電鏡在病理學(xué)中的應(yīng)用

電子顯微鏡技術(shù)及在病理診斷上的作用電子顯微鏡技術(shù)及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術(shù)

二、診斷病理學(xué)三、電子顯微鏡技術(shù)在病理診斷上的作用四、討論（一）概念電子顯微鏡技術(shù)：也稱電子顯微技術(shù)或電子顯微術(shù)概念電子顯微鏡技術(shù)

電鏡精密儀器

樣品制備技術(shù)

1、電子顯微鏡：是用電子束成像的顯微鏡，電子顯微鏡是一種高精密度的電子光學(xué)儀器，它具有較高分辨率本領(lǐng)和放大倍數(shù)，是觀察和研究物質(zhì)微觀結(jié)構(gòu)的重要工具。

發(fā)明背景：它是在發(fā)現(xiàn)電子束具有波動(dòng)性質(zhì)及利用磁場(chǎng)改變電子束行徑，在上述理論的指導(dǎo)下發(fā)明出的。電子顯微鏡主要分為兩種類型：一種是觀察樣品內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)的透射電子顯微鏡，另一種是揭示樣品表面形貌的掃描電子顯微鏡。掃描電鏡與透射電鏡比較：（見(jiàn)下表）掃描電鏡和透射電鏡比較項(xiàng)目掃描電鏡透射電鏡分辨本領(lǐng)70～100?2?發(fā)大倍數(shù)20～40萬(wàn)倍100萬(wàn)倍加速電壓1～50KV幾十千伏～幾百千伏圖像特點(diǎn)景深長(zhǎng)、三維立體結(jié)構(gòu)景深小、兩維平面結(jié)構(gòu)樣品制備固定-脫水-臨界點(diǎn)干燥-噴涂金屬固定-脫水-包埋-超薄切片-重金屬染色樣品尺寸1cm350～100nm切片樣品損傷光斑直徑只有幾十埃的電子束在樣品上掃描，對(duì)樣品損傷極小大約1μm直徑電子束打到樣品上，造成一定程度損傷樣品成像信號(hào)二次電子、背散射電子透射電子發(fā)大倍數(shù)調(diào)節(jié)用衰減器改變掃描線圈電流，進(jìn)行放大率調(diào)節(jié)調(diào)整中間鏡電流改變放大率決定分辨率因素入射電子束直徑?jīng)Q定圖像分辨率。加速電壓、透鏡縮小率、電源穩(wěn)定度及像差決定電子束斑直徑加速電壓、電源穩(wěn)定度、像差、樣品厚度等影響分辨率本圖片來(lái)自中科科儀本圖片來(lái)自中科科儀2、樣品制備透射電鏡樣品制備的常用方法：包括超薄切片、冷凍復(fù)型、負(fù)染色等。掃描電鏡樣品制備：比透射電鏡樣品制備簡(jiǎn)單。除保存樣品表面形貌結(jié)構(gòu)外，只要求樣品干燥并能導(dǎo)電，而不需包埋和切片。制備方法與透射電鏡樣品制備方法一樣。電子顯微鏡技術(shù)及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術(shù)二、診斷病理學(xué)三、電子顯微鏡技術(shù)在病理診斷上的作用四、討論二．診斷病理學(xué)概述病理學(xué)是研究疾病病因、發(fā)病機(jī)制、形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能、代謝變化的一門基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及其與臨床醫(yī)學(xué)之間的橋梁學(xué)科。主要包括基礎(chǔ)病理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)及診斷病理學(xué)(以往稱外科病理學(xué)或臨床病理學(xué))。各級(jí)醫(yī)院病理科所從事的工作主要是診斷病理學(xué)。病理檢查內(nèi)容通常包括活體組織檢查、手術(shù)切除標(biāo)本檢查、術(shù)中冰凍檢查、細(xì)胞學(xué)檢查、尸體解剖檢查等。病理檢查的手段很多,如:HE常規(guī)檢查、特殊染色(組織化學(xué))、免疫組化、原位分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、電子顯微鏡檢查、病理圖像分析、流式細(xì)胞儀檢查、細(xì)胞培養(yǎng)、傳真病理學(xué)(telepathology)等。電子顯微鏡技術(shù)及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術(shù)二、診斷病理學(xué)三、電子顯微鏡技術(shù)在病理診斷上的作用四、討論三．電子顯微鏡技術(shù)在病理診斷上的作用（一）電鏡檢查起決定性作用（二）電鏡檢查起參考和修正作用（三）電鏡檢查起驗(yàn)正作用三．電子顯微鏡技術(shù)在病理診斷上的作用（一）電鏡檢查起決定性作用：電鏡發(fā)現(xiàn)特異性超微結(jié)構(gòu)信息做出最后病理診斷。例：男,39歲,發(fā)現(xiàn)右側(cè)頸部無(wú)痛腫物1年余,花生米大,取腫物做活檢。光鏡:增大的淋巴結(jié),結(jié)構(gòu)紊亂,但仍殘留濾泡與淋巴竇,竇腔及淋巴索充以大量胞質(zhì)豐富的嗜伊紅細(xì)胞,直徑約20μm。核圓,卵圓或扭曲狀。間有增生的淋巴細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞。電鏡:大細(xì)胞排列疏松、無(wú)連接、胞質(zhì)寬廣,見(jiàn)有似網(wǎng)球拍或柄的雙膜結(jié)構(gòu)(Birbeck顆粒),證明光鏡下嗜伊紅大細(xì)胞為朗格漢斯細(xì)胞(圖1)。診斷為淋巴結(jié)朗格漢斯細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥。電鏡診斷具有獨(dú)特的確診價(jià)值。圖1

朗格漢斯細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥:見(jiàn)雙模構(gòu)成的似網(wǎng)球拍狀的Birbeck顆粒。EM