第4章藥物的鑒別

第4章藥物的鑒別性狀:1、外觀：藥品的聚集狀態(tài)、色澤以及臭味等。2、溶解度3、物理常數(shù)

物理常數(shù)是鑒定藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)。其測(cè)定結(jié)果不僅對(duì)藥品具有鑒別意義，也反映了該藥品的純雜程度。藥典收載的物理常數(shù)包括：相對(duì)密度、餾程、熔點(diǎn)、凝點(diǎn)、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。常用物理常數(shù)的測(cè)定1.溶解度中國(guó)藥典采用的測(cè)定方法為：準(zhǔn)確稱(chēng)?。ɑ蛄咳。┕┰嚻芬欢?，加入一定量的溶劑，在25℃±2℃每隔5分鐘振搖30分鐘，30分鐘內(nèi)觀察溶解情況。一般看不到溶質(zhì)顆粒或液滴時(shí)，即可認(rèn)為已完全溶解。溶解度的數(shù)值如出現(xiàn)明顯異常，表明供試品質(zhì)量存在問(wèn)題。常用物理常數(shù)的測(cè)定（1）稱(chēng)?。ɑ蛄咳。┕┰嚻返牧?，準(zhǔn)確度為規(guī)定值的±2%，固體供試品應(yīng)先研細(xì)；（2）易于溶解的樣品，取樣可在1~3g之間；貴重藥品及劇毒藥品可酌情減量，可用逐漸加入溶劑的方法，溶劑品種也可適當(dāng)減少，但至少要作水、酸、堿、乙醇等溶劑。（3）一般常用溶劑有水、乙醇、乙醚、氯仿、甘油、無(wú)機(jī)酸和堿等。溶解度常用物理常數(shù)的測(cè)定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中選用的部分溶劑及其在溶劑中的溶解性能，可供精制或制備溶液時(shí)參考。當(dāng)遇有在特定溶劑中的溶解性能作質(zhì)量控制時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)藥品的檢查項(xiàng)下另作具體規(guī)定。溶解度常用物理常數(shù)的測(cè)定2.熔點(diǎn)中國(guó)藥典中，熔點(diǎn)系指一種物質(zhì)按規(guī)定的方法測(cè)定，由固體熔化成液體的溫度，熔融同時(shí)分解的溫度，或在融化時(shí)自初熔至全熔的一段溫度。熔融同時(shí)分解系指某一藥物在一定溫度下產(chǎn)生氣泡、變色或混濁等現(xiàn)象。

常用物理常數(shù)的測(cè)定具有熔融同時(shí)分解性質(zhì)的藥物必須嚴(yán)格按照藥典規(guī)定操作，以供試品開(kāi)始局部液化或開(kāi)始產(chǎn)生氣泡時(shí)的溫度為初熔溫度，供試品固相消失、全部液化時(shí)的溫度作為全熔溫度。若固相消失不明顯，則應(yīng)以供試品的分解物開(kāi)始膨脹上升時(shí)的溫度作為全熔溫度。由于各物質(zhì)熔融分解時(shí)的情況不一致，一些藥品無(wú)法分辨初熔溫度、全熔溫度，此時(shí)可記錄它們發(fā)生突變時(shí)的溫度，作為熔融分解溫度。熔點(diǎn)常用物理常數(shù)的測(cè)定（1）傳溫液：一般按藥典規(guī)定選擇傳溫液（2）毛細(xì)管內(nèi)徑：0.9~1.1mm（3）升溫速度：1~1.5℃/min（4）溫度計(jì)：應(yīng)具有0.5℃溫度刻度；需用“熔點(diǎn)測(cè)定用對(duì)照品”進(jìn)行校正：即將待校溫度計(jì)用對(duì)照品按藥典規(guī)定方法測(cè)定熔點(diǎn)值，計(jì)算測(cè)定值與對(duì)照品規(guī)定值之差即得校正值。以測(cè)定值為橫坐標(biāo)，校正值為縱坐標(biāo)，繪制校正曲線；然后在相同條件下測(cè)試供試品的熔點(diǎn)，將測(cè)得值代入校正曲線，即可求出校正值進(jìn)而計(jì)算出實(shí)際熔點(diǎn)。影響熔點(diǎn)測(cè)定結(jié)果的主要因素常用物理常數(shù)的測(cè)定當(dāng)采用毛細(xì)管法測(cè)定難以判斷熔點(diǎn)時(shí)，需輔以差示掃描量熱分析法（DSC）的結(jié)果。一類(lèi)新藥的熔點(diǎn)則需采用毛細(xì)管法和DSC法兩種方法同時(shí)測(cè)定。熔點(diǎn)常用物理常數(shù)的測(cè)定3.黏度：指液體對(duì)流動(dòng)的阻抗能力。黏度的種類(lèi)：①動(dòng)力黏度（Pa·s）；②運(yùn)動(dòng)黏度（mm2/s）；③特性黏度（）。常用物理常數(shù)的測(cè)定黏度計(jì)的種類(lèi)：①平均黏度計(jì)；②旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)；③烏式黏度計(jì)。中國(guó)藥典對(duì)所收載的藥品在性狀下規(guī)定有黏度數(shù)值范圍。此外，“檢查項(xiàng)”下也會(huì)出現(xiàn)對(duì)黏度數(shù)值的限度。黏度常用物理常數(shù)的測(cè)定4.比旋度:具有光學(xué)異構(gòu)體分子的藥物，常常具有相同的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)，但旋光性能不同，一般分為左旋體、右旋體和消旋體。有些藥物的兩種不同光學(xué)異構(gòu)體的藥理作用相同，如左旋和右旋的可待因具有相同的局部麻醉作用；但很多藥物的左旋體和右旋體的生物活性卻有較大差異，如奎寧和奎尼丁為光學(xué)異構(gòu)體，奎寧是左旋體，用于治療瘧疾；奎尼丁是右旋體，用于治療心律不齊、心房纖維性顫動(dòng)。

