐寒能力的測(cè)定\觀測(cè)指標(biāo)^動(dòng)物WbTb耗食量耗水量行為手術(shù)對(duì)照組自來水鹽水給藥對(duì)照組給藥實(shí)驗(yàn)組結(jié)論將二組動(dòng)物同時(shí)移入4C的冷室中,停止給藥,保證動(dòng)物飲水和食物,每日觀測(cè)一次,記錄其死亡情況。最后對(duì)死亡動(dòng)物和存活動(dòng)物要檢驗(yàn)其腎上腺是否摘除干凈。五

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