常用物理常數(shù)的測(cè)定

為了保證藥品的質(zhì)量，中國(guó)藥典規(guī)定：具有旋光性藥物要作比旋度測(cè)定，以鑒別藥物或檢驗(yàn)純度。C—濃度，g/mLl—液層厚度，dm比旋度常用物理常數(shù)的測(cè)定5.折射率某些液體藥物，尤其是植物油，對(duì)光折射具有特定的折射率。測(cè)定折射率可以區(qū)別不同油類(lèi)或檢查某些藥物的純雜程度。例如，中國(guó)藥典中的揮發(fā)油、油脂和有機(jī)溶劑等性狀項(xiàng)下都列有折射率一項(xiàng)。中國(guó)藥典所收載的維生素E、維生素K1、苯丙醇也規(guī)定了折射率指標(biāo)。常用物理常數(shù)的測(cè)定6.吸收系數(shù)中國(guó)藥典采用百分吸光系數(shù)（E1cm1%），列入某些紫外吸收藥物的性狀項(xiàng)下，即用于相應(yīng)原料藥質(zhì)量的考察，也作為制劑含量測(cè)定中紫外分光光度法的計(jì)算依據(jù)。當(dāng)制劑的含量測(cè)定采用“吸收系數(shù)法”，而其原料藥的含量由于精密度的要求而改用其它法方法時(shí)，原料藥的性狀項(xiàng)下將列出吸收系數(shù)。該吸收系數(shù)是盡可能采用制劑含量測(cè)定中的條件測(cè)得的，目的是使原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與其制劑的標(biāo)準(zhǔn)相適應(yīng)。中國(guó)藥典對(duì)吸收系數(shù)的測(cè)定作了相應(yīng)規(guī)定。常用物理常數(shù)的測(cè)定吸收系數(shù)A—吸光度E1cm1%—百分吸收系數(shù)C—濃度（g/100mL）L—光路長(zhǎng)度（cm）百分吸收系數(shù)（）：吸收物質(zhì)濃度為1%(g/mL)，光程長(zhǎng)度為1cm時(shí)的吸光度值。（二）一般鑒別試驗(yàn)一般鑒別試驗(yàn)（generalidentificationtest）是依據(jù)某一類(lèi)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化性質(zhì)的特征，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)?。?duì)無(wú)機(jī)藥物是根據(jù)其組成的陰離子和陽(yáng)離子的特殊反應(yīng)；對(duì)有機(jī)藥物則大都采用典型的官能團(tuán)反應(yīng)。1、有機(jī)氟化物2、有機(jī)酸鹽3、芳香第一胺4、托烷生物堿5、無(wú)機(jī)金屬6、無(wú)機(jī)酸根1、有機(jī)氟化物取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20mL與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5mL為吸收液，待燃燒完畢后，充分振搖；取吸收液2mL，加茜素氟藍(lán)試液0.5mL，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2mL，用水稀釋至4mL，加硝酸亞鈰試液0.5mL，即顯藍(lán)紫色，同時(shí)做空白對(duì)照試驗(yàn)。2、有機(jī)酸鹽枸櫞酸鹽(1)取供試品溶液2mL（約相當(dāng)于枸櫞酸10mg）,加稀硫酸數(shù)滴,加熱至沸，加高錳酸鉀試液數(shù)滴，振搖，紫色即消失；溶液分成兩份，一份中加硫酸汞試液1滴,另一份中逐滴加入溴試液，均生成白色沉淀。(2)取供試品約5mg，加吡啶－醋酐(3∶1)約5mL，振搖，即生成黃色到紅色或紫紅色的溶液。

2、有機(jī)酸鹽乳酸鹽取供試品溶液5mL(約相當(dāng)于乳酸5mg),置試管中，加溴試液1mL與稀硫酸0.5mL，置水浴上加熱，并用玻棒小心攪拌至退色，加硫酸銨4g，混勻，沿管壁逐滴加入10％亞硝基鐵氰化鈉的稀硫酸溶液0.2mL和濃氨試液1mL，使成兩液層；在放置30分鐘內(nèi)，兩液層的接界面處出現(xiàn)一暗綠色的環(huán)。酒石酸鹽(1)取供試品的中性溶液，置潔凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在管的內(nèi)壁成銀鏡。酒石酸鹽(2)取供試品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亞鐵試液1滴和過(guò)氧化氫試液1滴，俟溶液退色后，用氫氧化鈉試液堿化，溶液即顯紫色。3、芳香第一胺取供試品約50mg，加稀鹽酸1mL，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β－萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。4、托烷生物堿---Vitali反應(yīng)本類(lèi)藥物為酯類(lèi)生物堿，水解后生成的莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀醇溶液和固體氫氧化鉀作用，則轉(zhuǎn)成有色的醌型產(chǎn)物，開(kāi)始呈深紫色。5、無(wú)機(jī)金屬鈉鹽(1)取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。(2)取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。

鋇鹽(1)取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯黃綠色；通過(guò)綠色玻璃透視，火焰顯藍(lán)色。(2)取供試品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。

鈣鹽(1)取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯磚紅色。(2)取供試品溶液(1→20)，加甲基紅指示液2滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至恰呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸。鎂鹽(1)取供試品溶液，加氨試液，即生成白色沉淀；滴加氯化銨試液，沉淀溶解；再加磷酸氫二鈉試液1滴，振搖，即生成白色沉淀。沉淀在氨試液中不溶。(2)取供試品溶液，加氫氧化鈉試液，即生成白色沉淀。分離，沉淀分成兩份，一份中加過(guò)量的氫氧化鈉試液，沉淀不溶；另一份中加碘試液，沉淀轉(zhuǎn)成紅棕色。亞鐵鹽(1)取供試品溶液，加鐵氰化鉀試液，即生成深藍(lán)色沉淀；分離，沉淀在稀鹽酸中不溶，但加氫氧化鈉試液，即分解成棕色沉淀。(2)取供試品溶液，加1％鄰二氮菲的乙醇溶液數(shù)滴，即顯深紅色。

鐵鹽(1)取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成深藍(lán)色沉淀；分離，沉淀在稀鹽酸中不溶，但加氫氧化鈉試液，即分解成棕色沉淀。(2)取供試品溶液，加硫氰酸銨試液，即顯血紅色。

6、無(wú)機(jī)酸根硼酸鹽(1)取供試品溶液，加鹽酸成酸性后，能使姜黃試紙變成棕紅色；放置干燥，顏色即變深，用氨試液濕潤(rùn)，即變?yōu)榫G黑色。(2)取供試品，加硫酸，混合后，加甲醇，點(diǎn)火燃燒，即發(fā)生邊緣帶綠色的火焰。

碳酸鹽與碳酸氫鹽(1)取供試品溶液，加稀酸，即泡沸，發(fā)生二氧化碳?xì)?，?dǎo)入氫氧化鈣試液中，即生成白色沉淀。(2)取供試品溶液，加硫酸鎂試液，如為碳酸鹽溶液，即生成白色沉淀；如為碳酸氫鹽溶液，須煮沸，始生成白色沉淀。(3)取供試品溶液，加酚酞指示液，如為碳酸鹽溶液，即顯深紅色；如為碳酸氫鹽溶液，不變色或僅顯微紅色。

磷酸鹽(1)取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液，即生成淺黃色沉淀；分離，沉淀在氨試液或稀硝酸中均易溶解。(2)取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結(jié)晶性沉淀。(3)取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶解。

碘化物(1)取供試品溶液，加硝酸銀試液，即生成黃色凝乳狀沉淀；分離，沉淀在硝酸或氨試液中均不溶解。(2)取供試品溶液，加少量的氯試液，碘即游離；如加氯仿振搖，氯仿層顯紫色；如加淀粉指示液，溶液顯藍(lán)色。銨鹽(1)取供試品，加過(guò)量的氫氧化鈉試液后，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤(rùn)的紅色石蕊試紙，能使之變藍(lán)色，并能使硝酸亞汞試液濕潤(rùn)的濾紙顯黑色。(2)取供試品溶液，加堿性碘化汞鉀試液1滴，即生成紅棕色沉淀。

銀鹽(1)取供試品溶液，加稀鹽酸，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶解，加硝酸，沉淀復(fù)生成。(2)取供試品的中性溶液，加鉻酸鉀試液，即生成磚紅色沉淀；分離，沉淀能在硝酸中溶解其他一般鑒別試驗(yàn)苯甲酸鹽(1)取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液，即生成赭色沉淀；加稀鹽酸，變?yōu)榘咨恋怼?/p>

(2)取供試品，置干燥試管中，加硫酸后，加熱，不炭化，但析出苯甲酸，在試管內(nèi)壁凝結(jié)成白色升華物。（三）專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)

藥物的專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)(specificidentificationtest)是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)巍＃ㄒ唬┗瘜W(xué)鑒別方法1、呈色反應(yīng)鑒別法2、沉淀生成反應(yīng)鑒別法3、熒光反應(yīng)鑒別法4、氣體生成反應(yīng)鑒別法

5、測(cè)定生成物的熔點(diǎn)三、專(zhuān)屬鑒別方法

1、呈色反應(yīng)鑒別法苯巴比妥(1)取本品約10mg，加硫酸2滴與亞硝酸鈉約5mg，混合，即顯橙黃色，隨即轉(zhuǎn)橙紅色。(2)取本品約50mg，置試管中，加甲醛試液1mL，加熱煮沸，冷卻，沿管壁緩緩加硫酸0.5mL，使成兩液層，置水浴中加熱。接界面顯玫瑰紅色。鹽酸土霉素取本品約0.5mg，加硫酸2mL，即顯深朱紅色；再加水1mL，溶液變?yōu)辄S色。維生素C取本品約0.2g，加水10mL溶解，取溶液5mL，加二氯靛酚鈉試液1-2滴，試液的顏色消失。2、沉淀生成反應(yīng)鑒別法異煙肼的鑒別取本品約10mg，置于試管中，加水2mL溶解后，加氨制硝酸銀1mL，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡?；前粪奏さ蔫b別

取本品0.1g，加水與0.4%氫氧化鈉溶液各3mL，振蕩，使溶解，濾過(guò)，取濾液加硫酸銅試液1滴，即生成黃綠色沉淀，放置后變?yōu)樽仙?、熒光反應(yīng)鑒別法維生素B1的鑒別取本品的約5mg，加4%氫氧化鈉試液2.5mL，加鐵氰化鉀試液0.5mL與正丁醇5mL,強(qiáng)力振搖2分鐘，放置使分層，上層醇液顯強(qiáng)烈的的藍(lán)色熒光；加酸使成酸性，熒光即消失。再加堿使成堿性，熒光又顯出。4、氣體生成反應(yīng)鑒別法①大多數(shù)伯胺（銨）類(lèi)藥物、酰尿類(lèi)以及某些酰胺類(lèi)藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣巴比妥藥物②化學(xué)結(jié)構(gòu)含硫藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后加熱產(chǎn)生硫化氫氣體硫鳥(niǎo)嘌呤4、氣體生成反應(yīng)鑒別法③含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱可生成紫色碘蒸氣。④含醋酸酯和乙酰胺類(lèi)藥物經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。對(duì)乙酰氨基酚碘苷5、測(cè)定生成物的熔點(diǎn)異煙肼的鑒別取本品約0.1g，加水5mL溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1mL，搖勻，微熱，放冷，即析出黃色結(jié)晶，濾過(guò)，用稀乙醇重結(jié)晶，在105℃干燥后，測(cè)定熔點(diǎn)，其熔點(diǎn)為228～231℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。（二）光譜鑒別法1、紫外光譜鑒別法對(duì)比吸收曲線的一致性

對(duì)比最大吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)吸光度或?qū)Ρ茸畲笪詹ㄩL(zhǎng)和相應(yīng)吸光系數(shù)的一致性對(duì)比最大、最小吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)吸光度比值的一致性經(jīng)化學(xué)處理后，測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性2、紅外光譜鑒別法紅外光譜法是一種專(zhuān)屬性很強(qiáng)、應(yīng)用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥、特別適用于用其他方法不易區(qū)分的同類(lèi)藥物，如磺胺類(lèi)、甾體激素類(lèi)和半合成抗生素類(lèi)藥品。（三）色譜鑒別法1、薄層色譜鑒別法瑞士CAMAGSCANNER3薄層掃描儀島津CS-9000雙波長(zhǎng)薄層掃描儀薄層色譜鑒別方法的特點(diǎn)是固定相一次使用，不會(huì)被污染，樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單。應(yīng)用范圍廣，節(jié)約溶劑，減少污染，利于不同性質(zhì)化合物分離。在實(shí)際工作中，一般采用對(duì)照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法，即將供試品和對(duì)照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）用同種溶劑配制成同樣濃度的溶液，在同一薄層級(jí)上點(diǎn)樣、展開(kāi)、顯色，供試品所顯主